长沙动物布鲁氏菌病血清学检测方法与分析
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［２０１８ －０１ －２３］． ｈｔｔｐ：ｌｌｗｗｗ．１ｉｕｙａｎｇ．ｇｏｖ．ｃｎ／ｌｉｕｙａｎｇｇｏｖ／ｘｘｇｋ／ ｘｘｇｋｍＹｓｚｆｚｓｓｙｄｗ／ｓｃｍｓｙｓｃｊｌｚｃｗｊ／ｚｗｗｊ／３５９１０９２／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍ１． ［３１梁 桂 婵 ．依 法 强 制 拆 除禁 养 区 １３家 养 殖 场 ［ＥＢ／ＯＬ］．
关键词 ：牛 、羊 ；布鲁 氏茵病净化 ；血 清学检测 ；食 品安全
中图 分类 号 ：￥８５４．４３
文 献 标 识 码 ：Ｂ
文 章编 号 ：１ ００６．．－４９０７（２０１ ８）０１－００１ ２－０３
布鲁 氏菌病 （Ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ，简称 布病 ）是 由布鲁 氏 杆 菌引起牛 、羊 、猪 、鹿 、犬等 哺乳动物和人类共患 的一种传染病 。布鲁氏杆菌一般持续终身感染并通 过繁殖道和乳腺分泌物扩散传染 ，引起相似的临床 与病理损伤 ，如发热 、流产与不育等症状 ，严重威胁 公共卫生和食品安全 ，是国际贸易检疫中必检的一 种传染病 。根据 国家布鲁氏菌病防治计划（２０１２— ２０２０）［１１和 国家标准《ＧＢ厂Ｉ＇１８６４６—２００２动物布鲁 氏 菌 病诊 断技 术》闭，我 中心用 虎 红平 板凝 集试 验 （ＲＢＴ）、试 管 凝 集 试 验 （ＳＡＴ）、酶 联 免疫 吸 附 试 验 （Ｃ—ＥＬＩＳＡ），对长沙地 区牛 、羊布病开展血清学抗体 检 测 ，用兽 医实 验室 常 用 的布病 净 化 的几种 血 清 学 检 测方 法 进行 比对 、评估 ，对 检 测结 果 进行 分 析 ，为 长沙市动物布鲁 氏菌病净化提供科学依据 ，确保动 物 源性 食 品 安全 ，为 长 沙市 建设 国家食 品安全 城 市
南 放 ，ｉ｝区
２０１８年第１期（总第２０３期）
长沙动物布鲁 氏茵病血清 学检测 方法与分析
唐爱明 ，陈 智 。刘增再 。郑姣妹 。谭 丹 ，宁华杰 （湖南省长沙市动物疫病预 防控制 中心 ，湖南 长沙 ４１００１３）
摘 要 ：根据 国家布鲁 氏茵病 防治计 划（２０１２－２０２０）和 动物布 鲁 氏茵诊 断技 术 ＧＢ／Ｔ １８６４６－２００２国 家标 准 ，通过 虎红 平板 ‘ （ＲＢＴ）、试 管凝集（ＳＡＴ）、竞争酶联免 疫吸 附试验 （ｃＥＬＩＳＡ），对长沙地 区牛羊血清进行布鲁 氏茵病 抗体检测 ，并对检验 过程和结果进行分析 ，为长沙市动物布鲁 氏茵病净化提供科 学依 据 ，确保动物 源性食 品安 全 ，为长 沙市建设 国家食 品 安 全 城 市提 供 技 术 支撑 。
１．３主 要 仪 器 恒 温 培 养箱 、ＭＫ３酶标 仪 、生物 梅 里 埃 ＶＩＴＥＫ
作者简Ｏｒ：唐爱 明（１９７４￣），女 ，湖南长沙人 ，硕士 ，高级兽 医师 ，主要从事动物疫病诊断和研 究工作 ，Ｅ－ｍａｉｌ：３３１６２６１１５７＠ｑｑ．ｃｏｍ。
