紫花苜蓿高频组培再生体系影响因素研究
影响苜蓿优质高产的制约因素及对策
影响苜蓿优质高产的制约因素及对策苜蓿被誉为“牧草之王”，营养丰富。
其干物质粗蛋白含量为15～25％，相当于豆饼的一半，比玉米高1～1．5倍。
1．6kg苜蓿干草，相当于lkg粮食的能量。
且产草量高、适应性强，是发展农区畜牧业的首选饲草。
但在苜蓿种植过程中，由于某些措施不当，一定程度上制约了农区畜牧业和养殖业对优质牧草的需求。
1 低产因素1．1管理粗放多年来，苜蓿大多作为绿肥种植，主要用于改良土壤，因而忽视田间管理和高产栽培技术的推广。
1．2 品种更新慢本地一直以当地紫花苜蓿为主，经多年种植已退化。
1．3选地与整地苜蓿喜水但不耐水淹，因此在低洼地，排水不畅、地下水位不到1m的地块，不宜种植。
苜蓿种子小、顶土力弱，但往往放在肥力差、整地质量不高的荒地种植。
1．4 投入少，施肥不当苜蓿对土壤养分的吸收能力很强，远较一般作物和牧草为高。
生产1t苜蓿干草约从土壤中吸收N素12．5kg，P素(P20５)3．5kg，k素(K20)20kg，与小麦相比，N、P均多1倍，K多2部，Ca多10倍。
但在苜蓿栽培中，农民往往不施肥或少施肥。
1．5 刈割不适时苜蓿生长早期，蛋白质、矿物质、胡萝卜素含量较高，水分多幼嫩可口，家畜喜食且营养价值高。
随着生长，粗纤维含量增加，矿物质和胡萝卜素含量减少。
特别是生长后期蛋白质含量明显减少，粗纤维大量增加，茎部明显木质化，适口性大大下降。
刈割过早影响草地寿命，刈割过迟品质下降。
最后一次刈割时间太晚影响苜蓿越冬和翌年返青。
1．6 病虫害苜蓿病虫害会降低苜蓿产量和品质。
1．7 晾制干草问题苜蓿开花初期刈割含水量为75-80％，而保存干草安全含水量为14-17％。
自然条件下，叶片的干燥速度比茎秆快5倍左右，而叶片是苜蓿最有价值的部分(蛋白含量是茎秆的2．5～3倍，占整株蛋白质的80％)，如果干燥时间长，叶片易受损失，营养损失较大。
晾制时如果降雨，会使草的颜色变白、发霉，叶片大量脱落，营养价值降低。
紫花苜蓿研究进展
紫花苜蓿研究进展紫花苜蓿是一种重要的牧草，具有丰富的营养价值和广泛的生态适应性，因此受到了广泛的关注和研究。
随着科学技术的不断进步，紫花苜蓿的研究也在不断取得新的进展。
本文将对紫花苜蓿的研究进展进行介绍，包括其遗传改良、营养价值、栽培管理等方面的最新研究成果。
一、遗传改良紫花苜蓿的遗传改良是当前研究的一个热点领域。
传统育种方法和分子生物学技术的结合，为紫花苜蓿的遗传改良提供了更多的手段。
在传统育种方面，研究人员通过杂交选育，培育出了具有高产量、高抗逆性、高抗病性的新品种，如“紫花苜蓿527”、“紫花苜蓿808”等。
这些新品种在不同的生态环境下表现出良好的适应性和稳定的生产性能，在提高紫花苜蓿的生产能力和品质方面发挥了重要作用。
利用分子生物学技术进行的遗传改良也取得了一些突破性进展。
研究人员通过基因工程技术，成功地将外源基因导入紫花苜蓿，使其获得了抗病、抗逆、抗虫等重要性状。
利用激素信号转导途径的基因进行转基因改良，可以增强紫花苜蓿的逆境适应性和生长发育能力。
这些遗传改良技术的应用，为提高紫花苜蓿的抗逆性和生产性能提供了新的途径和手段。
二、营养价值紫花苜蓿是一种优质的饲草，具有丰富的营养价值。
研究表明，紫花苜蓿含有丰富的蛋白质、维生素和矿物质，尤其是含有丰富的植物雌激素，对动物的生长和免疫功能有着重要的影响。
近年来，研究人员对紫花苜蓿的营养价值进行了深入的研究，不仅对其主要营养成分进行了分析和评价，还对其抗氧化、抗炎、抗衰老等健康功能进行了探讨。
研究发现，紫花苜蓿中富含的异黄酮类物质对人体具有多种有益作用，可以预防心血管疾病、调节内分泌功能、改善骨质疏松等。
这些研究成果为紫花苜蓿的开发利用提供了科学依据，为其在保健食品、药品等领域的应用奠定了基础。
三、栽培管理紫花苜蓿的栽培管理是影响其生长发育和产量形成的重要因素。
近年来，研究人员对紫花苜蓿的栽培管理进行了系统的研究，包括土壤肥力管理、种植密度、水分管理、病虫害防治等方面。
紫花苜蓿培养体系的建立
507
8551 （ 2010 ） 03-0507-06 文章编号 ：1000-
紫花苜蓿组织培养体系的建立
赵金梅 李 芳
2
周
禾
3
孙启忠
1
毕
静
2
（ 1. 中国农业科学院草原研究所， 内蒙古 呼和浩特 2. 内蒙古农业大学环境生态学院， 内蒙古 呼和浩特 3. 中国农业大学动物科技学院， 北京
［ 1， 2］
1. 2. 3
组培苗的移 植
组培苗在生根培养基上长到
4 ～ 6cm 时， 打开培养基封口膜， 炼苗 1 周， 然后移植到 由蛭石和草炭配置的灭菌土壤中生长 。 1. 2. 4 试验设计 愈伤诱导试验用 SPSS13. 0 软件设
5 计 L 16 （ 4 ） 正交试验， 研究不同 外 植 体 类 型、 不同浓度
1
1. 1
材料与方法
试验材料 试验材料为紫花 苜 蓿 品 种 中 苜 二 号， 种子由中国
愈伤组织分化的激素配 比 见 表 2 ， 共 6 个 处 理， 每 个处理 3 个重复， 每个重复接种 10 个外植体 。
表2 愈伤分化培养基
农业科学院北京畜牧兽医研究所杨青川老师和康俊梅 老师提供 。 1. 2 1. 2. 1 试验方法 无菌苗的培养 采用成熟种子， 在超净工作台 Table 2
08 29 收稿日期 ：200912 04 接受日期 ：2009 -
