生物高考选修1专题5、6
人教版高中生物选修一专题五《DNA和蛋白质技术》知识点归纳
专题五DNA和蛋白质技术课题一DNA的粗提取与鉴定一、提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?1.DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。
①DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?要使DNA溶解,需要使用什么浓度?要使DNA析出,又需要使用什么浓度?在0.14mol/L时溶解度最小;较高浓度可使DNA溶解;0.14mol/L可使DNA析出。
②在溶解细胞中的DNA时,人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水,以稀释NaCl溶液。
酒精是一种常用有机溶剂,但DNA却不能溶于酒精(特别是95%冷却酒精),但细胞中蛋白质可溶于酒精。
2.从理论上分析,预冷的乙醇溶液具有以下优点。
一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;二是降低分子运动,易于形成沉淀析出;三是低温有利于增加DNA分子柔韧性,减少断裂。
3.采用DNA不溶于酒精的原理,可以达到什么目的?将DNA和蛋白质进一步分离。
4.提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。
利用该原理时,应选用怎样的酶和怎样的温度值?蛋白酶,因为酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。
温度值为60~80℃,因为该温度值蛋白质变性沉淀,而DNA不会变性。
补充:DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋,其温度在80℃以上,如在PCR技术中DNA变性温度在95℃。
5.洗涤剂在提取DNA中有何作用?洗涤剂将细胞膜上的蛋白质,从而瓦解细胞膜。
6.当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用什么指示剂进行鉴定?在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。
原理总结:通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来,达到提纯的目的;最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。
二、实验材料的选取不同生物的组织中DNA含量不同。
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生物
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【例1】
下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原 )
理的叙述正确的是 (
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度
的降低而减小 B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于 酒精的物质而得到较纯的DNA C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机 溶剂 D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应
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(2)复性:温度下降到50℃左右,两种引物通过碱基互 补配对与两条单链DNA结合,如下图:
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(3)延伸:温度上升到72℃左右,溶液中的四种脱氧核 苷酸在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成
新的DNA链,如下图:
冷
绿)
提取含杂质较少(或较纯净)的DNA
蓝色(蓝绿色)
④二苯胺(或甲基
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2. ( 热 点 预 测 )PCR 技 术 有 效 地 解 决 了 因 为 样 品 中 DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,而被广泛应
DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种引物,四种脱 氧 核 苷 酸 , 耐 热 的 DNA聚 合 酶 , 同 时 通 过 控 制 温 度 使 DNA复制在体外反复进行。
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2.PCR的反应过程 (1)变性:当温度上升到90℃以上时,双链DNA解旋
2023-2024学年高中生物人教版选修1专题5 DNA和蛋白质技术单元测试(含答案解析)
2023-2024学年人教版高中生物单元测试班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________一、选择题(本大题共计19小题每题3分共计57分)1.下列说法错误的是()A. 凝胶色谱法分离蛋白质时相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内部故移动速度较快B. 使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小C. 血红蛋白提取实验中需要加入5倍体积的蒸馏水对红细胞进行洗涤以去除杂蛋白D. 凝胶色谱柱内的气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序所以一旦发现有气泡必须重装色谱柱【答案】C【解析】解 A.凝胶色谱法分离蛋白质时相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内部故移动速度较快 A正确B.在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法中不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小 B正确C.洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白需加入五倍体积的生理盐水进行洗涤 C错误D.凝胶色谱柱内的气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序所以一旦发现有气泡必须重装色谱柱 D正确故选 C2.图甲为凝胶色谱法分离蛋白质示意图图乙为凝胶电泳示意图下列叙述错误的是()A. 装填图甲凝胶色谱柱时若出现气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序B. 在凝胶色谱操作过程中一定不能让洗脱液流干露出凝胶颗粒C. 电泳槽的①②处接通电源后带电粒子在凝胶中发生定向移动D. 图乙的凝胶中加入SDS后蛋白质的移动速率取决于电荷大小【答案】D【解析】解 A.装填凝胶色谱柱时色谱柱内不能有气泡存在因为气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序使得到的红色带歪曲、散乱降低分离效果 A正确B.在凝胶色谱操作过程中一定不能让洗脱液流干露出凝胶颗粒 B正确C.电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极带电粒子在凝胶中发生定向移动 C正确D.图乙的凝胶中加入SDS后蛋白质的移动速率取决于分子大小 D错误故选 D3.下列关于PCR技术的叙述正确的是()A. PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上B. 该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶C. 该技术需要一对特异性的引物要求一对引物的序列是互补的D. 该技术应用体内DNA双链复制原理也需要模板、原料、能量、酶等条件【答案】D【解析】4.某中学生物兴趣小组进行DNA的粗提取与鉴定时选取如下实验材料新鲜花椰菜、体积分数95%的冷酒精、研磨液(含表面活性剂SDS、DNA酶抑制剂EDTA、适量的NaCl)、 0.015mol \cdot L^-1的NaCl溶液、二苯胺试剂、蒸馏水以及其他必要实验器材有关实验材料选择理由的叙述错误的是()A. 新鲜的花椰菜DNA含量丰富易获取B. SDS具有瓦解植物细胞膜的作用C. DNA溶于冷酒精而蛋白质等杂质不溶D. EDTA可减少提取过程中DNA的降解【答案】C【解析】解 A.新鲜的花椰菜DNA含量丰富易获取 A正确B.SDS可以瓦解细胞膜 B正确C.DNA不溶于冷酒精会在酒精溶液中析出 C错误D.EDTA是DNA酶抑制剂可以减少提取过程中DNA的降解 D正确故选 C5.