生物科技-7第七讲第三章 实验动物学微生物控制 精品

Ⅲ. 生殖试验（妊娠前和 5周龄雄性和12周龄雌性SPF小鼠、大鼠，经1周检疫适
妊娠初期服药反应）
应后使用
Ⅳ. 致癌性试验
4周龄的SPF小鼠、大鼠，经1周检疫适应后使用
Ⅴ. 生殖试验（器官 形成期的服药试验）
生殖试验（产前1周 和哺乳期服药试验）
12周龄的SPF小鼠、大鼠，经1周检疫适应后使用， 2.5 kg左右的雌兔，经4周检疫适应后使其交配妊娠用于
无菌动物 无 无 明确 少 很好 可能好 很低 约100%
实验标准设计
可能
实验结果的讨论能好 可能好 低 约90%
可能 高
普通动物 有或可能有 有或可能有 有疑问 多或大量 不准确 有困难 高 约40%
不可能 有疑问
日本国立卫生试验所生物安全性试验研究中心 按照日本政府的规定，对所有医药品、化妆品 、食品添加物、农药、化学物质、家庭用品、 动物用医药品、饲料添加物等，都必须进行生 物安全性试验，合格者方准许正式生产，投放 市场。
小大豚地兔猫狗 猴 鼠鼠鼠鼠
细菌 19 18 16 16 16 2 3
3
病毒 17 13 7 5 4 6 6
6
寄生虫
无体内外所有寄生虫
二、饲养与监测
SPF动物来源于无菌动物或悉生动物， 必须饲养在屏障系统中，所以屏障系统 也称为SPF设施。
通常SPF动物室都经严格净化，严格控 制病原微生物的侵入。
品 品物
物
用添
质
医加
药物
一般 毒性 试验
急性毒性试验 亚急性毒 慢性毒性
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特殊 毒性 试验
局部刺激试验 变态反应试验
致畸形试验 繁殖试验 依赖试验
致癌性试验
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安全性试验的种类
动物要求
Ⅰ.急性毒性试验
4周龄的SPF小鼠、大鼠，经1周适应后使用；2.5~3.0kg 的兔，经两周适应后使用；6~7月龄的毕克狗，经1 周适应使用。
Ⅱ.大鼠的亚急性及慢性毒 性试验
兔的亚急性毒性试验
毕克狗的亚急性及慢性毒 性试验
4周龄的SPF大鼠，经1周适应后使用； 约2.5kg的兔； 6~7月龄的毕克狗，经4周适应后使用。
在对SPF动物饲养过 程中，时间长了，难 免不发生污染。
所以不仅对SPF动物 需要定期监测，而且 对SPF动物一般都作 周期性重建(F5～6代 淘汰制度)。
三、应 用
国际上公认SPF动物适用于所有科学研究，是 目前国际标准级别的实验动物。
生产各种疫苗所用的动物都应为SPF级动物。 SPF动物应用价值在于它没有人畜共患病病原
2、清洁级动物特点及应用
清洁级动物比普通级动物要求排除的微生 物和寄生虫多，但比SPF动物少。即就微生 物净化程度CL比CV高，而比SPF低。
清洁级动物除肉眼观察无病外，尸体解剖 时，主要脏器、组织无论是肉眼观还是病 理组织切片均应无病变。
清洁动物饲养于温湿度恒定的、十万级 空气净化的半屏障系统中，其所用的饲 料、垫料、笼器具等都经过消毒灭菌处 理，饮用水除用高压灭菌外，也可采用 pH2.5～2.8的酸化水，工作人员需换灭 菌工作服、鞋、帽、口罩等进入动物室 进行操作。
体、没有主要传染病病原体、没有对实验结果 可能产生干扰的微生物。
SPF动物不存在隐性感染（清洁级就有）。 隐性感染不会影响动物健康的外表，容易被忽
视，但却能给实验带来严重的干扰。
表3-3几种实验动物应用价值的比较
类别 传染病 寄生虫 试验结果 应用动物数 统计价值 长期实验 死亡率 长期实验存活率
我国（1992年）医学实验动物标准中，规 定了SPF动物应排除的病原微生物和病毒的 种类如下：
细菌：小鼠有19种、大鼠18种、豚鼠16种 、地鼠16种、兔16种、猫2种、犬3种、猴3 种。
病毒：小鼠有17种、大鼠13种、豚鼠7种、 地鼠5种、兔4种、猫6种、犬6种、猴6种。
详见表3-1
表3-2 卫生部对实验动物生物监测标准
实验
12周龄的SPF小鼠、大鼠，经1周检疫适应后，使其交配 妊娠后用于实验
表3-5 日本对供安全性试验动物的要求
第四节 清洁级动物与普通级动物
一、清洁级动物（CL） 1.基本概念：是指动物体内、外不携带
有人畜共患病病原体，或动物传染病病 原体，并对科学研究无干扰的动物。
清洁级动物是根据我国国情而设定的等 级动物，目前在我国已成为适用于科研 的 标 准 的 实 验 动 物 ， 其 种 群 来 源 于 SPF 动物或剖腹产动物。
目前一般都饲养在IVC系统中。
清洁级动物近年来在我国得到较广泛的 应用。它较普通动物健康，又较SPF动 物易达到质量标准，在动物实验中可免 受动物疾病的干扰，其敏感性与重复性 亦较好。
但国际上普遍认为清洁动物仅适合于短 期或中期部分科研实验。
• 清洁级动物微生物控制标准基本上与SPF 动物相同。
第三节 无特定病原体动物（SPF动物）
一、基本概念：
无特定病原体动物(specific pathogen free animal,SPF)是指机体内无特定的微生物和寄 生虫存在的动物，而非特定的微生物和寄生虫 是允许存在的。
1978年，英、美、日、法等国协商制定了应 排除的病原微生物小鼠有22种、大鼠18种、 豚鼠18种、地鼠15种、兔16种。
其试验内容包括：一般毒性试验、特殊毒性试 验、在体内衍变过程、变异原性试验及一般生 物学试验，共5大项(见表3-4)，这些试验所用 的大、小鼠必须是SPF级(表3-5)。
表3-4日本关于生物安全性试验动物的规定
安全性试 验的种类
医 化 食 品 农 化 家庭 动 饲
药 妆 添 加 药 学 用品 物 料
• 不同之处是在抗体检查中，清洁级动物经 常可以查出鼠脑膜炎病毒和鼠肝炎病毒抗 体的存在。这一点会对个别实验产生不良 的影响。如隐性感染了鼠肝炎病毒的小鼠 ，就会影响小鼠的免疫应答和肿瘤研究。
• 清洁级动物是我国常用的实验动物，可应 用于生物医学研究的各个领域。
二、普通级动物（conventional animal CV） 1.概念：不携带人畜共患病病原体和动物急