吉林农业大学也食品分子检测技术复习资料

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食品安全检测技术复习提纲 7

食品安全检测技术复习提纲 7

食品安全检测技术复习提纲第一章样品的前处理技术1、超临界流体萃取的定义;超临界流体的性质;提携剂的作用;超临界萃取典型流程;2、固相萃取的原理,作用,操作程序(活化、上样、洗涤、洗脱)3、固相微萃取的原理(数学表达式),SPME 的特点(集取样、萃取、富集、进样于一身);提高固相微萃取萃取效率的方法第二章生物检测技术1、PCR PCR的过程(变性、退火、延伸)及反应条件;PCR反应试剂;2、基因芯片(DNA芯片)的定义;基因芯片制备的基本方法之一----原位光刻合成步骤基因芯片制备的基本方法-之一-----合成点样---微型机械点样法的步骤是什么?3、探针是什么?核酸探针技术原理;核酸探针标记物;了解核酸分子杂交方法---Southern杂交、Northern杂交4、ELISA 基本原理;ELISA测定方法的操作步骤及关键点第三章食品中残留危害物质检测技术1、有机氯农药残留量的测定——气相色谱法(GB/T 5009.19—2008)原理、提取、净化的操作步骤、检测、计算;——薄层色谱法原理,操作步骤,测定,计算;2、有机磷农药残留量的测定方法气相色谱法原理,样品的预处理,检测(火焰光度检测器原理,重点),计算速测卡法原理,结果判断方法3、氨基甲酸酯类农药HPLC同时测定蔬菜中三种氨基甲酸酯类农药测定原理,提取与净化氨基甲酸酯---气相色谱(附有FTD火焰热离子检测器)测定原理,提取与净化4、LC-MS/MS分析条件的选择和优化,重点:缓冲溶液和流动相;样品预处理牛奶中氯霉素类多残留的GC测定方法中,衍生化的作用;猪组织中盐酸克伦特罗的检验——ELISA法,原理、操作及关键步骤第四章食品中有害金属检测1、微波消解原理、方法及优点2、原子荧光的类型,原子荧光光谱(AFS)原理、氢化物反应种类;氢化物原子荧光的干扰及消除方法;计算3、砷的测定---银盐法原理,要求化学反应式表示4、F-730测汞仪测定原理第五章食品添加剂及非法添加物检测1、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾结构式,化学名称及溶解特性;比较高效液相色谱法和气相色谱法测定,样品前处理方法,为什么?苯甲酸和山梨酸测定---薄层层析法,样品提取酸化的目的是什么?样品中如含有二氧化碳、酒精时应如何处理?2、食品中苏丹红染料的检测方法——高效液相色谱法(GB/T19681—2005)样品的提取方法;柱层析的作用;流动相;定量计算超声波提取优点;超声波提取原理;3、吊白块---“甲醛次硫酸氢钠”分光光度法测定原理、方法及计算4、艾杰尔三聚氰胺HPLC-MS,样品的提取,PCX小柱净化,氮吹仪作用第六章食品中天然毒素检测技术免疫亲和净化的原理、特点黄曲霉毒素测定(高压液相色谱、酶联免疫法、胶体金免疫层析法),重点:胶体金免疫层析法原理及结果判断方法棒状曲霉测定(高压液相色谱);伏马毒素检测(高压液相色谱、酶联免疫法)河豚毒素检测(酶联免疫法);龙葵素检测(分光光度法、高压液相色谱)生物碱检测(高压液相色谱);生物胺检测(高压液相色谱)样品的提取、净化、测定重点:样品的提取、净化第七章食品中持久有机污染物检测技术什么是持久性有机污染物?特点?生物毒性的表现方式---致癌性、生殖毒性、神经毒性、内分泌干扰特性加速溶剂萃取(ASE)技术优点;增加温度、升高的压力的作用;多氯联苯(气相色谱法、气相色谱与质谱的联用仪);二恶英测定(同位素稀释气相色谱/质谱法);多溴联苯醚(气相色谱-质谱联用);烷基酚测定-----液相色谱-质谱法样品的提取、净化、测定重点:样品的提取、净化第八章食品加工中的污染物检测技术亚硝胺测定气相色谱一质谱仪法GB/T 5009.26—2003;苯并芘荧光分光光度法GB/T 5009.27—2003;高压液相色谱杂环胺高压液相色谱氯丙醇气相色谱一质谱仪法丙烯酰胺气相色谱—质谱(GC—MS)法GB/T 5009.204—2005甲醛高压液相色谱(SNT1547-2011)样品的提取、净化、测定重点:样品的提取、净化;苯并芘只要求粮食样品第九章食品中有害微生物的快速检测技术荧光定量PCR技术(重点,包括数学原理,熔解曲线,扩增曲线、阈值、CT值)实时荧光定量PCR方法检测大肠杆菌O157:H7;食品中五种致病性弧菌MPCR—DHPLC检测金黄色葡萄球菌B型肠毒素间接竞争ELISA检验。

现代食品检测技术作业及复习资料

现代食品检测技术作业及复习资料

现代食品检测技术作业及复习资料现代食品检测技术作业第一章:1.什么是计算机视觉技术,其主要包括哪几部分?计算机视觉技术是通过一个高清晰摄像头获取物体的图像。

将图像转换成数字的图像,在利用计算机模拟人的判别准则去理解和识别图像,通过图像分析作出相应结论的实用的技术。

部分:程序控制、事件检测、信息组织、物体与环境建模、交感互动。

2.计算机视觉技术的图像处理技术中彩色图像处理原理。

几乎所有的颜色都能由三种基本色彩混配出来,这三种颜色叫三基色。

两种方法:相加混色红、绿、蓝,相减混色黄、青、品红。

第二章:1.电子鼻和电子舌的工作原理是什么?主要包括哪些部件?原理:模拟生物的嗅觉和味觉形成过程。

电子鼻:气味分子被人工嗅觉中的传感器阵列吸附产生信号,信号经处理加工与运输,再经模式识别系统做出判断。

部件:气体传感器阵列、运放,滤波等电子线路、计算机电子舌:根据类脂或高聚物膜对味觉物质溶液产生电势变化的原理。

部件:多通道类脂膜味觉传感器阵列、运放,滤波等电子线路、计算机2.在电子鼻和电子舌检测器中,为什么要组成气体传感器阵列?检测范围更宽、灵敏度高、可靠性高。

3.电子鼻的传感器材必须具备的两个基本条件。

(1)对多种气味均有响应,即通用性强,要求对成千上万种不同的嗅味在分子水平上作出鉴别(2)与嗅味分子的相互作用或反应必须是快速、可逆的、不产生任何记忆效应即有良好的还原性。