部 门要建立 、完善养殖污染 日常监测制度 、责任追 究制度 ，严格落实养殖污染 防治各项监管措施 ，对 养 殖 场 （户 ）粪 污处 理 情 况 和 设 施 运 行情 况 实施 全 天候 监 控 。建 立联 合 监 督执 法机 制 ，加 大对 养 殖场 （户 ）的 日常监 督巡 查 力 度 ，严 厉 打 击 直 接 排 放 、超 标排放养殖粪污等违法行为 ，对造成环境污染的要 依法 追究 相 关 负责人 责 任 。严 厉打 击 乱丢 乱弃 病死 畜禽行为 ，杜绝 出现随意弃置、贩运 、屠宰 、经营、加 工病死（或死 因不明 ）畜禽及病死（或死 因不 明）畜 禽 产 品等违 法 行为 。 ２．３．４依法拆 除违规建设 的新养殖场。国土部 门对 未经 审 批违 规 建设 的新 养殖 场 （户 ），特 别是 建 立在 禁养区 、限养区和基本农 田的违规养殖场 （户 ），要 采取相关措施 ，要求养殖场（户 ）限期 自行关 闭或搬 迁 ，拒不执行的依法依规进行强制关闭或搬迁网。各
（２０１５－０５－１４１［２０１８－０１－２３］．ｈｔｔｐ：／／ｎｅｗｓ．１６３．ｃ０ｍ／１５／０５１４１０６１
ＡＰＩＢＴＯ８Ｈ００ｏｌ４ＡＥＤ．ｈｔｍ１．
硬磊百 丽 可
１２
Ｈｕｎａｎ Ａｎｉｍａｌ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎｏ．Ｉ，２０１８．（Ｔｏｔａｌ Ｎｏ．２０３）
部 门相互配合 ，信息共享 ，联合参与行动 ，形成多部
门高压态势 ，对违规养殖场 （户 ）形成强有力 的打
击 。
口
参考文献 ： 【１】姚丽华．我 国畜禽养殖污 染现状分析及污染 防治 法律 问 题研 究【Ｊ】．科技资讯，２０１５，１３（１３）：１１１－１１２． ［２】浏阳市畜牧兽 医水产局．关于 印发《关于加快推进标准 化 生态养殖 发展 的实施 意见》 的通 知 【ＥＢ／ＯＬ］．（２０１７－－０５－０３）
南亩放墨匿
２０１８年第１期（总第２０３期）
麦 氏比浊仪 、移液枪等 。
１．４检 澳４方 法 １．４．１虎 红平板 凝 集试 验 （ＲＢＴ）
按动 物布鲁 氏菌病诊断技术 （ＧＢ厂Ｉ’１８６４６—２００２） 和 试 剂 说 明 书进 行 操 作 和结 果 判 定 ：实 验 前 将 抗 原 、待 检血清样 品及 阴 阳性对照 恢复至 室温 ，取 ０．０３ｍＬ虎 红平 板凝 集 抗 原 于 洁净 玻 璃板 上 。取 ０．０３ｍＬ被 检 血 清 与 抗 原 混合 ，４分 钟 内观 察 结 果 。 凡 出现 ＋以上 者 判 为 阳性 。对 出现 阳性 反 应 的动 物 ，必 须进 一 步做 试 管凝 集 试验 确 证 。凝 集反 应 判 定标准 ：＋＋＋＋凝集块呈菌丛状 ，凝块间液体 明显清 亮 ；＋＋＋凝集反应较 强 ，液体较清亮 ；＋＋形成较明 显卷边 ，凝集块 间液体稍清亮 ；＋稍能查到凝集 ，稍 有卷边形成 ，凝集物间液体呈红色 ；一无凝集 ，呈均 匀粉 红 色 。 １．４．２试 管凝 集 试验 （ＳＡＴ）
提 供技 术支 撑 。现将 检测 情况 报告 如 下 。 １材料 与方 法 １．１血 清样 品
采集长沙地区未免疫布鲁 氏菌疫苗的牛 、羊血 清样本 ，冷冻保存 。
１．２试 剂
