凝血TT

修改纪录：
1目的
本操作书的制定的目的是，为操作者进行血浆凝血酶时间测定提供正确的操作方法。

2适用范围
适用于血浆凝血酶时间测定
3定义
凝血酶时间（TT）是一个快速而简易地评价纤维蛋白形成的试验，因子X III 缺乏时，TT保持正常。

当PT，APTT延长，不能解释结果时，在进行其他试验之前，应先测定TT，再做其他确诊测试。

4测定原理和临床意义
4.1测定原理
在过量的凝血酶存在下，被稀释血浆的凝固时间可直接反映血浆中纤维蛋白原水平。

4.2临床意义
反映血浆中纤维蛋白的减少和FDP的增多，可作为异常纤维蛋白原的筛选试验。

延长：血循环中纤维蛋白（原）降解产物（FDP）（如DIC继发纤溶亢进、溶拴治疗后））；肝素或类肝素物质增多；AT-Ⅲ活性增高；纤维蛋白原严重减少（如先
天性无纤维蛋白血症、严重肝脏疾病）等。

异常FDP（骨髓瘤，风湿性关节
炎）
缩短：见于高凝状态。

5实验室条件
5.1实验场所
中心实验室临检室
5.2温湿度要求
室温：15-30℃
湿度：20-80%
6标本要求
6.1标本种类
6.1.1标本种类
血浆
6.1.2标本量
最适量：3ml
最小量：2ml
分析量：200ul
不适标本的处理：采集量过少、抗凝剂错误、血液凝固等情况下，拒收标本，
及时与临床联系，并做好登记。

6.1.3容器
枸橼酸钠抗凝管---9体积血采集到1体积0.109 M枸椽酸钠抗凝剂中（NCCLSH3-A3，H21-A21标准）
6.1.4采集条件
采集时间：检查对象生活饮食处于日常状态，安静。

拒收标准：采血量不足、严重乳糜血、抗凝不充分、严重乳糜血、抗凝剂
有误等
采集部位：静脉采血。

6.2使用条件
6.2.1保存条件
---标本血浆在20℃保存8小时，如果采用肝素治疗，标本保存2小时。

* 不要将血浆置于2 - 8℃保存。

6.2.2保存事项
必须及时检验，放置过久可影响检验结果。

6.2.3保存天数：1天
6.2.4保存场所：临检室
6.2.5特殊容器：无
6.2.6预防措施
标本为可感染性标本，应注意人员及环境的防护，防护措施请使用眼镜，口
罩，手套等。

7试剂或培养基
试剂成分：
试剂：冻干试剂，人类的含钙凝血酶，大约1.5 NIH unit/ml。

警告 ---潜在的生物危害物质：该试剂来源于人类。

每一盒试剂均经过规定的检测，HIV抗体、HCV 抗体和HBV表面抗原为阴性。

因为至今无一测试可以保证完全不含HIV、HBV、HCV或其他传染因子，该试剂为人类血清或血样本生物安全2类水平，以避免潜在的传染，符合国家疾病控制中心/国家卫生研究所“Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories”要求，1984。

校准品：STAGO产品，未开瓶的试剂于2-8℃保存，可在有效期内保持稳定；
现用现配，已复溶的试剂于20℃可稳定4小时；更换试剂批号时应做校准；定标值因批号不同而不同，应仔细参阅试剂盒内的定标值
质控品：STAGO产品（STA@ ，未开瓶的试剂于2-8℃保存，可在有效期内保持稳定；现用现配，已复溶的试剂于20℃可稳定4小时；每24小时检测均应做一次质控；质控值因批号不同而不同，应仔细参阅试剂盒内的质控标值。

7.2试剂配制
7.2.1：试剂种类
7.2.2配制方法：
准备：复溶试剂，加入相应量的蒸馏水（试剂瓶上标明）。

复溶后的试剂在室温（18 -25℃）放置30分钟，然后轻轻摇匀，以获得同质的
悬浮状态
保存：未经触动的原试剂瓶，2 -8℃可保存至有效期（包装盒外）。

复溶后的试剂 20 ℃可保存7天；(No.00608保存8小时)
2 - 8 ℃可保存14 天。

（No.00608保存24小时）
* 不要冷冻
7.3配制试剂标签内容
1)试剂名称
2)配制日期
3)有效期限
4)特别说明（毒性，挥发性）
5)配制者
8仪器和器具
8.2器具
9定标（必要时）
9.1校准品准备
9.1.1校准品：记载被使用的校准品，包含以下内容
1)药品名和化学式（可能的场合）
2)国际承认的标准规格
3)品牌：STAGO产品或自制（可用新鲜、未经治疗的健康人全血）
9.1.2校准品配置
9.1.3器具要求
9.1.4保存条件
1)容器
2)温度；2-8℃冰箱内，切忌冷冻
3)稳定性（保存时间）
4)标签
9.2校准
9.2.1校准周期
新购置仪器使用前；仪器更换部件对结果准确性有影响时；室内质量控制结果有漂移时；实验室一年进行两次校准。

