MiR-145

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miR-145在乳腺癌中表达及意义

miR-145在乳腺癌中表达及意义
Abs r t tac :Pur pos To i v siae t e e pr s in o R一45 i e s a cno n t i c p t oo i i nfc n e. M e ho e n e tg t h x e so fmi 1 n bra tc r i ma a d iscl o a h lg e sg i a c ni i t ds
文 献 标 ) l 0 0 0 10 7 9 (0 9 o 一 0 9— 4
关键词 : 乳腺肿瘤 ; iN m R 15 原位杂 交 m R A; i . ; 4
中 图分 类 号 : 3 . ; 9 R 77 9 R3 4
Ex r s i n fm i 1 5 i br a tc r i m a a d t i n fc nc p e so o R- 4 n e s a c no n is sg i a e i
m R 15epes nadlm hnd e s s P < . 1 , N s g P< .5 n — b - vrxrsi P< . 5 , h r i 一 x r i n p oem t t i 4 so y a a s( 00 ) T M ae( 0 0 )adce B2oeepes n( 0 0 ) w e — t r o e
Co l son Th tr d e pr s in o i 1 5 mihtply a rl n t e p t g n ssa d pr ge so fb e tcac n ma,a d i ma nc u i s e a e e x e so fm R一 4 g a o e i h aho e e i n o s i n o r a r i o l r s n t y
临床 与 实验病理 学杂 志

miR-145通过靶向抑制SMAD3的表达抑制非小细胞肺癌细胞侵袭能力

miR-145通过靶向抑制SMAD3的表达抑制非小细胞肺癌细胞侵袭能力

•26何高燕,等miR-55通过靶向抑制SMAD3的表达抑制非小细胞肺癌细胞侵袭能力suppresson]J].Nut/tiox,2716,26(65):33-35.[16]LEE SUN EN,LIM JOO WEON,KIM HYEYOUNG.Achvatccproteis-1mediates docosabexaepoic acid-induced apoptosis oIhumao gastric ccoccs cells-J] ■Ann NY Acab Sci,O OC^,121:23-169.[26]ZHANG H,XU P,JIANG Y,et aU Gexomic,transc/ptomie,andepigexomic features diRerextiate gexes that are re/vvot Io muscu­lar polyyasaturated fat/acibs is the commoo carp[J].Froot Gex-et,2616,16:22-228,[21]GIROS ANNA,GRZYBOWSKI MIKE,SOHN VANESSA R.Reg-ec Prev Res,2099,2(8):732-742.[22]KATAN T,CABALLERO-SOLARES A,TAYLOR RG,et aUEffect oI plant-based diets with varyino ratios oI36to<n3fattyacibs ox growth pebormadce,tissue compositiox,Jatty acid bdsyy-thesis and lipib-related gexe expressiox is Atlantic salmoo(Sal-mo sa/r t[J]•Comp Biochem Physiol Pa/D Gexomicr Pre-teomicr,2616,2(39):299-394.[23]DUAN YH,LI FN,LI LL,et aU Regulatiox oI physio/gdal func-tiox by proportiop oI o-6/2-3polyyasaturated fatty acibs-J].Natural Product Research and Developmext,2214,2:926-631.ulatiox oI colorectal cancer cell apoptosis by the n-3polyyasatu-(编校:张西敏) rated fatty acibs doccnaPexaeqoic and eicosapextaedoic t J].Cano-miR-55通过靶向抑制SMAD5的表达抑制非小细胞肺癌细胞侵袭能力何高燕,罗晓斌,赵勇,罗丽miR-103inhibits the invasion of non-small cell lung cancer cells by targeting inhibi­tion of SMAD3expressiovHE Gaoyon,LUO Xiaobis,ZHAO Yony,LUO LlDepartment of'Respiratory and Critical Medicine,Suining City Central Hospital,Sichuan Suining626000,China.【Abstract】Objective:To investigate the effect of miR-55Braetiny the1011/1/0of SMAD3expression on theinvvsive abi/ty of non-small cell luny cancec cefs.Methods:The expression levels of miR-55and SMAD3in30oon-small cell luny caocer tissues and aPjacent tissues were deBcted by qRT-PCR and their000/1/00were ana-Uzed.The target geoe predichon site was used to predict the potenUal target geoe SMAD3of miR-145,which wasverified by the dual luciferase mpo/er gene assay.The tmnsfected cells of miR-55mimics,miR-55inhibitoc,siRNA SMAD3and related controls were Bansfected into oon-small cell luny cahcec A549cells by cell tmnsfechonexperiments j Trauswell assay was used to detect the iovvsive ability of A549cefs after tmnsfechon.The effect ofmiR-55on the expression of SMAD3protein was up-!011//0or dowo-1011//0in A549cells by Western b/t.Results:The results of qRT-PCR showed that miR-55was dowo-regumBq and SMAD3was highlo expressed inoon-small cell luuy cancec tissues,and the expression levels of both were hegakvelo00^//0.Taraet gene yredic-tion and vvhbation experiments showed that miR-55can specificaho bind to the3'-UTR of SMAD3,which was ataraet gene of miR-55.Western b/t analysis showed that tmnsfechon of miR-55mimics signi/cantlo decreasedthe expression of SMAD3proteih(P<0.001):and tmnsfechon of miR-55inhib/oc signi/cantlo iocmased the ep-pression of SMAD3protein(P<0.01).Tmoswef in vitro iovvsion assay showed that the transfected miR-145mimicgropp signi/cantlo reduced the iovvsive abi/ty of A549cells compared with the control groxa(P<0.001):and thetransfected miR-55inhibitor groxa signi/cantlo iocmased the invvsive abi/ty of A549cells(P<0.05).Comparedwith the control gropp,the iovvsive ability of khochdowh of SMAD3expressiny cells was weabened(P<0.001):The iovvsive abi/ty of co-transfected siRNA SMAD3and miR-55mimics A549cells was weaker than that ofkhochdowo of SMAD3alone(P<0.05).There was co significaot diderence in the iovvsive abi/ty of co-transfected【收稿日期】2629-93-92【基金项目】四川省卫生和计划生育委员会资助项目(编号:17pj937,5PJ499)【作者单位】遂宁市中心医院呼吸与危重症医学科,四川遂宁626009【作者简介】何高燕(192-),女,四川自贡人,硕士,医师,主要从事肺癌、肺纤维化及慢阻肺的诊疗工作。

miR—145通过下调靶基因ACVR1B促进急性川崎病的病理进程

miR—145通过下调靶基因ACVR1B促进急性川崎病的病理进程

miR—145通过下调靶基因ACVR1B促进急性川崎病的病理进程引言急性川崎病是一种自限性的小儿全身性血管炎性疾病,主要影响小动脉,是引起儿童梗死性心脏病的主要原因之一。

急性川崎病的发病机制至今尚不明确。

miRNAs是一类长度约21-23个碱基的小分子非编码RNA,不仅在调控器官发育与细胞增殖等基本生物学过程中发挥重要作用,还在多种疾病的发生发展中起关键作用。

本文将探讨miR-145通过下调靶基因ACVR1B促进急性川崎病的病理进程。

miR-145通过下调ACVR1B促进急性川崎病的病理进程研究发现,miR-145通过下调ACVR1B基因,可以促进血管内皮细胞的增殖和炎症反应。

在急性川崎病患者中,miR-145的高表达导致了ACVR1B的下调,从而加重了血管内皮细胞的增殖和炎症反应。

这种病理进程可能是导致急性川崎病患者发生心脏病变的重要因素之一。

研究人员使用miR-145合成物和ACVR1B激酶抑制剂,发现可以有效抑制血管内皮细胞的增殖和炎症反应,并且缓解了动物模型中的急性川崎病症状。

这些数据表明,miR-145通过下调ACVR1B可以促进急性川崎病的病理进程。

miR-145和ACVR1B作为急性川崎病的治疗靶点研究人员认为,miR-145和ACVR1B可能成为急性川崎病的治疗靶点。

针对miR-145的治疗策略可以通过抑制miR-145的表达,或者采用miR-145拮抗剂来实现。

而针对ACVR1B 的治疗策略可以通过使用ACVR1B的激酶抑制剂来实现。

这些治疗策略有望改善急性川崎病患者的症状,并且减轻心脏病变的发生。

结论miR-145通过下调靶基因ACVR1B促进急性川崎病的病理进程,可能成为急性川崎病发病机制的重要组成部分。

miR-145和ACVR1B有望成为急性川崎病的治疗靶点,为急性川崎病的治疗提供新的思路和方法。

急性川崎病的发病机制仍然复杂,miR-145和ACVR1B在急性川崎病中的确切作用还需要进一步的研究和探讨。

过表达miR145抑制结肠癌细胞HCT116增殖

过表达miR145抑制结肠癌细胞HCT116增殖
J R,Velasco—Gomalez C,et a1.Interferon-
Oxide inhibits the proliferation of Nitric
D J,Patterson
作用于黑色素瘤细胞A375时.对细胞的抑制具有 交互作用,同时证实了A375细胞确实在mRNA水 平上不表达p16基因。因此推测,转染进人细胞的
p16基因表达后提高了A375细胞对IFN.O/.一2b的
Gamma—Induced
murine renal cell carcinoma
cells[J].Int J
Biol
Sci,2012,8
(8):1109-1120. [7]Li
P,Du
Q,
Cao Z, growth
et
a1.Interferon—gamma induces and cell death through in human
表3细胞划痕实验中央区细胞数目(n=3)面:k
分组 pCMV空载体组 pCMV-miR一145组 细胞数
276-t-26 176士24