布鲁 氏菌病 虎红平 板凝 集抗 原 （生 产批 号 ： ２０１６１００５），购 自青岛易邦生物工程有限公司。布鲁 氏菌病试 管凝集抗原 、标准 阳性血清 、标准 阴性血 清（生产批号 ２０１７０１１５），购 自青 岛易邦生物工程有 限 公 司 。 布 氏 杆 菌 竞 争 ＥＬＩＳＡ 检 测 试 剂 盒 （Ｃ—ＥＬＩＳＡ），购 自兰 州 兽 医研 究 所 ，生 产 批 号 ２０１６０７１４１３０，有 效期 ２０１７０７１３。
关键词 ：牛 、羊 ；布鲁 氏茵病净化 ；血 清学检测 ；食 品安全
中图 分类 号 ：￥８５４．４３
文 献 标 识 码 ：Ｂ
文 章编 号 ：１ ００６．．－４９０７（２０１ ８）０１－００１ ２－０３
布鲁 氏菌病 （Ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ，简称 布病 ）是 由布鲁 氏 杆 菌引起牛 、羊 、猪 、鹿 、犬等 哺乳动物和人类共患 的一种传染病 。布鲁氏杆菌一般持续终身感染并通 过繁殖道和乳腺分泌物扩散传染 ，引起相似的临床 与病理损伤 ，如发热 、流产与不育等症状 ，严重威胁 公共卫生和食品安全 ，是国际贸易检疫中必检的一 种传染病 。根据 国家布鲁氏菌病防治计划（２０１２— ２０２０）［１１和 国家标准《ＧＢ厂Ｉ＇１８６４６—２００２动物布鲁 氏 菌 病诊 断技 术》闭，我 中心用 虎 红平 板凝 集试 验 （ＲＢＴ）、试 管 凝 集 试 验 （ＳＡＴ）、酶 联 免疫 吸 附 试 验 （Ｃ—ＥＬＩＳＡ），对长沙地 区牛 、羊布病开展血清学抗体 检 测 ，用兽 医实 验室 常 用 的布病 净 化 的几种 血 清 学 检 测方 法 进行 比对 、评估 ，对 检 测结 果 进行 分 析 ，为 长沙市动物布鲁 氏菌病净化提供科学依据 ，确保动 物 源性 食 品 安全 ，为 长 沙市 建设 国家食 品安全 城 市
南 放 ，ｉ｝区
２０１８年第１期（总第２０３期）
长沙动物布鲁 氏茵病血清 学检测 方法与分析
唐爱明 ，陈 智 。刘增再 。郑姣妹 。谭 丹 ，宁华杰 （湖南省长沙市动物疫病预 防控制 中心 ，湖南 长沙 ４１００１３）
摘 要 ：根据 国家布鲁 氏茵病 防治计 划（２０１２－２０２０）和 动物布 鲁 氏茵诊 断技 术 ＧＢ／Ｔ １８６４６－２００２国 家标 准 ，通过 虎红 平板 ‘ （ＲＢＴ）、试 管凝集（ＳＡＴ）、竞争酶联免 疫吸 附试验 （ｃＥＬＩＳＡ），对长沙地 区牛羊血清进行布鲁 氏茵病 抗体检测 ，并对检验 过程和结果进行分析 ，为长沙市动物布鲁 氏茵病净化提供科 学依 据 ，确保动物 源性食 品安 全 ，为长 沙市建设 国家食 品 安 全 城 市提 供 技 术 支撑 。
１．３主 要 仪 器 恒 温 培 养箱 、ＭＫ３酶标 仪 、生物 梅 里 埃 ＶＩＴＥＫ
作者简Ｏｒ：唐爱 明（１９７４￣），女 ，湖南长沙人 ，硕士 ，高级兽 医师 ，主要从事动物疫病诊断和研 究工作 ，Ｅ－ｍａｉｌ：３３１６２６１１５７＠ｑｑ．ｃｏｍ。