第三章1. 请联系课程所学的知识,利用一种现代食品检测技术检测西瓜的成熟度,并叙述出其详细原理、步骤和预期的结果?利用冲击振动检测西瓜的成熟度可以采用冲击振动方法无损检测西瓜的成熟度。

冲击振动响应方法无损检测西瓜成熟度的原理:西瓜成熟后,瓜瓤的弹性模量变小,对某个质量一定的西瓜来说,固有频率必然降低,所以利用固有频率可以估算西瓜的成熟度,这就是冲击振动响应法进行西瓜成熟度无损检测的基本原理。

西瓜固有频率测量试验装置如图1 所示。

为了得到西瓜的固有频率,试验中采用锤击激励,测量其瞬态激励力,由加速度计测量瞬态激励产生的响应。

食品安全检测技术题库.总结

食品安全检测技术题库.总结

食品安全检测技术题库背景食品安全是与每个人的生命健康直接相关的问题。

对于如何保障食品安全,我们经常会提到食品安全检测技术。

食品安全检测技术是指通过检测食品中的化学物质、微生物和其他污染物,判断食品是否安全的一种先进技术。

在当前的食品安全形势下,开展食品安全检测已经成为各个食品生产销售环节必须要进行的工作。

为了更好地备战食品安全检测技术考试,我们整理了以下题库,帮助大家深入了解食品安全检测技术。

食品安全检测技术题库1. 食品中常见的微生物有哪些?答:食品中常见的微生物有细菌、霉菌和酵母菌等。

2. 检测食品中细菌的方法有哪些?答:检测食品中细菌的方法有传统培养法、PCR法、酶免疫测定法、质谱法等。

3. 什么是食品中的亚硝酸盐?答:亚硝酸盐是一种常见的食品添加剂,其主要作用是防止食品变质和腐败。

但是亚硝酸盐也有一定的毒性,因此食品添加剂的使用需要严格控制。

4. 什么是食品中的重金属?答:食品中的重金属指的是在环境中存在于土壤、水源等介质中,由植物或动物吸收到体内而导致食品中出现的金属元素。

常见的食品中重金属污染物有铅、汞、镉、铬等。

5. 检测食品中重金属的方法有哪些?答:检测食品中重金属的方法有原子吸收光谱法、电感耦合等离子体质谱法、荧光光谱法等。

6. 食品中添加剂的使用需要严格控制,你知道为什么吗?答:食品中添加剂可能对人体健康造成一定的影响,因此需要对其使用进行严格控制。

常见的食品添加剂有色素、香料、防腐剂等。

7. 食品安全检测的流程是什么?答:食品安全检测的流程一般包括食品样品采集、样品制备、检测和数据处理等几个环节。

8. 食品安全国家标准都有哪些?答:食品安全国家标准包括食品安全标准、食品质量安全标准、食品安全风险评估标准等。

9. 食品安全检测技术在食品行业中的重要性?答:食品安全检测技术是确保食品质量和安全的关键措施。

通过检测食品中的化学物质、微生物和其他污染物,可以及时发现和解决食品安全问题,保障人们的健康与安全。

《食品分析检测》复习资料

《食品分析检测》复习资料

《食品分析检测》复习资料《食品分析检测》复习资料1.食品分析与检测选择分析方法的原则是:首先应选用中华人民共和国国家标准《食品卫生检验方法》理化检验部分所规定的分析方法。

其次根据实验室的条件,尽量采用灵敏度高、选择性好、准确可靠、分析时间短、经济实用、适用范围广的分析方法。

2.食品分析检测的一般程序:样品的采集,样品的制备和保存,样品的预处理,分析检测,数据的分析处理,出具检验报告。

3.采样的原则:①采集的样品必须具有代表性②采样过程中要设法保持原有的理化指标,防止成分逸散或带入杂质。

4.采样的一般程序检验样品采集混合处理、缩分待检食检样原始样品复检样品保留样品5.采样的一般方法随机抽样,按照随机原则从大批物料中抽取部分样品。

代表性取样,用系统抽样法进行采样。

根据样品随空间和时间变化的规律,采集能代表其相应部分地组成和质量的样品。

6.预处理总的原则:消除干扰因素,完整保留被测组分,使被测组分浓缩7.干法灰化的定义及优缺点干法灰化又称灼烧法,是用高温灼烧的方式破坏样品中有机物的方法。

优缺点:有机物分解彻底,操作简单,基本不加或加入很少的试剂,空白值低,但所需时间较长因温度过高易造成某些易挥发元素的损失,坩埚对被测组分有吸留作用,致使测定结果和回收率降低。

8.湿法消化的定义及优缺点湿法消化简称消化,即向样品中加入强氧化剂,并加热煮沸,使样品中的有机物质完全分解、氧化呈气态逸出,待测成分转化为无机物状态存在于消化液中,供测试用。

优缺点:有机物分解速度快,所需时间短;因加热温度较干法低,可减少金属挥发逸散的损失,容器吸留也少。

但在消化过程中,常产生大量有害气体,因此操作过程需在通风橱内进行;消化初期,易产生大量泡沫外溢,故需操作人员随时照管,试剂用量较大,空白值偏高。

9.溶剂提取法:同一溶剂中,不同的物质有不同的溶解度,同一物质在不同溶剂中的溶解度也不同。

利用样品各组分在某一溶剂中溶解度的差异,将各组分完全或部分地分离的方法。

食品分析复习资料.总结

食品分析复习资料.总结

1、采样遵循的原则是(均匀,有代表性,反映全部组成,质量,卫生状况:保持原有的理化指标,防止损坏或带入杂质)。

2、肉制品新鲜度常用检验方法有(爱氏试剂法)、(蛋白质沉淀法)、(过氧化氢酶法)、(pH 值检验法)。

3、采样一般分三个步骤进行,分别得到的样品为(检验样品、原始样品、平均样品)。

4、分析柑橘类果实及其制品时,用(柠檬)酸表示,K=0.064, K是换算为主要酸的系数,即指(ImolNaOH相当于酸的点数)。

5、用工业酒精配制白酒的鉴别主要检测对象是(甲醇)。

6、已知测定蔗糖溶液的糖锤度为35.8oBx,则该糖液的重量百分浓度为(35.8%)。

7、食品分析的方法有哪些(感官分析、化学分析、仪器分析、微生物分析、酶分析法)?8、对于颜色深的食品,测定其酸度的方法有(电位滴定法)。

9、对于含磷脂较多的鱼、贝、肉、蛋等,测定其脂肪含量可采用的方法是(氯仿一甲醇提取法)。

10、测定痕量水分的食品中的水分含量的方法是(卡尔-费休法)。

11、在测定磷酸盐含量比较高的食品的灰分时,为了使灰化完全,可采取的措施有逃化次后加水溶解、加入HNO3、H2O2、(NH4)2CO3使蓬松、加Mg2+ (空白)+PO43)。

