人抗EB病毒抗体EBVELISA试剂盒使用规则
62EB病毒(EBV)核酸检测标准操作规程(荧光PCR法)
EB病毒（EBV）核酸检测标准操作规程（荧光PCR法）1.目的规范EB病毒核酸DNA（荧光PCR法）检测操作流程，准确进行EB病毒DNA分析。
2.应用范围使用中山大学达安基因股份有限公司EB病毒核酸扩增(PCR)荧光定量检测试剂盒（荧光PCR法）和Mx3000P荧光定量PCR仪、Roche480荧光定量PCR仪进行EB病毒DNA检测。
3.职责由PCR实验室制定程序文件，专业技术人员负责执行，实验室主管负责监督实施。
4.内容4.1 实验原理及其临床应用本试剂盒用一对EB病毒（EBV）特异性引物和一条EB病毒（EBV）特异性荧光探针，配以PCR反应液、耐热DNA聚合酶(Taq酶)、核苷酸单体（dNTPs）等成分，用PCR体外扩增法检测EB病毒（EBV）DNA。
用于人血中EB病毒DNA的测定，为临床提供参考，4.2 标本采集4.2.1 使用标本类型：全血。
4.2.2 标本采集；由合作单位按照以下要求进行采集。
4.2.2.1全血：用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2毫升，注入EDTA(乙二胺四乙酸二钠)或枸橼酸钠抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，密闭送检。
4.2.3 标本保存和运送：标本可立即用于测试，也可以保存于-20℃待测，保存期为6个月。
标本运送采用0℃冰壶。
4.3 试剂准备4.3.1 供应商：中山大学达安基因股份有限公司。
4.3.2 此实验试剂应放在冰箱-20℃保存，在实验前5分钟取出备用，实验后应立即放回冰箱-20℃。
4.3.3 如果试剂出现了封口蜡破损导致液体外漏以及过期试剂，应及时更换。
4.4 质控品4.4.1 质控品来源：随试剂盒，由厂家提供。
4.4.2 质控品保存条件：置于-20℃冰箱中保存。
4.4.3 质控频度：每次实验均需做质控。
4.5 操作过程说明4.5.1 DNA提取4.5.1.1 质控品处理：取出阴性质控品、临界阳性质控品、强阳性质控品。
ELISA操作规程
ELISA操作规程
标题：ELISA操作规程
引言概述：ELISA（酶联免疫吸附实验）是一种常用的生物化学分析技术，用于检测特定蛋白质、抗体或者其他生物份子的存在和浓度。
正确的操作规程对于获得准确可靠的实验结果至关重要。
一、实验前准备
1.1 准备实验室基本设备：ELISA板阅读器、洗板机、移液器等。
1.2 准备实验试剂：包括底物、酶标记的抗体、洗涤缓冲液等。
1.3 根据实验方案准备样本：如血清、细胞上清液等。
二、板涂覆
2.1 将试剂均匀涂覆在ELISA板上。
2.2 封闭未被试剂覆盖的部份，防止非特异性结合。
2.3 将板在4℃下保存一段时间，促使试剂充分吸附。
三、样本加样
3.1 样本需按照实验方案稀释，避免过高或者过低浓度。
3.2 每孔加样量要准确，避免交叉污染。
3.3 混匀样本后，避免气泡产生。
四、洗板
4.1 使用洗板机进行洗板，确保每孔洗涤充分。
4.2 每次洗板后用吸头吸去残留液，避免残留物干扰实验结果。
4.3 洗板缓冲液的配制与使用要按照规定比例和方法进行。
五、显色和读板
5.1 加入底物后，保持暗处孵育一段时间。
5.2 在适当波长下读板，记录吸光值。
5.3 根据实验方案计算样本浓度，注意结果的解读和分析。
结语：ELISA操作规程的正确执行对于实验结果的准确性至关重要。
惟独严格按照规程操作，才干获得可靠的实验数据，为科研工作提供有力支持。
希翼本文提供的ELISA操作规程能够对您的实验工作有所匡助。
欧蒙ebv标准操作规程
欧蒙ebv标准操作规程欧蒙公司提供了一系列关于EBV（Epstein-Barr Virus，EB病毒）检测的标准操作规程，其中包括酶联免疫吸附法（ELISA）和间接免疫荧光技术（IIFT）等不同的检测方法。
这些操作规程旨在帮助实验室人员准确地进行EBV相关的血清学检测和核酸检测。
以酶联免疫吸附法为例，操作步骤通常包括：1. 样本处理：将待测的人血清或血浆按照规定的稀释比例进行稀释。
2. 加样：将稀释后的样本与包被有EBV抗原的微孔板混合，然后进行孵育。
3. 洗涤：使用洗涤液彻底清洗微孔板，去除未结合的物质。
4. 加二抗：向微孔板中加入标记有酶的第二抗体，再次孵育。
5. 洗涤：重复第3步的洗涤过程。
6. 显色：加入底物溶液，使之在酶的作用下发生反应，产生颜色变化。
7. 终止反应：通过加入终止液停止显色反应。
8. 结果判定：使用酶标仪测定每个微孔的吸光度，根据标准曲线判断样品中EBV抗体的含量。
