野生花脸香蘑多糖提取工艺优化
香菇多糖提取工艺的研究进展
香菇多糖提取工艺的研究进展香菇多糖提取工艺的研究进展香菇Lentinusedodes 为担子菌纲伞形科真菌，是世界上第二大食用菌。
香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质，具有抑制肿瘤、调节免疫、抗病毒和抗氧化等多方面的药理活性，且毒副作用小。
香菇多糖的提取常用水提醇沉法、酸碱提取法，但存在提取工艺复杂、溶剂使用量大、时间长等缺点，而且容易造成多糖降解，生物活性降低。
本文主要对近年来香菇多糖提取工艺优化研究方面的进展进行阐述。
1.超声波提取超声波提取法是利用超声波特殊的物理性质，加速介质质点运动、空化作用、振动匀化等以增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，从而使药效物质加速融人溶剂提高有效成分的得率。
王恒等用超声波辅助法从香菇中提取香菇多糖，通过实验优化确定出香菇多糖最佳提取工艺为超声功率200W ，料液比35：1，超声时间40min ，香菇多糖提取率为6.72 ％。
王俊颖等采用超声法浸提香菇多糖通过正交试验设计确定的最佳工艺为料水比1 : 25，超声温度60° C超声时间30min , 超声功率300W ，多糖得率为8.72 ％。
李宏睿等采用正交试验设计，对香菇多糖的提取条件进行优化，并与单纯的热水浸提进行比较。
结果表明，在料水比l：25 ，超声时间35min ，超声功率105W ，热水浸提温度90 ％，浸提时间20min 的条件下，提取效果最好，多糖提取率为13.75 ％，比单纯热水浸提法提高6.22％。
2.微波提取微波辅助提取技术主要是通过调节微波加热的参数，有效地加热物料中的目标成分，对目标成分进行选择性提取。
刘小丽等研究微波辅助法提取香菇多糖采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时间、乙醇用量以及杂蛋白的去除条件分别进行了考察。
试验结果表明最佳提取工艺条件为固液比1：20mL ，微波辐射功率为280W ，辐射时间5min，乙醇与多糖提取液体积比为4：1，香菇多糖提取率可达到9.46 ％。
舟山野生灵芝多糖制备工艺的优化研究【开题报告】
开题报告药学舟山野生灵芝多糖制备工艺的优化研究一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义灵芝是担子菌纲多孔菌科(Polyporaceae)灵芝属(Ganodelma)真菌赤芝G．lucidum·karst和紫芝G．japonicrn L loyd的总称，主要含麦角甾醇0.3%～0.4%，真菌溶菌酶及酸性蛋白酶、L-甘露醇、浠醇。
在水溶性提取液中含有水溶性蛋白质，天门冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸、亮氨酸、丙氨酸、色氨酸、苏氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸等多种氨基酸，多肽及多糖类。
尚含树脂、内酯、香豆精等。
世界上灵芝科的种类主要分布在亚洲、澳洲、非洲及美洲的热带及亚热带，少数分布于温带。
地处北半球温带的欧洲仅有灵芝属的4种，而北美洲大约5种。
我国地跨热带至寒温带，灵芝科种类多而分布广。
而灵芝则主要分布在中国，朝鲜半岛和日本。
灵芝作为拥有数千年药用历史的中国传统珍惜药材，具备很高的药用价值，经过科研机构数十年的现代药理学研究证实，灵芝对于增强人体免疫力，调节血糖，控制血压，辅助肿瘤放化疗，保肝护肝，促进睡眠等方面均具有显著疗效。
主要作用：一、抗肿瘤作用自身免疫功能的低下或失调，是肿瘤之所以会发生并扩展的重要原因。
灵芝是最佳的免疫功能调节和激活剂，它可显著提高机体的免疫功能，增强患者自身的抗癌能力。
灵芝可以通过促进白细胞介素-2的生成，通过促进单核巨噬细胞的吞噬功能、通过提升人体的造血能力尤其是白细胞的指标水平，以及通过其中某些有效成分对癌细胞的抑制作用，成为抗肿瘤、防癌以及癌症辅助治疗的优选药物。
灵芝对人体几乎没有任何毒副作用。
这种无毒性的免疫活化剂的优点，恰恰是许多肿瘤化疗药物和其它免疫促进剂都不具有的。
二、保肝解毒作用灵芝对多种理化及生物因素引起的肝损伤有保护作用。
无论在肝脏损害发生前还是发生后，服用灵芝都可保护肝脏，减轻肝损伤。
灵芝能促进肝脏对药物、毒物的代谢，对于中毒性肝炎有确切的疗效。
花脸香蘑发酵全液多糖提取条件的研究
基金项 目： 山东 省 农 业 良种 产 业 化 项 目（ 号 ：０ ８ Ｚ ０ ８Ｏ Ｄ） 部 分 研 究 内容 编 ２ ０ Ｌ 一０ 一ｌ 的 作者简介 ： 孟 玲 （９ ４ ， ， 岛 农 业 大 学 在读 硕 士 ， 要 从 事 真 菌 发 酵 工 程 及 活 性 物 质 的 研 究 。 １ ８ 一） 女 青 主