12、食品中的总酸度是指(食品中所有酸性成分的总量,包括未离解的酸的浓度和已离解的酸的浓度)。

13、食品感官分析按照应用目的可分为(嗜好型和分析型)按照方法的性质可分为(差别检验、标度和类别检验、分析或描述性检验)。

14、食品分析的一般程序为(样品的采集、制备和保存,样品的预处理,成分分析,分析数据姓理,分析报告的撰写)。

15、快谏测定蛋白质的方法名称有(双缩脲法、紫外分光光度法、水杨酸比色法、染料结合法)。

二、是非题1、测定所有食品中的脂肪含量时都可以用索氏抽提法。

( X )2、在测定冰淇淋膨胀率时,加入乙醚的体积为2.0ml,滴加蒸馏水的体积为22.0ml,则冰淇淋膨胀率为92.3%。

(”)3、测定脂溶性维生素一般在酸性条件下进行前处理。

(完整版)食品检验复习题(21)

(完整版)食品检验复习题(21)

(完整版)食品检验复习题(21)预览说明:预览图片所展示的格式为文档的源格式展示,下载源文件没有水印,内容可编辑和复制食品理化检验复习题(一)一.填空题1.样品的采集分随机抽样和代表性取样两种方法。

采样的程序分为三步即检样、原始样品、平均样品;2.样品预处理总的原则是消除干扰因素和完整保留被测组分;样品预处理目的:测定前排除干扰组分和对样品进行浓缩;样品预处理的方法有有机物破坏法、溶剂提取法、蒸馏法、色层分离法、化学分离法和浓缩法。

测定食品中金属离子,样品处理常用有机物破坏法。

3.有机物破坏法分为干法灰化和湿法灰化。

干法灰化中加入硝酸的目的是加速灰化;湿法消化常用的消化方法有:硝酸–硫酸法和硝酸–高氯酸–硫酸法。

4. 蒸馏法是利用被测物质中各组分挥发性的差异来进行分离的方法。

蒸馏法一般分为常压蒸馏、减压蒸馏、水蒸气蒸馏等三种形式,沸点太高或易分解的物质应采用减压蒸馏。

5.利用混合物中各物质溶解度的不同将混合物组分完全或部分地分离的过程称为萃取(提取)。

6. 色层分离法又叫色谱分离法,可分为离子交换色谱分离、吸附色谱分离、分配色谱分离。

7. 干燥器一般采用硅胶作干燥剂,当它的颜色减退或变红时需干燥后再用。

8.食品理化检验中常用的浓度表示方法有:质量分数(%)、体积分数(%)、质量浓度(g/L)、比例浓度,物质的量浓度(mol/L)、滴定度(g/mL )等。

9. 1%酚酞溶液是称取酚酞1g溶解于100mL 95%乙醇之中。

10. 氢氧化钠可使酚酞变红色。

11.标定NaOH溶液常用邻苯二甲基酸氢钾,指示剂选用酚酞。

12.作回收试验,根据回收率高低,可检验分析方法的准确度。

13.精密度是指多次平行测定结果相互接近的程度。

它的高低可用偏差来衡量。

14.精密称取是指按规定的数值称取,并准确至0.0001 g。

15.测定食品中氯化物含量时,硝酸银是标准溶液。

16.相对密度是指某一温度下物质的质量与同体积某一温度下水的质量之比;测定液体的相对密度的仪器是密度瓶或密度计。

食品质量检验技术复习题参考答案

食品质量检验技术复习题参考答案

一、名词解释1.水溶性灰分:经干法消化后溶于水的灰分。

可溶性的K、Na、Mg等的氧化物和盐类的含量2.水不溶性灰分:经干法消化后不溶于水的灰分。

污染的泥沙和铁、铝等氧化物及碱土金属的碱式磷酸盐的含量3.酸不溶性灰分:经干法消化后不溶于酸的灰分。

污染的泥沙和食品中原来存在的微量氧化硅的含量4.食品的总酸度:试样溶液中离解和未理解酸的浓度之和,不包括碳酸和亚硫酸,采用酸碱滴定的方法测定,以试样中所含主要酸的百分率表示。

6.空白实验:在不加入试样的情况下,按与测定试样相同的条件(包括相同的试剂用量和相同的操作条件)进行试验。

7.有效酸度:试样溶液中酸性物质离解产生氢离子浓度,这是试样真正酸度,采用酸度计测定,以PH值表示。

8.挥发酸:试样中所含挥发性酸性物质的总和,采用水蒸气蒸馏,标准碱溶液滴定,以相当于试样中乙酸的百分率表示。

9.粗脂肪:经前期处理的试样用无水乙醚或石油醚等溶剂回流抽提后,试样中脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物。

又是是饲料、动物组织、动物排泄物中脂溶性物质的总称。

10.还原糖:食品中的葡萄糖、果糖、麦芽糖和乳糖等具有半缩醛基或半缩酮基,这类糖称为还原糖。

11.总糖:食品及物体总所含糖的总量,包括多羟基醛或多羟基酮及它们的缩合物。

12.蛋白质系数:通过含氮量来计算蛋白质含量的的系数。

13.干法灰化:(高温灼烧)以氧为氧化剂,在高温下长时间烧灼使有机物彻底氧化分解,生成CO2和H2O及其它挥发性气体散掉,残留的白色或浅灰色无机物即灰分(盐类或氧化物)供检测。

14.湿法消化:(酸消解)采用强氧化剂(浓硝酸,浓硫酸,高氯酸,过氧化氢,高锰酸钾等)加热消煮,样品中的有机物完全分解,氧化,呈气态逸出,使待测元素呈离子状态存在于溶液中。