min。50 p,L 50
p,g/mL的PI于4℃避光孵育30 min。上机检测,实验均单独重复3次。 1.2.5细胞划痕实验检测过表达miR一145对结肠 癌细胞HCT.116迁移能力的影响将各干预组按 实验设计转染HCT.116细胞系,按l×105接种到 3.5 cm2培养皿中,待细胞生长至90%以上的单层 融合时,在每孔细胞中做长约2 cm的划痕。使用无 血清培养基洗去漂浮细胞,继续培养,显微镜下观 察划痕中央无细胞区域的细胞迁移情况。实验均单
塞旦医堂苤查垫!!生筮垫鲞笠!!塑
IFN的抗肿瘤机制还不是十分清楚,研究[s]证明 IFN能调动机体免疫,诱导细胞分化。抑制肿瘤细 胞的分裂增殖。此外,IFN可以通过IRF.1信号通 路来诱导肿瘤细胞发生自噬作用。从而抑制肿瘤细 胞增殖[7]。本研究结果显示,IFN.0【.2b单独或联合

miR-145过表达增强非小细胞肺癌细胞的放疗敏感性

miR-145过表达增强非小细胞肺癌细胞的放疗敏感性
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中 国老 年 学 杂 志 2018年 l0月 第 38卷
miR一145过表 达 增 强 非小 细 胞 肺 癌 细胞 的放 疗 敏感 性
杨 峥 房 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ娜 饶 石磊 (南 阳市 中心 医院肿瘤 放疗 科 ,河 南 南 阳 473009)
[摘 要] 目的 探讨 miR-145过表达 对非 小细胞 肺癌细 胞放疗 敏感性 的影 响。方法 RT—PCR检测非 小细 胞肺 癌细胞 株 A549、Calu-3、I-I460、SPC-A-1及支气管黏膜上皮细胞 16HBE中 miR·145的表达水平 。细胞转染 miR.145模 拟物(miR一145 mimics)、 阴性对 照(mimics contro1),RT-PCR检测转染效果 。噻唑蓝 (MTT)、流式细胞术分别检测 miR一145过表达 、放疗 和 miR-145过表达联 合放疗后 细胞 的增殖 、凋 亡能力 ,细胞克 隆实 验检测放疗敏感性 。Western印迹检测细胞 中活化 的含半胱氨 酸的天冬 氨酸蛋 白水解 酶 3(酶切 Caspase一3)、Wnt信号通 路 下游靶 基 因 (c—myc)、p一连 环蛋 白 (B-catenin)表 达水 平 。结果 非 小 细胞 肺癌 细胞 株 A549、 Calu一3、H460,SPC—A-1中 miR.145的表达水平均 明显低于支气管黏膜上皮 细胞 16HBE(P<0.05),且 Calu-3细 胞中 miR-145水平 最 低 ,后续选 用 Calu-3细胞为 研究对 象。miR一145 mimics有 效促进 Calu-3细胞 中 miR-145的表 达 ,而 mimics control没 有明显 作用 。 miR一145过表 达或者放疗均能够抑制 Calu-3细胞增殖 ,促进 Calu-3细胞凋亡 ,促进 细胞 中酶切 Caspase-3的表达 ,抑制细胞 中 c—myc、 B-catenin的表达 ,且 miR一145过表达联合放疗后 细胞存 活率最低 ,凋亡率 最高 ,酶切 Caspase-3表达 水平也 最高 ,c-myc、p·catenin表 达水平最低 。miR一145能够 增加细胞放疗敏感性 ,增敏 比为 1.363。结论 miR一145过表 达能够 抑制 非小细 胞肺癌 细胞增 殖 ,促进 非小细胞肺癌 细胞凋亡 ,增加 非小细胞肺癌细胞放疗敏感性 ,作用机制可 能与 Wnt信号通路有关 。

miR-143和miR-145在膀胱癌中的表达及意义

miR-143和miR-145在膀胱癌中的表达及意义

谱芯 片 、 ote l 、 e1 ieP R法 检测 mi一4 、 R 1 5 膀胱癌 中的表达 , 析 mi一4 、 R 15的表达与 膀胱癌 临 N r nbo R a t C h t .m R 13 mi 一4 在 分 R 13 mi.4
床分期 、 的关 系 。【 分级 结果 】 iN mR A表达谱芯 片 、ohn l 、 e1ie C N r e o R a t R法均提示 mR13mR 15 t bt . P m i一 、i一 在膀胱癌 中较癌旁 4 4
cn oa 0 g a r f l dr acr 【 e os mR Amc a a,N r e l , e1ieP R wr ue e c t l i pt l i f t e o b de c e. M t d】 iN ior y ohnb t r .m C e sdt dt th ic h o c e u s a n h r r t o a t e o e e epe i i- 3 n i一 5 n l dr acrn e s ii i iclt e ad r e wr aa zd 【 e l】 xrso omR 1 dmR 1 a ecnead hia o ao wt cn as gs n a s e nl e. R s t sn f 4a 4 ib d t r s c tn h li a g d e y us
A src : O jc v 】 T net aeteepes n o mi一4 n i 一4 nba drcne n e s cao i b tat 【 bet e i oivsgt h xrsi f R 13 ad m R 15i l e acra dt i as i i wt i o d h r o tn h
mi . 3 mi .4 在膀胱癌中的表达及意义 R 1 和 R 15 4

miR-145在结直肠癌中的表达及临床病理意义

miR-145在结直肠癌中的表达及临床病理意义

1 2 ] 崔恒 .宫颈 上皮内瘤 变的诊 断[ J ] .中华妇产科临床杂志 , 2 0 0 3,
4 ( 1 ) : 1 2
[ 3 ] 樊庆泊 , T a y S u n K u i e , 沈 铿 .子 宫颈 环 形 电切 术 在 子 宫 颈上 皮 内
瘤变治疗 中的价值[ J ] .中华妇产科杂 志, 2 0 0 1 , 3 6 ( 5) : 2 7 1 - 2 7 4 . [ 4 ] 郎景和, 张晓东 .妇产科 临床解剖学 [ M] .济南 : 山东科学技 术
W A N G C h a o - i f e .W A N G
W e i , Z H O U Y u n .D e p a r t m e n t o f O n t o l o g y , t t e n a n P r o v i n c i a l P e o p l e ’ S H o s p i t a l , Z h e n g z h o u 4 5 0 0 0 3 , C h i n a
【 A b s t r a c t 】 O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e m i R . 1 4 5 e x p r e s s i o n a n d a n a l y z e i t s r e l a t i o n s h i p w i t h
后住 院时 间缩短 , 术后并 发症 的发生 率 降低 。
参 考 文 献
[ 1 ] 钱德英 .宫颈锥切术的适应证 及并发症 『 J ] .中国实用妇科与产
( 本文编辑 : 傅利霞 )
m i R . 1 4 5在 结 直肠 癌 中 的表 达 及 临床 病 理 意 义

miR-145与妇科恶性肿瘤关系的研究进展

miR-145与妇科恶性肿瘤关系的研究进展
来抑制肿瘤细胞 的生长与血管 生成 。Z h o n g 等| 】 ] 研究 肺 腺癌 患者 中 3种 不 同 mi R N A 的差 异表 达 , 并对 3
种 m i R N A 的信 号 途 径 进 行 定量 检测 。 结 果 显 示 ,
mi R N A一 1 4 5对肿 瘤调 控 主要 与 R A S / E R K和 P I 3 K S /
1 mi R- 1 4 5结构 及 生 物 学 特 性
m i R一 1 4 5定 位 于染 色 体 5 q 3 2 , 长度为 4 . 0 8 k b ,
序 列高度 保守 的非 编码 小分 子 R N A。m i R 一 1 4 5是 一
A K T信号 途径 有关 。表 明 , m i R一 1 4 5可 通过 调控 一 些信 号通 道来影 响肿 瘤细 胞 的生长 、 分化 、 侵袭 和转
细胞 模 型 中 . mi R N A一 1 4 3与 mi R N A一 1 4 5通 过 抑 制 E R K 5 / c — My c和 p 6 8 / 1 : I 7 2 / [ 3 一 c a t e n i n信 号 通 路来 抑 制
肿瘤 细胞 的生 长[ 坫 ] 。X u等 研 究 显示 , 在结 肠癌 患 者 中. mi R 一 1 4 5通 过 靶 向 M T O R / p 7 0 S 6 K1信号 途径
钟 丽 ( 综述 ) , 安 云婷 ( 审校) ( 1 . 南昌大 学研 究生 院 医学部 2 0 1 0级 ;2 . 江 西省妇 幼保健 院肿 瘤科 , 南昌 3 3 0 0 0 6 )
关 键词 : m i R N A; m i R 一 1 4 5 ; 卵巢癌; 子宫颈癌; 子宫内膜癌

