人抗EB病毒抗体EBVELISA试剂盒使用规则

合集下载

62EB病毒(EBV)核酸检测标准操作规程(荧光PCR法)

EB病毒（EBV）核酸检测标准操作规程（荧光PCR法）1.目的规范EB病毒核酸DNA（荧光PCR法）检测操作流程，准确进行EB病毒DNA分析。

2.应用范围使用中山大学达安基因股份有限公司EB病毒核酸扩增(PCR)荧光定量检测试剂盒（荧光PCR法）和Mx3000P荧光定量PCR仪、Roche480荧光定量PCR仪进行EB病毒DNA检测。

3.职责由PCR实验室制定程序文件，专业技术人员负责执行，实验室主管负责监督实施。

4.内容4.1 实验原理及其临床应用本试剂盒用一对EB病毒（EBV）特异性引物和一条EB病毒（EBV）特异性荧光探针，配以PCR反应液、耐热DNA聚合酶(Taq酶)、核苷酸单体（dNTPs）等成分，用PCR体外扩增法检测EB病毒（EBV）DNA。

用于人血中EB病毒DNA的测定，为临床提供参考，4.2 标本采集4.2.1 使用标本类型：全血。

4.2.2 标本采集；由合作单位按照以下要求进行采集。

4.2.2.1全血：用一次性无菌注射器抽取受检者静脉血2毫升，注入EDTA(乙二胺四乙酸二钠)或枸橼酸钠抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，密闭送检。

4.2.3 标本保存和运送：标本可立即用于测试，也可以保存于-20℃待测，保存期为6个月。

标本运送采用0℃冰壶。

4.3 试剂准备4.3.1 供应商：中山大学达安基因股份有限公司。

4.3.2 此实验试剂应放在冰箱-20℃保存，在实验前5分钟取出备用，实验后应立即放回冰箱-20℃。

4.3.3 如果试剂出现了封口蜡破损导致液体外漏以及过期试剂，应及时更换。

4.4 质控品4.4.1 质控品来源：随试剂盒，由厂家提供。

4.4.2 质控品保存条件：置于-20℃冰箱中保存。

4.4.3 质控频度：每次实验均需做质控。

4.5 操作过程说明4.5.1 DNA提取4.5.1.1 质控品处理：取出阴性质控品、临界阳性质控品、强阳性质控品。

ELISA操作规程

ELISA操作规程
标题：ELISA操作规程
引言概述：ELISA（酶联免疫吸附实验）是一种常用的生物化学分析技术，用于检测特定蛋白质、抗体或者其他生物份子的存在和浓度。

正确的操作规程对于获得准确可靠的实验结果至关重要。

一、实验前准备
1.1 准备实验室基本设备：ELISA板阅读器、洗板机、移液器等。

1.2 准备实验试剂：包括底物、酶标记的抗体、洗涤缓冲液等。

1.3 根据实验方案准备样本：如血清、细胞上清液等。

二、板涂覆
2.1 将试剂均匀涂覆在ELISA板上。

2.2 封闭未被试剂覆盖的部份，防止非特异性结合。

2.3 将板在4℃下保存一段时间，促使试剂充分吸附。

三、样本加样
3.1 样本需按照实验方案稀释，避免过高或者过低浓度。

3.2 每孔加样量要准确，避免交叉污染。

3.3 混匀样本后，避免气泡产生。

四、洗板
4.1 使用洗板机进行洗板，确保每孔洗涤充分。

4.2 每次洗板后用吸头吸去残留液，避免残留物干扰实验结果。

4.3 洗板缓冲液的配制与使用要按照规定比例和方法进行。

五、显色和读板
5.1 加入底物后，保持暗处孵育一段时间。

5.2 在适当波长下读板，记录吸光值。

5.3 根据实验方案计算样本浓度，注意结果的解读和分析。

结语：ELISA操作规程的正确执行对于实验结果的准确性至关重要。

惟独严格按照规程操作，才干获得可靠的实验数据，为科研工作提供有力支持。

希翼本文提供的ELISA操作规程能够对您的实验工作有所匡助。

欧蒙ebv标准操作规程

欧蒙ebv标准操作规程欧蒙公司提供了一系列关于EBV（Epstein-Barr Virus，EB病毒）检测的标准操作规程，其中包括酶联免疫吸附法（ELISA）和间接免疫荧光技术（IIFT）等不同的检测方法。