部 门要建立 、完善养殖污染 日常监测制度 、责任追 究制度 ，严格落实养殖污染 防治各项监管措施 ，对 养 殖 场 （户 ）粪 污处 理 情 况 和 设 施 运 行情 况 实施 全 天候 监 控 。建 立联 合 监 督执 法机 制 ，加 大对 养 殖场 （户 ）的 日常监 督巡 查 力 度 ，严 厉 打 击 直 接 排 放 、超 标排放养殖粪污等违法行为 ，对造成环境污染的要 依法 追究 相 关 负责人 责 任 。严 厉打 击 乱丢 乱弃 病死 畜禽行为 ，杜绝 出现随意弃置、贩运 、屠宰 、经营、加 工病死（或死 因不明 ）畜禽及病死（或死 因不 明）畜 禽 产 品等违 法 行为 。 ２．３．４依法拆 除违规建设 的新养殖场。国土部 门对 未经 审 批违 规 建设 的新 养殖 场 （户 ），特 别是 建 立在 禁养区 、限养区和基本农 田的违规养殖场 （户 ），要 采取相关措施 ，要求养殖场（户 ）限期 自行关 闭或搬 迁 ，拒不执行的依法依规进行强制关闭或搬迁网。各
（２０１５－０５－１４１［２０１８－０１－２３］．ｈｔｔｐ：／／ｎｅｗｓ．１６３．ｃ０ｍ／１５／０５１４１０６１
ＡＰＩＢＴＯ８Ｈ００ｏｌ４ＡＥＤ．ｈｔｍ１．
硬磊百 丽 可
１２
Ｈｕｎａｎ Ａｎｉｍａｌ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎｏ．Ｉ，２０１８．（Ｔｏｔａｌ Ｎｏ．２０３）
部 门相互配合 ，信息共享 ，联合参与行动 ，形成多部
门高压态势 ，对违规养殖场 （户 ）形成强有力 的打
击 。
口
参考文献 ： 【１】姚丽华．我 国畜禽养殖污 染现状分析及污染 防治 法律 问 题研 究【Ｊ】．科技资讯，２０１５，１３（１３）：１１１－１１２． ［２】浏阳市畜牧兽 医水产局．关于 印发《关于加快推进标准 化 生态养殖 发展 的实施 意见》 的通 知 【ＥＢ／ＯＬ］．（２０１７－－０５－０３）
南亩放墨匿
２０１８年第１期（总第２０３期）
麦 氏比浊仪 、移液枪等 。
１．４检 澳４方 法 １．４．１虎 红平板 凝 集试 验 （ＲＢＴ）
按动 物布鲁 氏菌病诊断技术 （ＧＢ厂Ｉ’１８６４６—２００２） 和 试 剂 说 明 书进 行 操 作 和结 果 判 定 ：实 验 前 将 抗 原 、待 检血清样 品及 阴 阳性对照 恢复至 室温 ，取 ０．０３ｍＬ虎 红平 板凝 集 抗 原 于 洁净 玻 璃板 上 。取 ０．０３ｍＬ被 检 血 清 与 抗 原 混合 ，４分 钟 内观 察 结 果 。 凡 出现 ＋以上 者 判 为 阳性 。对 出现 阳性 反 应 的动 物 ，必 须进 一 步做 试 管凝 集 试验 确 证 。凝 集反 应 判 定标准 ：＋＋＋＋凝集块呈菌丛状 ，凝块间液体 明显清 亮 ；＋＋＋凝集反应较 强 ，液体较清亮 ；＋＋形成较明 显卷边 ，凝集块 间液体稍清亮 ；＋稍能查到凝集 ，稍 有卷边形成 ，凝集物间液体呈红色 ；一无凝集 ，呈均 匀粉 红 色 。 １．４．２试 管凝 集 试验 （ＳＡＴ）
提 供技 术支 撑 。现将 检测 情况 报告 如 下 。 １材料 与方 法 １．１血 清样 品
采集长沙地区未免疫布鲁 氏菌疫苗的牛 、羊血 清样本 ，冷冻保存 。
１．２试 剂
布鲁 氏菌病 虎红平 板凝 集抗 原 （生 产批 号 ： ２０１６１００５），购 自青岛易邦生物工程有限公司。布鲁 氏菌病试 管凝集抗原 、标准 阳性血清 、标准 阴性血 清（生产批号 ２０１７０１１５），购 自青 岛易邦生物工程有 限 公 司 。 布 氏 杆 菌 竞 争 ＥＬＩＳＡ 检 测 试 剂 盒 （Ｃ—ＥＬＩＳＡ），购 自兰 州 兽 医研 究 所 ，生 产 批 号 ２０１６０７１４１３０，有 效期 ２０１７０７１３。