男性不育症患者精浆中miR-145的表达水平及其临床意义

男性不育症患者精浆中miR-145的表达水平及其临床意义

男性不育症患者精浆中miR-145的表达水平及其临床意义林 彤,廖贤平(广州东仁医院生殖医学科,广州 510440)摘 要:目的 探讨男性不育症患者精浆中miR-145的表达水平及其临床意义。

方法 招募2017年1月~ 2018年9月男性不育症患者130例和同期体检正常的生育男性50例为正常对照组。

采用实时荧光定量PCR 检测精浆中miR-145的表达水平,精液常规参数采用WLJY-9000伟力彩色精子检测系统进行分析。

应用ROC 曲线分析miR-145对男性不育症的诊断价值,采用Pearson 相关分析精浆中miR-145表达水平与精液参数的相关性。

结果 男性不育症组精浆中miR-145表达水平明显高于对照组(3.92±0.86 vs 1.16±0.35),而男性不育症组精子浓度(70.24±28.60 vs 112.50±46.35)×106/mL 、精子存活率(38.40±7.60 vs 73.84±5.82)%、前向运动精子百分率(17.52±9.73 vs 46.20±5.30)%及正常精子形态百分率(2.60±1.42 vs 9.25±1.70)%明显低于对照组,差异均有统计学意义(t =4.852~11.238,均P <0.01)。

ROC 曲线分析显示,精浆中miR-145表达水平诊断男性不育症的曲线下面积(AUC )为0.864(95%CI :0.807~0.925),其最佳诊断截断值为2.15,敏感度和特异度分别为92.8%和75.0%。

相关分析显示,男性不育症患者精浆中miR-145表达水平与精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率均呈正相关(r =0.427,0.604,0.538,均P <0.01)。

结论 精浆中miR-145表达水平在男性不育症患者中明显上调,且精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率呈正相关,有望作为男性不育症的辅助诊断指标。

miR145抑制人肝内胆管细胞癌细胞增殖

miR145抑制人肝内胆管细胞癌细胞增殖
关键词: miR ̄145ꎻ新式激酶家族 1ꎻ肝内胆管细胞癌ꎻ蛋白激酶 B
中图分类号:R34 文献标志码:A
miR ̄145 suppresses proliferation of human intrahepatic cholangiocarcinoma cells
XIONG Xin ̄kuiꎬ DU Ye ̄muꎬ LIU Yu ̄tingꎬ GU Dian ̄hua∗
( Department of Hepatopancreatobiliary Surgeryꎬ the Affiliated Huai������an First People������s Hospital of Nanjing Medical Universityꎬ Huai������an 223300ꎬ China)
熊新魁ꎬ 杜也牧ꎬ 刘雨亭ꎬ 顾殿华∗
( 南京医科大学附属淮安第一医院 肝胆胰外科ꎬ 江苏 淮安 223300)
摘要:目的 研究 miR ̄145 调节人肝内胆管细胞癌( ICC) 细胞增殖的机制ꎮ 方法 收集标本 ICC 癌组织和癌旁胆管
组织ꎬ共 38 对ꎻ2 种 ICC 细胞系:HuCCT ̄1 和 RBEꎻ对其进行 miR ̄145 及 NUAK1 的表达调控ꎮ 通过 RT ̄qPCR 检测 miR ̄145 和新式激酶家族 1( NUAK1) 的表达及两者相关性ꎻ检测细胞周期观察细胞增殖变化ꎻ荧光素酶报告基因实 验确认 miR ̄145 的靶基因ꎻWestern blot 观察 AKT 通路蛋白水平变化ꎮ 结果 miR ̄145 在癌组织的表达明显低于癌 旁组织( P<0������ 05) ꎬNUAK1 在癌组织的表达明显高于癌旁组织( P<0������ 05) ꎬ两者具有相关性( P<0������ 05) ꎮ miR ̄145过 表达组和 NUAK1 干扰组细胞计数均明显少于对照组( P<0������ 05) ꎻHuCCT ̄1 细胞系转染 miR ̄145 mimics 后ꎬG1 期的 细胞数明显增加( P<0������ 05) ꎻ野生型的荧光信号明显被抑制( P<0������ 05) ꎻ过表达 miR ̄145 或抑制 NUAK1 后ꎬpAKT 和 pFOXO1 表达明显下降( P<0������ 05) ꎮ 结论 miR ̄145 可能通过抑制 NUAK1 及其下游通路抑制 ICC 细胞增殖ꎬ它有可 能为 ICC 临床诊治提供新的靶点和思路ꎮ

急性冠脉综合征患者外周血单核细胞miR—145与超敏C反应蛋白的相关性研究

急性冠脉综合征患者外周血单核细胞miR—145与超敏C反应蛋白的相关性研究

急性冠脉综合征患者外周血单核细胞miR—145与超敏C反应蛋白的相关性研究目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血单核细胞(PBMCs)miR-145与超敏C反应蛋白的相关性。

方法选取急性冠脉综合征患者90例,其中不稳定型心绞痛(UAP)30例(A组),ST段抬高型心肌梗死(STEMl)30例(B组)和非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMl)30例(C组)。

另外30例以心前区不适住院,既往无高血压、糖尿病和冠心病史,经心电图、心肌酶学和冠状动脉造影排除冠心病者作为对照组(D组)。

采用Rcal-time PCR法检测PBMCs中miR-145表达水平,使用U6作为内参对照。

采用ELISA法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。

结果A组、B组、C组分别与D组比较,ACS患者外周血单核细胞miR-145表达水平明显降低,均有统计学意义(P<0.05);A组、B组、C组分别与D组比较,PBMCs培养基上清中细胞因子hs-CRP水平明显升高,均有统计学意义(P <0.05);Pcarson相关分析结果显示,ACS患者外周血单核细胞miR-145表达与hs-CRP水平呈负相关性(r=-0.84,P<0.05)。

结论ACS患者外周血单核细胞miR-145与超敏C反应蛋白之间呈负相关性,可能成为ACS新型标志物。

标签:急性冠脉综合征;外周血单核细胞miR-145;超敏C反应蛋白急性冠脉综合征(Axute coronary svndrom,ACS)作为常见的心脏急症,是心血管疾病中致死致残的主要原因,包括不稳定心绞痛(Unstable Angina Pectoris,UAP)和急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction,AMI),而AMI 包括非ST段抬高型心肌梗死(Non-ST-Elevation MvocaHlial Infarction,NSTEMI)、ST段抬高型心肌梗死(ST-Elevation Myocardial Infarction,SIEMI)。

RSV下呼吸道感染肺炎患儿miR-145水平与细胞免疫指标及Th1

RSV下呼吸道感染肺炎患儿miR-145水平与细胞免疫指标及Th1
关键词 呼吸道合胞病毒呼吸道感染肺炎.-@I>&' 水平细胞免疫指标MN>OMN! 平衡 中图分类号:@&&P<>>Q# 文献标识码:G 文章编号:>PT&I>>!RZ!"!#["'I"P"PI"& >"<#RPRO>PT&I>>!R<!"!#<"'<"!"
呼吸道合胞病毒 @+A*-,106,7 A7/970-12 B-,CA @D= 在 世 界 各 地 都 很 普 遍 是 一 种 引 起 病 毒 性 肺 炎的常见病原体 容易导致婴幼儿及儿童毛细支 气管炎和肺炎E$F关于 @D= 下呼吸道感染及其发病 机制尚不清楚E!F 研究显示@D= 引起的下呼吸道 感染肺炎对患儿生命健康有严重威胁 其发病机 制除了与病原体直接相关外 还与机体自身的免 疫功能密切相关E#F 表达异常的微小 @?G.-9,6@ ?G.-@?G可能参与和影响 @D= 引起的下呼吸 道 感 染 肺 炎 发 生 发 展 其 中 微 小 @?GH$&'.-@I >&'在免疫炎症性疾病中有意义重大E&F 以 JK# JK&JKL 为代表 M 淋巴细胞免疫靶向治疗对 @D= 引起的下呼吸道感染肺炎治疗具有一定的潜在价 值 以辅助性 M 淋巴细胞 MN$MN! 细胞失衡为代 表的免疫失衡 造成机体全身炎症细胞因子的秩 序紊乱 在 @D= 引起的下呼吸道感染肺炎产生的 过程中有着极为重要作用E'F 有研究发现 .-@I$&'
11.387

