实验五 rpmi1640的配制
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实验六 RPMI-1640的配制
不完全RPMI-1640培养液配方
RPMI-1640干粉 1袋(1,000mL量)
L-谷氨酰胺
0.29g
NaHCO3溶液
2.2g
HEPEs
2.39g
去离子水
1,000mL
溶解，过滤除菌，分装，-20℃保存。
合成培养基的配制
1、将RPMI-1640粉袋竖立轻弹，使袋中干粉下沉， 剪开袋口，将干粉倒入3,000mL三角瓶中； 2、加入1,000mL去离子水，快速旋转摇动三角瓶，或 用磁力搅拌器搅拌一定时间使干粉培养基充分溶解； 3、称取3.7g NaHCO3、2.39g HEPEs加入三角瓶，快 速旋转摇动充分溶解； 4、在超净台中安装好灭菌过滤器，对溶液进行滤过 除菌，分装入250mL或500mL瓶中，瓶口用胶塞塞紧；
合成培养基的配制
5、用塑料膜将瓶口封好，加皮筋扎紧，4℃冰箱或 -20℃贮存备用，此为不完全RPMI-1640液。 6、完全RPMI-1640培养液的配制：不完全RPMI-1640 培养液占80％~90％，小牛血清占10％~20％。按1％ 体积分别加入双抗贮存液(青霉素+链霉素)，使青霉素 和链霉素的终浓度分别为100U／mL。