逍遥舒心胶囊质量控制方法研究_黄云娟_周国儿_李彬_江涛

中华中医药学刊逍遥舒心胶囊质量控制方法研究黄云娟1，周国儿1，李彬2，江涛（1．舟山市中医骨伤联合医院，浙江定海316000；2．舟山市食品药品检验所，浙江定海316000）摘要：目的：建立逍遥舒心胶囊的质量控制方法。

方法：用薄层色谱法鉴别方中柴胡、当归、栀子、白芍；用反相高效液相色谱法测定枳壳中柚皮苷含量。

结果：鉴别方法简便、专属；定量方法简便、准确，柚皮苷在4．65184．6μg范围内线性关系良好（r=0．9999），平均回收率95．75%，RSD=1．6%（n=9）。

结论：定性、定量能有效控制逍遥舒心胶囊的质量。

关键词：逍遥舒心胶囊；柚皮苷；质量控制；薄层色谱法；高效液相色谱法中图分类号：R284．1文献标志码：A文章编号：1673－7717（2013）09－1924－04Quality Control of Xiaoyao Shuxin CapsuleHUANG Yunjuan1，ZHOU Guoer1，LI Bin2，JIANG Tao（1．Zhejiang Zhoushan Municipal Hospital，Dinghai316000，Zhejiang，China；2．Zhejiang Zhoushan Institute for Food and Drug Control，Dinghai316000，Zhejiang，China）Abstract：Objective：To establish the method for quality control of Xiaoyao Shuxin Capsule．Methods：TLC was per-formed to identify Bupleuri Radix，Angelicae sinensis Radix，Gardeniae Fructus and Paeoniae Radix Alba in the capsuleprepartions．RP－HPLC was used to determine the content of Naringin．Results：The TLC identification was highly specif-ic．The method of content determination was simple and accurate．The linearity of Naringin was obtained over the range of4．65g to184．6μg（r=0．9999）．The average recovery rate of Naringin was95．75%with RSD of1．6%（n=9）．Con-clusion：This method is effective in the quality control of Huoxue Zhentong Capsule．Key words：Xiaoyao Shuxin Capsule；Naringin；quality control；TLC；HPLC收稿日期：2013－04－01基金项目：浙江省中医药科学研究基金计划（B类）资助项目（2011ZB157）作者简介：黄云娟（1972－），女，浙江舟山人，副主任中药师，研究方向：临床药学。

逍遥舒心胶囊是舟山市中医骨伤联合医院的自制制剂。

主要由柴胡、枳壳、酸枣仁、当归、白芍等14味中药组成，具有疏肝解郁、健脾和营、养血安神、清心除烦等功效，临床用于肝气郁结，心神不安所致胸肋胀满，失眠多梦，心烦心悸等。

为了保证药品的质量，参考文献资料［1－6］，对方中的主要成分进行质量控制，采用薄层色谱法对方中的柴胡、当归、栀子、白芍进行定性鉴别，并采用反相高效液相色谱法对枳壳中的柚皮苷进行含量测定，选择、确定最佳的洗脱系统，并对含量测定方法进行方法学研究。

1实验材料与仪器1．1实验材料逍遥舒心胶囊由舟山市中医骨伤联合医院制剂室提供（批号：20111101，20111201，20120301），空白样品根据处方比例由该院制剂室制成。

柴胡、当归、栀子对照药材和栀子苷、芍药苷、柚皮苷对照品均由中国食品药品检定研究院提供。

硅胶G薄层板由青岛海洋化工厂生产，乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂为分析纯。

1．2实验仪器Agilent1200高效液相色谱系统（G1311A四元泵、G1329A自动进样器、DAD检测器）；Agilent－Chemstation色谱工作站。

TU－1901紫外分光光度计；超声处理器（USC－502，上海波龙电子设备有限公司）。

2方法与结果2．1薄层色谱谱鉴别2．1．1为柴胡的薄层色谱鉴别取本品内容物3．0g，加甲醇20mL，超声处理15min，滤过，滤液浓缩至5mL，作为供试品溶液。

另取柴胡对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》2010年版1部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯－乙醇－水（8ʒ2ʒ1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60ħ加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视。

供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

实验结果分离效果较理想，空白样品无干扰（薄层色谱见图1）。

在展开剂系统的选择上，每个鉴别都用三种不同的展开剂进行展开，曾用三氯甲烷－甲醇－水（13ʒ7ʒ2）的下层溶液，醋酸乙酯－乙醇－水（15ʒ2ʒ1），结果上述两种展开系统拖尾较严重，斑点效果不好，故选择正文的展开剂。