另一种检测方法IIFT（间接免疫荧光技术）的基本步骤如下：1. 取材制片：采用适当的方法获取含有EBV抗原的细胞涂片。
2. 封闭：使用封闭液覆盖涂片，减少非特异性结合。
3. 加一抗：滴加已知的EBV特异性抗体，让其与细胞中的抗原结合。
4. 洗涤：使用缓冲液清洗涂片，去除未结合的一抗。
5. 加二抗：滴加标记有荧光素的第二抗体，使其与一抗结合。
6. 洗涤：再次清洗涂片，去除未结合的二抗。
7. 干燥：让涂片晾干。
8. 镜检：使用荧光显微镜观察涂片，根据荧光强度和模式判断样品中EBV抗体的存在情况。
以上只是简略介绍了两种EBV检测方法的基本操作步骤。
实际操作中，还需严格遵守各项安全规范和质量控制措施，确保检测结果的准确性和可靠性。
具体操作时，建议仔细阅读并遵循由欧蒙公司提供的详细标准操作规程。
1150817303EB病毒核酸定量检测试剂盒（PCR荧光法）说明书
EB病毒核酸定量检测试剂盒(PCR荧光法)说明书【产品名称】EB病毒核酸定量检测试剂盒(PCR荧光法)【包装规格】 32人份/盒【预期用途】本产品用于定量检测人全血中的EB病毒核酸。
EB病毒是人类的一种特异性嗜淋巴细胞性疱疹病毒，EB病毒在人群中具有广泛的感染性，主要通过人类唾液传播，也可经输血传染。
现在的研究表明与EB病毒的感染有关的疾病主要为传染性单核细胞增多症。
适应症：由EB病毒感染引起的传染性单核细胞增多症。
【检验原理】本试剂盒选用EB病毒保守基因片段设计特异引物及特异Taqman 探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，在PCR延伸反应过程中，Taq酶的外切酶活性将5’端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3’端荧光淬灭基团的屏蔽，即能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光，从而实现在全封闭反应体系中对EB病毒核酸的自动化检测。
【主要组成成份】组成组成成分规 格核酸提取液10×红细胞裂解液EB反应混合液Taq酶EB强阳性对照EB临界阳性对照阴性对照定量标准品1#（1.0-8.0）×104copies/ml 定量标准品2#（1.0-8.0）×105copies/ml 定量标准品3#（1.0-8.0）×106copies/ml 定量标准品4#（1.0-8.0）×107copies/ml 含0.5%Triton-100、5%Chelex-100含NH4Cl、NaHCO3、EDTA-Na2含Tris-HCl、 KCl、MgCl2、 dNTP、引物、荧光探针含Taq DNA 酶及抗体含EB病毒基因组DNA(重组克隆)含EB病毒基因组DNA(重组克隆)含TE缓冲液含EB病毒基因组DNA(重组克隆)1.8ml×15 ml×11.2ml×114ul×1100ul×1100ul×1100ul×120ul×120ul×120ul×120ul×1注： 不同批号试剂盒中各组份不可以互换。
人类免疫缺陷病毒抗体检测规程
人类免疫缺陷病毒抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、配液：将50ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释至1000ml备用。
4、编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照一型、二型各一孔，空白对照一孔。
5、加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100ul。
6、温育：覆盖黏胶纸，置37度孵育30分钟。
7、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。
8、每孔加酶结合物100微升，取新粘胶纸覆盖放映板，置37度孵育30分钟。
9、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。
10、每孔加入底物缓冲液50微升，TMB50微升，混匀，置37度显色10分钟。
11、加终止液50微升震荡反应板5秒钟，使之充分混匀。
12、在酶标度数仪上，取波长450nm（建议使用双波长酶标仪比色，参考波长630nm），仪空白对照孔校零，读取每孔吸收值（加终止液后，务必在15分钟内读数完毕）二、结果判断：抗HIV阳性对照OD值大于0.8，抗HIV阴性对照OD值小于0.08。
Cutoff Value=阳性对照值乘以10%（若阳性对照OD值大于2.5按2.5计算）标本OD值小于等于Cutoff Value为阴性。