敲减miR-145增强骨髓间充质干细胞对大鼠盆底功能障碍的修复作用

敲减miR-145增强骨髓间充质干细胞对大鼠盆底功能障碍的修复作用

收稿日期:2021G07G20基金项目:广东省至善妇儿健康关爱基金会关爱女性健康基金项目(201801034)作者简介:张小燕(1991 ),女,本科,住院医师,主要从事妇科肿瘤和盆底功能方面的研究.通信作者:陈慧,主任医师,E Gm a i l :c h e n h u i 175@163.c o m .敲减m i R G145增强骨髓间充质干细胞对大鼠盆底功能障碍的修复作用张小燕a ,陈㊀慧a ,陈㊀婧a ,耿月华b(中国人民解放军联勤保障部队第九〇九医院a .妇产科;b .病理科,福建漳州363000)摘要:目的㊀探讨敲减m i R G145对骨髓间充质干细胞(B M S C )修复大鼠盆底功能障碍(P F D )的影响.方法㊀分离大鼠B M S C ,并鉴定;将m i R GN C 或m i R G145Gs h R N A 慢病毒载体转入B M S C 后,采用C C K G8法检测细胞活力.将32只大鼠按照随机对照表法分为对照组(C o n )㊁P F D 组㊁m i R GN C 治疗组(m i R GN C )和m i R G145Gs h R N A 治疗组(m i R G145Gs h R N A ).通过阴道扩张法建立P F D 大鼠模型,m i R GN C 和m i R G145Gs h R N A 组大鼠分别给予注射已转染m i R GN C 和m i R G145Gs h R N A 慢病毒载体的B M S C ,14d 后,进行尿流动力学(膀胱容积㊁排尿时膀胱内压㊁漏尿点压)测试,并用w e s t e r nb l o t 法检测各组大鼠盘底支持组织中Ⅰ型胶原(C o l l a g e n Ⅰ)和弹性蛋白(E l a s t i n )的表达水平.结果㊀成功分离大鼠B M S C ;与m i R GN C 组比较,m i R G145Gs h R N A 组B M S C 的细胞活力明显增强(P <0.001).与C o n 组比较,P F D 组大鼠膀胱容积㊁排尿时膀胱内压㊁漏尿点压以及盘底支持组织中C o l l a g e n Ⅰ和E l a s t i n 的表达水平均降低(均P <0.01);与P F D 组比较,m i R GN C 组和m i R G145Gs h R N A 组大鼠中上述指标均增加(均P <0.05),且m i R G145Gs h R N A 组优于m i R GN C 组(均P <0.05).结论㊀敲减m i R G145能增强B M S C 对大鼠盆底功能障碍的修复作用.关键词:盆底功能障碍;骨髓间充质干细胞;弹性蛋白;胶原蛋白;m i R G145;动物,实验;大鼠中图分类号:R G332;R 711.71㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:2095G4727(2022)01-0032-06D O I :10.13764/j.c n k i .n c d m.2022.01.006K n o c k d o w no fm i R G145E n h a n c e sR e p a i rE f f e c t o fB o n eM a r r o w M e s e n c h y m a l S t e mC e l l s o nP e l v i cF l o o rD ys f u n c t i o n i nR a t s Z H A N GX i a o Gy a n a ,C H E N H u i a ,C H E NJ i n g a ,G E N GY u e Gh u a b(a .D e p a r t m e n t o f G y n a e c o l o g y a n dO b s t e t r i c s ;b .D e p a r t m e n t o f P a t h o l o g y ,t h e 909t hH o s p i t a l o f t h eC h i n e s eP e o p l e sL i b e r a t i o nA r m y J o i n tL o g i s t i cS u p po r tF o r c e ,Z h a n gz h o u 363000,C h i n a )A B S T R A C T :O b je c t i v e ㊀T o i n v e s t i g a t e t h eef f e c to fm i R G145k n o c k d o w no nt h e r e p a i ro f p e l v i c f l o o r d y s f u n c t i o n (P F D )w i t hb o n em a r r o w m e s e n c h y m a l s t e mc e l l s (B M S C s )i nr a t s .M e t h o d s ㊀R a t B M S C sw e r e i s o l a t e da n d i d e n t i f i e d .L e n t i v i r a l v e c t o r s c a r r y i ng m i R GN Co rm i R G145Gsh R N A w e r e t r a n s f e c t e di n t oB M S C s ,a n d c e l l v i a b i l i t y w a s d e t e c t e d b y C C K G8a s s a y .T h i r t yGt w o r a t sw e r e r a n d o m l y d i v i d e d i n t o c o n t r o l (C o n )g r o u p ,P F D g r o u p ,m i R GN Ct r e a t m e n t g r o u p ,a n d m i R G145Gs h R N At r e a t m e n t g r o u p .T h e r a tm o d e l o f P F Dw a s e s t a b l i s h e db y v a gi n a l d i l a t a t i o nm e t h o d .R a t s i nm i R GN Ca n dm i R G145Gs h R N A g r o u p sw e r e i n je c t e dw i t hB M S C s t r a n sf e c t e dw i t hm i R GN Ca n d m i R G145Gs h R N Al e n t i v i r a lv e c t o r s ,r e s p e c t i v e l y .A f t e r14d a y s ,u r o d y n a m i ct e s tw a s p e r f o r m e d .W e s t e r nb l o tw a s u s e d t od e t e c t t h e e x p r e s s i o no f t y p eⅠc o l l a ge na n de l a s t i n i n t h e p e l v i cf l o o r s u p p o r t i ng t i s s u e s .R e s u l t s ㊀R a t B M S C s w e r ei s o l a t e d s u c c e s s f u l l y .C o m pa r e d w i t h m i R GN C 23南昌大学学报(医学版)2022年第62卷第1期㊀J o u r n a l o fN a n c h a n g U n i v e r s i t y(M e d i c a l S c i e n c e s )2022,V o l .62N o .1 Copyright©博看网 . All Rights Reserved.g r o u p,t h ec e l lv i a b i l i t y i n c r e a s e di n m i RG145Gs h R N A g r o u p(P<0.001).C o m p a r e d w i t h C o n g r o u p,b l a d d e rv o l u m e,b l a d d e r p r e s s u r ed u r i n g u r i n a t i o n,l e a k p o i n t p r e s s u r ea n de x p r e s s i o no f t y p eⅠc o l l a g e na n de l a s t i n i nt h e p e l v i c f l o o r s u p p o r t i n g t i s s u e sd e c r e a s e d i nP F D g r o u p(P<0.01).H o w e v e r,t h e s e i n d e x e s i n c r e a s e d i n m i RGN Ca n d m i RG145Gs h R N A g r o u p sw h e nc o m p a r e d t oP F D g r o u p(P<0.05).F u r t h e r m o r e,t h e e f f i c a c y i nm i RG145Gs h R N A g r o u p w a s s u p e r i o r t o t h a t i nm i RGN C g r o u p(P<0.05).C o n c l u s i o n㊀K n o c k d o w no fm i RG145c a ne n h a n c e t h e r e p a i r e f f e c t o f B M S C s o n p e l v i c f l o o r d y s f u n c t i o n i n r a t s.K E Y W O R D S:p e l v i c f l o o r d y s f u n c t i o n;b o n em a r r o w m e s e n c h y m a l s t e mc e l l s;e l a s t i n;c o l l a g e n;m i RG145;a n i m a l s,l a b o r a t o r y;r a t s㊀㊀盆底功能障碍性疾病(p e l v i cf l o o rd y s f u n cGt i o n,P F D)是一种严重影响女性生活质量的常见病及多发病,尤其常见于中老年女性,主要表现为压力性尿失禁(s t r e s s u r i n a r y i n c o n t iGn e n c e,S U I)和盆底器官脱垂(p e l v i co r g a n p r o l a p s e,P O P),给患者带来巨大的精神压力和经济负担,已引起盆底医学研究者的广泛关注.