15.采样:又叫取样或抽样,指采取样品的过程。

16.平均样品:将原始样品按规定的方法混合均匀,再从这些均匀的原始样品中按规定方法分出一部分,供实验室分析用,这部分样品称平均样品。

食品分析复习整理及习题检测答案

食品分析复习整理及习题检测答案

(一)基础知识、程序1、简述样品采集、制备、保存的总原则?并简述什么叫四分法采样?答:样品采集的原则:所采集的样品要能够代表所要检测食品的性质。

样品制备的原则:制备的样品的各个部分的性质要保持一致。

样品保存的原则:干燥、低温、密封、避光四分法采样:将原始样品充分混合均匀后,堆积在一张干净平整的纸上,用洁净的玻棒充分搅拌均匀后堆成一圆锥形,将锥顶压平成一圆台,使圆台厚度约为3cm;划“+”字等分为四份,取对角2份其余弃去,将剩下2份按上法再行混合,四分取其二,重复操作至剩余量为所需样品量为止。

2、为什么要对样品进行预处理,简述样品预处理所要达到的要求?答:为了使试样中的待测组分处于适当的状态,以适应分析测定方法的需求,必须对食品试样进行预处理。

样品预备处理的要求:①消除干扰因素。

②完整保留被测组分。

③应能使被测定物质达到浓缩。

(二)水分1、试设计测定果汁(鲜橙多)中水分含量的实验方案。

(6分)仪器设备:蒸发皿,常温常压干燥箱,干燥器,电子天平,玻璃棒,海砂。

样品:鲜橙多。

(1)蒸发皿恒重:洗净f 烘干一做标记一加海砂+玻璃棒一105℃烘箱干燥1h -干燥器冷却0.5h -称重一再次干燥0.5h -冷却称重f重复以上操作直至相邻两次质量差不超过2mgf记录质量m1。

(2)样品预处理:准确称量10-15g(M)果汁于已烘干至恒重的蒸发皿内,置于沸水浴上不断搅拌,蒸发至近干,擦去皿底的水滴;(3)移入干燥箱中105c干燥至恒重,记录质量m2。

(4)计算,根据下列公式计算该试样中水分含量,结果保留三位有效数字。

X = M一(m2—W * 100(g/100g)M2.采用常压干燥法测定样品中的水分,样品应当符合的条件?(6分)1)水分是样品中唯一的挥发物质,不含或含其它挥发性成分极微。

2)水分可以较彻底地被去除,即含胶态物质、含结合水量少。

因为常压很难把结合水除去,只能用真空干燥除去结合水。

3)在加热过程中,样品中的其它组分由于发生化学反应而引起的重量变化可以忽略不计,对热稳定的食品。

食品质量检验技术复习题参考答案

食品质量检验技术复习题参考答案

⾷品质量检验技术复习题参考答案⼀、名词解释1.⽔溶性灰分:经⼲法消化后溶于⽔的灰分。

可溶性的K、Na、Mg等的氧化物和盐类的含量2.⽔不溶性灰分:经⼲法消化后不溶于⽔的灰分。

污染的泥沙和铁、铝等氧化物及碱⼟⾦属的碱式磷酸盐的含量3.酸不溶性灰分:经⼲法消化后不溶于酸的灰分。

污染的泥沙和⾷品中原来存在的微量氧化硅的含量4.⾷品的总酸度:试样溶液中离解和未理解酸的浓度之和,不包括碳酸和亚硫酸,采⽤酸碱滴定的⽅法测定,以试样中所含主要酸的百分率表⽰。

6.空⽩实验:在不加⼊试样的情况下,按与测定试样相同的条件(包括相同的试剂⽤量和相同的操作条件)进⾏试验。

7.有效酸度:试样溶液中酸性物质离解产⽣氢离⼦浓度,这是试样真正酸度,采⽤酸度计测定,以PH值表⽰。

8.挥发酸:试样中所含挥发性酸性物质的总和,采⽤⽔蒸⽓蒸馏,标准碱溶液滴定,以相当于试样中⼄酸的百分率表⽰。

9.粗脂肪:经前期处理的试样⽤⽆⽔⼄醚或⽯油醚等溶剂回流抽提后,试样中脂肪进⼊溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物。

⼜是是饲料、动物组织、动物排泄物中脂溶性物质的总称。

10.还原糖:⾷品中的葡萄糖、果糖、麦芽糖和乳糖等具有半缩醛基或半缩酮基,这类糖称为还原糖。

11.总糖:⾷品及物体总所含糖的总量,包括多羟基醛或多羟基酮及它们的缩合物。

12.蛋⽩质系数:通过含氮量来计算蛋⽩质含量的的系数。

13.⼲法灰化:(⾼温灼烧)以氧为氧化剂,在⾼温下长时间烧灼使有机物彻底氧化分解,⽣成CO2和H2O及其它挥发性⽓体散掉,残留的⽩⾊或浅灰⾊⽆机物即灰分(盐类或氧化物)供检测。

14.湿法消化:(酸消解)采⽤强氧化剂(浓硝酸,浓硫酸,⾼氯酸,过氧化氢,⾼锰酸钾等)加热消煮,样品中的有机物完全分解,氧化,呈⽓态逸出,使待测元素呈离⼦状态存在于溶液中。

15.采样:⼜叫取样或抽样,指采取样品的过程。

16.平均样品:将原始样品按规定的⽅法混合均匀,再从这些均匀的原始样品中按规定⽅法分出⼀部分,供实验室分析⽤,这部分样品称平均样品。

食品生物技术复习题(完整问题详解版)

食品生物技术复习题(完整问题详解版)

一基因工程与食品(一)名词解释1.基因工程:是指将目的基因通过体外重组后导入受体细胞,使这个基因能在受体细胞复制、转录、翻译表达的技术。

2.限制酶:是一类能够识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列并由此切割DNA 双链结构的核酸切酶。

3.DNA连接酶:是一种能在ATP或NAD+存在下催化双链DNA片段紧靠在一起的3’羟基末端与5’磷酸基团末端之间形成磷酸二酯键,使两末端连接起来的酶。

4.DNA聚合酶:能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶,可在其催化下进行DNA体外合成反应 DNA修饰酶:这类酶能对DNA分子进行一些比如3’末端加dNTP或5’末端添加/脱除磷酸基团等等的修饰T4噬菌体多核苷酸激酶:是一种能催化γ-磷酸从ATP分子转移给DNA或RNA分子的5’-OH末端的酶,它对底物分子长度没有限制。