标本OD值大于Cutoff Value为阳性。
三、注意事项：1、在试剂的使用单位必须使当地卫生行政部门标准的HIV初筛试验室。
2、整个检测工作必须符合HIV试验室管理范围和生物安全守则规定，严格防止交叉感染。
操作时必须带手套，穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。
3、HIV检测结果的判定不许以酶标仪的读数为准。
4、标本和酶结合物均应用加样器加注，并经常校对其准确性。
ELISA试剂盒的操作规范
ELISA试剂盒的操作规范
今天大家就一起来看看我公司ELISA试剂盒操作规范细节。
1.严格按照说明书进行操作。
操作前将试剂在室温下平衡30～60min。
2.加样后及时放入孵箱。
标本较多时，要分批操作。
按说明严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗。
3.合理安排检测量，以免反应板过多导致洗板等待时间长。
4.加样时保持显色剂不外流；加终止液时应避免产生气泡。
5.应桌面清洁，整个操作过程中酶标板不被污染。
在加样的步骤中，您要注意加样器枪头的洁净与否和吸量的准确性，直接影响检测结果。
由于枪头构造特殊，导致清洗困难，加大了交叉污染的机会。
建议用一次性吸嘴。
加样器也要经常清洗，定期校准。
加样时应将所加物加在酶标板板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出。
人抗EB病毒抗体EBVELISA试剂盒使用规则
人抗EB病毒抗体(EBV)ELISA试剂盒使用规则本试剂盒仅供研究使用。
48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗EB病毒抗体(EBV)表达。
实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗EB病毒抗体(EBV)表达。
用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中抗EB病毒抗体(EBV)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人抗EB病毒抗体(EBV)的存在与否。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。
然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCAIgG)酶联免疫分析(ELISA)
人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)水平。
用纯化的人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)，再与HRP标记的EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
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人抗EB病毒抗体(EBV)ELISA试剂盒使用规则
本试剂盒仅供研究使用。
48T
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗EB病毒抗体(EBV)表达。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗EB病毒抗体(EBV)表达。
用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中抗EB病毒抗体(EBV)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人抗EB病毒抗体(EBV)的存在与否。
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1
孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。
然后在待测样品孔先
加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品OD值< 临界值（CUT OFF）者为人抗EB病毒抗体(EBV)阴性
阳性判定：样品OD值≥临界值（CUT OFF）者为人抗EB病毒抗体(EBV)阳性
注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月。