1 -01 ） ， 基金项目 ： 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目 （ nyhyzx2007 国家科技支撑计划项目（ 2008 BADB3B03 ） 作者简介 ： 赵金梅（ 1977 -） ， 女， 内 蒙 古 巴 彦 淖 尔 人， 博 士， 助 理 研 究 员， 从 事 牧 草 抗 逆 遗 传 育 种 和 分 子 生 物 学 研 究 。 E-mail ： zhaojinmei3276 @ 126. com
苜蓿组织培养和再生体系研究
纱布 包 好 ， 入 ４ ℃ 水 浴 中 泡 种 １～２ 。０ １ 升 汞 放 ５ ｈ ．％ （ ｇ １ 溶液 消毒 ３～ ｍｎ Ｈ Ｃ： ） ４ ｉ。无 菌水 冲洗 ５次 ， 无菌 滤 纸 吸干 ， 种于不 含任 何激 素 的 固体 Ｍ 基 本 培 养基 （ 加 接 Ｓ 添
３ ％蔗糖 、． ％琼脂 ，Ｈ＝５ ８ 中。 ０８ ｐ ．） 培养 条 件 ： ５ ±Ｉ 光 照 强 度 ４ ０ １， 暗 周 期 ２ Ｃ Ｅ， ０ ０ｘ 光／
织， 并通过外植体直接再 生途 径和胚性 愈伤 组 织再 生途 径 获得 再 生 芽。在含 有 ＩＡ的 １２ Ｂ ／ ＭＳ培 养基 诱导再 生 苗
生根 。
关键词 ： 苜蓿 ； 外植体 ； 愈伤组织 ； 胚性愈伤 组织； 组织培养
中图 分 类 号 ￥６ ．３ ５ ７２ 文 献标 识 码 Ａ 文章 编 号 １０ ７ ３ （００ Ｏ ４ ０ ０ ７— ７ １ ２ １ ）７— ６— ２
合 的诱 导生 根培养基 （ ２ 中 ， 导生根 培养。 表 ） 诱
表 ２ 根诱 导 培 养 基成 分
发 芽培养获得无 菌苗 ， 以无 菌苗 的叶 片 、 茎段 为 组织 培养 的外植 体材料 。
１２ 试 验 方 法 ．
１２ １ 无菌苗培 养 ．．
取 粒大饱 满 的苜蓿种 子 ７ ， ０粒 双层 １２４ 数据 统计 ．． 采用下 列公式计 算 ：
１ ６卷 ０ ７期
张明娟等
苜蓿组织培养和再生体 系研究
４ ７
２１ 无菌 苗出芽 率 ．
农 菁一 号 的 出苗率 为 ２．％ ， 东 ５７ 肇
数天 分化 出再 生芽 ， 幼芽生 长状态 良好 （ ｌ） ５ 统 计 图 ｅ 。２ｄ
紫花苜蓿高频再生体系的建立[1]
![紫花苜蓿高频再生体系的建立[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/fdb2fd7d01f69e31433294c4.png)
［收稿日期］2009-06-10［作者简介］钱瑾（1978-），女，汉族，甘肃人，巴音学院生物工程系教师、草业科学硕士，主要从事草业科学、食品加工教学和研究。
苜蓿(Medicago sativaL.)为豆科苜蓿属植物，是世界上栽培最早、分布面积最广的优质多年生豆科牧草，素有“牧草之王”的美誉，随着分子生物学和植物基因工程的发展。
在分子水平上对苜蓿进行遗传改良的研究已取的了部分成果。
苜蓿组织培养的研究早期主要集中在多年生紫花苜蓿上。
Saunders 等首先从愈伤组织上获得了再生体系，其他一些种的苜蓿也通过培养细胞和组织获得了再生植株。
由于苜蓿品种繁多，研究方向和所选的品种不同，培养基的组成也会有所差异。
笔者以陇东苜蓿（Long-dong purple medic ）、阿尔冈金（Algonguin ）和秘鲁(Prue)苜蓿种子无菌苗的子叶节和下胚轴进行组织培养，进一步优化苜蓿高频再生体系，并建立了具有重要推广价值的苜蓿品种转化体系。
1材料与方法1.1试验材料试验于2005年3月在兰州大学生命科学遗传育种改良重点实验室进行。
供试验的3个苜蓿品种是陇东苜蓿（Long-dong purple medic ）、阿尔冈金（Algo －nguin ）、秘鲁(Prue)，种子均由甘肃农业大学苜蓿育种专家曹致中教授实验室提供。
1.1.1植物材料外植体采用由无菌苗得到的子叶节和下胚轴的切段。
选择子粒饱满，有光泽的种子，用纱布包裹种子，用回型针夹好，防止小种子丢失，易于操作；用自来水冲洗15min ，然后在70%的酒精中浸泡30s ～1min ；转入0.1%升汞中浸泡5～10min;用无菌水洗涤5～6次，每次约3min ，洗涤过程中不断搅动种子包，将种子表面的升汞洗涤下来，然后用无菌滤纸吸干种子表面的液体，置于无激素的MS 培养基上培养。
1.1.2植物激素(1)BA 、KT 用少许1mol/L 盐酸溶解后，加蒸馏水配成0.5mg/mL 的母液，4℃保存备用。
紫花苜蓿的组织培养与快繁技术研究
紫花苜蓿的组织培养与快繁技术研究作者：李云玲苗锦山来源：《安徽农学通报》2013年第07期摘要：以紫花苜蓿为材料，研究了不同外植体和不同激素处理对苜蓿愈伤和胚状体分化的影响。
结果表明，子叶和下胚轴作外植体，在MS+2，4-D 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L +BA0.5mg/L培养基上愈伤组织诱导率较高，下胚轴的诱导率要高于子叶；下胚轴在MS+BA3.0mg/L培养基中胚状体分化率最高。
关键词：紫花苜蓿；组织培养；快繁技术中图分类号 Q943.1 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）07-51-02目前，土壤盐渍化是影响生态环境和农业生产的严重问题。
在盐胁迫下，植物代谢会受抑制，生长变得缓慢，严重时，叶子萎蔫，甚至死亡。
目前，全世界的盐渍化土地约占陆地面积约30%，而在中国，盐渍地的比例明显高于世界平均水平，天津东部滨海平原区土壤盐渍化尤其严重。
另外，日光温室的大面积普及使土壤盐渍化的问题也越来越明显[1]。
紫花苜蓿，豆科苜蓿属，是一种比较抗盐的作物[2]，其分布遍及五大洲，苜蓿中蛋白质含量可达80%，营养价值丰富，而且再生性强，是改良土壤的良好绿肥[2-3]，因而被称为“牧草之王”。