5.碱性磷酸酶:这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端6.启动子:是指一段能被宿主RNA聚合酶特异性识别和结合并指导目的基因转录的DNA序列,是基因表达调控的重要元件。

8.终止子:是指一段终止RNA聚合酶转录的DNA序列,分为本征终止子和依赖终止信号的终止子。

11.克隆载体:是指能在细胞进行自我复制的外源基因运载体,如细菌质粒、λ噬菌体、M13噬菌体及粘粒等。

12.质粒:是一些存在于微生物细胞染色体外的小型闭合环状双链DNA分子,是能够进行独立复制并保持恒定遗传的复制子。

13.穿梭质粒:是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记,因而可在两种不同的寄主细胞中存活和复制,并可以携带外源DNA在不同物种的细胞间往返穿梭的质粒载体。

14.粘粒载体:是一类人工构建的含有λDNA粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。

15.噬菌粒:是指质粒载体与M13噬菌体的基因间隔区重组而成的噬菌体载体,同时具有二者的复制起点。

16.感受态细胞:是指具有能够接受外源DNA的生理状态的受体细胞,一般处于对数生长期后期,时间短暂,但经氯化钙等处理可使细胞进入这一状态。

《食品分析与检测技术》期末考试复习题及参考答案

《食品分析与检测技术》期末考试复习题及参考答案

食品分析与检测技术复习题(课程代码392183)一、名词解释1、采样:从大量的分析对象中抽取有一定代表性的一部分样品作为分析材料,这项工作叫采样。

2、原始样品:把许多份检样综合在一起称为原始样品。

3、检样:由整批食物的各个部分采取的少量样品,称为检样。

4、平均样品:原始样品经过处理再抽取其中一部分作检验用者称为平均样品。

5、样品的制备:指对样品的粉碎、混匀、缩分等过程。

6、误差:测定值与真实值之差。

7、系统误差:由固定原因造成的误差,在测定过程中按一定的规律重复出现,一般具有单向性,即测定值总是偏高或总是偏低。

它一般可以分为:仪器误差、方法误差、试剂误差和操作误差等。

8、偶然误差:由于一些偶然的外因所引起的误差。

产生偶然误差的原因一般是不固定的、未知的、且大小不一,具有不确定性。

可能由于环境的偶然波动或仪器的性能、分析人员的操作不一致所产生的。

9、灵敏度:分析方法所能检测到的最低限量。

10、绝对偏差:单次测定与平均值的差值。

11、相对偏差:绝对偏差在平均值中所占的百分率。

12、平均偏差:单次测量值与平均值的偏差之和,除以测定次数。

13、相对平均偏差:平均偏差在平均值中所占的百分率。

14、绝对误差:测量值与真实值之差。

15、相对误差:绝对误差在真实值中所占的百分率。

16、食品感官分析:利用人体五种感官的刺激反应即感觉,如味觉、嗅觉、视觉、听觉和触觉等,用符号或文字作实验记录的数据,对食品的各项指标,如色、香、味、形等作出评判,后对实验结果经统计分析得到结论的方法。

17、感觉:感觉就是客观事物的各种特征和属性通过刺激人的不同感觉器官引起兴奋,经神经传导反映到大脑皮层的神经中枢,从而产生的反应。

18、感觉的敏感性:是指人的感觉器官对刺激的感觉、识别和分析能力。

19、感觉阈:对所能接受范围的上下限和对该范围内最微小变化感觉的灵敏程度。

20、绝对阈:刚刚能引起感觉的最小刺激量和刚刚导致感觉消失的最大刺激量。

食品生物检测技术总复习

食品生物检测技术总复习
四、题型:填空题(20分)、名词解释(10分)、选择题(30分)、判断改错题(15分)、简答(15分)、论述分析题(10分)
表食品微生物检测部分内容总结举例参见下页
食品微生物检测部分内容总结举例
检测项目
定义
分类
培养特性
检测程序
所选用培养基及作用
致病性/生物学意义
其他
菌落总数
【按最新国标】
食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
2.可作为肠道致病菌污染食品的指示菌,通过检测有利于控制肠道传染病的发生和流行。
3.有利于控制食品在生产加工、运输、保存等过程中的卫生状况。
沙门氏菌
六个亚属3个群…….
伤寒/急性胃肠炎,潜伏期6~12h,死亡率0.5%
志贺氏菌
4个群……
GN增菌液
……
急慢性痢疾
金黄色葡萄球菌
化脓病/恶心、呕吐、腹泻
溶血性链球菌
食品生物检测技术总复习
一、书上习题
1.p194 6、7、8、补充12.常见的血清学试验方法有哪些?(以玻片法详细说明凝集反应试验的做法和原理。)13.什么是凝集反应、沉淀反应?
2.p236 1、2、3、4、5、7、9补充检验程序12.食品微生物检验的一般步骤是什么?
二、每节课上课时的笔记
三、教案上的练习题
平板计数法
平板计数琼脂培养基
1.判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。
2.预测食品存用的期限长短。
3.了解细菌在食品中的繁殖动态。
大肠杆菌
在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
①大肠埃希氏菌发属

食品检验与分析考试资料

食品检验与分析考试资料

一、名解1、酸价:中和1g游离脂肪酸所需要的KOH的物质的mg数,反应油脂酸败的指标。

2、过氧化值POV:一千克油脂中所含氢过氧化物的毫摩尔数。

3、挥发性盐基氮TVBN:动物性食品在没和细菌的作用下,将蛋白质分解成氨和胺类,含有碱性含氮物质,具有挥发性和特异性臭味。

4、灰分:食品经高温(500-600度)灼烧后所残留的物质,代表无机物和矿物质的含量。

5、保留时间:相同条件,相同时间,某物质从进样至出峰的时间称为保留时间。

二、误差:1、什么是误差?:表示测定值与真值的差异或精确测量的变量4、相关系数r:衡量两个变量之间的相关程度。

[-1,1] r=0时,完全不相关,r*r=1时完全相关。

三、样品的采集与前处理:1、采样——为了进行检验而从大量物料中抽取的一定数量具有代表性的样品。

3、测有机物的方法:蒸馏法或萃取法(所选用的萃取剂必须与提取组分互溶而与溶液中原溶剂不溶)四、三大营养素的检测1、蛋白质——微量凯式定氮法:①原理:蛋白质在强热和浓硫酸的作用下,可被消化分解生成硫酸铵。