担 子 菌 亚 门 （ ａｉｉｍｙ ｏ ｃ ｔ ａ ， 菌 纲 Ｂ ｓ ｏ ｃ ｍｙ ｏｉ ） 层 ｄ ｎ
１０ ０ ｍＬ， Ｈ 自然 。 ０ ｐ １ ２ 发 酵 全 液 制 备 ．
（ ｍｅ ｏ ｃ ｔｓ ， 菌 目（ ａ ｉ ｌｓ ， Ｈｙ ｎ ｍｙ ｅｅ） 伞 Ａｇ ｒｃ ｅ） 口蘑 科 ａ （ ｒ ｈ ｌｍａａ ｅ ｅ ， 蘑 属 （ ｅ ｉ ａ ， 名 紫 Ｔ ｉ ｏｏ ｔｃ ａ ） 香 ｃ Ｌ ｐｓ ） 又 ｔ 晶香蘑 、 脸 蘑 和 紫 花 脸 香 蘑 等 ， 中 国 主 要 分 花 在 布于 山 东 、 龙 江 、 北 、 肃 、 海 、 川 等 地 ， 黑 河 甘 青 四
得供试 发 酵全 液 。 １３ 多 糖 提 取 基 本 条 件 ． 发 酵 全 液 经 剪 切 乳 化 机 打 碎 后 ， １ｍｏ／ 用 ｌＬ Ｎａ ＯＨ 调 节 发 酵 全 液 ｐ 至 １ ，０ Ｈ ２ １ ０℃ 沸 水多 糖 得 率 作 为 评 价 指 标 ， 以
对花 脸香 蘑发 酵全 液 多 糖 的提 取 条 件 进 行 优 化 ， 为花脸 香蘑 多糖 提取 研究 奠定 基 础 。
１ｈ ６０ ０ｇ离心 １ ｎ 上 清经 沸水水 浴 浓缩 至 ， ０ ０ｍｉ ，
原 体 积 的 １ １ ， 人 无 水 乙 醇 使 乙 醇 终 浓 度 达 ／０加
花脸香蘑发酵全液多糖提取条件的研究
花脸香蘑发酵全液多糖提取条件的研究摘要:采用热水浸提法,以粗多糖得率作为评价指标,通过单因素试验和正交试验,对花脸香蘑[Lepista sordida (Fr.) Sing.]菌丝体发酵全液中多糖的提取条件进行优化。
结果表明,优化的提取条件为:提取温度100 ℃、提取次数3次、pH 12、乙醇终浓度70%;在此优化条件下,花脸香蘑发酵全液的粗多糖得率达4 mg/mL。
关键词:花脸香蘑;发酵全液;多糖;提取条件花脸香蘑[Lepista sordida (Fr.)Sing.]属于担子菌亚门(Basidiomycomycotina),层菌纲(Hymenomycetes),伞菌目(Agaricales),口蘑科(Tricholomataceae),香蘑属(Lepista),又名紫晶香蘑、花脸蘑和紫花脸香蘑等,在中国主要分布于山东、黑龙江、河北、甘肃、青海、四川等地,气味浓香,是一种味道鲜美的食用菌[1]。
罗心毅等报道在人工代料栽培的花脸香蘑子实体中富含人体抗自由基、抗衰老、抗癌等微量元素[2]。
1996年MAZUR等从花脸香蘑发酵菌丝体中提取、分离得到两种二萜骨架化合物,并进行了结构鉴定及生物活性研究[3];而针对花脸香蘑发酵全液多糖提取条件的研究尚未见报道。
本研究采用热水浸提法,以粗多糖得率作为评价指标,对花脸香蘑发酵全液多糖的提取条件进行优化,为花脸香蘑多糖提取研究奠定基础。
1 材料与方法1.1材料1.1.1供试菌株花脸香蘑623菌株系青岛农业大学药用真菌研究所提供。
1.1.2培养基平板培养基:玉米面10 g ,酵母膏2 g,琼脂20 g,水1 000 mL,pH自然。
液体培养基:玉米面10 g ,酵母膏2 g,水1 000 mL,pH自然。
1.2发酵全液制备平板培养基中心点接种直径8 mm斜面菌种,27 ℃培养至菌丝体较致密并呈现紫色时,得活化菌种。
采用直径8 mm的打孔器取活化菌种,接种于装有200 mL液体培养基的500 mL三角瓶中,150 r/min、27 ℃培养,直至发酵液不再浑浊,菌球密度适中,获得液体菌种。
食用真菌多糖提取条件的优化及其还原力的比较
1402010, Vol. 31, No. 14食品科学※工艺技术食用真菌多糖提取条件的优化及其还原力的比较陈 欣，龚 兰，刘冠卉(江苏科技大学生物与环境工程学院，江苏 镇江 212003)摘 要：利用单因素和正交试验对 4 种食用真菌多糖的提取工艺进行研究，并对其还原能力进行比较。
结果表明： 杏鲍菇多糖最佳提取工艺为提取温度 90℃、料水比 1:30(g/mL)、提取时间 1h、乙醇体积分数为 95%；香菇多糖最 佳提取工艺为提取温度 90℃、料水比 1:20(g/mL)、提取时间 3h、乙醇体积分数 85%；金针菇多糖最佳提取工艺为 提取温度 80℃、料水比 1:20(g/mL)、提取时间 2h、乙醇体积分数 95%；美味牛肝菌多糖最佳提取工艺为提取温度 70℃、料水比 1:40(g/mL)、提取时间 4h、乙醇体积分数 95%；经过工艺优化，4 种食用真菌多糖最高得率分别为 3.89%、5.93%、2.79%、9.48%；4 种食用真菌多糖的还原能力均随着多糖质量浓度的提高而提高，而美味牛肝 菌多糖的还原能力最强。
与其他 3 种食用真菌相比，经过提取工艺的优化，美味牛肝菌的多糖提取率最高，抗氧 化能力最强。