下列属于PCR技术的条件的是()①单链的脱氧核苷酸序列引物②含目的基因的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥热稳定的DNA聚合酶⑦限制性核酸内切酶A. ①②③⑤B. ①②③⑥C. ①②③⑤⑦D. ①②④⑤⑦【答案】B【解析】PCR需要一对引物即一对单链的脱氧核苷酸序列①正确PCR需要模板即目的基因所在的DNA片段②正确PCR需要脱氧核苷酸作为原料③正确核糖核苷酸是合成RNA的原料而PCR合成的是DNA ④错误采用PCR技术合成DNA时不需要DNA连接酶但需要热稳定的DNA聚合酶⑤错误⑥正确体外合成DNA时不需要限制性核酸内切酶⑦错误因此 B项正确 A、C、D项错误故选B6.甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图相关叙述正确的是()A.图甲的烧杯中为NaCl溶液目的是使DNA析出B.图乙的试管中所用溶剂为酒精溶液其中A试管起对照作用C.图甲操作需用玻璃棒缓慢搅拌以使DNA析出并缠绕在玻璃棒上D.图乙操作中鉴定DNA所用试剂为双缩脲试剂【答案】D【解析】图甲的烧杯中为酒精溶液 A错误图乙的试管中为NaCl溶液 A试管起对照作用 B错误用酒精析出DNA时在试管中加入冷却的酒精静置2~3分钟溶液中会析出白色丝状物用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌卷起丝状物 C正确鉴定DNA所用的试剂是二苯胺试剂 D错误故选C7.在DNA粗提取与鉴定实验中将获得的含有DNA的黏稠物(含较多物质)分别处理如下其中杂质所处的位置在()A. ①④⑤B. ①③⑥C. ①④⑥D. ②④⑥【答案】C【解析】DNA在2mol/L的氯化钠溶液中的溶解度较高因此杂质在①中DNA在0.14mol/L的氯化钠溶液中的溶解度很低因此杂质在④中DNA不溶于冷却的95%的酒精溶液因此杂质在⑥中故选C8.下列有关在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是()A. 加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B. 让吸管管口沿管壁环绕移动贴壁加样至色谱柱顶端不要破坏凝胶面C. 打开下端出口待样品完全进入凝胶层后直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱D. 待红色的蛋白质接近色谱柱底端时每5mL收集一管连续收集流出液【答案】C【解析】A.加样前打开色谱柱下端的流出口使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面平齐时关闭出口故A项正确B.加样时用吸管小心的将1mL透析后的样品沿管壁环绕移动贴壁加样至色谱柱顶端不要破坏凝胶面故B项正确C.打开色谱柱下端出口使样品渗入凝胶床内等样品完全进入凝胶层后关闭下端出口加入磷酸缓冲液到适当的高度然后连接缓冲液洗脱瓶打开下端出口进行洗脱故C项错误D.待红色的蛋白质接近色谱柱底端时开始收集血红蛋白每5mL收集一管连续收集流出液故D项正确故选C9.将经处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min速度离心10min后离心管中溶液分为4层血红蛋白位于从下至上的()A. 第一层B. 第二层C. 第三层D. 第四层【答案】B【解析】解分离血红蛋白溶液时将搅拌好的混合液转移到离心管中经过中速长时离心后可明显看到试管中溶液分为四层从下往上数第一层为杂质沉淀层第二层为血红蛋白水溶液第三层为脂溶性物质的沉淀层第四层为甲苯层因此血红蛋白位于从下至上的第二层故选 B10.下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述正确的是()A. DNA在NaCl溶液中的溶解度与蛋白质不同B. 沸水浴条件下 DNA与二苯胺反应呈紫色C. 洗涤剂可瓦解细胞膜但对DNA有影响D. 向DNA滤液中加入酒精会使杂蛋白析出【答案】A【解析】11.在表达融合蛋白时可以利用融合PCR技术把两个不同的基因片段连接起来其原理如图所示下列分析正确的是()A. 该过程使用的引物P2和P3的碱基完全互补配对所以不能放在一个系统中工作B. 融合PCR的第一步是不需要引物的可能是因为两条链重叠的部位互为另一条链的引物C. 融合PCR的第一步需要加入耐高温DNA聚合酶、DNA连接酶等D. 若融合PCR的第二步获得了64个融合基因则该过程消耗了128个引物【答案】B【解析】解 A.该过程使用的引物P2和P3存在互补配对片段所以不能放在一个系统中工作否则会发生结合而失去作用 A错误B.融合PCR的第一步是不需要引物的可能是因为两条链重叠的部位互为另一条链的引物 B正确C.融合PCR的第一步需要加入耐高温DNA聚合酶不需要DNA连接酶 C错误D.若融合PCR的第二步获得了64个融合基因则该过程消耗了256个引物 D错误故选 B12.在向溶解DNA的NaCl溶液中不断加入蒸馏水的目的是()A. 加快溶解DNA的速度B. 加快溶解杂质的速度C. 减小DNA的溶解度加快DNA析出D. 减小杂质的溶解度加快杂质的析出【答案】C【解析】解在DNA粗提取实验中向在溶解DNA的NaCl溶液中不断加入蒸馏水会使NaCl溶液的浓度降低进而减少DNA的溶解度使DNA分子逐渐析出.故选 C.13.下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤其中正确的是()A. 蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步B. 蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、鸡、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白C. 对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等D. 对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳【答案】D【解析】解 A、蛋白质提取和分离的实验步骤一般包括样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等4步 A错误B、蛋白质的提取和分离实验一般用哺乳动物的成熟的红细胞作为实验材料分离血红蛋白一般不要鸡、蛙等动物血液为材料分离血红蛋白 B错误C 、样品处理的一般步骤分为为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白、透析等 C错误D、对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳D正确.故选 D.14.下列与教材实验相关的叙述错误的是()A. 向蛋白质样液中加入蛋白酶用双缩脲试剂检测样液仍能产生紫色反应B. 提取绿叶中的叶绿素和类胡萝卜素时至少需要破坏细胞膜和叶绿体膜C. 经健那绿染液处理的洋葱鳞片叶内表皮细胞中的线粒体依然保持生活状态D. 可用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响用淀粉酶探究pH对酶活性的影响【答案】D【解析】解 A.向蛋白质样液中加入蛋白酶后蛋白质水解但蛋白酶的化学本质是蛋白质因此用双缩脲试剂检测样液仍能产生紫色反应 A正确B.提取绿叶中的叶绿素和类胡萝卜素时至少需要破坏细胞膜和叶绿体膜使叶绿体中的色素出来 B正确C.经健那绿染液处理的洋葱鳞片叶内表皮细胞中的线粒体依然保持生活状态 C正确D.高温会使过氧化氢分解因此不能利用过氧化氢和过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响淀粉可以在酸性条件下分解所以不能利用淀粉、淀粉酶探究pH对酶活性的影响 D错误故选 D15.下图凝胶色谱法分离蛋白质示意图和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图分析错误的是()A. 在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发现柱内有气泡存在就需要重装B. 图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢所以最后从层析柱中流出来C.图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小D. 凝胶中的SDS带负电则应在电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极【答案】B【解析】解 A.在装填凝胶色谱柱时凝胶装填在色谱柱内要均匀不能有气泡存在因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序 A正确B.图甲中大分子蛋白质因不容易进入凝胶内部的通道路程短移动速度快所以最先从层析柱中流出来 B错误C.图乙凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小 C正确D.凝胶中的SDS带负电所以电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极 D正确故选 B16.下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述不正确的是()A. 提取动物细胞中的DNA和蛋白质都可以采用蒸馏水涨破细胞的方法B. 