如果能在盐碱地上种植苜蓿，既可以起到绿化作用，又可创造经济价值，还可以改良土壤，兼顾社会效益、经济效益和生态效益[4]。
由于苜蓿是多年生异花授粉植物，自交结实率低，仅通过常规育种进行品种改良非常困难，而以植物遗传转化技术改良苜蓿品质是一条有效途径[5]。
笔者通过研究不同外植体及不同培养基激素改变对愈伤组织形成和芽分化的影响，以期建立紫花苜蓿的快繁再生体系。
1 材料与方法1.1 试验材料供试苜蓿品种为紫花苜蓿，由潍坊科技学院蔬菜工程技术研究所提供。
1.2 试验方法1.2.1 无菌苗的培养将紫花苜蓿的种子流水充分洗净后，浸泡10h左右，然后放入超净工作台中。
先用75%的酒精浸泡30s，然后用无菌水冲洗3次，取出后用0.1%的升汞消毒10min，再用无菌水冲洗3～5次，洗去多余的升汞。
紫花苜蓿高频植株再生体系的建立
大
学
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第 １ ７ ￣ ８ 期 ７ １
Ｊ） （ ＵＲＮＡＬ ＯＦ ＧＡＮＳＵ ＡＧＲＩ ＣＵＩＴＵＲＡＬ ＵＮＩ ＶＥＲＳＩ ＴＹ
第 ４ ２卷 双 月 刊
紫 花 苜蓿 高频植 株 再 生 体 系 的建 立
Ａｂｓｒ ｃ ：Ｔｈ ｓ ｐ ｐｅ ｓ ｔ ｏ ｎｔ ｈｅ ｄ ｆｅ ｅ ｅ ｏ ａ ｌ ｎｄｕ ｔｏｎ ａ ａ ｔ ｅ ｅ ｒ ｔｏｎ ａ ｔａ ｔ ｉ ａ ｒ ｉ ｏ ｐｒ ｂｅ ｉ ｏ ｔ ｉｆ ｒ ｎｃ ｆｃ ｌｕｓ ｉ ｃ ｉ ｎｄ ｐｌ ｎ ｓ ｒ ｇ ｎｅ ａ ｉ ｍｏｎ ｇ ｄ ｆｅ ｅ ｌａ ｆ ｕ ｔｖ ｒ ． ｉｆ ｒ ｎｔａ ｆ ｌａ ｃ ｌｉ ａ ｓ Ｔｈｅ ｒ ｓ ｔ ｈｏ ｄ ｔ ｔｔ ｅ ｕｌｓ ｓ ｗｅ ｈａ ｈｅ ｍｏｓ ｕｉａ ｅ ｆ ｒ ｒ ｓ ｏｒｎｇ ｔ ｉＳ ｅ。 ｕｄ ａ ｏ ｔ ｓ ｔ ｂｌ ｏ ｅ ｔ ｉ ｈｅ ｔＳ ｕ ｂ ｎｄ ｒ ｏｔ
豆 科牧 草 ， 有“ 草之 王” 素 牧 的美誉 ． 随着 分子 生物 学
和植 物基 因工 程 的发 展 ， 在分 子 水 平 上对 苜 蓿 进行
行 组织 培养 ， 进一 步优 化苜蓿 高频 再生 体 系 ， 建 立 并
遗 传改 良的研 究 已取 的 了部 分成 果 ． 蓿 组 织 培 养 苜 的研 究早 期 主 要 集 中在 多 年 生 紫 花 苜 蓿 上． ａ ｎ Ｓｕ —
ＮＡ ０ ０ ｇ Ｌ ＋ 蔗 糖 ０ １ ＋ 琼脂 ０ ０ 分别 是 紫 花 苜 蓿 的 愈 伤 组 织 诱 导 、 、 分 化 的 适 宜 诱 导 培 养 基 ． Ａ（． １ｍ ／ ） ．５ ．８ 芽 根
关 键 词 ：紫花 苜 蓿 ； 叶 节 ； 胚 轴 ； 伤组 织 ； 株 再 生 子 下 愈 植
紫花苜蓿组织培养体系的建立及其遗传转化_周晓馥
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传转化的 效率决定于基因型 1 .#2 和菌株类型仁 一 . ,J ;
A k n i 和s la vi c "等 L ." , 川 报道遗传转化效率也决定于 选择转化体的能力和茎段再生频率 "
1 材料与方法
L l 材料
紫花首楷 (M e d i ca o g
:a t动 "L l .)种子 , 灭菌种
右移栽 , 刚移 栽 1一 2 周 内 , 刚移 栽 小苗 不可 被 阳光
子萌发后获得无菌种子苗 , 之后将种子苗无性繁殖 后于无菌瓶中保存无菌苗 , 后种植于温室保存植株 " 取无菌苗的叶片作为再生体系研究的外植体 " 基本 培养基为 M S , 添加不同种类 ! 浓度激素组合和有 机附加物作为愈伤组织诱导培养基 (编号 M l一 MS ) , 各培养基成分见表 1 " 1/ 2 M S 培养基作为生根壮苗培 养基 , 所有培养基 M s 4 1 . 4 叭 , pH S 7 . 8 , 12 1 e 高温 高压灭菌 2 0 mi n " 本试验中所用继代培养基分别与
的遗传 转化 技术 有基 因枪法 ! 农杆 菌介 导法 ! 花粉
收稿 日 期 : 20 12一 11一 08 基金项 口 : 国家科技 部农业科技成 果转化资金项 目 (20 1 OG BZB l o l比 ), 吉林 省科技发展计划项 目 ( 20 1 0 80 3 ) , 吉林省高技术产业发展项 日 1吉发改高技 (2( x玲)63 3 号2 , 吉林 师范大学研究生创新科 研计划资助项 目 1研创新 ( 学 ) ( 20 1 11 6 号) ] 作者 简介 : 周晓馥 , 女 , 博上 教授 , 硕士生导师 , 研究方 向 : 植物基因工程 ;E 一 ma l :xi i o f a uz h o u @s oh u . com 通讯作者 : 徐洪伟 , 男 , 博士 副教授 , 硕 七生导 师 , 研究方向 : 植物基因工程 ; E 一 ma l :j i sP l x hw @ 12 6 一 "m
农杆菌介导的紫花苜蓿BADH基因高效转化体系的优化和转基因植株的检测
农杆菌介导的紫花苜蓿BADH基因高效转化体系的优化和转基因植株的检测土壤盐渍化是一个世界性问题，是影响农业生产和生态环境的一个非常重要的非生物胁迫因素。
如何利用大面积的盐碱地，提高作物耐盐性是生物科学的一个重要研究课题。
苜蓿是一种被誉为“牧草之王”的多年生优质豆科牧草，它不仅营养价值高，适口性好，适应性强、抗寒耐旱，是全世界广为种植的优良牧草，而且对生态环境治理、固土护坡、防止水土流失起到非常重要的作用。
如何进一步提高其耐盐抗旱特性，扩大其种植范围，是当前苜蓿生产面临的重要研究课题，基因工程的发展和应用为苜蓿抗盐育种开辟了一条新的途径。
