常用细胞固定剂及其优缺点比较

经常使用细胞固定剂及其优缺点比较之樊仲川亿创作1、95%酒精：最经常使用的细胞学固定液，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋沉淀后，能溶于水，因此，经95%酒精固定的涂片，染色前没有需要经过水洗。

此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色。

固定时间根据标本的分歧，时间也不尽相同，一般标本固定时间为15-30分钟，痰标本需要更长一些时间。

经过95%酒精固定的标本，细胞核保管较好，结构清晰，颜色鲜艳。

如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳，可以呵护细胞免受空气干燥后的人工假象。

2、乙醚酒精液（1：1）：其效果与95%酒精相似，但由于乙醚有很强的吸水性和特有的刺激性气味，容易挥发，长期低浓度吸入，有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、蛋白尿、红细胞增多等不良反应。

长期皮肤接触，可发生皮肤干燥、皲裂。

所以现在已经逐渐被95%酒精所代替。

3、甲醇：固定时间快，细胞收缩小，细胞核保管较好，结构清晰，染色鲜艳。

常作为穿刺细胞涂片的固定液。

对抗原保管较好，可作为细胞涂片免疫组化的固定液。

缺点是具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害。

甲醇的毒性与其代谢产品甲醛和甲酸的蓄积有关。

以前认为毒性作用主要为甲醛所致, 甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不克不及合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩。

近年研究标明,甲醛很快代谢成甲酸,急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害，主要与甲酸含量相
关。

4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用。

不克不及沉淀白蛋白，但能沉淀核蛋白。

渗透性强，固定快，能使红细胞膨胀而破碎，常与其它液体配合使用。

5、无水酒精：对糖原保管较好，容易使细胞收缩，其性能与95%酒精相似，很少单独使用，一般只用于糖原的固定。

6、丙酮：为易挥发的无色液体，有刺激性气体。

可使蛋白质沉淀，渗透性强，细胞收缩严重，对核的固定差。

很少用于惯例细胞学的固定。

广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定，也有人用于抗原的保管，作为细胞涂片免疫组化的固定液。

丙酮具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害。

7、Carnoy 固定液：配方：无水乙醇60ml，氯仿30ml，冰醋酸10ml
Carnoy液能固定胞浆和胞核，尤其适宜于染色体等。

经常使用于糖原及尼氏体的固定，由于冰醋酸能溶解红细胞并可防止细胞由酒精引起的过渡收缩，对固定有血的标本和显示DNA、RNA效果很好。

缺点是每次固定后固定液内有大量的红细胞碎片和细胞脱落，必须及时过滤，否则容易造成污染。

其次，氯仿具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害。

8、10%中性缓冲甲醛液：
配方1：40%甲醛10ml，0.01mol/L pH7.4的PBS90ml。

配方2：40%甲醛120ml，蒸馏水880ml，磷酸二氢钠（NaH2PO4;H2O）
4g，磷酸氢二钠（Na2HPO4）13g。

10%中性缓冲甲醛液对大多数抗原保管较好，是免疫组织化学最经常使用的固定液，组织穿透性好，组织收缩较小。

但此液体不适合固定湿固定的涂片，可作为干固定涂片和细胞蜡块的固定液。

甲醛也具有挥发性和毒性。

大量吸入会出现呼吸道的严重刺激和水肿、眼刺痛、头痛，也可发生支气管哮喘。

经常吸入少量甲醛，能引起慢性中毒，出现粘膜充血、皮肤刺激症、过敏性皮炎、指甲角化和脆弱、甲床指端疼痛等。

全身症状有头痛、乏力、胃纳差、心悸、失眠、体重减轻以及植物神经紊乱等。