采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质C. 用二苯胺试剂鉴定DNA时在沸水浴条件下溶液呈蓝色D. 血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化 DNA则可采用电泳、盐析等方法纯化【答案】D【解析】A项 DNA和蛋白质存在于细胞内用动物细胞作材料提取DNA和蛋白质都要用蒸馏水处理使细胞吸水涨破释放出其中的蛋白质或DNA A项正确B项 DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同因此采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质 B项正确C项用二苯胺试剂鉴定DNA时在沸水浴条件下溶液呈蓝色 C项正确D项凝胶色谱法纯化血红蛋白只是很多纯化方法中的一种蛋白质的纯化也可以采用电泳、盐析等方法 D项错误故选D17.下列关于生物学实验的叙述正确的是()A. 用显微镜直接观察新鲜的藓类小叶装片可看到扁平的椭球形叶绿体B. 在电子显微镜下拍摄到的线粒体的结构照片属于物理模型C. 经染色后的洋葱根尖直接在显微镜下可看到处于有丝分裂各时期的细胞D. 用淀粉酶探究pH对酶活性的影响实验中可用碘液检验实验结果【答案】A【解析】解 A.由于新鲜的藓类叶片是单层细胞可以用显微镜直接观察叶绿体叶绿体为绿色、扁平的椭球形或球形 A正确B.在电子显微镜下拍摄到的线粒体的结构照片是实物的写照不属于模型 B错误C.经染色后的洋葱根尖的细胞绝大多数处于分裂的间期不一定可以观察到有丝分裂的各时期 C错误D.若探究pH对酶活性的影响不宜选用淀粉水解因为淀粉酶催化的底物淀粉在酸性条件下也会发生水解反应 D错误故选 A18.下列关于血红蛋白的提取和分离的叙述中错误的是()A. 红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关B. 凝胶柱中适量气泡的存在会提高分离的效果C. 凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的方法D. 判断纯化的蛋白质是否为血红蛋白可采用电泳法鉴定【答案】B【解析】解 A.红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关 A正确B.凝胶柱中适量气泡的存在会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果 B错误C.凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的方法 C正确D.判断纯化的蛋白质是否为血红蛋白可采用电泳法鉴定 D正确故选 B19.下列操作正确的是()A. 分离红细胞时采用低速长时间离心B. 红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可C. 分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D. 透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液透析12h【答案】D【解析】A、分离红细胞时采用低速短时间离心 A错误B、红细胞释放出血红蛋白需要加入蒸馏水和甲苯还需要在磁力搅拌器上充分搅拌 B 错误C、分离血红蛋白溶液是中速长时间离心 C错误D、透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液透析12h D正确二、解答题(本大题共计4小题每题10分共计40分)20.(1)要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用________对全部DNA 进行片段化将获得的片段与________连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是________ 最常用的方法是________ 再通过________鉴别和筛选含目的基因的受体菌20.(2)如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因原因是________________________________________________20.(3)构建了基因文库并不等于完成了目的基因的分离因此必须用各种方法将目的基因从文库中筛选出来下列不能为筛选目的基因提供依据的是________20.(4)利用PCR技术扩增目的基因这一过程中需要加入一种特殊的酶即________ 【答案】(1))限制酶, 运载体, 大肠杆菌, 感受态转化法, 标记基因【解析】解(1)基因文库包括基因组文库和部分基因文库要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用限制酶对全部DNA进行片段化将获得的片段与运载体连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是大肠杆菌最常用的方法是感受态转化法标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而将目的基因筛选出来故可通过标记基因鉴别和筛选含目的基因的受体菌【答案】(2)基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因【解析】(2)由于基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因所以如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因【答案】C【解析】(3)筛选目的基因可以依据目的基因的功能、目的基因的mRNA及目的基因表达产物蛋白质的氨基酸序列由于碱基种类并没有特异性所以不能作为筛选目的基因的依据故选 C【答案】(4)热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)【解析】(4)PCR过程包括变性、复性和延伸三步变性过程需要用90℃以上的高温使双链DNA解聚为单链故利用PCR技术扩增目的基因需要加入热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)21.(1)将实验流程补充完整 A.________ B.________ 步骤B的目的是________ 21.(2)洗涤红细胞的目的是________ 此过程中若离心速度过高和时间过长会导致________ 在________的作用下红细胞会破裂释放出血红蛋白21.(3)在利用凝胶色谱法纯化血红蛋白的过程中色谱柱不能有气泡存在原因是________ 如果________ 说明色谱柱制作成功待蛋白质接近凝胶色谱柱底端时用试管连续收集流出液先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是________21.(4)在判断纯化的蛋白质是否达到要求需要对蛋白质进行纯度鉴定在鉴定的方法中使用较多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳加入SDS 使电泳迁移率完全取决于________ 【答案】(1)血红蛋白的释放, 粗分离(或透析), 去除样品中分子量较小的杂质【解析】解(1)蛋白质的提取与分离的一般步骤为样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定样品处理分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白液显然流程图中步聚A、B分别为血红蛋白的释放和粗分离步骤B粗分离是通过透析完成的透析的目的是去除样品中分子量较小的杂质【答案】(2)去除杂蛋白(或血浆蛋白), 白细胞一同沉淀达不到分离的效果, 蒸馏水和甲苯【解析】(2)洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白此过程中需要低速短时离心若离心速度过高和时间过长会导致白细胞一同沉淀达不到分离的效果在蒸馏水和甲苯的作用下红细胞会破裂释放出血红蛋白【答案】(3)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果, 红色区带均匀一致地移动, 先收集到的蛋白质相对分子质量大后收集到的蛋白质相对分子质量小【解析】(3)在利用凝胶色谱法纯化血红蛋白的过程中色谱柱不能有气泡存在因为气泡的存在会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果如果红色区带均匀一致地移动说明色谱柱制作成功相对分子质量较大的蛋白质在凝胶外部移动而先流出相对分子质量较小的蛋白质在凝胶内部移动而后流出【答案】(4)分子大小【解析】(4) SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中 SDS能使蛋白质完全变性其带有的负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别使电泳迁移率完全取决于分子的大小22.(1)通过肿瘤疫苗激活的免疫应答归类正确的是()①细胞免疫②体液免疫③人工免疫④天然免疫⑤特异性免疫⑥非特异性免疫22.(2)下列可做为肿瘤抗原的是()(多选)22.