关 键 词： 食 用 真 菌 ； 多 糖 ； 优 化 ； 还 原 力Extraction and Ferric Reducing Antioxidant Power of Polysaccharides from Four Edible FungiCHEN Xin，GONG Lan，LIU Guan-hui (School of Biological and Environmental Engineering, Jiangsu University of Science and Technology, Zhenjiang 212003, China)Abstract In this study, we optimized key conditions for the water extraction and ethanol precipitation of polysaccharides from ： the edible fungi, Pleurotus eryngii, Lentinula edodes, Flammulina velutipes and Boletus edulis Bull using single factor and orthogonal array design methods and compared the reducing power of the products obtained. The results showed that the optimum values of extraction temperature, material-to-water ratio (g/mL), length of extraction and ethanol concentration were 90 ℃, 1:30, 1 h and 95% for Pleurotus eryngii polysaccharide extraction, 90 ℃, 1:20, 3 h and 85% for Lentinula edodes polysaccharide extraction, 80 ℃, 1:20, 2 h and 95% for Flammulina velutipes polysaccharide extraction, and 70 ℃, 1:40, 4 h, 95% for Boletus edulis Bull polysaccharide extraction, respectively. Under these optimum conditions, the corresponding polysaccharide yields were 3.89%, 5.93%, 2.79% and 9.48%, respectively. All of these four fungal polysaccharides had reducing power positively correlated with concentration. The reducing power of Boletus edulis Bull polysaccharides was the strongest. Also, the yield of Boletus edulis Bull polysaccharides was the highest. These results demonstrate Boletus edulis Bull appear to be a promising edible fungus. Key words：edible fungi；polysaccharides；optimization；reducing power 中图分类号：TS201.1；Q539 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2010)14-0140-05食用真菌不仅营养丰富、风味独特，而且部分种 类可药食兼用[ 1 ] 。
响应面法优化香菇胞外多糖提取工艺
响应面法优化香菇胞外多糖提取工艺摘要：采用单因素实验研究醇沉时间、乙醇浓度和发酵液pH对香菇（Lentinula edodes）发酵液中提取胞外多糖产量的影响，结果表明最佳醇沉时间为16 h，乙醇浓度为80%，pH为8。
在单因素实验基础上采用Box-Behnken响应面设计法优化香菇发酵液中胞外多糖提取工艺，最佳提取工艺为：醇沉时间17.71 h，乙醇浓度78.66%，pH 7.93。
在此条件下，香菇胞外多糖产量达到3.15 g/L，与模型预测值3.08 g/L接近。
关键词：香菇；胞外多糖；Box-Behnken设计；响应面法；提取条件香菇多糖是目前临床上广泛应用的免疫增强剂，广泛应用于恶性肿瘤的辅助治疗，可有效改善患者免疫功能，增强化疗疗效并降低毒副反应，使患者生存质量明显提高[1-4]。
