a-淀粉酶
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a-淀粉酶的应用
1 食品工业 a-淀粉酶具有液化作用和糖化 作用,在饮料工业中常常用作甜味剂。在 冷饮中,使冷饮黏度降低,流动性增高, 保证高淀粉冷饮的口感。在面制品行业中 作为安全、高效的改良剂,可改良面包品 质。另外耐高温 a-淀粉酶作为一种新型液 化酶制剂,大量应用于发酵行业,其热稳 定性是由蛋白质本身的热稳定性决定的, 所以广泛应用于啤酒酿造和酒精工业等
科学家正通过多种途径寻找产生a-淀粉酶的 新菌株,并运用分子生物学手段克隆新基 因,以期达到廉价大规模生பைடு நூலகம்a-淀粉酶的目 的。
4 医药中的应用 由于黑曲霉a-淀粉酶具有耐酸 性,故可用来制造帮助消化一类的药物,开 发适合于胃酸性环境的耐酸性a-淀粉酶,用 于制备消化助剂。 5饲料中的应用 在饲粮中添加外源a-淀粉酶可 以帮助幼龄动物消化利用淀粉,其生长性能 与饲料转化率十分有益。肉鸡日粮中添加产 a-淀粉酶的活大肠杆菌培养物可以起到抗生 素生长促进剂的作用,改善肠道形态,提高 生产性能。
收集发酵液,高速冷冻离心机离心,弃沉淀收集上清液 ↓ 硫酸铵沉淀,置于4℃下静置过夜,离心,收集沉淀 ↓ 少量醋酸缓冲液溶解沉淀,透析除盐,超滤浓缩酶液 ↓ DEAE Sepharose 离子交换层析,分管收集,测酶活将酶 活较高的各管合并,超滤浓缩 ↓ 相应的缓冲液溶解,Sephacry S-200凝胶层析,分管收集, 测酶活将最高管收集,超滤浓缩 ↓ SDS-PAGE电泳进行酶纯度检测
a-淀粉酶在30~90 ℃ 时都有活力,最适反应 温度为55 ℃ ,在40~70 ℃有较高活力, >70 ℃时活力较低。在PH 6.0~9.0 有较高 的活力,
钙离子、锰离子、钴离子对酶活有强烈激活 作用,EDTA部分抑制淀粉酶活性
a-淀粉酶的分离纯化
发酵产a-淀粉酶的过程中,发酵液中除了含有a淀粉酶外还有其他杂质,所以要对发酵液进行 目标蛋白质的提纯。 对a-淀粉酶的分离纯化 最常用的方法就是: 预处理→硫酸铵沉淀→脱盐→层析分离
另外耐高温a淀粉酶作为一种新型液化酶制剂大量应用于发酵行业其热稳定性是由蛋白质本身的热稳定性决定的所以广泛应用于啤酒酿造和酒精工业等水洗工业由于淀粉廉价易获取易去除所以在现代纤维制造工艺中被用作为防止纱线断裂而加的一层保护材料之后再使用a粉酶进行处理能有选择性地去除淀粉浆而不伤害纱线纤维还能使淀粉降解为易溶于水的糊精使其容易被洗掉
2 水洗工业 由于淀粉廉价、易获取、易去除, 所以在现代纤维制造工艺中被用作为防止纱线 断裂而加的一层保护材料,之后再使用 a -淀 粉酶进行处理,能有选择性地去除淀粉浆而不 伤害纱线纤维,还能使淀粉降解为易溶于水的 糊精,使其容易被洗掉。 3 造纸工业 淀粉酶在造纸工业中主要用来改良 纸张涂层淀粉的黏度和浓度。浆糊是一种很好 的纸张涂料,能提高纸张的硬度和强度、增强 纸张的可摩擦性,而自然界的淀粉浓度对于纸 张上浆来说太高了,所以可用a-淀粉酶部分降 解淀粉来调节。
1 a-淀粉酶特性
2 a-淀粉酶的分离纯化 3 a-淀粉酶的应用 4 a-淀粉酶的研究进展
a-淀粉酶特性
广泛分布于动物(唾液、胰脏等 )植物(麦芽、山 萮菜)及微生物 。 a-淀粉酶是一种能从淀粉分子内部随机地切开 a-1, 4糖苷键、能跨越不能切分支点的a-1, 6键而 切开内部的 a-1, 4糖苷键的内切酶,因产物的还 原性末端葡萄糖残基上碳原子呈a-构型,故称a淀粉。 其特征是引起底物溶液的下降和碘反应的消失, 在分解直链淀粉时产物以葡萄糖为主,还有少量 的麦芽三糖和麦芽糖,在分解支链淀粉时,除了 生成麦芽糖、葡萄糖、麦芽三糖,还生成分支部 分具有a-1, 6-键的a-糊精。
a-淀粉酶的研究进展
目前国内生产的a-淀粉酶主要有以下几种: 中温a-淀粉酶由枯草芽孢杆菌7658菌株经深 层发酵而成,是一种内切淀粉酶。 耐高温a-淀粉酶用地衣芽孢杆菌,经液体发 酵而成。 耐酸性a-淀粉酶黑曲霉经固态发酵 真菌a-淀粉酶曲霉属微生物发酵产生的 一种内切型a-淀粉酶。
国外a-淀粉酶研究现状:外国已初步搞清产a淀粉酶的调控基因,探讨了与此相关转导 转化和基因克隆等育种技术,并且将枯草 芽孢杆菌重组体的基因引入生产菌株内, 使a-淀粉酶的产量得到很大的提高。