(3)如图所示①﹣⑤过程需要使用限制酶的是________过程22.(4)图中所用的生物技术有()(多选)22.(5)据已有知识判断图中筛选的 CAR﹣T细胞具备特点是()(多选)22.(6)放疗是用放射性元素对人体肿瘤的部位进行局部方面的扫描和照射通过辐射杀死瘤细胞化疗是通过药物的手段使药物进入人体血液并去除人体中的癌细胞放疗和化疗对人体正常细胞也有杀伤作用相对于放疗化疗肿瘤疫苗治疗法的优点有________A. ①②⑥B. ②④⑥C. ①③⑤D. ①④⑥【答案】C2、A、衰老肿瘤细胞可以作为肿瘤抗原引起免疫反应 A正确B、肿瘤相关蛋白或多肽可以作为肿瘤抗原引起免疫反应 B正确C、肿瘤细胞内的脱氧核糖不能作为肿瘤抗原 C错误D、含有肿瘤抗原基因的质粒不能直接作为抗原其表达产物可以作为肿瘤抗原 D错误故选 AB3图中①获取目的基因、②构建基因表达载体均需要限制酶4由图可知 CAR﹣T疗法通过转基因技术把CAR基因导入T细胞使其表达另外对获得的成功表达CAR的T细胞通过动物细胞培养进行增殖综上所述 BC不符合题意 AD符合题意故选AD5、A、只有浆细胞可以分泌抗体 T细胞不能分泌抗体 A错误B、由图可知获得目的基因的T细胞经体外培养可表达CAR受体 B正确C、图中筛选的 CAR﹣T细胞可以激活体内T淋巴细胞监控清除肿瘤细胞 C正确D、CAR﹣T细胞具有特异性不能识别不同种类的癌细胞D错误故选BC6、相对于放疗化疗肿瘤疫苗治疗法疗效高、特异性强、副作用小故答案为【解析】肿瘤疫苗会激活细胞免疫通过细胞免疫杀死肿瘤细胞该过程属于人工免疫细胞免疫属于特异性免疫综上所述 ABD不符合题意 C符合题意故选 C2、A、衰老肿瘤细胞可以作为肿瘤抗原引起免疫反应 A正确B、肿瘤相关蛋白或多肽可以作为肿瘤抗原引起免疫反应 B正确C、肿瘤细胞内的脱氧核糖不能作为肿瘤抗原 C错误D、含有肿瘤抗原基因的质粒不能直接作为抗原其表达产物可以作为肿瘤抗原 D错误故选 AB3.图中①获取目的基因、②构建基因表达载体均需要限制酶4.由图可知 CAR﹣T疗法通过转基因技术把CAR基因导入T细胞使其表达另外对获得的成功表达CAR的T细胞通过动物细胞培养进行增殖综上所述 BC不符合题意 AD符合题意故选AD5、A、只有浆细胞可以分泌抗体 T细胞不能分泌抗体 A错误B、由图可知获得目的基因的T细胞经体外培养可表达CAR受体 B正确C、图中筛选的 CAR﹣T细胞可以激活体内T淋巴细胞监控清除肿瘤细胞 C正确D、CAR﹣T细胞具有特异性不能识别不同种类的癌细胞 D错误故选 BC6、相对于放疗化疗肿瘤疫苗治疗法疗效高、特异性强、副作用小故答案为【答案】C【解析】C【答案】①②【解析】A B【答案】【解析】①②【答案】A, D【解析】AD【答案】疗效高、特异性强、副反应小【解析】BC(1)疗效高、特异性强、副反应小23.为探究生长素的极性运输科学家筛选出与其相关的基因P 请论述利用分子生物学的方法对基因P可进行的研究说出有关的分子生物学技术预测相关结果说明基因P的功能【答案】对基因P进行基因敲除或将编码抑制P基因表达产物的基因整合到载体中导入受体细胞若实验组生长素分布呈均匀状态说明P基因表达产物参与IAA极性运输可能为受体蛋白【解析】解为探究生长素的极性运输科学家筛选出与其相关的基因P 可设计以下实验对基因P进行基因敲除或将编码抑制P基因表达产物的基因整合到载体中导入受体细胞若实验组生长素分布呈均匀状态说明P基因表达产物参与IAA极性运输可能为受体蛋白试卷第11页,总11页。
高二生物选修1_专题5_DNA和蛋白质技术测试题
高二生物选修1 专题5 DNA和蛋白质技术测试题第Ⅰ卷选择题 (共70分)一、单选题(2分×20=40分)。
1.本实验中有三次过滤:§1⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液以上三次过滤分别为了获得()A含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液B含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液C含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNAD含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液2.洗涤剂能够瓦解(),但对DNA没有影响。
§1A.细胞壁B.细胞膜C.细胞核D.细胞质3.在沸水浴的条件下,DNA遇()会被染成蓝色。
§1A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺4.在DNA提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()§1A.不易破碎B.减少提取过程中DNA的损失C.增加DNA的含量D.容易洗刷5.DNA的粗提取中,将与滤液体积相等的、冷却的(),静置2—3min,溶液中会出现白色丝状物。
§1A.0.9%的NaClB.0.14mol/L的NaCl溶液C.质量分数15%的HClD.体积分数为95%的酒精溶液6. 以血液为实验材料时,需要向血液中加入(),防止血液凝固。
A.醋酸钠B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红7.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是()§1A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少DNA的溶解度,加快DNA析出D.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出8.在一个密闭的容器中,利用PCR技术用含有同位素13C的脱氧核苷酸合成一个DNA分子,然后再加入普通的含12C的脱氧核苷酸,经n次循环后,所得DNA分子中含12C的脱氧核苷酸链数与含13C的脱氧核苷酸链数之比是()§2A.2n:1B.(2n-2):nC.(2n-2):2D.(2n-1):19.具有x个碱基对的一个DNA分子片段含有m个腺嘌呤,该片段利用PCR技术完成了第n 个循环后需要多少个游离的胞嘧啶脱氧核苷酸?()A.(2n-1)(x-m )B.2n(x-m)C. (2n-1)(x/2-m)D.2n(x/2-m)10.下列关于DNA复制过程的正确顺序是()§2①互补碱基对之间氢键断裂②互补碱基对之间形成氢键③DNA分子在解旋酶的作用下解旋④以解旋后的母链为模板进行碱基互补配对⑤子链与母链盘旋成双螺旋状结构A①③④②⑤ B ①④②⑤③ C ①③⑤④② D ③①④②⑤11.实验室内模拟生物体DNA的复制必需的一组条件是()①酶②游离的脱氧核苷酸③A TP④DN分子⑤mRNA⑥tRNA⑦适宜的温度⑧适宜的酸碱度A①②③④⑤⑥ B ②③④⑤⑥⑦ C ②③④⑤⑦⑧ D ①②③④⑦⑧12. DNA的合成方向总是()延伸。
人教版高中生物选修一专题5《 DNA和蛋白质技术》单元测试题(解析版)
专题5《 DNA和蛋白质技术》单元测试题一、单选题(每小题只有一个正确答案)1.以下对 DNA 和血红蛋白的提取与分离(鉴定)实验的分析错误的是()A.都要用猪血细胞来做实验材料B.在 DNA 的粗提取中可利用DNA在不同浓度盐溶液中的溶解度不同而析出C.在实验中都要进行除杂处理以便得到较纯净的 DNA 或血红蛋白D.将析出的 DNA 溶解在 2mol/L的 NaCl溶液中,加入二苯胺试剂沸水浴后呈现蓝色2.下列关于蛋白质性质的叙述中,不会影响到蛋白质的泳动速度的是()A.蛋白质分子的大小B.蛋白质分子的密度C.蛋白质分子的形状D.蛋白质分子的等电点3.关于DNA的实验,叙述正确的是()A.用兔的成熟红细胞可提取DNAB. PCR的每个循环一般依次经过变性-延伸-复性三步C. DNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物D.用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质呈红色4.通过样品处理和粗分离得到的血红蛋白溶液,还含有其他种类的蛋白质分子(如呼吸酶等)。
怎样将杂蛋白与血红蛋白分离开来呢?常用凝胶色谱法进行纯化。
以下做法、说法不正确的是() A.凝胶色谱分离蛋白质包括:制作色谱柱、装填色谱柱、样品加入和电泳B.色谱柱的装填过程要注意:装填前凝胶需要充分溶胀、装填要均匀、尽量紧密,降低颗粒间隙;无气泡;洗脱液洗涤平衡不能断流C.样品加入和洗脱的基本过程是:调节缓冲液面→加入蛋白质样品(不能破坏凝胶面)→调节缓冲液面→洗脱→红色区带均匀地移动标志着成功→收集分装蛋白质。
最后将纯化的样品进行电泳鉴定D.如果红色区带移动不均匀、歪斜、散乱、变宽等,其主要原因是色谱柱的装填有问题5.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但实验结果却不同。
下列有关叙述不正确的是()A.实验材料选择错误的组别是丙B.沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C.甲组实验现象差的原因是25℃的酒精对DNA的凝集效果差D.乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂6.如果在除去杂质时选择方案三,为什么要将滤液放在60~75 ℃的恒温水浴箱中保温10~15 min()A.使DNA变性B.使蛋白质变性C.使DNA和蛋白质变性D.分解蛋白质7.对PCR的实验操作顺序的叙述,正确的是()A.准备→移液→混合→离心→反应B.准备→移液→离心→混合→反应C.离心→移液→混合→反应D.移液→离心→混合→反应8.某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中,发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。