目前香菇多糖多从子实体中提取，存在生产周期长、耗能大、产量和提取率低等问题[5-7]。
活泼的研究表明，香菇发酵液含有与香菇子实体相同的营养成分，而且含量均高于香菇子实体，尤其是钙、镁、多糖、异亮氨酸、亮氨酸含量很高[8]。
因此，利用廉价农副产品做原料，采用液体深层发酵技术不仅可以规模化培养香菇菌丝体，还可以从发酵液中提取香菇多糖。
此技术已成为降低香菇多糖生产成本、提高生产效率的有效途径[9]。
目前，从香菇发酵液中提取胞外多糖（extracellular polysaccharide，EPS）的研究甚少，特别是以响应面法用于优化香菇胞外多糖提取的工艺尚无报道。
因此，笔者通过响应面分析法优化香菇胞外多糖提取工艺，为从发酵液中提取香菇多糖的工业化生产提供参考。
1材料与方法1.1供试菌株香菇（Lentinula edodes）66#菌株由陕西省食药用菌工程技术研究中心提供。
1.2培养基斜面培养基（CPDA培养基）：20%马铃薯、2%葡萄糖、2%琼脂、0.3% KH2PO4、0.15% MgSO4·7H2O、0.001% VB1、pH自然。
香菇多糖提取工艺
香菇多糖提取工艺的研究1引言多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中,是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子,尤其是一类重要的信息分子[1]。
到目前为止，已有近300种的多糖化合物从天然产物中分离出来，其中植物提取水溶性多糖最为重要。
从植物中提取多糖主要根据不同溶解度来选择溶剂进行。
香菇多糖的提取一般有热水提取法、酸提取法、碱提取法、酶提取法和微波助提法等方法[2]，本文进行了浸提香菇多糖的工艺条件研究，以期获得香菇多糖的最佳提取条件，为其产业化生产提供有效的方法和技术参数。
本实验采用各种溶剂和酶的处理,提取香菇多糖,保持多糖的生物活性，效果是明显的。
1.1香菇多糖的组成与药理价值香菇多糖(LentinanLNT) 是一种β—1,3—葡聚糖，系从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖。
多糖以甘露糖为主，含少量的葡萄糖、微量的岩藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等；肽链由天冬氨酸、组氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸等18种氨基酸组成。
LNT的化学结构是一种以β—D—[1~3]葡萄糖残基为主链，侧链为(1—6)葡萄糖残基的葡聚糖，平均分子量约为50万道尔顿[3]。
香菇多糖1969年在日本首先发现，自此，国内外学者对LNT作了许多深人的研究。
近年来，LNT广泛药理作用研究取得了很大进展。
主要的药理价值有：免疫调节作用；抗肿瘤作用[4]；抗病毒作用；对寄生虫、霉菌、细菌等感染均有治疗作用；有抗衰老、抗辐射作用，还具有预防实验性高脂血症和高血糖作用。
在临床上LNT还用于治疗小儿反复呼吸道感染，糖尿病，寻常型银屑病，硬皮病，面部扁平，尖锐湿疹等。
此外，硫酸化香菇多糖具有显著抗HIV作用，香菇多糖在治疗胃癌、结肠癌、肺癌等方面有良好疗效[5]。
作为免疫辅助药物，香菇多糖主要用来抑制肿瘤的发生、发展和转移，提高肿瘤对化疗药物的敏感性，改善患者的身体状况，延长其寿命。
花菇多糖的提取工艺优化
出版社，是杂志请标出是哪家杂志？？？)2004（11）:35～36. 2 张惟杰.糖复合物生化研究技术(第 2 版)[M].杭州:浙江大学出版社, 1999,11～12. 3 聂凌鸿,宁正祥.广东淮山多糖提取工艺的研究[J].食品工业科技，2003,12(24):43～45. 4 田光辉.香菇多糖的提取工艺优化[J].延安大学学报（自然科学版），2002，2（21）:46～
1 仪器设备与材料
1.1 实验原料 花菇：市售，烘干粉碎备用。
1.2 实验仪器 722 型可见分光光度计、RE52-3 旋转蒸发器、800B 离心机、 SHZ-3 循环水多用真空泵、 电子分析天平、恒温水浴锅（请补充仪器的生产厂家？？）
1.3 药品 95%乙醇、蒸馏水、苯酚、硫酸及其他试剂：均为分析纯。
X2 时间/h
X3 料液比
-1
0.5
1
1:30
0
1.5
2
1:40
1
2.5
3
1:50
表 5 中心组合实验设计表‡
实验号
X1
X2
X3
多糖得率/%
1
-1
-1
0
2.25
2
-1
0
-1
2.48
3
-1
0
1
2.92
4
-1
1
0
3.02
5
0
-1
-1
2.92
6
0
-1
1
3.25
7
0
1
-1
3.42
8
0
1
香菇多糖提取工艺的优化