随着社会进入老龄化时期,P F D 患者越来越多,S U I及P O P分别影响着15%~17%和3%~6%的成年女性[1].P F D的发生与盆底支持组织结构的破坏或缺陷有关[2G3].盆底支持组织主要是含有细胞外基质(E C M)的成纤维细胞产生的胶原蛋白及弹性蛋白等纤维蛋白,而这些蛋白的缺乏可能导致P F D[4G5].目前临床上对于症状严重的P F D患者主要以手术恢复其解剖学位置为主,但术后并发症多,复发率高[6].因此,有必要开发一种新的盆底支持结构用于P F D的治疗,实现其在分子水平及组织生理功能上的重建,并维持盆底支持结构的微环境平衡.干细胞具有多向分化的能力,能够参与组织修复,有可能分化为多种细胞类型的支持组织,因此在P F D治疗中具有广阔的应用前景.骨髓间充质干细胞(b o n e m e s e n c h y m as t e m c e l l,B M S C)是最具特征性的干细胞来源之一,具有很强的分化能力,并分泌有利于组织修复的生物活性因子;同时B M S C 也是最早应用于盆底功能修复的间充质干细胞类型[7].在S U I动物模型中,注射B M S C能修复受损的外尿道括约肌,并显著减轻S U I症状[8G9].此外, m i R N A在B M S C分化过程中发挥着不可或缺的作用.有研究[10]表明敲减m i RG145表达可增强皮肤成纤维细胞重编程及诱导其分化为多能干细胞的能力.基于B M S C的细胞治疗,也是盆底医学领域的研究热点,B M S C是一种很有临床应用前景的治疗策略,有可能成为彻底改变P O P和S U I的治疗方法[11G13].因此,本研究旨在观察干预B M S C中m i RG145的表达是否能协同增强B M S C对P F D的骨盆支持组织缺损的修复作用.1㊀材料与方法1.1㊀材料1.1.1㊀实验动物35只S P F级6月龄雌性S D大鼠购自上海杰思捷实验动物有限公司,生产许可证号:S C X K(沪)2018G0004;本研究的所有动物获得中国人民解放军联勤保障部队第九〇九医院动物伦理委员会批准,且所有实验步骤均符合动物实验 3R 指南.1.1.2㊀主要试剂与仪器I M D M培养基(美国H y C l o n e公司);胎牛血清(f e t a l b o v i n es e r u m,F B S)(美国G i b c o公司);1%链霉素/青霉素双抗溶液(美国S i g m aGA l d r i c h公司);曲拉通(T r i t o n XG100)试剂和牛血清白蛋白(b o v i n e s e r u ma l b u m i n,B S A)(北京索莱宝科技有限公司);大鼠B M S C的标记抗体A l e x aF l u o r647GC D29㊁F I T CGC D44㊁F I T CGC D45㊁P EGC D73和A P CGC D90抗体(美国B D公司);Ⅰ型胶原(C o l l a g e nⅠ) (英国A b c a m公司);弹性蛋白(E l a s t i n)(美国S a nGt aC r u z公司);S l o w F a d eG o l d抗淬灭荧光封片剂(美国L i f eT e c h n o l o g i e s公司);m i RG145Gs h R N A慢病毒载体和m i RGN C慢病毒对照载体由汉恒生物科技(上海)有限公司合成;R N e a s y P l u s M i n i试剂盒和Q u a n t i T e c t逆转录试剂盒(美国Q i a g e n公司);R I P A裂解液㊁D A P I染色剂㊁B C A蛋白测定试剂盒和βGa c t i n抗体(上海碧云天生物科技有限公司);C C KG8细胞活力检测试剂盒㊁E C L发光底物试剂盒和H R P标记的二抗(万类生物科技(上海)有限公司).I X81显微镜(日本O l y m p u s公司);C y tGo F L E XS流式细胞仪(德国B e c k m a n公司);压力传感器(美国G r a s s I n s t r u m e n t s公司);E L X800酶标仪购自美国B i o T e k公司;注射泵(美国K DS c iGe n t i f i公司);电泳电转系统(美国B i oGR a d公司).33张小燕等:敲减m i RG145增强骨髓间充质干细胞对大鼠盆底功能障碍的修复作用Copyright©博看网 . All Rights Reserved.1.2㊀方法1.2.1㊀大鼠原代B M S C的分离和培养从3只6个月龄雌性S D大鼠股骨骨髓中分离B M S C,培养于含有20%F B S和1%链霉素/青霉素的I M D M培养基中,每3d换液1次.待细胞融合至80%时,用0.25%胰蛋白酶消化收集细胞,并重新以5ˑ105个 m L-1密度接种到培养瓶中,标记为第1代,按照此方法传代,取纯化的第3代B M S C 用于鉴定.1.2.2㊀免疫荧光法和流式细胞术鉴定B M S C 免疫荧光法:第3代B M S C以每孔2500个细胞的密度种于24孔室玻片上,细胞贴壁后,用4%多聚甲醛固定过夜,P B S冲洗,用10%B S A封闭45m i n,再用0.1%T r i t o nXG100透过5m i n,4ħ下分别孵育A l e x aF l u o r647GC D29(1 200)和F I T CGC D44(1 100)抗体过夜,P B S冲洗,D A P I染核5m i n,用S l o w F a d eG o l d防淬灭剂封片,并用荧光显微镜观察.流式细胞术:将第3代B M S C制成1ˑ105个 m L-1密度的细胞悬液,用10%B S A封闭30m i n,然后分别避光孵育1 200稀释比例的表面抗体F I T CGC D44㊁F I T CGC D45㊁P EGC D73和A P CGC D90抗体,并设立同种型对照,流式细胞仪检测.1.2.3㊀m i RG145Gs h R N A慢病毒转染B M S C取第3代B M S C以每孔1ˑ105个接种到24孔板中,次日用2m L含6μg m L-1聚酰胺的新鲜I M D M培养基替换原培养基,分别加入20病毒感染复数(m u l t i p l eo f i n f e c t i o n,MO I)m i RG145Gs h RGN A慢病毒载体或对照m i RGN C慢病毒载体培养24h,然后更换新培养基继续培养48h.收集细胞,用R N e a s y P l u s M i n i试剂盒提取细胞的总R N A,然后逆转为c D N A,并用R TGq P C R法检测转染m i RGN C或m i RG145Gs h R N A的B M S C中m i RG145的表达水平,用来评估转染效率.1.2.4㊀C C KG8法检测细胞活力分别取转染m i RGN C或m i RG145Gs h R N A的B M S C以每孔1ˑ104个接种到96孔板中,分别培养0㊁3㊁5和7d.加入C C KG8试剂在37ħ条件下孵育2h,用酶标仪测量450n m波长处吸光度值.1.2.5㊀大鼠P F D模型的建立将剩余32只大鼠按照随机对照表法分为4组:对照组(C o n)㊁P F D模型组(P F D)㊁m i RGN C治疗组(m i RGN C)和m i RG145Gs h R N A治疗组(m i RG145Gs h R N A),每组8只.按照文献[14]方法,用阴道扩张方式构建P F D模型:将18F导管插入大鼠阴道,并用3G0丝线固定,然后向连接压力传感器的F o l e y 球囊进行注水3.0m L,并维持对盆底支持组织产生持续0.15k g压力状态4h,放水并与压力传感器一并取出.C o n组只插导管不注水.m i RGN C组和m i RG145Gs h R N A组大鼠在取出压力传感器后,分别通过尾静脉注射1ˑ106个已转染m i RGN C和m i RG145Gs h R N A慢病毒载体的B M S C.于阴道扩张14d后,分别测定膀胱内压和漏尿点压.1.2.6㊀膀胱内压测定腹腔注射1.2g k g-1乌拉坦麻醉各组大鼠,然后将P EG50膀胱导管插入大鼠膀胱,导管经三通装置连接到一个微量注射泵和一个压力传感器.用手排空膀胱,记录膀胱基线压力值;然后通过导管以5m L h-1的速度向每个膀胱输注37ħ的生理盐水,充满膀胱直到出现自发性排尿现象,在此过程中记录膀胱自发性收缩压力值㊁最高收缩压力值和自发性收缩时的排尿容积.每只大鼠重复进行3次试验.排尿时膀胱内压=最高收缩压力平均值-膀胱基线压力平均值.1.2.7㊀漏尿点压测定腹腔注射1.2g k g-1乌拉坦麻醉各组大鼠,然后将P EG50膀胱导管插入大鼠膀胱,导管经三通装置连接到一个微量注射泵和一个压力传感器.用手排空膀胱,并记录此时的膀胱基线压力值;然后通过导管以5m L h-1的速度向每个膀胱输注37ħ的生理盐水,当达到0.4m L(约膀胱容量的一半)时,用手缓慢按压大鼠下腹部以增加膀胱内压力,直到漏尿现象,迅速松开手,记录无张力收缩时漏尿的峰压力值.每只大鼠重复进行3次试验.漏尿点压=无张力收缩时漏尿的峰压力平均值-膀胱基线压力平均值.1.2.8㊀w e s t e r nb l o t法检测目的蛋白表达麻醉大鼠后,断头处死,解剖并收集大鼠盆底支持组织.用R I P A提取组织样品中总蛋白.用B C A蛋白测定试剂盒对样品的总蛋白定量后,将各样品等量蛋白变性后,经S D SGP A G E分离并转移到硝化纤维素膜上.用5%脱脂乳封闭膜后,4ħ下分别孵育C o l l a g e nⅠ(1 1000)㊁E l a s t i n(1 2000)和βGa c t i n(1 8000)过夜,用T B S T洗膜后,室温孵育H R P标记的二抗1h,再次洗膜后,用E C L发光底物试剂盒使得条带显像.用I m a g e J测量蛋白的相对表达量.1.2.9㊀统计学方法使用S P S S19.0软件进行数据处理.计量资料43南昌大学学报(医学版)2022年2月,第62卷第1期 Copyright©博看网 . All Rights Reserved.以均值ʃ标准差表示,2组间比较采用独立样本t 检验,多组间比较采用单因素方差分析.以P <0.05为差异有统计学意义.2㊀结果2.1㊀B M S C 的鉴定免疫荧光法显示,第3代B M S C 中,B M S C 的特异表面标志物C D 29和C D 44的表达均呈阳性(图1A ).流式细胞术分析显示,第3代B M S C 中间充质干细胞特异性标志物C D 44㊁C D 73和C D 90的表达均呈阳性,而造血干细胞特异性标志物C D 45的表达呈阴性(图1B ).表明成功分离获得B M S C .AB㊀㊀A :B M S C 细胞中C D 29和C D 44的表达(免疫荧光染色,ˑ400);B :B M S C 细胞表面C D 73㊁C D 44㊁C D 90和C D 45的表达(流式细胞术).图1㊀B M S C 的鉴定2.2㊀B M S C 中m i R G145的表达及其活力R T Gq P C R 结果显示,与m i R GN C 组比较,m i R G145Gs h R N A 组B M S C 中m i R G145的表达降低(P <0.001).见图2.C C K G8结果显示,与m i R GN C 组比较,m i R G145Gs h R N A 组B M S C 的细胞活力明显增加(P <0.01或P <0.001).