高中生物选修1《专题5 DNA和蛋白质技术》复习课件
• 2.PCR的反应过程 • 一般要经历三十多次循环,每次循环可分为变 性→复性→延伸三步。学.科.网 zxxk. • 3.PCR技术反应过程中控制不同温度的意义 • (1)90 ℃以上时变性,双链DNA解聚为单链; • (2)50 ℃左右时复性,两种引物与两条单链 DNA结合; • (3)72 ℃左右时延伸,TaqDNA 聚合酶促使 DNA新链的合成。
• 5.玫瑰精油称为“液体黄金”,其提取方法() • A.只能用水蒸气蒸馏法 B.可用蒸馏法和压 榨法 • C.可用蒸馏法和萃取法 D.可用压榨法和萃 取法 • 【答案】 C
• (2009年高考江苏卷)下列关于DNA和蛋 白质提取与分离实验的叙述,正确的有(双 ) •选) 【答案】( BD • A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用 蒸馏水涨破细胞 • B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析 出DNA可去除蛋白质 • C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可 以去除溶液中的DNA • D.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法 进行分离纯化
状物较少,可将混合液放入到冰箱中再冷却几分钟。
1. (改编)在DNA分子的粗提取实验中,两次向 烧杯中加入蒸馏水的作用是( ) A. 稀释血液、冲洗样品 B. 使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出 C. 使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D. 使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA 【答案】B
• 2.(2010年青岛模拟)下列关于DNA粗提取 与鉴定的说法正确的是( ) • A.氯化钠的浓度越低,DNA的溶解度越大 • B.人的血液不可代替鸡血进行该实验 • C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂 • D.利用DNA易溶于酒精的特点可除去DNA 中的部分杂质 • 【答案】 B
• 1.(2008年江苏生物)下列叙述中错误的 是( ) • A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶 解而不能使其析出 • B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会 呈现蓝色 • C.用电泳法可分离带电性质、分子大小 和形状不同的蛋白质 • D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分 子物质
高中生物选修1全册同步习题集(含答案)
高中生物选修1全册同步习题集目录同步习题:1-1果酒和果醋的制作规范训练同步习题:1-2腐乳的制作规范训练同步习题:1-2腐乳的制作随堂达标检测同步习题:1-3制作泡菜并检测亚硝酸盐含量随堂达标检测同步习题:2-2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数规范训练同步习题:2-2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数随堂达标检测同步习题:2-3分解纤维素的微生物的分离随堂达标检测同步习题:3-1菊花的组织培养随堂达标检测同步习题:3-2月季的花药培养规范训练同步习题:3-2月季的花药培养随堂达标检测同步习题:4-1果胶酶在果汁生产中的作用随堂达标检测同步习题:4-2探讨加酶洗衣粉的洗涤效果随堂达标检测同步习题:4-3酵母细胞的固定化规范训练同步习题:5-2多聚酶链式反应扩增DNA片段规范训练同步习题:5-2多聚酶链式反应扩增DNA片段随堂达标检测同步习题:6-1植物芳香油的提取规范训练同步习题:6-2胡萝卜素的提取规范训练同步习题:6-2胡萝卜素的提取随堂达标检测同步习题:2-1微生物的实验室培养规范训练同步习题:3-1菊花的组织培养规范训练同步习题:1-3制作泡菜并检测亚硝酸盐含量规范训练同步习题:1-1果酒和果醋的制作随堂达标检测同步习题:2-1微生物的实验室培养随堂达标检测同步习题:2-3分解纤维素的微生物的分离规范训练同步习题:4-1果胶酶在果汁生产中的作用规范训练同步习题:4-2探讨加酶洗衣粉的洗涤效果规范训练同步习题:4-3酵母细胞的固定化随堂达标检测同步习题:5-1DNA的粗提取与鉴定规范训练同步习题:5-1DNA的粗提取与鉴定随堂达标检测同步习题:5-3血红蛋白的提取和分离规范训练同步习题:5-3血红蛋白的提取和分离随堂达标检测同步习题:6-1植物芳香油的提取随堂达标检测同步习题:专题2《微生物的培养与应用》专题整合同步习题:专题3《植物的组织培养技术》专题整合同步习题:专题4《酶的研究与应用》专题整合同步习题:专题5《DNA的蛋白质技术》专题整合同步习题:专题6《植物有效成分的提取》专题整合专题1传统发酵技术的应用课题1果酒和果醋的制作(时间:30分钟满分:50分)1.(2011·江苏百校联考一)下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中,错误的是()。
高三生物一轮复习 选修1知识清单
高中生物选修1知识清单专题1 传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋的制作【课题背景】1.酸度较高的果醋可用于烹调,酸度较低的果醋是一种新兴的饮料。
2.无论是果酒还是果醋,都具有一定的保健养生的功效。
【基础知识】1.酵母菌是兼性厌氧微生物,在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖。
在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵。
2.20°C左右最适合酵母菌繁殖,酒精发酵时一般将温度控制在18~25°C。
3.在葡萄酒的自然发酵过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。
4.在发酵过程中,随着酒精度数的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色。
5.在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
6.到了冬天,酵母菌形成孢子,进入休眠状态。
由春至夏,土壤的温度逐渐升高,酵母菌便又进入了旺盛的生长和繁殖时期。
7. 一年四季,土壤始终是酵母菌的大本营。
8.土壤中的酵母菌可以通过各种途径传播到葡萄上:一阵轻风,可能将酵母菌吹到葡萄上;飞溅的雨水,可能将酵母菌溅到葡萄上;昆虫吸食葡萄汁的同时,也传播了酵母菌。
9.醋酸菌是一种好氧细菌,只有当氧气充足时,才能进行旺盛的生理活动。
10.在变酸的酒的表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。
11.当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
12.醋酸菌的最适生长温度为30~35°C。
【实验设计】1.2.在发酵过程中,每隔12 h左右将瓶盖拧松一次(注意,不是打开瓶盖),以放出CO2,此后再将瓶盖拧紧。
当发酵产生酒精后,再将瓶盖打开,盖上一层纱布,进行制葡萄醋的发酵。
【操作提示】1.防止发酵液被污染:①榨汁机要清洗干净,并晾干;②发酵瓶要清洗干净,用体积分数为70%的酒精消毒,或用洗洁精洗涤;③装入葡萄汁后,封闭充气口。
高考总复习 生物选修1-6
高考总复习人教版
选修一 生物技术实践专题
生物
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自我纠查:①压榨 层 ⑤水中蒸馏
②萃取
③水蒸气 ⑦水气蒸馏
④油层和水 ⑧有机溶剂
⑥水上蒸馏
⑨有机溶剂
⑭微生物
⑩水蒸气蒸馏
⑯萃取
⑪漂洗
⑰浓缩
⑫静置
⑬岩藻
⑮干燥
小思考:(1)这三种方法的基本原理相同,但原料放置 位置不同。 ①水中蒸馏:原料放在蒸馏容器的水中,水要完全浸 没原料。
生物
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选修一 生物技术实践专题
生物
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高考要点
考纲要求
热点提示
研究从生物材料中提 初步学会用水蒸气蒸馏法和 取某些特定成分 压榨法提取植物芳香油
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基础知识
选修一 生物技术实践专题
生物