更换试剂批号时应做校准；定标值因批号不同而不同，应仔细参阅试剂盒内的定标值。

9.2.2校准方法
同批号的试剂可以使用同一个定标曲线，建议每天做质控。

试剂换批号时、质控数值不好时需要定标。

STAGO产品，未开瓶的试剂于2-8℃保存，可在有效期内保持稳定；现用现配，已复溶的试剂于20℃可稳定4小时；更换试剂批号时应做校准；定标值因批号不同而不同，应仔细参阅试剂盒内的定标值。

将所需试剂、复溶试剂、标准血浆及质控血浆室温18-25℃放置30分钟，并转动摇匀。

用STA-Owren-Koller缓冲液稀释通用定标物１：５、１：１０、１：２０稀释或者１：１０、１：２０和１；４０稀释。

（稀释比例请根据该测试仪器的说明书确定），通用定标物的纤维蛋白原水平在相应试剂盒中标明
定标测定
1、在主屏幕下，用F1键打开样品存放抽屉。

2、装入稀释液－“Owren koller。

3、用ESC键关闭样品存放抽屉。

4、在主屏幕下，ESC键进入状态栏。

5、选择“calib/control”中的“calibration”进入定标界面。

6、用F1选中此项目，此时该项目左面应标“S”（如果不能选中，则说明项目中
缺少参数，此时应用ENTER键入相应项目，填写参数，然后再回到定标菜单。

）
7、用F10键运行该项目，此时项目名称左面变成黄色。

8、定标程序完成后，仍以此菜单下，选择相应的项目，用ENTER进入统计图屏
幕，可观察定标曲线的线性，回归性等指标，并且可修改和打印。

★有此试验，在定标后，自动运行了质控程序，并显示出质控结果
10质量管理
10.1质控物的管理
10.1.1质控物质的种类，名称，浓度
种类：全血
名称; STAGO产品
浓度:定值
10.1.2质控物质使用
用STA-Owren-Koller缓冲液以同样稀释比例稀释质控血浆进行测试。

10.1.3测定周期
每日一次（每日工作前）, 质控：每天测试运行前应运行质控。

当质控结果不好时，分析结果应值得怀疑，检查测试系统功能是否正常，如测试条件、试剂、血浆等。

如有必要须重复运行质控测试。

10.1.4保存方法
2-8℃冰箱内，切忌冷冻
10.1.5允许范围
±3SD之内或厂家规定的范围
10.1.6判断基准
±3SD为失控，±2SD为警告
10.1.7失控时必须采取的措施
若在±3SD之外，则应查找原因，对仪器、试剂进行检查后，再进行质控
测定，直至质控正常，才能进行样品检测。

失控后应填写失控报告，通知
组长，写明原因并进行签字，同时应将原始记录保存归档。

如果仪器状态不好，应请工程师来进行维护，必要时应进行校准。

10.1.8数据记录及保存形式：
每日的质控数据自动传到计算机中保存，并将原始数据保存。

每月由组长
将质控图表及质控记录打出进行总结，并交科室管理组。

10.1.9质控物的代替方案
10.2自制质控物的管理方法：无
STAGO产品（STA@ ，未开瓶的试剂于2-8℃保存，可在有效期内保持稳定；现用现配，已复溶的试剂于20℃可稳定4小时；每24小时检测均应做一次质控；质控值因批号不同而不同，应仔细参阅试剂盒内的质控标值。

将所需试剂、复溶试剂、标准血浆及质控血浆室温18-25℃放置30分钟，并转动摇匀
质控的测定
1、在主屏幕下，ESC键进入状态栏。

2、选择“Calib/contrel”中的“Qudity Control”进入质控界面。

3、用↑、↓、←、→键移动光标选择需质控项目。

4、用F1选中此项目，此时该项目左面应标“S”如果不能选中，则说明该项目中缺
少参考时间，质控范围等参数，此时应用ENTER键入相应项目，填写缺少
参数，然后再回到质控屏幕。

5、用F10键运行该项目，此时项目名称左面变成黄色。

6、质控程序完成后，仍以此菜单下，选择相应的试验项目，用ENTER进入统计范
图菜单，在此菜单下可观察正常或异常质控指标的每日、每月、每年统
计的趋势图，切换正常质控指标，用F2或F3键，用F1键可查询相应的质
控数据。