在凯氏蒸馏器中,硫酸铵与碱作用,通过蒸馏将氨放出,收集于硼酸溶液中,用已知浓度的HCL溶液滴定。

根据HCL消耗量计算出氨的含量,再乘上蛋白质系数即可得蛋白质含量。

计算公式:蛋白质含量=消耗盐酸量*换算系数=(V1—V2)*C(HCL)*0.014*F*100/m*0.1F——氮换算为蛋白质的系数,取6.25;0.014——1molHCL标准液相当的氮含量②整个过程分三步:消化、蒸馏、吸收与滴定.2、脂肪——索氏提取法:常用有机溶剂油乙醚、石油醚、氯仿—甲醇混合溶剂等。

①乙醚作溶剂时提取的是粗脂肪,还含有水溶性的物质,所以实用时必须采用无水乙醚作提取剂,并要求样品无水分。

②乳制品中的脂肪只能用碱性乙醚法。

原理:利用NH3—乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜,使非脂成分溶解于NH3—乙醇溶液中,而脂肪游离出来,再用乙醚—石油醚提取出脂肪,蒸馏去除溶剂后,残留物即为乳脂肪。

食品检验技术复习题1

食品检验技术复习题1

食品检验技术复习资料一、名词解释1.相同的属性:1是指食品在通过调查了解和仔细观察后,确认它们在性质、特征、经历、外观等方面,都有共同之处,它们是完全同质的。

2.干灰化法:1是将样品置坩埚中,小火炭化(除去水分、黑烟)后,再以500-600℃高温灰化至无黑色炭粒。

3.食品的营养成分:2食品的营养成分,是指天然食品或加工食品中所含对人体健康有营养意义的成分。

主要的营养成分有:蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、无机盐(包括微量元素)和水,共六大类。

4.过氧化值:5过氧化值是100g油脂相当碘的克数。

5.化学性食物中毒:6化学性食物中毒,主要指一些有毒的化学物质随食物进入机体后,引起的急性中毒。

6.样品的无机化处理:1破坏样品有机物质的操作,称为样品的无机化处理,或有机质破坏,或有机质破坏,主要分为湿消化和干灰化两类。

7.比移值:1薄层经显色后,斑点中心至原点的距离和溶剂前沿距离原点的距离的比值,称为比移值,即R f值。

8.触酶试验:7有些细菌如葡萄糖球菌等具有触酶,能催化过氧化氢放出初生态氧,继而形成氧分子出现气泡。

9.酸价:5酸价是指中和1g油脂所消耗氢氧化钾的毫克数。

10.细菌性食物中毒:6由细菌或细菌毒素污染的食品所致的食物中毒。

11.大肠菌群:7大肠菌群系指一群在37℃、24h能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

(该菌主要来源于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,具有广泛的卫生学意义)12.靛基质(吲哚)试验:7某些细菌,如大肠杆菌、变形杆菌等,能分解培养基内蛋白胨中的色氨酸,产生靛基质(吲哚),再与试剂对二甲基氨基苯甲醛作用后,形成红色的化合物——玫瑰靛基质。

13.食品添加剂:3是指食品在生产、加工、保藏等过程中所加入的天然物质或化学合成物质。

食品添加剂一般无营养价值,只是具有防止食品腐败变质、增强食品感官性状或提高食品质量的作用。

14.最低检出量:4?最低检出量是指在测定的条件下,黄曲霉毒素B1在薄层板上能被观察到荧光点的最低量。

食品生物技术复习题(完整问题详解版)

食品生物技术复习题(完整问题详解版)

一基因工程与食品(一)名词解释1.基因工程:是指将目的基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的技术。

2.限制酶:是一类能够识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列并由此切割DNA 双链结构的核酸内切酶。

3.DNA连接酶:是一种能在ATP或NAD+存在下催化双链DNA片段紧靠在一起的3’羟基末端与5’磷酸基团末端之间形成磷酸二酯键,使两末端连接起来的酶。

4.DNA聚合酶:能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶,可在其催化下进展DNA体外合成反响 DNA修饰酶:这类酶能对DNA分子进展一些比如3’末端加dNTP或5’末端添加/脱除磷酸基团等等的修饰T4噬菌体多核苷酸激酶:是一种能催化γ-磷酸从ATP分子转移给DNA或RNA分子的5’-OH末端的酶,它对底物分子长度没有限制。

5.碱性磷酸酶:这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端6.启动子:是指一段能被宿主RNA聚合酶特异性识别和结合并指导目的基因转录的DNA序列,是基因表达调控的重要元件。

8.终止子:是指一段终止RNA聚合酶转录的DNA序列,分为本征终止子和依赖终止信号的终止子。

11.克隆载体:是指能在细胞内进展自我复制的外源基因运载体,如细菌质粒、λ噬菌体、M13噬菌体与粘粒等。

12.质粒:是一些存在于微生物细胞染色体外的小型闭合环状双链DNA分子,是能够进展独立复制并保持恒定遗传的复制子。

13.穿梭质粒:是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记,因而可在两种不同的寄主细胞中存活和复制,并可以携带外源DNA在不同物种的细胞间往返穿梭的质粒载体。

14.粘粒载体:是一类人工构建的含有λDNA粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。

15.噬菌粒:是指质粒载体与M13噬菌体的基因间隔区重组而成的噬菌体载体,同时具有二者的复制起点。

16.感受态细胞:是指具有能够承受外源DNA的生理状态的受体细胞,一般处于对数生长期后期,时间短暂,但经氯化钙等处理可使细胞进入这一状态。

食品质量检验技术复习提纲

食品质量检验技术复习提纲

食品质量检验技术复习提纲一、绪论食品质量检验技术的涵义及食品检验的内容、食品检验的一般方法有哪些?二、样品采集和预处理1.熟悉食品检验的一般过程(程序)2.什么是检样、原始样品、平均样品;以散粒状食品为例,掌握正确采样的要求、步骤及注意事项。

3.了解样品制备的目的、样品保存的原则及方法4.什么是机物破坏法?掌握有机物破坏法适用的范围、原理、方法步骤及各方法(干法消化、湿法消化)的优缺点。

5.样品预处理的目的是什么?6.样品预处理中磺化法、皂化法、掩蔽法、色谱分离法有何作用?三、食品分析检验的一般方法及主要物理常数的测定1.熟悉食品分析检验方法分类依据及分类2.掌握比重、真比重、视比重的概念及比重瓶法测量液态食品的原理和操作方法。