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【例】 可用 ( )
玫瑰精油被称为“液体黄金”,其提取方法
A.只能用水蒸气蒸馏法
B.可用蒸馏法和压榨法 C.可用蒸馏法和萃取法 D.可用压榨法和萃取法
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解析:用玫瑰花提取精油,根据玫瑰花的干湿情况可 采用不同的提取方法,鲜玫瑰花可采用水蒸气蒸馏法,干
选修一 生物技术实践专题
生物
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水中蒸馏对于柑橘和柠檬等原料不适用。因为水中蒸
馏会导致原料焦糊和有效成分水解。
选修一 生物技术实践专题
生物
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2019版生物人教版选修1课件:专题5 专题整合
-4-
专题整合
一二
知识网络
二、DNA的粗提取、血红蛋白的分离与PCR的比较
专题应用
-5-
专题整合
一二
知识网络
专题应用
-6-
专题整合
一二
知识网络
专题应用
【例题2】 下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确 的是( )
A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞 B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA,可去除蛋白质 C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA D.蛋白质和DNA中,只有蛋白质可以用电泳的方法专题整合
知识网络
专题应用
一二
解析:如果提取动物细胞中的DNA和蛋白质可以用蒸馏水涨破细 胞,但是如果用植物细胞来提取DNA或蛋白质,那么用蒸馏水就无 法涨破细胞,所以应根据细胞的结构特点选择不同的方法破碎细胞 (常用的还有研磨法、超声波法、酶解法等),A项错误;DNA在NaCl 溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而变化,当NaCl溶液的物 质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低,利用这一原理,可以 使溶解在NaCl溶液中的DNA析出,B项正确;透析法可以将蛋白质 与其他小分子化合物如无机盐、单糖、双糖、氨基酸等分离,但是 不能将蛋白质与DNA分开,C项错误;蛋白质和DNA都是大分子物 质,皆可以用电泳的方法进行分离纯化,D项错误。
专题整合
-1-
专题整合
知识网络
专题应用
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专题整合
知识网络
一二
一、DNA与蛋白质在理化性质方面的差异
专题应用
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专题整合
知识网络
专题应用
一二
【例题1】 在DNA的粗提取与鉴定、血红蛋白的提取与分离实 验中分别用到了DNA、蛋白质的理化性质,它们利用的理化性质依 次为( )
人教高中生物选修1 课后限时作业 专题5 DNA和蛋白质技术课题2 含答案
专题5 课题2(建议用时:30分钟)考点基本目标发展目标1.多聚酶链式反应(PCR) 1,2,3,4 11,12,13,2.PCR的实验设计、结果分析及评价5,6,7,8,9,1014,15[基本目标]1.下列关于PCR的说法,不正确的是()A.PCR是体外复制DNA的技术B.PCR过程中只需要一个模板DNA、两种引物分子、大量脱氧核苷酸原料C.Taq DNA聚合酶是一种热稳定的DNA聚合酶D.PCR利用的是DNA双链复制原理B[解析]PCR技术是一种在体外迅速扩增DNA片段的技术;PCR过程除需要DNA 分子双链作为模板、两种引物分子、大量脱氧核苷酸原料外,还需要酶等适宜条件;Taq DNA聚合酶是一种耐热的DNA聚合酶;PCR和DNA的体内复制原理相同,都是半保留复制。
2.PCR技术中,引起DNA变性的因素是()A.pH过高B.pH过低C.升高温度D.加入酒精C[解析]PCR中引起DNA变性的因素是升高温度,在80~100 ℃的温度范围内,DNA的双螺旋结构会解体,双链分开。
3.PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是()①PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA②PCR过程不需要DNA聚合酶③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的④PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制A.③④B.①②C.①③D.②④C[解析]PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比较,主要有两点不同:①PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA,长度通常为20~30个核苷酸;②PCR过程中,DNA解旋不依赖解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的。
4.标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步,这三大步需要的温度可能依次是()A.92 ℃、50 ℃、72 ℃B.72 ℃、50 ℃、92 ℃C.50 ℃、92 ℃、72 ℃D.80 ℃、50 ℃、72 ℃A[解析]当温度上升到90 ℃以上时,双链DNA解聚为单链,称为变性;当温度下降到50 ℃左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,称为复性;当温度上升到72 ℃左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在Taq DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,称为延伸。
2019-2020学年高二生物选修一教学案:专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定 Word版含答案
一、基础知识(阅读教材P54~55)1.提取DNA 的方法和原理(1)提取生物大分子的思路:选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
(2)DNA 粗提取方法:利用DNA 与 RNA 、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA ,去除其他成分。
2.DNA 的性质 (1)DNA 的溶解性①DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl 溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。
②DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
(2)DNA 的耐受性①蛋白酶能水解蛋白质,但是对 DNA 没有影响。
②大多数蛋白质不能忍受 60~80 ℃的高温,而DNA 在80 ℃以上才会变性。
③洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA 没有影响。
(3)DNA 的鉴定DNA +二苯胺――→沸水浴蓝色。
二、实验设计(阅读教材P55~56)1.实验材料的选取:选用 DNA 含量相对较高的生物组织。
2.破碎细胞,获取含DNA 的滤液(1)动物细胞的破碎(以鸡血为例):在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。
(2)植物细胞的破碎(以洋葱为例):先将洋葱切碎,然后加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分地搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
3.去除滤液中的杂质4.DNA 的折出:利用DNA 不溶于酒精溶液这一原理,可从溶液中析出较纯净的DNA ,此时DNA 的状态为白色丝状物。
5.DNA 的鉴定:将白色丝状物溶解于5 mL 物质的量浓度为 2 mol/L 的NaCl 溶液中,再加入4 mL 的二苯胺试剂,沸水中加热5 min ,冷却后观察溶液的颜色,同时设置不含DNA的NaCl溶液作为对照实验。
三、操作提示(阅读教材P56)1.以血液为实验材料时,每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠,防止血液凝固。
高考生物一轮总复习: 选修1专题5、6ppt课件
(1)析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液等体积的冷却
酒精溶液 ( 体积分数为 95%) ,静置 2 ~ 3 min,溶液中会出 现白色丝状物 ( 此即粗提取的 DNA) ,用玻璃棒沿一个方向
搅拌卷起丝状物。