见图3.miR-NC miR-145-shRNA15010050m i R -145相对表达水平/%miR-NCmiR-145-shRNA53072.52.01.51.00.50O D 450值时间/d∗P <0.001与m i R GN C 组比较;n =4.图2㊀B M S C 细胞中m i R G145的表达(R T GqP C R 法)∗P <0.01,∗∗P <0.001与m i R GN C 组比较;n =4.图3㊀B M S C 的细胞活力(C C K G8法)㊀㊀2.3㊀各组大鼠的尿流动力学比较与C o n 组相比,P F D 组大鼠的膀胱容积(图4A )㊁排尿时膀胱内压(图4B )以及漏尿点压(图4C )均显著降低(P <0.01或P <0.001),表明大鼠P F D造模成功.与P F D 组比较,注射转染m i R GN C 的B M S C 可在一定程度上增高P F D 大鼠的膀胱容积(图4A )㊁排尿时膀胱内压(图4B )以及漏尿点压(图4C )(P <0.05或P <0.01).与m i R GN C 组比较,m i R G145Gs h R N A 组大鼠的膀胱容积(图4A )㊁排尿时膀胱内压(图4B )以及漏尿点压(图4C )均升高(P <0.05或P <0.01).53张小燕等:敲减m i R G145增强骨髓间充质干细胞对大鼠盆底功能障碍的修复作用Copyright©博看网 . All Rights Reserved.CBA ㊀㊀A :膀胱容积;B :膀胱内压;C :漏尿点压.∗P <0.05,∗∗P <0.01,∗∗∗P <0.001;n =8.图4㊀各组大鼠尿流动力学指标的比较2.4㊀各组大鼠盆底支持组织中E l a s t i n 和C o l l a ge n Ⅰ的蛋白表达比较w e s t e r nb l o t 结果显示,与C o n 组比较,P F D 组大鼠盆底支持组织中E l a s t i n 和C o l l a ge n Ⅰ表达水平显著降低(均P <0.001);与P F D 组大鼠比较,m i R GN C 组和m i R G145Gs h R N A 组大鼠盆底支持组织中E l a s t i n 和C o l l a g e nⅠ表达水平均显著增加(P <0.05或P <0.001),其中m i R G145Gs h R N A 组大鼠盆底支持组织中E l a s t i n 和C o l l a g e n Ⅰ表达水平明显高于m i R GN C 组(P <0.05).见图5.CBA㊀㊀A :C o l l a g e n Ⅰ和E l a s t i n 蛋白印迹图;B :C o l l a g e n Ⅰ的相对表达;C :E l a s t i n 的相对表达.∗P <0.05,∗∗P <0.001;n =8.图5㊀各组大鼠盆底支持组织中C o l l a ge n Ⅰ和E l a s t i n 的表达3㊀讨论㊀㊀目前,盆底支持组织缺陷被认为是导致P F D 病理生理学发展的重要原因之一[2G5].E l a s t i n 是多种支持组织(如韧带和主动脉)E C M 中弹性纤维的主要成分,其能在没有能量的情况下促进组织的伸展和恢复到原来的状态[15].胶原蛋白是E C M 中另外一种重要的结构蛋白,其在维持盆底支持组织的弹性和韧性中起重要作用[16].弹性蛋白纤维降解及胶原蛋白流失可导致韧带㊁筋膜等盆底支持组织的张力降低和支持组织结构的松弛,并最终导致P F D 的发生[4G5].因此,恢复P F D 盆底支持组织中E l a s t i n和胶原蛋白的含量可增加盆底支持组织的弹性和韧性,可在一定程度上逆转P F D 的症状.B M SC 因具有很强的分化能力和分泌有利于组织修复的生物活性因子的能力,其在软组织修复和重建中的潜力已被广泛报道[17G18].如,B M S C 移植能促进新生组织的生长以及体内伤口愈合动物模型中沉积的胶原[18].在与P F D 相关的治疗研究中,C O R C O S 等[7]发现,注射B M S C 能修复受损的外尿道括约肌,显著改善S U I 症状;J I N 等[8]研究显示,注射B M S C 能恢复P F D 盆底支持组织中E l a s t i n 和胶原蛋白的含量,缓解PF D 的S U I 症状.本研究也同样显示,与P F D 模型组比较,注射B M GS C 能增加P F D 盆底支持组织中E l a s t i n 和胶原蛋白的含量,并一定程度上恢复因阴道扩张而受损盆底组织的功能(增加膀胱容积㊁排尿时膀胱内压和漏尿点压).近来研究[16,19G20]显示,改变B M S C 中某些m i R N A s 的表达可增强B M S C 对受损组织的恢复功能,如上调B M S C 中m i R G29表达能增强B M GS C 对P F D 受损盆底支持组织弹性和韧性的恢复[16];m i R G145修饰的B M S C 可通过T G F Gβ/S m a d 63南昌大学学报(医学版)2022年2月,第62卷第1期Copyright©博看网 . All Rights Reserved.调节大鼠阴茎中平滑肌细胞和C o l l a g e nⅠ含量,改善其勃起功能[19].另外,已有报道[20]显示,过表达m i RG145能增加血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠腹主动脉中E l a s t i n和胶原蛋白降解的发生率,反之,敲减m i RG145能降低血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠腹主动脉中E l a s t i n和胶原蛋白降解的发生率.本研究结果显示,在P F D大鼠模型中,与注射m i RGN C慢病毒载体转染的B M S C比较,注射m i RG145Gs h R N A慢病毒载体转染的B M S C的大鼠E l a s t i n和C o l l a g e n Ⅰ表达水平均明显增加,且膀胱容积㊁排尿时膀胱内压和漏尿点压均明显增高,说明敲减B M S C中m i RG145表达能增强B M S C对P F D的修复作用.虽然如此,本研究依然具有很多局限性需要考虑:比如,注射m i RG145Gs h R N AGB M S C是通过何种信号途径上调P F D大鼠盆底支持组织中E l a s t i n和C o lGl a g e nⅠ表达,以及注射m i RG145Gs h R N AGB M S C是否能调节其他修复相关蛋白参与增强B M S C对P F D的修复作用;另外,改变B M S C中其他m i RGN A s的表达是否也能影响B M S C对P F D的修复作用等一些未知的问题.这些未知的问题仍有待更多的研究去证明.总之,本研究结果提示抑制B M S C中m i RG145的表达可提高B M S C移植对P F D大鼠的治疗潜力.同时,本研究综合了m i R N A生物学和基因工程B M S C技术,为寻找P F D的潜在疗法提供了一个新方向.参考文献:[1]㊀L E MO S N,D O UMO U C H T S I SS K.I C Sd e b a t ea r t i c l eGc h i l dGb i r t h,m o d e so fd e l i v e r y,a n d p e l v ic f l o o rd y s f u n c t i o nGc h a l le nGg e s i ne d u c a t i n g w o m e na b o u tm o 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L,e t a l.E l a s t i no v e r e x p r e s s i o nb y c e l lGb a s e d g e n e t h e r a p yp r e s e r v e sm a t r i xa n d p r e v e n t sc a rd i a cd iGl a t i o n[J].J C e l lM o lM e d,2012,16(10):2429G2439.[16]㊀J I N M F,WU Y L,W A N G J,e ta l.M i c r o R N AG29f a c i l i t a t e s t r a n s p l a n t a t i o no fb o n em a r r o wGd e r i v e d m e s e n c h y m a l s t e mc e l l st o a l l e v i a t e p e l v i c f l o o r d y s f u n c t i o nb y r e p r e s s i n g e l a s t i n[J].S t e mC e l l R e sT h e r,2016,7(1):167.[17]㊀A T A L A A.T i s s u e e n g i n e e r i n g o f r e p r o d u c t i v e t i s s u e s a n d o rGg a n s[J].F e r t i l S t e r i l,2012,98(1):21G29.[18]㊀HA N S O NSE,G U T OW S K IK A,H E MA T T IP.C l i n i c a l a pGp l i c a t i o n s o fm e s e n c h y m a l s t e mc e l l s i n s o f t t i s s u e a u g m e n t aGt i o n[J].A e s t h e t S u r g J,2010,30(6):838G842.[19]㊀L I U Q W,C U IY B,L I N H J,e ta l.M i c r o R N AG145e n g iGn e e r e db o n em a r r o wGd e r i v e dm e s e n c h y m a l s t e mc e l l s a l l e v i aGt e d e r e c t i l e d y s f u n c t i o n i na g e dr a t s[J].S t e m C e l lR e sT h e r,2019,10(1):398.[20]㊀WUJ,WA N GJ,L IX O,e t a l.M i c r o R N AG145m e d i a t e s t h ef o r m a t i o no f a ng i o t e n s i nI IGI n d u c e d m u r i n ea b d o m i n a l a o r t i ca n e u r y s m[J].H e a r tL u n g C i r c,2017,26(6):619G626.(责任编辑:黄永红)73张小燕等:敲减m i RG145增强骨髓间充质干细胞对大鼠盆底功能障碍的修复作用Copyright©博看网 . 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miR-145在垂体腺瘤患者中的表达及其临床意义