3.了解折光率、旋光度、比旋度的概念及其与食品物理常数测定的意义。

四、食品中一般成分的检验1.了解食品中水的存在形式、特点。

2.掌握重量法测定水分的原理、主要设备、操作方法步骤及测定水分的意义3.掌握总灰分、水溶性灰分、算不溶性灰分的概念,熟悉灰分测定的意义。

4.掌握重量法测定灰分的原理、设备及操作步骤。

5.掌握总酸、有效酸度、外表酸度、真实酸度的概念,掌握滴定法测定总算的原理及操作方法6.熟悉索氏法测定脂肪的原理、设备及操作;掌握巴布科克氏测定支付的原理及方法。

7.液体食品如何用索氏法测定脂肪?请你设计试验方案,采用索氏法测定牛乳中粗脂肪含量。

8.什么是分光光度技术?分光光度法分哪几种具体方法?掌握分光光度法的工作原理、仪器使用方法及步骤9.蛋白质测定有哪些方法?各方法有何特点?10.微量凯氏法测定蛋白质消化时,消化时间如何确定?11.熟悉柱前衍生高效液相色谱法测定氨基酸的原理、步骤。

酸水解柱前衍生高效液相色谱法测定氨基酸为何Glu、Asp两种氨基酸丰度最高?。

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食品分子检测技术名词(10分)、填空(20)、选择(10分)、判断(10分)、简答(35分)、简述(15)前两章包括填空和简答,如职能、基本原则重点后几章PCR重点图+原理生物芯片制备分析过程核酸探针为重点食品检测的必要性:重要性、商品贸易重要工具、反映国家检测水平、消费者知情权、质量平衡与保证、特殊物质鉴定、打假。

中药检测(指纹图谱技术):样品经过适量处理后,采用一定的分析手段,如光谱或色谱能得到指示该样品特性的色谱光谱的谱图或图像。

指纹图谱技术:1、光谱指纹图谱:uv(紫外)、IR(红外)、MS(直谱)、NMR(核磁共振)2、色谱:GC(气相)、HPLC(高压液相)、TLC(骨髓)、HPCE(毛细管)、X射线衍射3、DNA:DNA表达产物(Pr、蛋白印迹)、DNA水平(PCR、免疫、基因芯片、探针)。

食品检测的目的:判定食品的原辅料、半成品及制成品的质量合格与否,证实原辅料、半成品、制成品的符合性,进行食品质量安全评定,考核食品质量,获取食品质量安全信息,仲裁食品质量纠纷。

食品检测的职能:把关、鉴别、报告、预防等职能。

食品检测的内容(工作程序):1、熟悉与掌握规定要求:一些相应的基本规定—规定具体化,知道是否合格。

2、检测:按规定方法采用相应仪器、试剂、度量工具、按程序定性定量检查,并记录相关数据。

3、比较:将检测所得结果与规定要求相比较,比较一项或多项检测指标是否符合规定要求。

4、判定:根据比较结果,判定产品是否为合格品。

5、处理:(个体)单件处理—合格,即时转入下一程序;不合格—据要求相关程度决定返工、回收、报废;批量—发现不合格—>拒收、筛选、复检,对不合格品应填写返修单、回用单、废品单。

良好的实验室操作规范:“非临床安全性研究管理规范”—美国、良好实验室操作规范—GLP。

GLP内容:1、实验设施:用于检测用的仪器设施,存放、试剂配制,操作处理点,清洗设施。

2、人员管理:a\总要求:具备GLP意识,了解和熟悉GLP的基本内容,全面掌握并严格执行GLP的要求,具有相应的专业和文化程度,严谨的科学作风和职业道德,高度的责任感;b\人员构成:(a)负责人~具备较丰富实际操作经验、管理能力,负责实验设计、修改、整个过程操作,确保实验实施,保证实验过程按GLP规章制度进行,若有违GLP的应先在第三者处理违反GLP的事情,对可能出现问题预见、批判、对策。

(b)、实验人员专业技术、文化水平、职业道德、严格执行GLP 。

(c)、监督人员:对所监督实验过程难点,易错点、仪器、实验人员是否达到GLP要求,发现问题、公平、公正、直接汇报负责人。

3、标准操作:仪器设备,微生物,标准操作规程,不应太严格、太专业,也不能太松。

4、监督体制。

检测技术基本原则:质量原则、安全原则、快速原则、可操作原则、经济原则。

检验技术操作的一般要求:1、名词、单位符合国家规定的标准要求。

2、试剂均要分析纯3、称量、剂量器具,符合规定并定期进行校准4、称量的精确度用有效数字表示5、检验:做空白试验、平行试验6、检验方法的选择,参照GB 7、采样必要注意样品的生产日期、批号、代表性和均匀性。

8、一般样品在检验结束后应保留一个月,以备复检。

原始样本:根据待检食品的性质,按相应规则从待检食品的各个部位采集少量的小样,混合在一起,就是该批食品的原始样本。

平均样本:将原始样本混合均匀,按4分法,平均的分出一部分作为全面检验用的样本。

(包括:试验样本、复检样本、保留样本)试验样本:由平均样本分出用于全部项目检验的样本。

复检样本:检验后有分歧,需要重新检验的样本。

保留样本:保存一定时间、封存、以备不时之需。

采样的原则:代表性原则,典型性原则,适时性原则,适量性原则,程序原则。

采样的方法:1、散装食品~先表面观察,搅拌均匀,取样。

2、包装的~分三个部分:抽样、混匀—>大包装;小包装—>对同批采样。

3、食具:滤纸,5cm2/km2生理盐水沾湿贴在内壁,放生理盐水、检测水。

微生物学无菌操作方法:1、试剂和用具的灭菌:吸管、长柄勺、匙—>纸、布包起,高压灭菌;采样瓶;刀,镊子—>火焰灼烧;灭菌后妥善保管。

2、无菌操作步骤:样本、器具紫外照射,75%酒精擦手,带胶囊的,用酒精涂擦瓶;用灭菌后的匙取样。

迅速放入无菌采样瓶,密封。

3、注意事项:尽量从未开封的包装内取样;预先包好消毒的采样工具和容器,必须在采样时方可打开所包的纸和布;采样时最好两人操作,一个负责取样,另一人协助打开采样瓶,包装和封口;为了查明某一工序的卫生状况,可在这一工序处理前和处理后各取一份样本作对照;检查微生物和样本要在采样后4h内送至检验室。