本实验是苜蓿抗盐碱育种研究课题的一部分，是在已建立的苜蓿高频组培再生体系的基础上，进行了农杆菌介导的甜菜碱醛脱氢酶基因转化的进一步研究。
主要结果如下：1. 优化了农杆菌介导的苜蓿高效遗传转化体系。
本试验在已有工作的基础上，对转化体系各因子进行了优化，确定了Cef 最适浓度为400mg/L，Kan最适浓度为50mg/L；以GUS阳性发生率和抗性愈伤组织率为转化指标探讨了不同苜蓿基因型、不同外植体类型和外植体的不同生理状态对转化效率的影响，并选取转化效率高的基因型作为主要受体，侵染15天左右的叶片；在其它因子条件的优化中，适宜的菌液浓度OD600值为0.3-0.5，侵染时间15-20分钟，无预培养，共培养3-4天，在农杆菌液体培养基及共培养基中都加入乙酰丁香酮（10mg/L）的处理方式比较好，侵染效率比较高。
2. 转化植株的PCR检测。
转化研究中获得了大量Kan抗性愈伤组织，愈伤组织分化出再生植株后，提取其DNA进行PCR扩增反应，以PCR-Southern确定扩增出来的条带为特异性条带，在145个检测株系中，共获得34个呈阳性反应的株系。
结果表明BADH基因已成功的转入苜蓿基因组中。
3. 转基因植株的耐盐性试验。
组培条件下的抗盐梯度实验表明：未转基因植株在盐浓度达到0.7%时就停止生长，超过0.9%植株大部分已白化死亡，而转基因植株在盐浓度0.7-0.9%时基本能正常生长，在1.2%盐害胁迫时出现明显受害症状，表现为植株停止生长和叶片白化。
紫花苜蓿高产栽培的影响因素分析
d o i:10.19369/j.c n k i.2095-9737.2016.07.006紫花苜蓿高产栽培的影响因素分析宋艳华(吉林省白城市镇赉县畜牧业管理局,吉林白城137300)摘要:紫花苜蓿具有许多优良特点,比如产量高、蛋白质含量丰富、适口性佳、营养均衡、具有较强的生物固氮能力、广泛的适应性,所以紫花苜蓿在很大的程度上对我国的种植业结构产生着影响,而且是比较明显的影响。
临床生产中,在紫花苜蓿的品种选择、种植管理、收获制度等方面,都会对其品质和产量造成直接的影响,所以为了避免在苜蓿种植栽培的过程中出现问题,影响经济效益,就必须了解并且掌握对紫花苜蓿高产栽培造成影响的因素,以降低损失。
现主要阐述能够影响紫花苜蓿高产栽培的几个主要因素,并且进行了综合的分析。
关键词:紫花苜蓿;秋眠级;水肥调控;刈割制度;高产栽培中图分类号:S541 文献标识码:A文章编号:2095-9737(2016)07-009-02在实际生产中,紫花苜蓿通常也都简称为苜蓿,随着人们对于紫花苜蓿认识的提高,苜蓿的种植栽培范围也随之扩大,种植面积同样在不断的增大,在我国各个牧区均占据着首要的地位,深受种植者的追捧。
世界范围内,在欧亚大陆都有种植紫花苜蓿的习惯。
紫花苜蓿可以用于配合饲料和混合饲料中,好多家畜都喜欢采食紫花苜蓿,在养猪业和禽业更是青饲料的首选。
紫花苜蓿含有多种营养物质和多种维生素,所以在家畜采食苜蓿之后,能够获得充足的营养,在农业生态系统中发挥着重要的别的牧草不具有的功能,在许多方面都已经成为了首选的牧草之一。
苜蓿生产是由许多生态和生产因子共同构成的,拥有不可替代的生态和生产作用,从苜蓿经济生产性能的影响角度进行分析,由光温和水分条件决定的品种区域,在进行匹配的时候,通常占据主导性地位,而苜蓿的秋眠级数则是对苜蓿进行生态区划的重要指标。
紫花苜蓿前两茬儿的产量非常高,几乎占年产量的7/10,因为品质优秀,商品性佳。
所以在第一茬的紫花苜蓿收获之后,必须加强田间管理,争取以后能够获得更加可观的经济效益。
紫花苜蓿高频体细胞胚与次生胚再生体系的建立
文 章 编 号 ： ４ ５ ７ ４ （ ０ ７ ０ — ０ １ ０ ０ ６ —９ ２ ２ ０ ）４０ ０ —６
紫 花苜 蓿 高频 体 细 胞 胚 与次 生胚 再 生 体 系 的建 立
孙艳香 ， 杨红梅 ， 尹 军 ， 朱晔荣 ， 王宁宁 ， 王 勇 ， １ ３
（１ 南 开 大 学 生 命 科 学 学 院 ， 津 ３ ０７ ； ．廊 坊 师 范 学 院 生 物 系 ， 北 廊 坊 ０ ５ ０ ； ． 天 ００１ ２ 河 ６０ １ ３ 天 津 市 农 业 生 物 技 术 研 究 中心 ，天津 ３０ ９ ． ０ １ ２）
收 稿 日期 ： ０ ６ ０ ０ ２ ０—６２
作 蓄 艳 裔７ ， 博 ，２２－事 物 传 种 分 生 学 冤 者 界孙 喜１ －，搿廊 人 士副授０６ 植 遗 育 与 子 物 简 ： 香 ） 河 嘉 ， （１ １） 介 （０ 女 蠢 坊 ９ 雌 北 ０２ 要 ０主 教， 从 １
摘 要 ：通 过 系 统 地 对 紫 花 苜蓿 体 细 胞胚 发 生 以及 次 生 胚 发 生 途 径 中 若 干 影 响 因子 的 比较 研 究 ， 立 了 紫 花 建 苜 蓿 高 频 体 细 胞 胚 和 次 生 胚 再 生 体 系 ． 果 表 明 ， 细 胞 胚 再 生 体 系及 次 生 胚 再 生 体 系 均 具 有 严 格 的基 因 型 依 结 体 赖 性 ， 同 的 品 种 间 以及 同 一 品 种 内 的不 同株 系 间再 生 频率 存 在 较 大 差别 ； Ｏ 培 养 基 可作 为胚 状 体 成 苗 培 养 不 ＭＳ 基 ， 次 生胚 在 ＭＳ 培 养 基 中 成 苗 率 较 低 而再 次形 成新 的胚 状 体 ； 良无 激 素 Ｓ 培 养 基 可 有 效 终 止 次 生胚 的 但 Ｏ 改 Ｈ 发 生 ， 诱 导 次生 胚 成 苗． 外 ， ６个 紫 花 苜 蓿 品 种 中 筛 选 到 ３个 具 有 较 强 胚 状 体 再 生 能 力 的品 种 ， 高 胚状 并 此 从 ６个 体 发 生 能 力 的株 系 ， 具 有 较 强 的次 生 胚 发 生 能 力 的株 系 ， ２个 为进 一 步 的遗 传 转 化 奠 定 了基 础 ．