这些操作规程旨在帮助实验室人员准确地进行EBV相关的血清学检测和核酸检测。

以酶联免疫吸附法为例，操作步骤通常包括：1. 样本处理：将待测的人血清或血浆按照规定的稀释比例进行稀释。

2. 加样：将稀释后的样本与包被有EBV抗原的微孔板混合，然后进行孵育。

3. 洗涤：使用洗涤液彻底清洗微孔板，去除未结合的物质。

4. 加二抗：向微孔板中加入标记有酶的第二抗体，再次孵育。

5. 洗涤：重复第3步的洗涤过程。

6. 显色：加入底物溶液，使之在酶的作用下发生反应，产生颜色变化。

7. 终止反应：通过加入终止液停止显色反应。

8. 结果判定：使用酶标仪测定每个微孔的吸光度，根据标准曲线判断样品中EBV抗体的含量。

另一种检测方法IIFT（间接免疫荧光技术）的基本步骤如下：1. 取材制片：采用适当的方法获取含有EBV抗原的细胞涂片。

2. 封闭：使用封闭液覆盖涂片，减少非特异性结合。

3. 加一抗：滴加已知的EBV特异性抗体，让其与细胞中的抗原结合。

4. 洗涤：使用缓冲液清洗涂片，去除未结合的一抗。

5. 加二抗：滴加标记有荧光素的第二抗体，使其与一抗结合。

6. 洗涤：再次清洗涂片，去除未结合的二抗。

7. 干燥：让涂片晾干。

8. 镜检：使用荧光显微镜观察涂片，根据荧光强度和模式判断样品中EBV抗体的存在情况。

以上只是简略介绍了两种EBV检测方法的基本操作步骤。

实际操作中，还需严格遵守各项安全规范和质量控制措施，确保检测结果的准确性和可靠性。

具体操作时，建议仔细阅读并遵循由欧蒙公司提供的详细标准操作规程。

1150817303EB病毒核酸定量检测试剂盒（PCR荧光法）说明书

EB病毒核酸定量检测试剂盒(PCR荧光法)说明书【产品名称】EB病毒核酸定量检测试剂盒(PCR荧光法)【包装规格】 32人份/盒【预期用途】本产品用于定量检测人全血中的EB病毒核酸。

EB病毒是人类的一种特异性嗜淋巴细胞性疱疹病毒，EB病毒在人群中具有广泛的感染性，主要通过人类唾液传播，也可经输血传染。

现在的研究表明与EB病毒的感染有关的疾病主要为传染性单核细胞增多症。

适应症：由EB病毒感染引起的传染性单核细胞增多症。

【检验原理】本试剂盒选用EB病毒保守基因片段设计特异引物及特异Taqman 探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，在PCR延伸反应过程中，Taq酶的外切酶活性将5’端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3’端荧光淬灭基团的屏蔽，即能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光，从而实现在全封闭反应体系中对EB病毒核酸的自动化检测。

【主要组成成份】组成组成成分规格核酸提取液10×红细胞裂解液EB反应混合液Taq酶EB强阳性对照EB临界阳性对照阴性对照定量标准品1#（1.0-8.0）×104copies/ml 定量标准品2#（1.0-8.0）×105copies/ml 定量标准品3#（1.0-8.0）×106copies/ml 定量标准品4#（1.0-8.0）×107copies/ml 含0.5%Triton-100、5%Chelex-100含NH4Cl、NaHCO3、EDTA-Na2含Tris-HCl、 KCl、MgCl2、 dNTP、引物、荧光探针含Taq DNA 酶及抗体含EB病毒基因组DNA(重组克隆)含EB病毒基因组DNA(重组克隆)含TE缓冲液含EB病毒基因组DNA(重组克隆)1.8ml×15 ml×11.2ml×114ul×1100ul×1100ul×1100ul×120ul×120ul×120ul×120ul×1注：不同批号试剂盒中各组份不可以互换。

