CCD及软件简介
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CCD及软件介绍
LBD服务部安永波2011-7
图像系统组成
CCD产品
QIMAGING
DP系列
软件产品 MC
IPP IPE OLYMPUS cellSens
InVivo / InVitro Autoquant AFA,ScopePro
DP-BSW DP2-BSW Xcellence
CCD --- Charge Coupled Device 物理实质:光电转换器件 构成形式:面阵,mn 主要功能:成像 芯片大小:对角线长度 1/3” ½” 2/3”
感光原理
相机(这里主要指CCD)类型-黑白和彩色
特点:
很接近眼睛观察的效果, 直接分辨物体的颜色。 ---适合明场拍照
特点:
分辨率高,响应速度快。 ---适合荧光等定量分析
图像的获取
如何获取理想的图像:
•正确进行测光与曝光 •色温合适 •对焦准确 •选择合适的预览与拍照 区域 •图像分辨率合适 •正确进行Gain、Offset 调节 •图像动态范围合适
图像的获取(测光与曝光) 自动测光与曝光:多数情况下可以选择CCD产品的软件程序进行 图像的自动测光与曝光,分为平均测光与点测光两大类。
平均测光:通常将目标对象的30%作为测光区域,适合 明场或者标本分布比较均匀的情况。
图像的获取(测光与曝光)
点测光:通常将目标对象的1%或0.1%作为测光区域, 适合荧光、暗场、标本稀疏分布或者反差强烈的标本, 或者强调某部分内容的时候。
目标明确
目标不明确
图像的获取(测光与曝光) 手动曝光:可以输入一定的曝光时间(相机不同:从us到60s进行 选择),用于弥补自动曝光模式下出现的曝光不足和曝光过渡情况 。
图像的获取(色温与白平衡) 色温:白色物体在不同的光源照射下反射出的颜色也不同,为了定量 地表示光照色彩,人们使用色温概念,以开尔文温度(K)来表达 。
图像的获取(色温与白平衡) 白平衡(White Balance) :相机(CCD)在环境光线下使得被摄景物 反射的光谱成分改变后,拍出的照片仍能正确地还原物体的真实色 彩,不产生色偏的一种电子调节机制。
图像的获取(对焦) 正确对焦 :对于显微图像来讲,特别是使用高倍率物镜(高数值孔径 物镜)时,特别要注意标本的焦平面是否对准了CCD的芯片平面,也 就是要准确对焦。
图像的获取(预览与拍照区域) 预览与拍照区域 :对于CCD来讲,有两种状态可以选择,一种是预览 模式(Preview),用来观察动态图像,一般在聚焦和确定感兴趣区域 时使用;另一种是拍摄模式(Snap / Capture),用来获取图像。
预览:“饱和提示”工具
图像的处理与分析(图像还原:背景扣除)
图像的处理与分析(图像还原:景深扩展)
景深扩展(EDF):对同一位置各 个层面的多幅图像进行处理,得到 各点均清晰聚焦的整幅图像。
图像的处理与分析(图像还原:图像拼接)
图像拼接:对一个层面不同位置的多幅图像进行处理,像砌 地板似的将多张图像拼接起来,构成一幅完整的图像轮廓。
**要求:图像亮度信息尽可能均匀,位置有交叉。
图像的处理与分析(图像增强:荧光通道合成)
图像的处理与分析(物体的度量:空间刻度校正)
将图像实际刻度与像素之间建立关联并进行像素与单位(um)换算。
图像的处理与分析(物体的度量:空间测量)
通过空间刻度校正之后,就可以手动或自动进行物体的长度、周长、 半径、面积等等的测量。
图像的处理与分析(物体的度量:计数与分类)
通过图像二值化的方法,除能够实现特定目标(比如细胞等)的计数功能, 还能够进一步对不同类型的细胞进行分类。
各软件取图界面 DP-BSW 白平衡
黑平衡
测光区大 小设置 自动曝光 时测光区 曝光模式 选择
采集分辨 率设置 手动曝光 设置
预览,采集
分辨率
采集范围 自动设置 增益,伽玛, 偏置调节
自动曝光 范围 单次自动 曝光 预览曝光 时间 像素融合
自动白平 衡
饱和度预警
驱动程序
工作区预览 拍摄条件读取 ,保存