(2)鉴定 比较 加入物质 实验组 均加入:① 丝状物 (DNA) 4 mL二苯 胺试剂 对照组 ②2 mol/L NaCl溶液5 mL 结果 溶液逐 渐变蓝 图示
目录
(3)杂质的去除方案 NaCl 溶液中溶解度的不同, ①利用DNA在不同浓度的 _______ 通过控制其溶液的浓度去除杂质。 ②用木瓜蛋白酶去除_______ 蛋白质 。
③用高温(60~75 ℃)使_______ 蛋白质 变性。
(4)DNA的析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相 冷却的酒精 溶液可使DNA析出。 等的、 _____________
不变蓝
目录
特别提醒
本实验用鸡血细胞作实验材料,不能用哺乳动物的成熟红
细胞,原因是哺乳动物的成熟红细胞内无细胞核,但它可 以作为血红蛋白提取和制备细胞膜的理想材料。
目录
对点突破
1.(2011· 高考江苏卷)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴
定”的实验中,相关叙述正确的是( ) A.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L,滤去析出物
(5)DNA 的 鉴 定 : 将 析 出 的 DNA 溶 于 物 质 的 量 浓 度 为 2
mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂,沸水浴加热,溶 液变蓝。
目录
二、多聚酶链式反应扩增DNA片段 1.PCR原理
在80~100 ℃的温度范围内,DNA发生_______, 变性 双螺旋结构
解体,在温度缓慢降低后,DNA发生_______,DNA 单链与 复性 引物 通过碱基互补配对结合 , 耐高温的 DNA 聚合酶从 _______ 引物的3′端 开始延伸DNA链。 ____________ 2.PCR的条件 引物 、4种脱氧核苷酸、耐 缓冲溶液、DNA模板、2种_______
2018-2019学年新人教版高中生物选修1全册练习含答案
人教版高中生物选修1全册练习含解析目录专题1传统发酵技术的应用课题1果酒和果醋的制作练习专题1传统发酵技术的应用课题2腐乳的制作练习专题1传统发酵技术的应用课题3制作泡菜并检测亚硝酸盐含量练习专题1传统发酵技术的应用知识整合练习专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养练习专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习专题2微生物的培养与应用课题3分解纤维素的微生物的分离练习专题2微生物的培养与应用知识整合练习专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养练习专题3植物的组织培养技术课题2月季的花药培养练习专题3植物的组织培养技术知识整合练习专题4酶的研究与应用课题1果胶酶在果汁生产中的作用练习专题4酶的研究与应用课题2探讨加酶洗衣粉的洗涤效果练习专题4酶的研究与应用课题3酵母细胞的固定化练习专题4酶的研究与应用专题知识整合练习专题5DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定练习专题5DNA和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段练习专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离练习专题5DNA和蛋白质技术知识整合练习专题6植物有效成分的提取课题1植物芳香油的提取练习专题6植物有效成分的提取课题2胡萝卜素的提取练习专题6植物有效成分的提取知识整合练习专题1传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋的制作1.严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键,直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物,通常所指的发酵条件不包括( )A.温度控制B.溶氧控制C.pH控制D.酶的控制解析:通常所指的发酵条件包括温度、pH、溶氧、通气与转速等。
酶是自身调节物质,不属于发酵条件。
答案:D2.下列有关果酒自然发酵流程中的叙述正确的是( )A.应将选择好的葡萄进行反复冲洗,防止杂菌污染B.应将选择好的葡萄只冲洗1~2次,防止菌种流失C.应去梗再冲洗,防止冲洗时梗刺破葡萄皮造成污染D.应对榨取的葡萄汁进行灭菌处理,防止杂菌污染解析:在果酒自然发酵中,冲洗这一步操作的主要目的是除去浮尘,不能冲洗得过于干净,也不能去皮,因为自然发酵的菌种来自葡萄皮上的野生型酵母菌。
高中生物选修1专题五课件:DNA与蛋白质技术
4、 Taq DNA聚合酶的应用
高温解决了打开双链的问题,但是,又导致 DNA聚合酶失活的问题,耐高温的Taq DNA 聚合酶解决了高温导致DNA聚合酶失活的问 题,促成了PCR技术的自动化
5、 缓冲液需要为PCR反应提供的物质
DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种引 物,四种脱氧核苷酸,耐热的DNA聚合酶,同 时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行
11、复制的意义 DNA分子通过复制使遗传信息从亲代传给了 后代,从而保持了遗传信息的连续性
12、DNA复制过程中的等量关系
①一条双链DNA分子,复制N次,形成的子代 DNA分子中,含亲代DNA母链的有两个DNA 分子,占子代DNA总数的2/2N;亲代DNA分 子母链两条,占子代DNA中脱氧核苷酸链总 数的2/2 N+1= 1/2N
5、反应
将离心管放入PCR仪上,设置好PCR仪的循 环程序
循环数 第一次 30次 最后一次
变性
94°C, 10min 94℃, 30s 94℃, 1min
复性 -
延伸 -
55℃,30s 72℃, 1min
55℃,30s 72℃, 1min
6、注意事项 PCR技术高度灵敏,为了避免外源DNA等因素的 污染而造成干扰实验,PCR操作时要注意做到:
8、细胞内复制和PCR不同点
① PCR过程需要的引物不是RNA,而是人工 合成的DNA单链,其长度通常为20-30个脱 氧核苷酸
② PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是 通过对反应温度的控制来实现的
(五) PCR的反应过程
1、PCR的反应步骤
PCR一般经历三十多次循环,每次循环可以 分为三个基本步骤──变性、复性和延伸 2、循环过程冈崎片断连接起来。形 成一条完整的新的DNA链。新链与旧链构成新的 DNA
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1.某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动,具体步骤如下:材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。
剪碎后分成两组,一组置于20 ℃、另一组置于-20 ℃条件下保存24 h。
DNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。
用两层纱布过滤,取滤液备用。
第二步:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。
第三步:取6支试管,分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。
DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸水中加热5 min,材料保存温度花菜辣椒蒜黄20 ℃++++++-20 ℃+++++++++(分析上述实验过程,回答下列问题:(1)该探究性实验课题名称是________________________________________________________________________。
(2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少________________________________________________________________________。
(3)根据实验结果,得出结论并分析。
①结论1:与20 ℃相比,相同实验材料在-20 ℃条件下保存,DNA的提取量较多。
结论2:________________________________________________________________________。
②针对结论1,请提出合理的解释:________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。
为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是:________________________________________________________________________,然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
解析:(1)题目给出了多种实验材料,以探究不同保存温度对DNA提取量的影响,因此该实验名称可为“探究不同实验材料和不同保存温度对DNA提取量的影响”。