人类免疫缺陷病毒抗体检测规程

人类免疫缺陷病毒抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。

2、将标本对应微孔按顺序编号。

3、配液：将50ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释至1000ml备用。

4、编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照一型、二型各一孔，空白对照一孔。

5、加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100ul。

6、温育：覆盖黏胶纸，置37度孵育30分钟。

7、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。

8、每孔加酶结合物100微升，取新粘胶纸覆盖放映板，置37度孵育30分钟。

9、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。

10、每孔加入底物缓冲液50微升，TMB50微升，混匀，置37度显色10分钟。

11、加终止液50微升震荡反应板5秒钟，使之充分混匀。

12、在酶标度数仪上，取波长450nm（建议使用双波长酶标仪比色，参考波长630nm），仪空白对照孔校零，读取每孔吸收值（加终止液后，务必在15分钟内读数完毕）二、结果判断：抗HIV阳性对照OD值大于0.8，抗HIV阴性对照OD值小于0.08。

Cutoff Value=阳性对照值乘以10%（若阳性对照OD值大于2.5按2.5计算）标本OD值小于等于Cutoff Value为阴性。

标本OD值大于Cutoff Value为阳性。

三、注意事项：1、在试剂的使用单位必须使当地卫生行政部门标准的HIV初筛试验室。

2、整个检测工作必须符合HIV试验室管理范围和生物安全守则规定，严格防止交叉感染。

操作时必须带手套，穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。

3、HIV检测结果的判定不许以酶标仪的读数为准。

4、标本和酶结合物均应用加样器加注，并经常校对其准确性。

ELISA试剂盒的操作规范

ELISA试剂盒的操作规范
今天大家就一起来看看我公司ELISA试剂盒操作规范细节。

1.严格按照说明书进行操作。

操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

2.加样后及时放入孵箱。

标本较多时，要分批操作。

按说明严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗。

3.合理安排检测量，以免反应板过多导致洗板等待时间长。

4.加样时保持显色剂不外流；加终止液时应避免产生气泡。

5.应桌面清洁，整个操作过程中酶标板不被污染。

在加样的步骤中，您要注意加样器枪头的洁净与否和吸量的准确性，直接影响检测结果。

由于枪头构造特殊，导致清洗困难，加大了交叉污染的机会。

建议用一次性吸嘴。

加样器也要经常清洗，定期校准。

加样时应将所加物加在酶标板板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出。

人抗EB病毒抗体EBVELISA试剂盒使用规则

人抗EB病毒抗体(EBV)ELISA试剂盒使用规则本试剂盒仅供研究使用。

48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中抗EB病毒抗体(EBV)表达。

实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗EB病毒抗体(EBV)表达。

用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中抗EB病毒抗体(EBV)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人抗EB病毒抗体(EBV)的存在与否。

标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。

然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCAIgG)酶联免疫分析(ELISA)

人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)水平。

用纯化的人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)，再与HRP标记的EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学实验技术，用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。

ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装，包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。

本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，以帮助用户顺利进行ELISA实验。

1.准备实验材料：-ELISA检测试剂盒：根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒，确保其在储存和运输过程中无损坏。

-样本：准备需要检测的样本，如血清、尿液、组织提取物等。

确保样本的质量和浓度满足实验要求。

-微孔板：根据试剂盒的要求选择合适的微孔板，同时注意其质量有无污染。

-基本实验设备：如计量器、洗板机、显微镜等。

2.实验步骤：-取出储存在4℃的试剂，确保其达到室温（一般为20-25℃），再根据实验步骤进行下一步操作。

-预处理样本：根据试剂盒的说明书，进行样本的预处理，包括稀释、纯化、稳定化等步骤。

-加样：将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中，通常每个孔需要加入100-200μL的样品。