香菇多糖提取工艺的优化作者：王广慧，于德涵来源：《湖北农业科学》2014年第07期摘要：试验研究了超声波协同高压热水浸提法从香菇（Lentinus edodes）中提取活性多糖的最适条件。
通过正交试验，探讨了料液比（g/mL，下同）、超声波功率、超声波处理时间、高压热水浸提时间及高压热水浸提温度对香菇多糖提取率的影响，并以香菇多糖提取率为评价指标，优化其提取工艺。
结果表明，超声波协同高压热水浸提法提取香菇多糖的最适条件为：料液比1∶50，超声波功率250 W，超声波处理时间8 min，高压热水浸提温度108 ℃，高压热水浸提时间100 min。
在此条件下，香菇多糖的提取率为27.2%。
关键词：香菇（Lentinus edodes）多糖；超声波；高压热水浸提；工艺优化中图分类号：TQ461 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）07-1625-02Optimization of Extracting Polysaccharide Extraction from Lentinus edodesWANG Guang-hui， YU De-han（Department of Food and Pharmaceutical Engineering， Suihua College， Suihua 152061，Heilongjiang， China）Abstract： The conditions of extracting polysaccharide from Lentinus edodes by ultrasonic combining with high pressure hot water were optimized through analyzed effects of solid-liquid ratio， ultrasonic power， ultrasonic treatment time， high pressure extraction time and high pressure extraction temperature on the extraction rate of polysaccharide. The results showed that the optimal condition was the solid-liquid ratio of 1∶50（g/mL）， ultrasonic power of 250 W，ultrasonic time of 8 min， high pressure extraction temperature of 108 ℃， high pressure extraction time of 100 min. Under the optimal condition， the polysaccharide extraction rate was 27.2%.Key words： Lentinus edodes polysaccharide；ultrasonic；high-pressure hot water extraction；process optimization香菇（Lentinus edodes）含有多种有效药用成分，香菇多糖是一种重要的生物反应调节剂。
花脸香蘑功能饮料的研制
２结果与分析
２．１发酵发酵５ ｄ后，菌丝体均匀浓密，湿生物量达到 ４０％一５０％，具有独特的蘑菇香味和鲜味。 ２．２风味确定在该饮料的生产中，影响其质量、口感、风味 的主要因素为花脸香蘑提取液浓度、甜味剂、酸味剂的添加 量。在该试验中设计三因素三水平，以ｋ（３４）正交表作正交试 验，对饮料风味进行调配，因素水平见表ｌ。
ｍｍｘ５姗大小菌
表４。
通过极差分析，由表３可以看出，影响饮料风味各因素主
收稿日期：２００９－０７—１０ ’通讯作者。ｅ－ｍａｉｌ：ｊｉａａｇｘｌ＠ｏｕｃ．Ｍｕ．ｃｎ
次顺序为Ａ＞Ｂ＞Ｄ＞ｃ，即提取液浓度＞白砂糖添加量＞空白＞ ６１
万方数据
藏加工
ｌｅ ｆｕｎｇｉ
裹２产品毫官评价质■标准 质量标准 评 色 气 滋 分 泽 味 良质饮辩 ８一ｌＯ分 乳白或淡黄色 清香纯正 次质饮科 ５０分 白色或深黄色 香味不浓或带异味 劣质饮料 ｌ￣４分
ｄｍｉｎ摇床培养１０ ｄ，挑选菌丝球均匀细密的作为种子。
２５０ｍＬ三角瓶装液１００ｍＬ，接种量７％（Ｖ／Ｖ）．２５℃，１６０ｄｍｉｎ 摇床培养５ ｄ，收集菌丝体。 １．５．２提取水经过处理，达到软饮料用水标准旧。离心收 集菌丝体，加入２倍体积的水．１００℃浸提Ｏ．５ ｈ．过滤，再向菌 丝体中加入等体积的水，１００Ｔ浸提Ｏ．５ ｈ，滤掉菌丝体，合并 滤液。花脸香蘑提取液具有独特的蘑菇香味，口味清新爽口。
味甜中带酸清凉爽口菇味过浓或不浓。藕有异味酸味过重，有严重异味
２．４．１感官指标①色泽：金黄色。②滋气味：具有独特的花 脸香蘑清香．清凉酸甜适中，无异味。③组织形态：均一、澄清、