7、如果此项质控数值超标，可用ESC键，并选择“重新运行”该项目。

11操作程序
※记载每个步骤详细的说明
11.1流程图：见附件录1
11.2标本准备
11.2.1容器：
枸橼酸钠抗凝的试管
11.2.2标本核收
认真核对病人的病历号、姓名、病房、科别等有关项目、化验单填写是否正
确；标本是否合格，若不合格及时与临床联系，并做好登记工作。

11.3操作程序
11.3.1标本测定操作步骤
系统输入及详细操作见STAGO仪器擦操作规程。

1.先将复溶的试剂预温至37.0±0.5℃；开机，放置试剂及标本；
2.做定标或质控，合格后仪器自动开始测定，打印出结果；
3.取出标本，关机。

4.注意事项：不要测试有轻微凝固的标本。

不要测试被肝素污染的标本。

必须保证
质控的结果在标定的范围内，如果超出范围结果值得怀疑，必须重做。

4．将结果写在申请上。

11.3.2结果发送
计算机登录（打印报告单应与原始申请单，信息与结果两个人核对）
11.4危险品管理：
※记载关于危险物质的使用和废弃方面的危险和必须采取的措施
11.4.1危险品;无（戴眼镜，戴手套，穿防护衣和安全器具）
11.4.2废弃物的处理方法
废液处理
留下的标本，应放到有1000mg/l有效氯浸泡（4片健之素/L）的专用容器内
浸泡。

容器处理
1）一次性被污染用容器放入焚烧垃圾
2）反复使用的容器放1000mg/l（4片健之素/L）浸泡，由科室洗刷工进行处
理。

12计算：
13结果报告
13.1参考范围的种类：
1)标本种类：
血浆
参考值14-21秒（一般TT延长在3秒之内均可认为正常）
建立正常参考值，会因所使用的仪器或检测方法的不同而得到不同的结果，因此，每个实验室应根据使用的仪器，试剂和人群的不同，建立自已的正常参考值。

2)设定依据：《全国临床检验操作规程》中华人民共和国卫生部医政司
第二版
3)影响因素（生理变动）：
13.2异常结果处理
1)复查范围:
测定结果超过或低于参考范围时，应与病情或历史结果进行比较，若与病情、
历史结果不相符，或初次检测异常者应进行复查。

必要时推片复查。

若两次
结果相近或与历史结果相符，可以发送报告，若不符应与临床联系。

2)危急值
3)异常结果的处理和联系方式：见《应急处理程序》。

13.3报告形式
报告样式：秒
报告位数小数点后一位
13.4报告时间: 当天
14检测性能
1)线性范围：
2)检出界限（包含算出依据）
3)检出灵敏度：
4)精密度: 批内5次重复的CV值＜1.5%
5)准确度：检测结果与其他认可方法基本一致
6）交叉污染3.0%或更少
7）特异性期待测值的90-110%
15影响因素
1)干扰物质（乳糜，溶血，黄疸等）：血浆中有微量凝块会使时间缩短、大量
凝块会使时间延长。

抗凝剂比例、测量温度等。

2)交叉反应
3)药物
16注意事项
16.1取血时必须顺利，应一针见血，以防组织损伤，外源性凝血因子进入针管，将影
响结果测定。

16.2标本必须立即送检及时检查，时间过久将影响检验结果。

16.3血浆中有微量凝固块会使测试时间缩短（凝血因子被激活），而大量凝固会使
PT时间延长，因为消耗了凝血因子和纤维蛋白原。

16.4应选择正确的抗凝剂，抗凝剂和血的体积比应为1：9。

16.5测量温度必须保持恒定。

16.6不要让试剂被血浆污染。

16.7限制因素：不要测试有轻微凝固的标本。

不要测试被肝素污染的标本
17参考文献
《诊断学》作者戚仁铎等人民卫生出版社第四版
《今日临床检验学》作者丛玉隆等中国科学技术出版社
《全国临床检验操作规程》作者叶应妩等中华人民共和国卫生部医政司《全国临床检验操作规程》中华人民共和国卫生部医政司第二版
《临床基础检验学》作者寇丽筠等人民卫生出版社第二版
《医学临床三基训练》医技分册中华人民共和国卫生部医政司
18改定与评价
18.1改定
操作书内容，操作内容和其他主要项目变更，制作者应尽快修订，得以承认19操作记入要领
※操作日志包含以下内容
1)检查•测定标本数和再检标本数
2)管理样品精度的核对情况
3)和关联检查项目的相关核对情况
4)检查室室温等环境的相关事项
5)超异常结果的处理
6)操作者姓名
7)操作年月日和检查•测定的开始•完成时间
1·操作流程图
再次核对结果
2·测定、检查仪器作业日志
测定、检查仪器作业日志年月日检验科临检室Array
天气（）室温（）湿度（）。