-洗板：使用洗板机或手工操作，将孔中的杂质洗净。

洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。

-加入特异性抗体：根据试剂盒的说明书，将稀释好的特异性抗体加入各孔中，确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。

-洗板：重复第4步的操作，将未结合的抗体洗净。

-加入酶标记物：根据试剂盒的说明书，将稀释好的酶标记物加入各孔中，确保加入的量准确无误。

-洗板：重复第4步的操作，将未结合的酶标记物洗净。

-加入底物：将稀释好的底物加入各孔中，使其与酶标记物反应，生成可视化的颜色。

-终止反应：根据试剂盒的要求，在一定的反应时间后，加入终止剂停止反应。

终止剂的选择需符合试剂盒的要求。

-检测结果：使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化，通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。

3.数据分析：-计算样本的结果：根据试剂盒的说明书，根据吸光度或颜色强度测量结果，计算样本中目标物的浓度。

ELISA检测试剂盒操作流程

定量测定人血清中幽门螺杆菌（Hp）IgG抗体
ELISA检测试剂盒操作流程
一、操作流程：
1.根据需要，将若干孔德条带放置在支架上；
2.将标本、阴性质控、阳性质控以及标准品作1：200稀释（将５μｌ样品加稀
释液稀释到1ml，混匀）；
3.取100μl已稀释的血清样品、标准品和阴性质控、阳性质控加入相应得孔板
内（质控和标准品至少需做两孔），A1孔不加液体作为空白底色；
4.在37℃温箱中放置30分钟；
5.到时间后将孔被液体甩去，并用1X洗涤液反复清洗4次，最后用蒸馏水洗
一次；
6.在每孔内加100μl酶结合物（需按比例稀释，除A1孔外），轻微混匀；
7.在37℃温箱中放置30分钟；
8.甩去孔内酶结合物，用1X洗涤液反复清洗4次，最后用蒸馏水洗一次；
9.在每孔内加100μlTMB（使用前混合Ａ液和Ｂ液）（包括A1孔也加），轻微
混匀；
10.37℃放置15分钟；
11.每孔加50μl 1N硫酸终止液（包括A1孔），轻微混匀；
12.在15分钟内，用酶标仪在450nm处读取吸光度值（OD值）（将酶标仪A1
孔设定为空白孔）。

二、结果换算：
以标准样品的OD值为轴，标准样品的数值为X轴，在方格纸或计算机上作出标准曲线，然后根据标本的OD值读数在标准曲线上读出相应的IgG抗体浓度。

三、结果判定：
阴性：抗体浓度≤20u/ml为正常
阳性：抗体浓度＞20u/ml为阳性。

人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程

1、检验申请单独检验项目申请：人类免疫缺陷病毒抗体{缩写抗HIV（1+2）]测定。

临床医生根据需要提出检验申请。

2、标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中，或采用含分离胶的真空采血管。

也可采集血浆，用肝素、EDTA或枸橼酸盐抗凝。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h后将标本离心分离出血清或血浆，避免溶血。

离心必须达到3000rpm 15min，离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。

2.2.2标本保存时间：室温（15-25℃）下可稳定48h，普通冰箱中（2-8℃）稳定7d，在-20℃最多可保存4周。

避免反复冻融。

不可使用热灭活的标本。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4-8℃冰箱内保存7d。

2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛，避免剧烈活动。

3．方法原理本实验采用HIV特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板，用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。

当待测标本中存在HIV抗体时，该抗体和固化的抗原结合于反应板上，并进一步与酶结合物相结合，在TMB底物参与反应的情况下，产生显色反应。

4．试剂及其他用品4.1试剂：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒，由上海科华生物工程股份有限公司出品，试剂盒药品批准文号：国药准字S2*******(96人份)。