无肉跟可见杂漉淀、无分层。
２．４．２理化指标①总酸（以柠檬酸计％）：ｏ．０６７２＜ｌ；②ｐＨ： ３．９２；③可溶性固形物≥３．８％。 ２Ａ．３卫生指标饮料中细菌总数≤１∞个，ｍＬ，大肠杆菌群
香菇多糖的纯化工艺优化
香菇多糖的纯化工艺优化梁敏【摘要】为获得纯度较高的香菇多糖,以香菇为原料,采用复合酶法提取香菇多糖并对其进行纯化,在单因素试验的基础上,对脱色温度、活性炭用量、脱色时间和pH 值4个因素进行正交试验并选取香菇多糖脱色的最佳工艺条件,采用酶法结合Sevage法脱除蛋白质对脱色后的香菇多糖进行纯化.结果表明:在脱色温度20℃,活性炭用量1.0％,脱色时间90 min,pH 3的条件下,香菇多糖脱色率为71.3％,多糖损失较低,为7.8％.脱色纯化后的香菇多糖为白色,蛋白去除率为90.26％.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2013(041)010【总页数】4页(P165-167,171)【关键词】香菇多糖;纯化;工艺优化【作者】梁敏【作者单位】齐齐哈尔大学化学化工学院,黑龙江,齐齐哈尔161006【正文语种】中文【中图分类】S39香菇(Lentinus edodes)是侧耳科(Pleurota ceae)的担子菌，世界名贵食用兼药用菌之一。
香菇子实体中除含有蛋白质、氨基酸、矿物质、维生素和对人体有益的微量元素外还含有一种重要的生物活性高分子多糖。
现代研究表明，香菇多糖具有抑制肿瘤、抗病毒和抗氧化等药理活性，对提高肝炎及艾滋病人的免疫功能等均有较好的作用，且无任何毒副作用[1]。
Chihara等[2-3]从香菇子实体中分离得到一种具有抗肿瘤活性的β-(1-3)-D-葡聚糖，其抑制癌症和抗肿瘤效果不是直接作用于移植性癌细胞，而是通过宿主调节发生作用，其抗肿瘤的药理作用并非直接杀伤细胞或抑制细胞生长，而是表现在增强人体免疫调节作用。
因此，人们常称香菇多糖为生物反应修饰剂[4]。
香菇多糖通常被包裹在细胞壁内，往往和蛋白质结合在一起，以蛋白多糖的形式存在，中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质，从而将多糖释放出来，提高多糖的得率，降低多糖中蛋白质的含量，提高多糖的纯度。
传统的浸提法虽然是提取多糖的经典方法，但时间长、能耗大、效率低，酶法处理可以提高多糖的提取率、减少能源消耗、缩短提取时间。
内部沸腾法提取香菇多糖的工艺优化
收稿日期：2010-07-23 基金项目：广西科学研究与技术开发计划课题(桂科能 05112001-3A6) 作者简介：陈晓光(1981 —)，男，博士研究生，研究方向为基本有机化工。E-mail：chen_007051@ * 通信作者：童张法(1963 —)，男，教授，博士，研究方向为化学工程基础和精细化工应用。E-mail：zhftong@
during inner ebullition extraction
图 2 是在解析剂乙醇体积分数 20% 条件下，不同提 取温度对总糖提取率的影响。由图 2 可知，90℃为最佳 温度。20% 乙醇的共沸点 87.1℃，当物料的温度高于 87.1℃，物料内部的乙醇产生沸腾，提取过程为对流扩 散，当物料的温度低于 87.1℃，物料内部的乙醇不沸 腾，提取过程为分子扩散。所以温度低于 87.1℃时由于 扩散速度慢，在 5min 内提取不完全。但温度高于 90℃ 时，物料内部沸腾过快，对流扩散维持时间太短，另 一方面，由于多糖分子大，扩散迁移速度较慢，所以 对流扩散的过早结束导致了提取率的下降。
1.3.3 传统煎煮法提取香菇总糖 为与内部沸腾提取法对比，取 5g 香菇粉末，加入
1 2 5 m L 水，加热回流 2 h ，过滤，取少量的滤液，用 苯酚 - 硫酸法测定粗多糖含量。
1.3.4 醇沉法制备香菇多糖 分别将内部沸腾法和传统法得到的提取液的体积浓
缩到被提物料的 1.2 倍，然后加入 95% 乙醇使浓缩液中 的乙醇含量为 7 5 % ，静置，醇沉过夜，过滤，5 0 ℃ 真空干燥，取少量粗浸膏分析多糖含量，确定最佳的 含醇量。 1.4 分析方法
1.4.3 香菇多糖含量的计算[15] 香菇多糖的含量计算如下： Y/% = (C1 － C2)× 0.9 × 100 式中：Y 、C 1 及 C 2 分别是香菇多糖、总糖及还总
野生花脸香蘑的分离纯化及ITS序列鉴定
