挥发油成分的提取和鉴别

挥发油成分的提取和鉴别

一、实验目的

1．掌握水蒸汽蒸馏法从中药材中提取挥发油的原理和操作技术；

2．熟悉陈皮、丁香药材中挥发油的化学组成和一般鉴别方法；

3．熟悉挥发油的单向二次薄层层析方法。

二、仪器与试药

（一）仪器

挥发油提取器电热套玻璃仪器气流烘干器

电热恒温干燥箱圆底烧瓶（500mL）移液管（10mL、5mL）

（二）试药

陈皮丁香三氯化铁氨性硝酸银 2,4-二硝基苯肼

碱性高锰酸钾陈皮油和丁香油对照品茴香醛浓硫酸

石油醚（60-90℃）乙酸乙酯硅胶 CMC-Na

三、主要成分的结构与性质

1．陈皮：为芸香科植物橘Citrus reticulata Bianco的果皮。性温，味苦、辛。能理气健脾，燥湿化痰。用于胸脘胀满、食少吐泻、咳嗽多痰。橘的栽培变种的果皮亦作陈皮入药；其未成熟果实的外层果皮亦入药，药材称为青皮，能疏肝破气、消积化滞。化学成分含橙皮苷（hesperidin）、川陈皮素（nobiletin）、柠檬烯、a-蒎烯、B-蒎烯、B-水芹烯（B-phellandrene）等。含挥发油2%以上，油中主成分为柠檬烯，含少量邻氨基苯甲酸甲酯、芳樟醇和川陈皮素

陈皮油外观：淡黄色液体，气味独特的陈皮香气，比重0.8381-0.8431。

2．丁香：为桃金娘科植物丁香Eugenia caryophllata Thunb.的干燥花蕾，又名丁子香，支解香、雄丁香。辛，温。入胃、脾、肾经。能温中，暖肾，降逆。治呃逆，呕吐，反胃，泻痢，心腹冷痛，痃癖，疝气，癣疾。花蕾含挥发油即丁香油。《中国药典》规定含挥发油不得少于16%，油中主要为丁香油酚(Eugenol)、乙酰丁香油酚(Acetyleugenol)及少量α-与β-丁香烯(Caryo- phyllene)；其次为葎草烯(Humulene)、胡椒酚(Chavicol)、α-衣兰烯(α-Ylangene)，其中丁香油酚约占总挥发油的64-85%。花蕾中尚含有4种黄酮衍生物，皆为黄酮甙元，其中两种为鼠李素(Rhamnetin)及山萘酚(Kaempferol)；另有齐墩果酸(Oleanolic acid)、番樱桃素、番樱桃素亭(Eugenitin)、异番樱桃素亭(Isoeugenitin)等。

丁香油外观：淡黄或澄明油状物，有丁香的特殊香气，置空气中或贮存日久，则渐浓厚而色变棕黄，不溶于水，易溶于醇、醚，比重为1.038-1.060。

柠檬烯 丁香油酚 橙皮苷

四、实验原理：

1．提取：利用挥发油具有挥发性，可随水蒸汽同时蒸出来的性质，进行提取。油水易分层者，可直接分出油层；油水不易分层者，可用盐析或用低沸点有机溶剂进行萃取得到挥发油；

2．鉴别：挥发油所含成分复杂，为一混合物。利用挥发油中各种成分具有的特征官能团，用各种特性反应试剂进行化学检识和层析薄层鉴别；

3．单项二次层析：不含氧烃、萜、烯类极性小于含氧的烃、萜、烯类，单用石油醚（60-90℃）进行层析，则极性大的成分不易展开，再用石油醚与乙酸乙酯的混合溶剂进行层析，则极性小的成分与极性大的成分则能较好的展开。 五、实验内容： （一）提取

1．丁香的提取：取丁香三份，每份20g ，分别放入挥发油提取装置的圆底烧瓶中，分别加入下表2中的水量，浸泡30分钟，直火加热共水蒸馏1.5小时，记录挥发油提出量及挥发油颜色，小心分出油层，将油装在小烧瓶中，备用。

2．陈皮的提取：取陈皮三份，每份100g ，分别放入挥发油提取装置的圆底烧瓶中，分别加入下表3中的水量，浸泡30分钟，直火加热共水蒸馏1.5小时，记录挥发油提出量及挥发油颜色，小心分出油层，将油装在小烧瓶中，备用。

注：（1）正确操作挥发油提取装置；

（2）油水不易分离时，可采用盐析或低沸点有机溶剂（乙醚、石油醚等）萃取等方法分离挥发油；

OH

O

O

OH

OH

O

rha-glu

（3）挥发油提取过程中，加水量和温度对实验结果的影响较大。

（二）鉴别

1．薄层点滴检识：

取适量挥发油样品加5-10倍量无水乙醇溶解，分别加入下述（1）-（5）项试剂，观察并记录实验结果于表4。

（1）三氯化铁：检查酚性成分；

（2）氨性硝酸银：检查醛基；

（3）2,4-二硝基苯肼：检查醛基、酮基；

（4）碱性高锰酸钾：检查不饱和化合物；

（5）香草醛-浓硫酸：105℃烘烤10分钟，挥发油中各成分显不同的颜色。

2．薄层鉴定——单向二次层析

吸附剂：青岛硅胶G以0.4%CMC-Na水液制板，105℃活化1小时。

展开剂：（1）石油醚（60-90℃）

（2）石油醚-醋酸乙酯(85:15)

样品：自制丁香油醇液，自制陈皮油醇液

对照品：丁香油酚对照品醇液，柠檬烯对照品醇液

显色剂：喷香草醛-浓硫酸溶液

结果：与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

六、实验结果

1．比较不同加水量对药材中挥发油提取量的影响，通过实验确定最佳溶媒用量。

2．详细记录丁香油和陈皮油薄层点滴检识结果。

3．绘制丁香油和陈皮油色谱图，并计算R f值。

4．总结实验过程中遇到的问题和解决方法。

七、思考题

1．挥发油提取过程中应注意哪些影响因素？