ELISA操作规程

ELISA操作规程一、实验室准备1.确保实验室环境清洁、整洁，并消毒操作台面和仪器。

2.准备所需材料：ELISA板、酶标仪、洗涤液、稀释液、标准品、试剂盒、试管、移液管、显色液、终止液等。

3.确保试剂保存完好，过期试剂及时更新，避免使用失效试剂。

二、实验操作步骤1.实验板的涂覆（1）选择合适的ELISA板，根据所需实验的样品数量确定使用的孔板数量。

（2）将需要的涂覆抗原或抗体稀释至适当浓度，用1:1000的稀释液稀释。

（3）将稀释液孔板均匀涂覆，避免产生气泡和交叉污染。

（4）将涂覆好的板以适当温度、湿度下放置2-4小时，或过夜在4摄氏度培养箱中。

2.样品处理（1）收集样品并编号，避免混淆。

（2）将样品稀释至合适浓度，一般为1:100-1:1000。

3.加标准品和样品（1）将标准品按照一定比例稀释。

（2）将稀释好的标准品和样品加入涂覆好的ELISA板的对应孔中。

4.孵育孔板（1）将ELISA板密封，放置在适当温度下孵育，时间根据实验需要设定，一般为1-2小时。

（2）检查孔板中是否有泡沫或交叉污染，若有，请及时处理。

5.洗涤（1）将孔板固定在洗涤器上，加入洗涤液。

（2）按照洗涤液说明书上的步骤进行洗涤。

6.加酶标记二抗（1）将酶标二抗按照一定比例稀释。

（2）将稀释好的酶标二抗加入每个孔中。

7.孵育孔板（1）将ELISA板密封，放置在适当温度下孵育，时间根据实验需要设定，一般为1-2小时。

（2）检查孔板中是否有泡沫或交叉污染，若有，请及时处理。

8.洗涤（1）将孔板固定在洗涤器上，加入洗涤液。

（2）按照洗涤液说明书上的步骤进行洗涤。

9.加显色底物（1）将显色底物按照一定比例稀释。

（2）将稀释好的显色底物加入每个孔中。

10.显色反应（1）将ELISA板在适当时间内观察显色反应的结果。

（2）根据所用试剂盒的说明书，记录每个孔的颜色强度。

11.反应终止（1）根据试剂盒的说明书，使用终止液终止显色反应。

（2）终止反应后，可通过酶标仪读取各孔的吸光度值。

人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书

人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书产品规格：96T/48T供应商：上海樊克生物有限公司本产品只用于科研实验人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书，小鼠(LR/Ob-R)ELISA试剂盒，苗条素受体elisakit elisa试剂盒上海樊克生物供应！人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书Liquid type specimen:Including serum, plasma, urine, pleural effusion and ascites, cerebrospinal fluid, cell culture supernatant, etc..1) serum:Room temperature blood natural coagulation 10-20 minutes after the centrifuge about 20 minutes (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. In the process of preservation, if there is precipitation, should be re - centrifugal.2) plasma:According to the requirements of the specimens of choice of EDTA, sodium citrate or heparin as an anticoagulant, 10-20 minutes after mixing, centrifuged for 20 minutes or so (2000-3000 r.p.m.). Carefully collect the supernatant. In the process of preservation, if there is precipitation, should be re - centrifugal.3) urine:Collecting with sterile tubes. Centrifugal 20 minutes or so (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. In the process of preservation, if there is precipitation, should be re - centrifugal. Pleural effusion, cerebrospinal fluid with reference to this practice.4) cell culture supernatant:To collect the ingredients for the detection of secretory components. Centrifugal 20 minutes or so (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. Detection of cell components, with PBS (PH7.2-7.4) diluted cell suspension, the cell concentration reached 1 million /ml or so. Through repeated freezing and thawing, in order to make the cell damage and release of intracellular components. Centrifugal 20 minutes or so (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. In the process of preservation, if there is precipitation, should be re - centrifugal.5) tissue specimen:After cutting the specimen, weigh the weight. Add a certain amount of PH7.4, PBS. Rapid freezing with liquid nitrogen. The specimens were melted and still maintained at 2-8. Add a certain amount of PBS (PH7.4), with a hand or a homogenate of the specimen homogenate full. Centrifugal 20 minutes or so (2000-3000 turn / min). Carefully collect the supernatant. Be detected after a repackaging, remaining frozen spare.人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书国产/进口Elisa试剂盒，96T/48TElisa试剂盒， 96T/48Telisakit价格人抗人类免疫缺陷病毒抗体ELISA试剂盒说明书Elisa试剂盒操作步骤：3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学实验方法，用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。