野生花脸香蘑的分离纯化及ITS序列鉴定邹莉;杨苑艺;孙婷婷;王世新;崔嵘;李晶莹【摘要】以采自内蒙古根河地区的野生花脸香蘑为材料,采用组织分离法分别对其菌盖处、菌盖与菌柄交界处和菌柄处的组织进行分离纯化;通过测定生长速度和污染率等方法,研究分离纯化的最适培养基和最佳部位;最后将分离物进行ITS序列分析,计算遗传距离,并采用邻接法构建NJ系统发育树.结果表明,分离纯化最适培养基为PDA+子实体煮水培养基;菌盖与菌柄交界处为最佳分离部位,菌丝生长速度快、长势好、污染率低;并且子实体经自然风干2d后能有效降低污染率;最后分离物经ITS序列测定,系统发育分析证实其为花脸香蘑.【期刊名称】《浙江农业学报》【年(卷),期】2016(028)002【总页数】5页(P264-268)【关键词】花脸香蘑;组织分离;ITS序列分析;系统发育分析【作者】邹莉;杨苑艺;孙婷婷;王世新;崔嵘;李晶莹【作者单位】东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040【正文语种】中文【中图分类】S646花脸香蘑(Lepista sordida)又叫紫晶香磨、丁香蘑等，属真菌界(Fungi)担子菌门(Basidiomycomycota)层菌纲(Hymenomycetes)伞菌目(Agaricales)口磨科(Tricholomataceae)香蘑属(Lepista)[1]。
子实体中等大小，菌盖直径2.0～10.5(12)cm，紫色、浅红菱色或藕粉色，菌肉薄并带淡紫色，菌褶淡蓝紫色或浅红菱色[2-3]。
花脸香蘑含有丰富的蛋白质和氨基酸，还富含钙、铁、锌、硒等微量元素[4]，其菌株发酵物有较强的抗癌、抗菌等活性[5]，是营养价值与药用价值兼优的野生食用菌，具有极大的开发价值[6]。
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野生花脸香蘑多糖提取工艺优化
作者：伦志明池玉杰韩树英尹立伟
来源：《安徽农业科学》2014年第07期
摘要[目的]研究野生花脸香蘑子实体多糖的最佳提取工艺条件。
[方法]采用热水浸提法提取野生花脸香蘑子实体多糖，通过单因素试验研究浸提时间、浸提温度、料液比、提取次数对多糖得率的影响，并在单因素试验的基础上，进行正交试验获得最佳提取工艺。
[结果]在提取次数为2次的前提下，野生花脸香蘑子实体多糖的最佳提取工艺条件为：浸提温度65 ℃，料液比1∶40（g/ml），提取时间5 h；在此条件下，提取花脸香蘑子实体水溶性多糖，得率为10.39%。
[结论]试验优选了野生花脸香蘑子实体多糖的提取工艺条件，为野生花脸香蘑多糖的生产提供了理论依据。
关键词野生花脸香蘑[Lepista sordida （Schum.：Fr.）Sing]；多糖；正交试验
中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2014）07-02113-03
基金项目黑龙江省自然科学基金项目（C200931）。
作者简介伦志明（1971-），女，黑龙江海伦人，副教授，博士研究生，从事食用菌相关方面研究。
收稿日期20140217食药用真菌中具有药理活性的物质有很多，而多糖则是其中最广为人知、最有效的抗肿瘤和免疫调节活性物质，它们可以从食药用真菌的子实体、菌丝体和发酵液中分离出来[1]。
从20世纪70年代开始，菌丝中提取的云芝多糖、子实体中提取的香菇多糖和发酵液中提取的裂褶菌多糖在抗癌临床治疗方面取得了良好效果[2]。
40多年间，各国学者对包括灵芝、云芝、灰树花、平菇、蛹虫草、黑木耳等在内的近700种担子菌多糖的活性进行了研究[3]。
结果显示，这些多糖表现出较强的抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、抗病毒、降低血糖和降低血脂等多种药理活性[4-10]，而且由于天然、毒副作用小的特点，使它们成为了潜力巨大的功能性食品和药物的来源。
自然界的食药用真菌约有140 000种，人类已知的约有14 000种[11]，仍有庞大的食药用真菌群体做为多糖资源去等待人类开发与利用。
花脸香蘑[Lepista sordida （Schum.：Fr.）Sing]为伞菌目（Agaricales）口蘑科（Tricholomataceae）香蘑属（Lepista）真菌，广泛分布于黑龙江、河北、河南、甘肃、青海、四川、新疆、西藏、山西、内蒙古、广西、云南、湖南、重庆、贵州、江西和福建等地[12]。
因生物转化率较低，子实体易碎，不耐运输，目前尚未大面积推广栽培，市场上完全依赖于野生资源。
对于这种气味浓香、色泽宜人、味道鲜美、在民间享有很高知名度的名贵食用菌，多糖的研究才刚刚开始。
张振宇等以中药渣对花脸香蘑进行固体发酵，发现其粗多糖提取物在一定浓度下对小鼠NK细胞活性具有明显增强作用[13]。
另有研究表明，花脸香蘑多糖具有抗肿瘤活性[14]，对肝细胞有保护作用[15-16]。
孟玲等对花脸香蘑菌丝多糖的发酵条件进行了研
究，结果表明，在适量蔗糖、蛋白胨、硫酸镁、磷酸二氢钾，蒸馏水1 000 ml的培养条件下，菌丝体多糖提取率最高[17]。