紫花苜蓿高产栽培的影响因素分析
紫花苜蓿高产栽培的影响因素分析作者：宋艳华来源：《现代畜牧科技》 2016年第7期宋艳华（吉林省白城市镇赉县畜牧业管理局，吉林白城137300）摘要：紫花苜蓿具有许多优良特点，比如产量高、蛋白质含量丰富、适口性佳、营养均衡、具有较强的生物固氮能力、广泛的适应性，所以紫花苜蓿在很大的程度上对我国的种植业结构产生着影响，而且是比较明显的影响。
临床生产中，在紫花苜蓿的品种选择、种植管理、收获制度等方面，都会对其品质和产量造成直接的影响，所以为了避免在苜蓿种植栽培的过程中出现问题，影响经济效益，就必须了解并且掌握对紫花苜蓿高产栽培造成影响的因素，以降低损失。
现主要阐述能够影响紫花苜蓿高产栽培的几个主要因素，并且进行了综合的分析。
关键词：紫花苜蓿；秋眠级；水肥调控；刈割制度；高产栽培中图分类号：S541文献标识码：A文章编号：2095-9737(2016)07-009-02收稿日期：2016 - 03 -15作者简介：宋艳华（1963 -），女，吉林镇赉人，中专，畜牧师，研究方向：畜牧兽医。
在实际生产中，紫花苜蓿通常也都简称为苜蓿，随着人们对于紫花苜蓿认识的提高，苜蓿的种植栽培范围也随之扩大，种植面积同样在不断的增大，在我国各个牧区均占据着首要的地位，深受种植者的追捧。
世界范围内，在欧亚大陆都有种植紫花苜蓿的习惯。
紫花苜蓿可以用于配合饲料和混合饲料中，好多家畜都喜欢采食紫花苜蓿，在养猪业和禽业更是青饲料的首选。
紫花苜蓿含有多种营养物质和多种维生素，所以在家畜采食苜蓿之后，能够获得充足的营养，在农业生态系统中发挥着重要的别的牧草不具有的功能，在许多方面都已经成为了首选的牧草之一。
苜蓿生产是由许多生态和生产因子共同构成的，拥有不可替代的生态和生产作用，从苜蓿经济生产性能的影响角度进行分析，由光温和水分条件决定的品种区域，在进行匹配的时候，通常占据主导性地位，而苜蓿的秋眠级数则是对苜蓿进行生态区划的重要指标。
紫花苜蓿前两茬儿的产量非常高，几乎占年产量的7/10，因为品质优秀，商品性佳。
植物激素对2个紫花苜蓿品种再生体系的影响
诱 导 生根 的培养基 为 １ ２Ｍｓ ／ ＋ＮＡＡ０ ５ｍｇ Ｉ ． ／ 。
关键 词 ：紫花 苜蓿 ； 伤 组织 ； 生体 系 ； 愈 再 植物 激素 中图分 类号 ： ４ Ｑ ９ ４ Ｓ５ ； ４ 文献 标识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：１ ０ — ５ ０ ２ １ ） ５０ １－４ ０ ９５ ０ （０ ０ ０ －０ ５０
Ｅ ｍａｌａ ｎ ａ ６ ７ ｓｎ ． ｏ — ｉ：ｍｉｔ０ ２ ＠ ｉａ ｃ ｒ ｎ
菌 种子 萌发 ７ ｄ的下 胚 轴 为 外 植 体 材 料 ， 行 不 同浓 进
度 ２ ４Ｄ和不 同 ２ ４Ｄ、 ，－ ，一 ＫＴ 浓度 配 比的愈 伤组 织诱 导 试 验 。每个 处 理 ３个 重 复 ， 个 重 复 ３ 每 Ｏ块 外 植 体 。
率 的统 计 ， 究 不 同外 植 体 类 型对 愈 伤 组 织诱 导 的影 研
响。
１ ２ １ 无菌苗 的培 养 ． ．
收稿 日期 ： ０ ００ — ３ 修 回 日期 ： ０ ００ — ６ ２ １ — ３２ ； ２ １ — ４２
１ ２ ３ 下 胚 轴 的 愈 伤 组 织 诱 导 选 取 ２个 品 种 的 无 ． ．
甘肃 兰州 ７０ ７ ） ３ ０ ０
摘 要 ： 用 ＭＳ为基本 培 养基 ， 采 附加 不 同浓度 的 ２ ４Ｄ、 Ｔ 和 ＮＡＡ， “ ，一 Ｋ 对 盛世 ” “ 和 甘农 ４号” ２个 紫 花 苜蓿品种 进行 了组 织培 养再 生体 系的研 究。结 果表 明 ： 下胚轴 是愈 伤组 织 诱 导的 最佳 外植 体 材 料 ； ， ２ ４Ｄ浓 度增加 对“ 一 甘农 ４号” 紫花 苜蓿 出愈 率影 响不 明显 ， “ 但 盛世 ” 紫花 苜蓿 的 出愈 率 随着 ２ ４Ｄ 浓度 的 ，一
紫花苜蓿高频体胚发生及萌发成苗技术与转基因应用
紫花苜蓿高频体胚发生及萌发成苗技术与转基因应用温之雨;董福双;张华宁;杨瑞娟;张艳敏【摘要】The objective of this study was to establish the technique for high efficient embryogenesis and seedling development using cotyledons or leaves from aseptic seedlings as explants,which will provide a technical support for genetic improvement of tolerance to abiotic stresses in alfalfa(Medicago sativa).The effects of different medium ingredients on callus induction,embryogenetic induction,maturation,and germination were compared.The technique for high-frequency of embryogenesis included induction of callus on SHDK medium,induction of embyros on MB(-/+) + 0.4 mg/L ABA+50 g/L PEG-6000+50 