(2)如果DNA断裂,就不容易被提取出来,在提取DNA时,玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌,是为了防止DNA分子断裂,有效提取DNA。
(3)①由表格可知,花菜、辣椒、蒜黄三种不同的实验材料在20 ℃或-20 ℃时,DNA提取量表现为蒜黄多于花菜,花菜多于辣椒,即:等质量的不同实验材料,在同一温度下DNA提取量不同(或从蒜黄提取的DNA量最多);②低温下DNA水解酶的活性减弱,导致DNA降解速度慢,从而DNA提取量相对较高。
(4)由于氯仿可使蛋白质变性沉淀,而DNA易溶解于其中,对DNA结构无影响,因此可将第三步获得的滤液与等量氯仿混合,静置一段时间,蛋白质变性沉淀,而DNA溶解于上清液中,从而可吸取上清液,从上清液中提取DNA。
答案:(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)DNA断裂(3)①等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的DNA量最多②低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液2.随着人类基因组计划的进展和多种生物基因组测序工作的完成,人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。
对蛋白质进行研究时,首先要获得纯度较高的蛋白质。
下图是某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中,准备从猪的血液中初步提取血红蛋白,设计的“血红蛋白提取、分离”流程图:实验准备配制缓冲液、血细胞悬液→样品处理洗涤、破碎、离心等→蛋白质粗分离透析→纯化、纯度鉴定凝胶色谱法、电泳等请回答下列有关问题:(1)样品处理中红细胞的洗涤要用________反复冲洗、离心。
向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH 7.0的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,破碎细胞的原理是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是________,若要尽快达到理想的透析效果,可以________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________(写出一种方法)。
(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的____________________等的差异,而产生不同迁移速度,实现各种分子的分离。
(4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳,观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。
由图可知携带者有________种血红蛋白,从分子遗传学的角度作出的解释是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
解析:(1)洗涤红细胞所用的溶液是生理盐水,根据渗透作用原理,将红细胞置于低渗溶液中,红细胞会吸水涨破,释放出血红蛋白。
(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是除去样品中的小分子杂质;可通过增加缓冲液的量或及时更换缓冲液等方法缩短透析时间,能尽快达到理想的透析效果。
(3)由于各种分子带电性质以及分子大小、形状等的差异,在电泳过程中会产生不同的迁移速度,从而实现各种分子的分离。
(4)根据图示可知,镰刀型细胞贫血症的携带者含有两种血红蛋白,原因是携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因,分别控制合成两种不同的蛋白质。
答案:(1)生理盐水渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水涨破)(2)除去小分子杂质增加缓冲液的量或及时更换缓冲液(3)带电性质以及分子大小、形状(4)2 携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因,可以控制合成两种不同的蛋白质3.(2011·高考海南卷)许多植物含有天然香料,如薄荷叶中含有薄荷油。
现用薄荷叶提取薄荷油。
回答问题:(1)薄荷油是挥发性物质,提取薄荷油时应选用________(鲜、干)薄荷叶作原料,其原因是________________________________________________________________________。
(2)用萃取法提取薄荷油时,采用的溶剂是________,原理是________________________________________________________________________。
(3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时,在油水混合物中加入氯化钠的作用是__________________________。
常用于分离油层和水层的器皿是________。
分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是________,除去固体硫酸钠的常用方法是________。
解析:本题考查有关提取薄荷油的知识。
(1)因为薄荷油是挥发性物质,所以应选取鲜薄荷叶作为提取材料。
(2)用萃取法提取薄荷油时,应选用有机溶剂,因为薄荷油易溶于有机溶剂。
(3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时,在油水混合物中加入氯化钠的作用是增加盐浓度,促进油水分层,常用于分离油层和水层的器皿是分液漏斗。
分离出的油层中加入无水硫酸钠吸掉水分后再用过滤法除去固体硫酸钠。
答案:(1)鲜薄荷叶中薄荷油易挥发(2)有机溶剂薄荷油易溶于有机溶剂(3)增加盐浓度,促进油水分层分液漏斗吸水过滤1.PCR利用了DNA热变性的原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。
对PCR过程中“温度的控制”的下列说法错误的是( )A.酶促反应需要高的温度,是为了确保模板是单链B.延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度C.DNA聚合酶不能热变性,要用耐高温的聚合酶D.DNA解旋酶不能热变性,为了确保模板是单链解析:选D。
PCR是一种体外DNA扩增技术。
DNA双链的解开不需要解旋酶,靠高温使其变性,双螺旋结构解体,双链分开;复性前,在耐高温的DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA,因此延伸的温度要大于复性温度,小于变性温度。
2.红细胞中含有大量血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。
下列对血红蛋白提取和分离的叙述,错误的是( ) A.血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定的顺序进行B.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液C.粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质D.可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定解析:选B。
蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定,提取和分离血红蛋白时,首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品处理;再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去,即样品纯化,纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后,配制成凝胶悬浮液,而不是用生理盐水;最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
3.下列植物芳香油的提取所选取的原料、植物芳香油的名称及适宜的提取方法不.正确的是( )A.玫瑰花、玫瑰精油、压榨法B.橘皮、橘皮精油、压榨法C.茉莉花、茉莉浸膏、萃取法D.薰衣草茎和叶、薰衣草油、蒸馏法解析:选A。
蒸馏法一般适用于提取玫瑰精油、薄荷油、薰衣草油等挥发性强的芳香油;压榨法一般适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料芳香油的提取;萃取法适用范围较广。
4.(原创题)下图为“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置,请回答问题。
(1)实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血,主要原因是鸡血细胞液中________含量较高。