miR-145在垂体腺瘤患者中的表达及其临床意义

编者按:微小RNA(micro RNA,miRNA)是一类长度为19~23个核+酸的非编码小RNA,通过干扰mRNA的翻译进行转录后调控,因此又被称为基因表达的关键调节因子。

研究表明,miRNA不仅可以调节肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡和侵袭,还在其他多种疾病的发生、发展过程中发挥效应,如糖尿病、COPD、癫痫、慢性心力衰竭等。

miRNA在血液中稳定存在,易于检测,有可能成为疾病诊断、治疗评价和预后预测的标志物。

为提高对miRNA在临床实践工作中作用的认识,本期特开辟专栏,集中刊发有关miRNA在不同疾病中的应用研究论文,以飨读者。

【DOI]10.3969/j.Rsn.1671-6450.2021.22.001微小RNA应用研究miR-145在垂体腺瘤患者中的表达及其临床意义,,,,,基金项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金青年基金(2219D01C323)作者单位:830254乌鲁木齐,新疆医科大学第一附属医院神经外科通信作者:罗坤,E-mail:laokua_2322@【摘要】目的分析微小RNA190(miR-190)在垂体腺瘤患者中的表达及其对预后的评估意义。

方法选取2019年1月一2216年1月新疆医科大学第一附属医院神经外科诊治垂体腺瘤患者192例瘤组织样本(PA组),并选取正常垂体样本22份作为对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别测定2组垂体组织miR-145表达量,分析瘤组织miR-145与患者临床/病理特征及预后的关系。

结果PA组患者瘤组织miR-MO的表达显著低于对照组(t/P=2.365/0.232),而在功能性垂体腺瘤(FPA)亚组患者中表达显著高于无功能垂体腺瘤(NFPA)亚组(/P=22.725/0.200);垂体腺瘤患者瘤组织mR645的表达在不同年龄、肿瘤侵袭性及肿瘤分型中比较,差异有统计学意义(/P=2.329/0.021、6.167/0.200、7.200/0.200);高表达miR-145的NFPA患者总体复发率显著低于低表达患者,差异有统计学意义(17.24%vo.42.31%,2/0=4.176/0.041)。

子宫内膜异位症合并不孕患者血清miR-145表达及与临床病理类型及妊娠结局关系

子宫内膜异位症合并不孕患者血清miR-145表达及与临床病理类型及妊娠结局关系
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EMT)好发于育龄期女 性,病
病变、棕色病变、白色病变;② 内囊型,腹腔镜下见卵
织器官 [12].有 研 究 [3]指 出 EMT 是 导 致 女 性 不 孕
2 个月),临床出现渐进性痛经伴或不伴月经过多,
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前治疗 EMT 合 并 不 孕 的 最 主 要 手 段,但 不 同 患 者
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摘 要 目的:探讨子宫内膜异位症 (
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145 表 达 与 临 床 病 理 类 型 及 妊 娠 结 局 关 系. 方
法:
2017 年 1 月 -2019 年 12 月在本院接受腹腔镜及药物 治 疗 的 EMT 合 并 不 孕 患 者 122 例 作 为 EMT 合 并 不 孕 组,
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血浆外泌体miR-145-5p在颅内动脉瘤患者中表达及与颅内动脉瘤破裂关系研究

血浆外泌体miR-145-5p在颅内动脉瘤患者中表达及与颅内动脉瘤破裂关系研究

-I临^床扌报i道-血浆外泌体miR-145-5p在颅内动脉瘤患者屮表达及与颅内动脉瘤破裂关系研究许刚柱,丁志斌,吴涛西安医学院第一附属医院神经外一科,陕西西安710003[摘要]目的探讨血浆外泌体miR-145-5p在颅内动脉瘤(lA)患者中的表达量,并分析其与动脉瘤破裂的关系。

方法选取西安医学院第一附属医院自2018年9月至2020年9月收治的110例lA患者纳入lA组,选取同期于我院体检的92例健康体检者纳入健康组。

比较健康组与lA组血浆外泌体miR-145-5p表达水平。

根据lA患者是否发生动脉瘤破裂,分成破裂组("=32)与未破裂组("=78)。

比较破裂组与未破裂组临床资料及血浆外泌体miR-145-5p表达水平,利用Logistic 多因素回归模型分析患者动脉瘤破裂的危险因素,并绘制受试者工作特征曲线分析血浆外泌体miR-145-5p表达水平对动脉瘤破裂的评估价值。

结果lA组的血浆外泌体miR-145-5p表达量显著高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。

破裂组、未破裂组的年龄、血浆外泌体miR-145-5p表达量以及糖尿病、高脂血症、动脉瘤直径M5cm患者比例比较,差异有统计学意义(P<0.05)。

多因素Logistic回归分析显示,年龄m60岁、糖尿病、高脂血症、动脉瘤直径M5cm、血浆外泌体miR-145-5p 表达量mil.63是lA患者动脉瘤破裂的危险因素(P<0.05)。

