试管法ABO血型鉴定

试管法ABO血型鉴定
1.检验目的
鉴定供受血者ABO血型,保证临床输血安全;
2．检验方法
试管法
.试管法
2.1.1.实验原理
ABO血型鉴定,是根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理,用已知IgM类特异性标准抗A和抗B血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或和B抗原,同时用已知标准A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的天然IgM类抗A或和抗B;
2.1.2.标本要求
静脉EDTA抗凝血～,以3000r/min离心3分钟,分离上清液;
2.1.
3.试剂
单克隆或多克隆抗A、抗B试剂,3-5% A、B及O型试剂标准红细胞悬液;
2.1.4.器材
离心机,4℃冰箱、显微镜,12×70mm试管以下称“小试管”,滴管,10mm×60mm透明的玻璃试管或塑料试管;
2.1.5.操作步骤
2.1.5．1．正定型查抗原：取试管2支,分别标明抗A、抗B,加入抗A和抗B分型血
清各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混匀;
2.1.5．2. 反定型查抗体：取试管3支,分别标明A型、B型和O型细胞;用滴管分
别加入受检者血清2滴于试管底部,再分别以滴管加入A、B、O型5%试剂红细胞悬液1滴,混匀;
2.1.5．
3.立即以3000r/min离心10秒;离心时间为离心机校准时间;
2.1.5．4.轻轻摇动试管,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集或溶血现
象,如肉眼观察不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜下观察有无凝集;
2.1.5．5.凝集强度判断标准
＋＋＋＋：红细胞凝集成一大片或几片,仅有少数单个游离红细胞,血清清晰透明;
＋＋＋：红细胞凝集成数个大颗粒凝块,有少数单个游离红细胞,血清透明;
＋＋：红细胞凝成数个小颗粒凝块,游离红细胞＜1/2;
＋：红细胞凝成数个小颗粒凝块,游离红细胞＞1/2;
±：红细胞凝成数个微小颗粒凝块,周围有很多游离红细胞;
MF：混合凝集外观mixed field,MF,镜下可见少数红细胞凝集,而绝大多数红细胞呈分散分布;
－：阴性,镜下未见红细胞凝集,红细胞均匀分布;
HP：部分溶血part hemolysis,HP,有些残留红细胞;
H：完全溶血hemolysis,H,无残留红细胞;
2.1.5.6.报告受检者红细胞ABO血型表1001-1;
表1001-1 ABO血型鉴定结果判断
受检者血清＋试剂红细胞
分型血清＋受检者红细胞
受检者血型
抗A 抗B A细胞B细胞O细胞＋－ A －＋－－＋ B ＋－－－－O ＋＋－＋＋AB －－－注：＋为凝集；－为不凝集。