笔者以野生花脸香蘑子实体为原料，采用单因素试验及正交试验优化花脸香蘑多糖的热水提取工艺，以期为花脸香蘑多糖的开发和利用提供科学的理论依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1 研究对象。
花脸香蘑，采自黑龙江省齐齐哈尔市双河农场，经形态观察及ITS序列分析鉴定为花脸香蘑（Lepista sordida），序列已经提交GenBank，序列编号为KF874612。
1.1.2 主要仪器。
DKS26恒温水浴锅，购自上海森信试验仪器有限公司；Cary50紫外分光光度计，购自美国VARIAN公司；SORVALL LEGEND RT台式冷冻离心机，购自德国Heraeus公司；FD5505真空冷冻干燥机，购自美国SIM公司；FW100高速万能粉碎机，购自北京中兴伟业仪器有限公司；循环水真空泵，购自郑州长城科工贸有限公司。
1.1.3 主要试剂。
葡萄糖、重蒸酚、浓硫酸和95%乙醇等试剂均为国产分析纯，市售。
1.2方法
1.2.1 试验样品预处理。
取花脸香蘑子实体，自然风干后，置于60 ℃烘箱中烘至恒重，以高速万能粉碎机粉碎，过60目筛，加入8倍体积浓度95%乙醇，室温放置过夜，抽滤后，上清液密封放置，沉淀复加乙醇，过夜、抽滤，如此反复操作3次，合并上清液，旋转蒸发仪回收乙醇，沉淀置阴凉通风处风干，备用。
1.2.2 苯酚-硫酸法测定多糖含量[18]。
1.2.2.1 苯酚溶液配制。
称取80.00 g重蒸苯酚，加入20 ml蒸馏水使之溶解，制成浓度80%苯酚溶液，置于4 ℃冰箱中避光保存，使用前加蒸馏水稀释成浓度6%苯酚溶液。
1.2.2.2 葡萄糖标准溶液配制。
称取葡萄糖10.0 mg，105 ℃烘至恒重，加蒸馏水溶解定容至250 ml，配制成40 μg/ml葡萄糖标准溶液。
1.2.2.3 线性关系的考察。
用移液器吸取葡萄糖标准溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6和1.8 ml，置于10 ml离心管中，以蒸馏水补充至2.0 ml，以2.0 ml蒸馏水作为空白对照，各加入1.0 ml浓度6%苯酚溶液，混合均匀，再加入5.0 ml浓硫酸，振荡摇匀，沸水浴中加热15 min，取出后用自来水冷却，紫外分光光度计测490 nm波长处吸光度，以吸光度为（Y）纵坐标，葡萄糖质量浓度（X，μg/ml）为横坐标，制作标准曲线，计算线性回归方程。
1.2.2.4 花脸香蘑多糖提取得率的测定。
多糖提取率按下列公式计算：多糖提取率（%）= （C×V×D/M）×100；其中，C为提取液中葡萄糖浓度（mg/ml），V为提取液容积（ml），D 为提取液稀释倍数，M为试验样品质量（mg）。
1.2.3 花脸香蘑多糖提取单因素试验。
（1）料液比对花脸香蘑多糖的影响。
取花脸香蘑子实体粉末10.00 g，称取5份，按料液比1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50（g/ml，W/V，下同），在95 ℃条件下浸提2 h，设置3个重复，浸提后提取液离心，测量容积，取1.0 ml提取液，稀释至适当倍数，按苯酚-硫酸法用紫外分光光度计测定490 nm波长处吸光度，比较不同料液比条件下的多糖提取率。
（2）提取温度对花脸香蘑多糖的影响。
取花脸香蘑子实体粉末10.00 g，称取7份，按上述试验确定的料液比，分别于35、45、55、65、75、85和95 ℃水浴中加热2 h，设置3个重复，浸提后提取液离心，测量容积，取1.0 ml提取液，稀释至适当倍数，用苯酚-硫酸法在490 nm波长处测定吸光度，比较不同温度条件下的多糖提取率。
（3）提取时间对花脸香蘑多糖的影响。
取花脸香蘑子实体粉末10.00 g，称取5份，按上述试验确定的料液比和温度，分别提取1、2、3、4和5 h，设置3个重复，浸提后提取液离心，测量容积，取1.0 ml提取液，稀释至适当倍数，按苯酚-硫酸法在490 nm波长处测定吸光度，比较不同时间条件下的多糖提取率。
（4）提取次数对花脸香蘑多糖的影响。
取花脸香蘑子实体粉末10.00 g，称取4份，按上述试验确定的料液比、温度和时间，分别提取1、2、3和4次，设置3个重复，浸提后提取液离心，合并上清液，测量容积，取1.0 ml提取液，稀释至适当倍数，按上述苯酚-硫酸法在490 nm波长处测定吸光度，比较不同提取次数条件下的多糖提取率。
1.2.4 正交试验。
在单因素试验基础上，以提取温度（A）、料液比（B）、提取时间（C）为考察因素，采用L9（33）正交表设计试验组合（表1），每个组合设置3个重复，提取次数为2次，使用统计分析软件SPSS17.0分别对单因素试验及正交试验进行方差分析。
2 结果与分析
2.1线性关系的考察计算得线性回归方程为：Y=0.014 9X-0.002 6，R2=0.997 3。
试验结果表明，在1.6～7.2 μg/ml范围内，葡萄糖浓度与吸光度的线性关系良好。