2．1．2为当归的薄层色谱鉴别当归为本制剂的主要成分，具有活血祛瘀的功效，故本实验以当归对照药材为对照，取本品内容物1.5g，加乙醚20mL，超声处理10min，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇2mL使溶解，作为供试品溶液。

另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》2010年版1部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷－乙酸乙酯（4ʒ1）为展开剂，展开，取出，晾4291中华中医药学刊S1柴胡对照药材1．样品201110012．样品1112013．样品1203014．空白样品图1柴胡谱层色谱图1．缺味样品2．供试品（批号：20111001）3．供试品（批号：20111201）4．供试品（批号：20120301）5．当归对照药材图2当归的薄层鉴别图谱干，置紫外光灯（365nm ）下检视。

供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

采用正文方法提取样品，以正已烷－乙酸乙酯（4ʒ1）为展开剂，展开后斑点较清析，Rf 值合适，缺当归样品和其他药材无干扰。

另外比较石油醚（60 90ħ）－乙酸乙酯（9ʒ1）为等展开剂，展开后供试品斑点不够集中；并进行了点样量的比较，结果显示5μL 较为适宜，见图2。

2．1．3为栀子的薄层色谱鉴别取本品内容物4．0g ，加50%甲醇10mL ，超声30min ，滤过，取滤液作为供试品溶液。

另取栀子对照药材1g ，同法制成对照药材溶液。

再取栀子苷对照品，加乙醇制成每1mL 含4mg 的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》2010年版1部附录VIB ）试验，吸取上述3种溶液各5μL ，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以乙酸乙酯－丙酮－甲酸－水（5ʒ5ʒ1ʒ1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110ħ加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

参照《中华人民共和国药典》2010版1部栀子的薄层色谱方法，点样量为5μL ，采用药典的展开剂乙酸乙酯－丙酮－甲酸－水（5ʒ5ʒ1ʒ1）为展开剂展开，曾比较展开剂乙酸乙酯－甲酸－水（10ʒ2ʒ1）展开后，样品的Rf 值偏小，样品斑点与其他斑点不够完全分开；而正文所收载展开剂极性适中，斑点Rf 值适中，分离度好，缺栀子样品无干扰，故收入标准正文，见图3。

1．供试品（批号：20111001）2．供试品（批号：20111201）3．供试品（批号：20120301）4．缺栀子样品5．栀子对照药材6．栀子苷对照品图3栀子薄层鉴别图谱2．1．4为白芍的薄层色谱鉴别白芍具柔肝养血功效，为本剂的臣药，本方法新增薄层色谱对白芍加以控，参照《中华人民共和国药典》2010版1部白芍的薄层色谱方法。

取本品内容物3．0g ，加乙醇10mL ，超声10min ，滤过，滤液浓缩至1mL ，作为供试品溶液。

另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1mL 含1mg 溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法（中华人民共和国药典2010年版1部附录VIB ）试验，吸取上述两种溶液各10μL ，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－甲酸（40ʒ5ʒ10ʒ0．2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的蓝紫色斑点。

曾比较了三氯甲烷－甲醇（5ʒ1）和甲苯－乙酸乙酯－甲醇－甲酸（10ʒ7ʒ3ʒ2）为展开剂，结果用前者斑点分离效果不好，爬不开；后者斑点较清析，斑点Rf 值适中，但考虑甲苯有毒性，故选用正文所收载展开剂，分离度好，缺白芍样品无干扰，故收入标准正文，见图4。

2．2含量测定2．2．1色谱条件色谱柱：Diamonsil C 18柱（250mm ˑ4．6mm ，5μm ）；流动相：乙腈—水（用磷酸调节pH 至3）（20ʒ80）；检测波长：283nm ；柱温：室温；流速：1．0mL /min 。

理论塔板数按柚皮苷峰计算大于3000。

2．2．2对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液的制备5291中华中医药学刊1．缺白芍样品2供试品（批号：20111001）3．供试品（批号：20111201）4．供试品（批号：20120301）5．芍药苷对照品图4白芍薄层鉴别图谱①对照品溶液：精密称取经五氧化二磷减压干燥24h 的柚皮苷对照品18．46mg ，置于25mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。

精密量取此贮备液5．0mL ，置100mL 量瓶中，加甲醇至刻度，制成浓度为92．3μg ·mL －1的对照品溶液。

②供试品溶液：取本品内容物1.5g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL ，称定重量，加热回流1．5h ，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液用0．45μm 微孔滤膜过滤，即得。

③阴性对照溶液：取缺枳壳的阴性样品，精密称取阴性样品1．5g 按2．2．2中②项方法制成阴性对照样品溶液。