g/L sucrose,growth of embryos on Bio2Y medium,and development of seedling on 1/2 MS(or SH) medium.Under the optimal conditions,about 77.9 healthy embryos that formed seedlings were produced per gram of callus.The seedlings regenerated were grown in a growth chamber at 20 ℃ with a photoperiod of 16 h light and 8 h dark for two weeks prior to transplanting to a greenhouse,and the survival rate was over 90％.This technique was successfully used in the transformation of PPA gene into alfalfa and the transgenic alfalfa with resistance to aphid was obtained.%以紫花苜蓿的子叶或叶片为外植体,建立高频体胚发生及成苗技术体系,为苜蓿耐逆性状的遗传改良提供技术支撑.在愈伤诱导、体胚诱导、体胚成熟与萌发等几个关键环节,分析比较培养基组分对培养效果的影响.建立在SHDK培养基上诱导愈伤、MB(-/+)+ABA 0.4 mg/L+PEG-6000 50 g/L+蔗糖50 g/L培养基上诱导体胚、Bio2Y培养基上促体胚发育成熟、1/2 MS(或SH)培养基上体胚萌发成苗的高频再生技术体系.最适条件下,每克胚性愈伤组织可产生77.9个正常萌发成苗的健康体胚.再生植株在生长箱内经过2周20℃、16 h/d的光照培养后移栽温室,成活率达90％以上.利用该离体再生技术成功地将凝集素基因PPA导人苜蓿中,获得抗蚜转基因苜蓿.【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2017(026)006【总页数】8页(P882-889)【关键词】紫花苜蓿;体胚发生;离体再生;转基因【作者】温之雨;董福双;张华宁;杨瑞娟;张艳敏【作者单位】河北省农林科学院遗传生理研究所,河北省植物转基因中心,石家庄050051;河北省农林科学院遗传生理研究所,河北省植物转基因中心,石家庄050051;河北省农林科学院遗传生理研究所,河北省植物转基因中心,石家庄050051;河北省农林科学院遗传生理研究所,河北省植物转基因中心,石家庄050051;河北师范大学生命科学学院,石家庄050024;河北省农林科学院遗传生理研究所,河北省植物转基因中心,石家庄050051【正文语种】中文【中图分类】S512.1+2苜蓿(Medicago sativa L.)是重要的豆科牧草，营养丰富，蛋白质质量分数占其干物质的17%～20%，被誉为“牧草之王”。
紫花苜蓿组织培养高频再生体系的建立
紫花苜蓿组织培养高频再生体系的建立段亚楠;卢福荣;茹艺;李曹娜;韩阳【期刊名称】《北方园艺》【年(卷),期】2013(000)015【摘要】以紫花苜蓿品种“甘农1号”的子叶为外植体,研究了不同培养基和不同浓度激素对紫花苜蓿愈伤组织诱导、分化及生根的影响.结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为NSH+2,4-二氯苯氧基(2,4-D)4 mg/L+6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.4mg/L+3％蔗糖+0.7％琼脂;最佳诱导愈伤组织分化培养基为MS+2％蔗糖+0.7％琼脂;最佳诱导无根苗生根培养基为1/2MS+萘乙酸(NAA)0.2 mg/L+1％蔗糖+0.7％琼脂;再生植株适宜的移栽基质为营养土∶草炭∶蛭石=1∶2∶1.该研究建立了一个紫花苜蓿稳定的高频再生体系,为其作为转基因受体奠定了基础.【总页数】3页(P127-129)【作者】段亚楠;卢福荣;茹艺;李曹娜;韩阳【作者单位】辽宁大学生命科学院,辽宁沈阳110036;辽宁大学生命科学院,辽宁沈阳110036;辽宁大学生命科学院,辽宁沈阳110036;辽宁大学生命科学院,辽宁沈阳110036;辽宁大学生命科学院,辽宁沈阳110036【正文语种】中文【中图分类】S541+.1【相关文献】1.紫花苜蓿高频植株再生体系的建立 [J], 钱瑾;刘发央;谢小冬;贾彪2.紫花苜蓿下胚轴高频离体再生体系的建立 [J], 杨丽辉;陈耀锋;韩巧玲;李春莲3.紫花苜蓿NFF2高效组织培养再生体系的建立 [J], 王庆东;刘青青;党羽佳;胡华锋;陈占宽;杨艳坤4.紫花苜蓿子叶的高频离体再生体系的建立与优化 [J], 徐博;任伟;王英哲;孙启忠;郭玮;娄玉洁5.紫花苜蓿组织培养再生体系的建立 [J], 苏玉春;韩微微;陈光因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
紫花苜蓿组织培养中常遇问题及对策
紫花苜蓿组织培养中常遇问题及对策
吴丽芳;张鸭关
【期刊名称】《草业与畜牧》
【年(卷),期】2009(000)009
【摘要】在总结分析有关植物组织培养技术研究的基础上,结合笔者在紫花苜蓿不同外植体-花药、子叶、下胚轴等培养研究中的体会,对苜蓿组织培养中的一些常遇问题及问题产生的原因和影响因素进行了分析,并提出了相关对策,为苜蓿组织培养技术提供一定的理论基础和实践依据.
