福建省漳州市芗城中学高中生物 2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体教案 新人教版选修3

2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
教学目标：
知识目标： ⑴掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。

⑵简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。

能力目标： 让学生了解单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取生物科 学知识和培养探索生物科学的兴趣。

教学重难点：
重点：动物细胞融合、单克隆抗体的制备过程
难点：单克隆抗体的制备过程
教学课时：1课时
教学过程：
一. 动物细胞融合：
（一）复习导入新课
让学生回顾有关植物体细胞杂交技术的基本知识。

指出动物细胞与植物细胞的不同，进一步探讨动物细胞是否可以融合或杂交？如果动物细胞进行融合，与植物细胞有什么区别？ 植物细胞A 原生质体制备 原生质体A 人工诱导 植物细胞B 酶解法去壁 原生质体
B 融合
人工诱导因素
（二）动物细胞融合：
也称为细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。

融合形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。

动物细胞融合的基本原理与植物原生质体融合的基本原理相同，都是依据细胞膜的流动性。

但是动物细胞没有细胞壁，不需要酶解。

动物细胞自然生长条件下会出现融合的现在，但是多数依靠人工诱导动物细胞融合。

物理：离心、振动、电激
诱导动物细胞融合 化学：聚乙二醇（PEG ） 同核、异核 的因素 生物：灭活的病毒（如仙台病毒等）
通过课本图2-23和生物技术资料卡讲解灭活病毒如何诱导细胞融合、如何获得灭活病毒。

总结：细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能（包括种间，属间、科间的细胞都获得成功），使杂交细胞具有两个亲本细胞的遗传特性。

但是，最主要的应用是杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。

二． 单克隆抗体：
（一）复习导入新课
膜融合、核融合 物理：离心、振动、电激 化学：聚乙二醇（PEG ）
杂交细胞
让学生回忆的免疫调节中关于抗体的本质，和B 淋巴细胞产生抗体的流程。

请学生在阅读课本P52的最后一自然段的基础上，讨论一下问题：抗体的传统生产方法如何进行及缺陷是什么？淋巴细胞产生抗体的流程图：
抗原a 吞噬细胞 T 细胞 B 淋巴细胞 浆细胞 抗a 抗体（具有特异性）
(二). 抗体的传统生产方法：
向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需要的抗体。

这种生产抗体的方法产量和纯度都很低，而且制备的抗体特异性差。

（三）.单克隆抗体
要获得大量的纯种抗体，必须得到只产生单一抗体的B 淋巴细胞（可以通过单个细胞的分离培养的得到）。

但是主要的问题是，得到单一的B 淋巴细胞后，由于它是属于高度分化的细胞，在体外培养的条件下，一个B 淋巴细胞是不可能增殖的，怎么解决这个问题呢？
引导学生思考：如果诱变B 淋巴细胞，使其可以无限增殖（如癌细胞状态）？但是诱变是不定向的，有可能使细胞丧失产生抗体的能力。

所以要采用一种定向的方法让B 淋巴细胞既保持产生抗体的能力，又能无限增殖---细胞杂交。

单克隆抗体技术产生的，就是把一种B 淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行杂交融合，所得到的杂交细胞既能大量增殖，又能产生大量的特异性抗体，这就是极富创造性的杂交瘤实验。

通过课本图2-24详细讲解单克隆抗体的制备过程。

板书：
第一次筛选的目的？筛选后的细胞的种类？ 第二次筛选的目的？
特定抗原 免疫小鼠 B 淋巴细胞（多种）
如：B 1，B 2，B 3 多种杂交瘤细胞（异核）如：AB 1,AB 2,AB 3
多种杂交细胞（同核、异核）如：AA,BB,AB 1,AB 2,AB 3
杂交融合 选择性培养基
专一抗体检验，对阳性细胞克隆培养
单克隆杂交瘤细胞
总结分析单克隆抗体的概念及其优点。

让学生看书，回忆单克隆抗体的制备过程，并请学生复述。

板书：
动物细胞融合单克隆抗体
物理：离心、振动、电激传统抗体生产化学：聚乙二醇（PEG）
生物：灭活的病毒单克隆抗体生产体外培养注射到小鼠体内
单克隆抗体。