它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。

本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。

一、实验准备1.阅读检测项目的说明书：在使用试剂盒前，仔细阅读说明书，了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。

2.样本准备：根据实验要求，准备样本。

如果需要检测血清中的抗体水平，可以采集血液样本，离心分离血清；如果需要检测细胞培养上清中的分子，将上清收集，并使其清晰，避免细胞或杂质的污染。

3.样本预处理：根据实验需求，对样本进行必要的预处理。

例如，可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本，以改变样本组分和浓度。

4.准备品质控制样品：制备阳性和阴性控制样品，用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。

5.实验器材准备：准备所需实验器材，如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。

确保器材的干净和完整，并按照说明书要求对其进行预处理。

二、试剂使用步骤1.试剂准备：根据说明书要求，将试剂从冰箱中取出，并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。

确保试剂瓶盖紧闭，并避免暴露在直接阳光下。

2.实验操作：按照说明书的要求，将试剂加入到酶标板中，并根据实验设计进行标准曲线的设置。

标准曲线用于测量未知样品的数量，并计算出浓度。

3.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行孵育。

孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。

4.洗涤：使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。

洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。

5.补液：在洗涤完成后，加入辣根过氧化物酶标况稀释液，促进酶标物与特异性结合物的反应。

6.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。

7.反应停止：根据试剂盒的要求，加入相应的停止液，停止酶反应。

ELISA试剂盒操作方法

ELISA试剂盒操作方法ELISA（酶联免疫吸附法）是一种常用的实验技术，用于检测目标物（如蛋白质、抗原或抗体）的存在和浓度。

ELISA试剂盒是ELISA实验的核心，包括特定的试剂和材料，用于执行特定的步骤和操作。

以下是一般ELISA试剂盒的操作方法，包含以下步骤：1.准备实验样品：收集所需分析物的样品（例如血清、细胞上清液或组织提取液等），并适当保存或稀释以便后续操作。

2.预处理步骤：根据实验的目的和试剂盒的要求，进行样品的预处理。

这可能包括去除干扰物质、离心、稀释或加热等处理步骤。

3.涂覆酶联免疫板：打开试剂盒中提供的酶联免疫板，将其放置在工作台上。

将涂覆物质（如抗体或抗原）加入到每个酶联免疫孔中，通常使用多通道移液器或微量移液器进行操作。

涂覆后，尽量避免泡沫和交叉污染。

4.触发剂孵育：将涂覆后的酶联免疫板放入孵育箱或板上孵育器中，在适当的温度下孵育一段时间。

此步骤的目的是固定涂覆物质，并优化其活性。

5.洗涤：将试剂盒中提供的缓冲液加入酶联免疫孔中，并倾斜孔盘轻轻敲打或使用洗板仪进行洗涤，以去除未结合的物质和杂质。

通常，洗涤液需要多次更换，充分洗涤以获得更好的准确性和灵敏度。

6. 过量引物（Block）：加入试剂盒提供的阻断缓冲液至孔中，目的是防止非特异性结合的发生。

阻断时间可以根据试剂盒的要求进行调整。

7.加入样品和控制物质：将处理好的样品和控制物质，如阳性对照和阴性对照，加入到各个酶联免疫孔中。

注意要根据试剂盒的要求进行适当的稀释。

8.孵育和洗涤：将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中，按照试剂盒的要求进行孵育。

完成孵育后，继续进行洗涤步骤，以去除未结合的物质。

9.检测剂加入：将检测试剂（通常是特异性抗体或酶标记物质）加入酶联免疫孔中。

如有需要，可以进一步稀释试剂以适应实验要求。

10.再次孵育和洗涤：将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中，对要求进行的步骤进行孵育。

完成孵育后，进行洗涤步骤以去除未结合的物质。

62-EB病毒(EBV)核酸检测标准操作规程(荧光PCR法)