【总页数】4页(P5-8)
【作者】吴丽芳;张鸭关
【作者单位】云南省曲靖师范学院云贵高原生物多样性研究所,云南,曲靖,655011;云南省曲靖师范学院化学化工学院,云南,曲靖,655011
【正文语种】中文
【中图分类】S541.048
【相关文献】
1.紫花苜蓿NFF2高效组织培养再生体系的建立 [J], 王庆东;刘青青;党羽佳;胡华锋;陈占宽;杨艳坤
2.紫花苜蓿的组织培养与快繁技术研究 [J], 李云玲;苗锦山
3.高压静电场对紫花苜蓿组织培养的影响初探 [J], 郭龙芳;郭九峰;薛福东;那日
4.紫花苜蓿组织培养体系的建立及其遗传转化 [J], 周晓馥;吕杰;苗璐;高峰;徐洪伟
5.百合组织培养过程中常见问题及对策 [J], 滕巍;程英魁;张悦;王健鹂;王秀峰;于永辉
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紫花苜蓿体细胞胚高频再生体系的建立
紫花苜蓿体细胞胚高频再生体系的建立王强龙;王锁民;张金林;陈托兄;楼洁琼;陆妮【期刊名称】《草业科学》【年(卷),期】2006(023)011【摘要】以我国农艺性状优良的丰产紫花苜蓿Medicago sativa品种大叶苜蓿和甘肃省广为种植的优质紫花苜蓿品种陇东、陇中、甘农1号、甘农3号等的下胚轴、子叶、叶片和叶柄为外植体研究了不同培养基、激素配比以及脯氨酸、蔗糖和活性炭对紫花苜蓿胚性愈伤组织和体细胞胚诱导分化的影响,结果表明:最佳胚性愈伤诱导培养基为MS + 2,4-D 5 mg/L + KT 1 mg/L;最佳外植体为下胚轴.最佳体细胞胚诱导和分化培养基为SH;脯氨酸对体细胞胚的诱导分化无明显作用;在培养基中添加活性炭会降低体细胞胚诱导率;蔗糖浓度为20 g/L时体细胞胚诱导率最高.同时还建立了紫花苜蓿体细胞胚高频再生体系,为根癌农杆菌介导AtNHX1基因对紫花苜蓿的遗传转化打下了坚实的基础.【总页数】7页(P21-27)【作者】王强龙;王锁民;张金林;陈托兄;楼洁琼;陆妮【作者单位】兰州大学草地农业科技学院,甘肃,兰州,730020;内江师范学院,四川,内江,641112;兰州大学草地农业科技学院,甘肃,兰州,730020;兰州大学草地农业科技学院,甘肃,兰州,730020;兰州大学草地农业科技学院,甘肃,兰州,730020;兰州大学草地农业科技学院,甘肃,兰州,730020;兰州大学草地农业科技学院,甘肃,兰州,730020【正文语种】中文【中图分类】S5【相关文献】1.紫花苜蓿下胚轴高频离体再生体系的建立 [J], 杨丽辉;陈耀锋;韩巧玲;李春莲2.紫花苜蓿子叶的高频离体再生体系的建立与优化 [J], 徐博;任伟;王英哲;孙启忠;郭玮;娄玉洁3.紫花苜蓿高频体细胞胚与次生胚再生体系的建立 [J], 孙艳香;杨红梅;尹军;朱晔荣;王宁宁;王勇4.棉花高频体细胞胚胎发生及再生体系建立 [J], 顾冉冉;薛金教;袁英歌;彭明;崔百明5.紫花苜蓿组织培养高频再生体系的建立 [J], 段亚楠;卢福荣;茹艺;李曹娜;韩阳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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第 ４期
草 原 与 草 坪 ２１ ０ ０年
５ ５
紫 花 苜蓿 高频 组培 再 生体 系影 响 因素研 究
徐 春 波 王 勇 ， 海 霞 ， 赵 ，李 兴 酉
（ ．中国农业科 学 院草原研 究所 ， １ 内蒙古 呼和 浩特 ２ ．内蒙古 农业 大学 生态 环境学 院 ， 内蒙古 呼和浩 特 ００ １ ； １ ０ ０ ０ ０１ １ ０ ８）
于进 一步研 究解决 。
１ ２ ２ 培养基 ．．
愈伤 诱导 培养基 ：
Ａ．ＭＳ １ ０ ｍｇ Ｌ ２，－ ＋ ． ／ ４Ｄ Ｂ ．ＭＳ— ． ／ ， － 卜１ ５ ｍｇ Ｌ ２ ４ Ｄ Ｃ ＭＳ＋ ２ ｍｇ Ｌ ２， － ． ．０ ／ ４ Ｄ＋ ０ ５ ｍｇ Ｌ ＫＴ ＋ ．２ ／
２０ ０ｍｇ Ｌ水解 酪蛋 白 ０ ／
收稿 日期 ： ０ ９１－１ 修 回 日期 ： ０ ００ －６ ２ ０ －２２ ； ２ １－５２ 基金 项 目 ：中 央级 公 益 性 科 研 院 所 基 本 科 研 业 务 费 专 项 资 金 （ 国 农 业 科 学 院 草 原 研 究 所 ） 目 资 助 中 项
１ ２ １ 无 菌苗培 养 ． ．