现场采样记录的内容:被采样单位;样品名称;采样地点、样本产地、商标数量、生产日期、批号、样本状态;被采样的数量、包装类型、及规格;感官所见、卫生条件;采样方式;采样目的;采样现场的环境、条件;采样机构、盖章、采样人签字;采样日期;被采样单位负责人签字。

样本制备的一般方法:烟—粉碎;肉—绞肉机搅碎;罐头—汁+固体;蛋类—清、黄混匀;水果、蔬菜—清洗、沥干、中轴线切开取一半。

样本前处理:粉碎;提取;净化、萃取、层析;浓缩,Pr 冻干/透析—>浓缩实验设计:文献检索;确定样本处理方法;检测方法的确定;分析方法的评价。

数据处理:1、检验结果的表示:a、常量检验结果:毫克百分含量—mg/100g、百分含量—g/100g、千分含量—g/kg。

b、微量或痕量表示:百万分含量—mg/kg、十亿分含量—ug/kg、万亿分含量—ng/kg。

2、检验结果的误差:系统误差—仪器、试剂、方法、主观,随即误差—不可避免。

3、检验结果的评价:a、准确度:测定值与真实值的符合程度,决定检验结果的可靠程度。

b、精确度:在相同条件下,进行多次测定,每次测定结果相互接近的程度,表示了各次测定值与平均值的偏离程度,由偶然误差决定c、准确度与精确度之间的关系,准确度高。

精确度必须高,但精确度高,准确度不一定高。

4、检验结果的数据处理:a、数据处理的基本原则:记录结果的数据只保留一位估计值b、可疑数据可根据四舍六入奇进偶舍原则c、数据相加减结果保留到小数点后,最少位数d、平均值,若有4个或4个以上数据,平均值增加一个有效数字e、常数,稀释1/2.1/3时,需几个有效数字,就取几个f、表示准确度、精确度时,保留2位有效数字。

5、提高检测结果准确度的方法:选择合适的分析方法,仪器、计量器具的校正,增加测定次数,做对照试验,做回收试验。

6、试剂按纯度分级:优级纯—标签颜色为绿—标识GR,分析纯—红—AR,化学纯—蓝—CP。

PCR反应原理:1、变性:解链2、退火:引物与模板结合3、延伸:DNA聚合E5’—3’引物,加hNTP与引物连接,与模板结合,并不断延伸。

PCR反应的特点:1、特异性强:影响因素:引物与模板的特异性结合、TapDNA聚合E保真性2、灵敏度高:引物易与模板识别结合,所需模板少3、简单快捷4、对标本的纯度要求低。

引物:与待扩增的靶DNA两端序列互补的人工合成的核苷酸短片断。

基因长度:1kbp—理想、1~2kbp—有效的、3kbp—无法完成。

引物设计原则:1、长度有限:一般—15~30bp,最佳:18—24bp,不能超过38bp.2、碱基随机分布:GC含量45~65%—允许的,最好45~55%。

3、引物本身不允许形成二级结构4、引物之间,不允许形成引物二聚体5、引物的3’端,引端最后一个为A,错配纪几率大,T 最小,GC含量不超过4个,最后一位最好为T。

6、引物的5’端,允许出现错配,可在5’端进行碱基的改变,可引入限制性内切酶的切位点。

7、避开简并位点:引物3’最后最好落在密码子第一或第二个碱基上。

PCR反应体系组成:模板、引物、dNTP、DNA聚合酶、缓冲液、Mg2+、反应促进剂。

纯化过程—>得到纯净DNA:破壁,EDTA存在下用碱性SDS;除Pr用酚—氯仿;除RNA,用RNA降解酶;乙醇沉淀。

PCR反应的循环参数:1、变性的时间和温度:最常见94℃,0、5~1、5min,预变性94℃,5~10min。

2、引物的退火,55~72℃0、5~1min。

3、延伸,最常用72℃,2000bp—>1、5min 即可,0、5~2min.4、循环数,20~35个循环,25~30个时—>平台期。

标准的反应体系(100ul):1、10×buffer 10ul 。

2、dNTP 200u mol/l 。

3、引物10~100Pmol。

4、模板DNA 0、1~2ug。

5、Mg2+1、5 nmol/l。

6、加水100ul.7、DNA聚合E 25u。

标准PCR循环设置:1、预变性5~10min 94℃。

2、变性0、5~1、5min 94℃。

3、退火0、5~15min 55℃~72℃。

4、延伸0、5~2min 72℃。

5、终延伸5~10min 72℃.6、1~99h 4℃.琼脂糖凝胶电泳~原理:在PH8、0~8、3时,磷酸发生解离,带负电;在电场力作用下,在电泳池向正极移动,采用适当凝胶介质,在分子筛的作用下,使分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大差异,分子量大的可受阻力大,在凝胶孔隙中泳动速度慢,分子量小的快,从而达到分离核酸片段的目的,核酸分子嵌入荧光染料后,在紫外灯下可观察到核酸片段所在的位置。

荧光染料:溴化乙锭(EB)—橙黄色。

迁移率影响因素:1、DNA分子量的大小~分子量的对数和泳动率流速成正比。

2、琼脂糖的浓度~浓度和泳动率流速成反比。

3、DNA分子的构象~超螺旋最快开环最慢线性居中。

4、电源电压~在低压下,电泳速度与电压成正比5、嵌入染料的存在:EB 改变速度最高15%。

6、离子浓度的影响常用电泳缓冲液~TAE TBE TPE。

PCR 技术的发展:1、巢氏PCR:模板量很低用来提高特异性,扩大产量,两对引物(外部~提高特异性、增大模板量,内部~2次扩增)2、逆转录PCR :真核生物DNA含有内含子;引物~随机引物、6~8bp,oligo d(T),自己设计的特异性引物。

3、多变PCR:检测距离较远的多个特异性DNA序列合成多对引物。

4、不对称PCR:合成特异长度的单链,其中一个引物量多,另一个量少。

5、反向PCR:扩增已知序列两侧位置序列。

6、增效PCR:用于模板量很低,低浓度引物,高浓度引物。

7、错定PCR:只知某一端的碱基序列。

步骤:提取RNA或mRNA,进行RT—PCR得到CDNA,使用DNA,与3’端的已知特异引物与5’端的含G引物进行PCR扩增。

PCR技术在微生物检测中的应用:富集培养,6~7d;李斯特氏菌,溶血基因12h;金黄色葡萄球菌。

PCR在转基因食品检测中的应用:启动子、目的基因、终止子。

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