血浆外泌体miR-145-5p表达量评估lA患者动脉瘤破裂的曲线下面积为0.765。

结论年龄m60岁、糖尿病、高脂血症、动脉瘤直径m5cm、血浆外泌体miR-145-5p表达量mil.63是lA 患者动脉瘤破裂的危险因素。

miR-145-5p在lA患者血浆外泌体中呈过表达,且其对动脉瘤破裂风险存在一定评估价值,临床可考虑将该指标作为日后lA诊疗的依据之一。

[关键词]颅内动脉瘤;外泌体;miR-145-5p;危险因素;血管平滑肌细胞Key words:lntracranial aneurysm;Exosomes;miR-145-5p;中图分类号:R543DOl:10.16048/j.issn.2095-5561.2021.02.13颅内动脉瘤(intracranial aneurysm,lA)在我国成人中患病率约为7%,大部分患者动脉瘤直径W5cm,动脉瘤过大可引起动脉瘤破裂,导致血液进至蛛网膜下腔,诱发蛛网膜下腔岀血(subarachnoid hemorrhage,SAH),病死率较高[1]。

miR一145与肿瘤相关性研究进展

miR一145与肿瘤相关性研究进展
合成 功能 有关 ,即具 有分 泌蛋 白的功 等 ,这 些靶 基 因与 国 内外 文献 报道 一 中发 现 O c t 4的表达 ,通过对肺 腺癌 和 能 。mi R. 1 4 5可 以上调 平 滑 肌标 志蛋 致 。 细 支气 管肺泡 癌中 O c t 4表达 的检测 及 张帅 等[ s ] 运 用 mi R a n d a靶基 因预测 白的表 达 ,抑 制 K l f 4及 K l f 5的表 达 , 软件 对其 靶基 因进 行 分析 , 其中 O C T 4 分析 指 出 O c t 4在肿瘤 的发生 中可能 具 形态 学上 同时发 生纺 锤状 改 变 ,最终 为其可 能 的靶 基 因 。S l a等 发现 结肠 有 潜 在 的重 要 性 . O c t 4有望 成 为 肺 小
究更 新较 快 。科研 工 作者进 行 了大量 瘤 中表 达 显著 下调 , 如 前列 腺 癌 [ 4 J 、 肺 肿瘤 细胞增 殖 和转 移 ,而过表 达 可抑
实验 ,提 出 了较 多的新 的观点 ,现就 癌 、 肝癌 、 卵 巢癌 , 表明 m i R . 1 4 5作 为 制肿 瘤 的发 生发 展 、 浸 润和转 移 活性 ;
mi R N A, 可因部分相 关互补 而表现 出二 保 护 肺 癌 患 者 的 mi R N A。 Wa n g等
成熟 m i R . 1 4 5 , 具有 2 1 个 碱基 。
2 mi R. 1 4 5基 因 的 功 能
以利 于判 断肿瘤 的分 期 、分级 及癌 前
级 茎一 环 的结构 . 通过 相关 酶切后 形 成 m i R . 4 5 1通 过 下 调 致 癌 基 因 R A B 1 4影 状 态 ,也为 临床 治疗 方 案 的制 定提 供 响N S C L C细 胞 的生 存一 文 的报 道 . 可 有 利依据 。 5 . 2 O c t 4基 因 能为 N S C L C患 者 带 来 一 种 新 的治 疗 O c t 4 ( 也 称为 O c t 3 / 4 )
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著升高 ; HC T一 1 1 6 / L OHP 细 胞 P TEN 基 因水 平 为 0 . 4 1 ±0 . 0 4, 较 母 本 细胞 的 0 . 8 9 ±0 . 0 2显 著 下 调 。 应 用 mi R一 1 4 5转
染母 本 及 耐 药 细 胞 发 现 , mi R 一 1 4 5可 明 显 抑 制 HC T — l 1 6母 本 及 HC T 1 l 6 / L — OHP 细胞 的 增 殖 , 生 长抑制 率分别为 5 7 和 3 8 , 进 而提 高 细胞 对 L — OHP的 药物 敏 感 性 。 进 一 步 研 究发 现 , mi R - 1 4 5过 表 达 处 理 后 , 抑 癌基 因 P T E N 表 达 水 平 为0 . 7 8 ±0 . 0 3 , 较 c o n t r o l 组的 0 . 4 2 ±0 . 0 l显 著 上调 ; 而 MD R1基 因 表 达 水 平 为 0 . 4 7 ±0 . 0 1 , 较 c o n t r o l 组的 0 . 8 7 ± 0 . 0 2显 著 下 调 。 经 mi R 一 1 4 5 s i R NA 预 处 理 后 , HC T 1 1 6 / L — OHP 细 胞 抑 癌 基 因 P T E N表达水平为 0 . 3 5 ±0 . 0 2 , 较
Hale Waihona Puke 2 . 郑 州市 中心 医院 ・ 郑 州大 学 附属 中心 医 院 肿 瘤 内科 , 河南 郑州 4 5 0 0 0 2
【 摘要】 目的 探 讨 mi c r o RNA 1 4 5( mi R- 1 4 5 ) 对人 结 肠 癌 细 胞 株 HCT - 1 1 6奥 沙 利 铂 ( L一 0HP) 耐 药作 用及 其 机 制 。 方
Ro l e o f mi R一 1 45 i n t h e a c qu i r e d r e s i s t a n c e t o Ox a l i p l a t i n o f h u ma n c o l o n c a n c e r c e l l l i n e H CT- 1 1 6
mi R 一 1 4 5 组显著下降 ; 而 MDR 1基 因表 达 水 平 为 0 . 9 4 ±0 . 0 4 , 较 mi R 一 1 4 5组 显 著 上 调 ; P T E N 蛋 白及 MDR 1 目的 蛋 白
P — g P 的 变化 呈现 相 同 趋 势 , P值均<0 . 0 5 。结 论 mi R 一 1 4 5可 降低 人 结 肠 癌 HC T 一 1 1 6细 胞 株 奥 沙利 铂 耐 药性 , 其 作 用机
付 强 张永 磊 成 静 陈 小兵 谢 建 国
消 化肿 瘤 内科 : 陈小 兵 , 罗素 霞) , 河 南 郑州 4 5 0 0 0 2
罗素 霞
1 . 河南省 肿瘤 医院 ・ 郑j , j 、 】 大 学 附 属 肿 瘤 医院 ( 胃肠 外 科 中 心 : 付强, 张永磊 , 谢建 国;
制 可 能 是 通 过 影 响 MD R1和 P T E N 基 因及 蛋 白表 达 水 平 来 实现 的 。
【 关键词】 结肠肿瘤 ; mi c r o RNA 1 4 5; HC T一 1 l 6细 胞 ; 耐 药; 奥沙利铂 ; 印迹 法 , 蛋 白质
中华肿瘤防治杂志 , 2 0 1 5 , 2 2 ( 1 9 ) : 1 5 2 3 一l 5 2 7
法 采 用 逐 步 增 加 药物 浓 度 的 方 法 , 建 立 人 结 肠 癌 耐 奥 沙利 铂 细胞 株 HC T 一 1 1 6 / L — OHP 。 脂 质 体 转 染 法将 mi R 一 1 4 5转
入 建立好的耐药细胞株 中, 并 设 立 阴性 mi RN A 对照组、 mi R 一 1 4 5 s i RN A 处理 组 ( mi R 一 1 4 5 组) 、 空脂 质 体 组 和 空 白对 照 组 ( c o n t r o 1 组) 。MTT 法 测 定 转 染 4 8 h后 细 胞 增 殖 能 力 和 对 L 一 0HP 的 敏 感 性 ; 实时定 量 P C R 检 测 转 染 后 HC T 一 1 1 6 / L 0HP 细 胞 中 多 药耐 药基 因 MD R 1和 抑 癌 基 因 P T E N 的表 达 ; 蛋 白质 印迹 法检 测 P 糖 蛋 白 ( P — g P ) 和 P TE N 蛋 白表 达 。 结 果 成 功 建 立 耐 药倍 数 为母 本 细胞 7倍 的 HC T 一 1 1 6 / L 0HP细 胞 株 。检 测 HC T — l 1 6母 本 与 HC T 一 1 1 6 / L 『 0HP 细 胞 MDR 1 、 P TE N 基 因表 达 结 果 显 示 , HC T 一 1 1 6 / L — OHP细 胞 MD R1 基 因水 平 为 0 . 8 6 土0 . 0 5 , 较 母 本 细胞 的 0 . 3 9 ±0 . 0 3显
中华肿瘤防治杂志 2 0 1 5年 l 0月第 2 2卷 第 1 9期
CHI N J CANC E R P RE V TRE AT, Oc t o b e r 2 0 1 5 , Vo 1 . 2 2 No . 1 9
《 实验研究/ 论著l
H CT一 1 1 6 Mi R一 1 4 5对 人 结 肠 癌 细 胞 株 奥 沙 利 铂 耐 药 机 制 探 讨
FU Qi a n g ,ZH ANG Y o n g — l e i ,CH ENG J i n g。,CH EN Xi a o b i n g ,X I E J i a n — g u o ,LUO Su Xi a
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