选 择饱满 、 种皮 完整 无破 损 的优
良苜蓿 种子 ， 自来水 冲洗 种子 ３ ｎ ７ 的酒精 消毒 ０ｍｉ ，０ １ｍｉ ， ｎ 无菌水 漂洗 ３ ， ０ｓ然后 转入 ５ 的次氯 酸钠 中消 毒 １ ｎ 再用无 菌 水 冲洗 ５次 。用 灭 菌 滤纸 吸 干 种 ０ｍｉ ， 子表 面 的液体 后接种 到无激 素 的 １ ２ＭＳ培养 基上 。 ／
关键词 ：紫花 苜蓿 ； 因型 ； 基 外植体 ； 养基 ； 培 脱分化 ； 分化
中 图分 类号 ： ４ Ｓ ３ ５ Ｓ ５ ； ３ 文献标 识码 ： Ａ 文 章编号 ：１ ０ —５ ０ ２ １ ） ４０ ５ —５ ０ ９５ Ｏ （ Ｏ Ｏ Ｏ —０ ５０
紫 花苜 蓿 （ ｄｃ ｇ ｔ ａ 为多 年 生豆 科植 物 ， Ｍｅ ｉ ｏｓ ｉ ） ａ ａ ｖ 是世 界上重 要 的栽 培牧 草 ， 我 国已有 ２ ０ 在 ０ ０年 的栽 培
１ 材 料 和方 法
１ １ 供 试 材 料 ．
历史 ， 其营 养价值 被 列 在 各种 牧 草 的首位 ， “ 草 之 有 牧
王” 的美誉 ［ 。 １ ］
中苜 １号 （ Ｍ．ｓｔｖ Ｖ Ｚ ｏ ｇ ． ） 公农 １ ａｉａ Ｃ ． ｈ ｎ ｍｕＮｏ １ ， 号 （ ｓｔ ａ Ｃ ． ｎ ｎ ｎ ． ） 猎 人 河 （ ｓｔ ａ Ｍ．ａｉ Ｖ Ｇｏ ｇ ｏ ｇ Ｎｏ １ ， ｖ Ｍ．ａｉ ｖ
（ ０ ６ １０ ） ２ ０ —— １
Ｄ ．改 良 Ｓ Ｈ＋４ ０ｍｇ Ｌ２ ４Ｄ＋ ０ ５ｍｇ Ｌ ６Ｂ ．Ａ１ ．Ｍ Ｓ ｏ＋０ ５ ｍｇ Ｌ ＮＡＡ＋ １ ０ ｍｇ Ｌ ６ Ｂ ． ／ ． ／ － Ａ Ｂ１ ．Ｍ Ｓ ０＋ ０ ５ ｍｇ Ｌ ＮＡＡ＋ １ ０ ｍｇ Ｌ ６ＢＡ＋ ． ／ ． ／ 一 ０ ５ ｍｇ Ｌ Ａｇ ． ／ ＮＯ３ Ｃ１ ．ＭＳ Ｏ＋０ ５ ｍｇ Ｌ ＮＡＡ十 １ ０ ｍｇ Ｌ ６ＢＡ＋ ． ／ ． ／ 一
摘 要 ： 紫花苜 蓿 ４个品种 获得 高频再 生体 系， 究 了基 因型 、 用 研 外植 体 、 养基 对 紫花 苜蓿脱 分化 和 培
分化 的 影响 。结果表 明 ， 一２ ｗＬ ３ ３的愈 伤组 织 分化 率 最 高达 到 ７ ． ， 最 佳基 因型 ； ６３ 为 下胚 轴 是 最 佳 的 外植 体 ； 最佳 脱 分化培 养基 为改 良 Ｓ Ｈ＋４ ０ｍｇ Ｌ ２ ４Ｄ＋０ ５ｍｇ Ｌ ６Ｂ 最佳 继代培 养基 为 ＭＳ ． ／ ，－ ． ／ － Ａ， Ｏ＋ ０ ５ｍｇ Ｌ ＮＡＡ＋ １０ｍｇ Ｌ ６Ｂ ． ／ ． ／ － Ａ＋１ ０ｍｇ Ｌ Ａｇ ． ／ ＮＯ。 最佳 分化培 养基 为 ＭＳ ， 。
作者简介 ： 春波（９９ ， ， 蒙古扎兰 屯人 ， 研 ， 徐 １ ７ 一） 女 内 助 硕
士 ， 事 牧 草 种 质 资 源 、 传 育 种 与 生 物 技 术 研 从 遗 究 工 作 。Ｅｍａｌｘｂ ７ ０ ２ １ ３ ｃｒ － ｉ ｃ ９２ ０ ＠ ６．ｏ ： ｎ
５ ６
ＧＲＡＳ ＬＡＮＤ ＡＮＤ Ｓ ＴＵＲＦ（ ０ ０ ２ １）
减少 了无用基 因对性 状 改 良的不 良影 响 ， 而 可 以快 从
蓿 种子 由中国农 业 科学 院草 原研 究 所 赵来 喜 、 于林 清 和王照 兰提供 。
１２ 方 法 ．
速实 现育种 目标 。因此 ， 过转 基 因手 段将 优 良基 因 通 转移 到栽 培 品种 中， 以加速 培 育新 品种 。而转 基 因 可 的前提就 是要建 立 高效组 培再生 体系 。苜 蓿组 织 培养 最 早见 于 Ｓ ｕ ｄ ｒ 等［ 的报道 ， ａ ｎ ｅｓ ２ ］ 通过 器 官形 成 和体 胚
ｅ． ｎ ｅ ｖ ） ｗＬ ３ ３ Ｍ．ａ ｉａｅ． Ｌ ３ ３ 苜 ｖ Ｈｕ ｔｒ Ｒｉｅ 和 一 ２ （ ｓｔ ｖ Ｗ 一２ ） ｖ
随着生 物技术 的发 展 ， 利用 基 因工 程 培 育 和 改 良 植物 品种成 为便捷 和实用 的手段 。转 基 因技术 通 过 引 入少量 有用基 因取代 了传 统 育种 中大 量基 因 的介 人 ，
愈 伤组织 发育 ２条途径 ， 最终 分化成 完 整 的植株 ， 标 这
志 着苜蓿 组织培 养研究 的开 始 。尽 管 国 内外 对 苜蓿 离 体 再生体 系 的研究 已经 比较 深入 ， 是 ， 但 再生 频 率不 稳 定、 受基 因型影 响 大 和再 生周 期 长 等 问题 目前 仍 有 待