EB病毒（EBV）核酸检测标准操作规程（荧光PCR法）1.目的规范EB病毒核酸DNA（荧光PCR法）检测操作流程，准确进行EB病毒DNA分析。

3.职责由PCR实验室制定程序文件，专业技术人员负责执行，实验室主管负责监督实施。

用于人血中EB病毒DNA的测定，为临床提供参考，4.2 标本采集4.2.1 使用标本类型：全血。

4.2.2 标本采集；由合作单位按照以下要求进行采集。

4.2.3 标本保存和运送：标本可立即用于测试，也可以保存于-20℃待测，保存期为6个月。

标本运送采用0℃冰壶。

4.3 试剂准备4.3.1 供应商：中山大学达安基因股份有限公司。

4.3.2 此实验试剂应放在冰箱-20℃保存，在实验前5分钟取出备用，实验后应立即放回冰箱-20℃。

4.3.3 如果试剂出现了封口蜡破损导致液体外漏以及过期试剂，应及时更换。

4.4 质控品4.4.1 质控品来源：随试剂盒，由厂家提供。

4.4.2 质控品保存条件：置于-20℃冰箱中保存。

4.4.3 质控频度：每次实验均需做质控。

4.5 操作过程说明4.5.1 DNA提取4.5.1.1 质控品处理：取出阴性质控品、临界阳性质控品、强阳性质控品。

人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCAIgG)酶联免疫分析(ELISA)

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)水平。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人EB病毒壳体抗原IgG(EB.VCA IgG)浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

ELISA试剂盒的使用方法

方法二：用于检测未知抗体的间接法：
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
方法一：用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
2.加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
ELISA试剂盒的使用方法
拜力生物编辑整理：
Elisa试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。
3.加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5.终止反应：于各反应孔ห้องสมุดไป่ตู้加入2M硫酸0.05ml。
6.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA检测试剂盒使用指南1.简介：1.1 本文档旨在提供ELISA检测试剂盒的详细使用指南，以帮助用户正确、高效地进行ELISA检测。

1.2 ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫测定方法，用于检测体液中特定抗原或抗体的存在与浓度。

1.3 本文档将涵盖ELISA检测试剂盒的准备、样本处理、试剂操作、结果读取等详细步骤。

2.准备：2.1 确保实验室环境整洁，无污染。

2.2 检查所需试剂、仪器和设备是否完整，并检查有效期和储存条件。

2.3 根据实验需要，准备所需样本和质控品，并储存于适当的条件下。

3.样本处理：3.1 根据实验目的选择合适的样本类型，如血清、血浆、尿液等。

3.2 根据试剂盒说明书的要求，对样本进行适当的稀释和预处理。

3.3 严格控制操作条件，避免样本污染和交叉污染。

4.试剂操作：4.1 根据试剂盒说明书，将所需试剂从冰箱中取出，并在室温下适当恢复。

4.2 严格按照说明书的要求，对试剂进行稀释和混合。

4.3 操作过程中注意洁净实验台面，避免试剂交叉污染。

5.检测步骤：5.1 将适量的稀释后的样本、质控品和标准品分别装入试管中。

5.2 添加适量的酶标记抗体或底物，并充分混匀。

5.3 按照试剂盒说明书的要求，进行孵育和洗涤步骤。

5.4 添加底物并进行反应，控制反应时间。

5.5 停止反应，并使用酶标仪测量吸光度。

6.结果读取：6.1 根据试剂盒说明书，根据吸光度值和标准曲线，计算样本中目标物质的浓度。

6.2 将测量结果记录，并进行统计和分析。

6.3 评估实验结果的可靠性，并进行结果的解释和报告。

7.注意事项：7.1 严格按照试剂盒说明书的要求进行操作，避免任何操作步骤的误差和误操作。

7.2 注意实验室安全，避免接触有害化学物质，正确使用防护设备。

7.3 在实验过程中遵循生物安全操作规范，避免潜在的感染风险。

此外，本文档涉及附件，请在附件部分查看相关详细信息。