生物农药 3苏云金杆菌Bt
Bt(苏云金杆菌)乳剂生产工艺规程
Bt（苏云金杆菌）乳剂生产工艺规程衡阳市微生物厂一九九二年三月Bt 乳剂工业生产技术一、概述Bt 即苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis ）的简称，是一种寄生于昆虫体内引起昆虫发病死亡的能产生伴孢晶体的芽孢杆菌，其制剂广泛应用于农、要、果、蔬、城市园林方面的害虫防治。
二、生产工艺流程砂土管菌种 斜面菌种 扁瓶菌种扩大培养 发酵罐 过滤 浓缩加助剂 检验 包装三、生产工艺操作规程 （一）砂土管菌种的制备 1、砂的处理：取建筑用砂或河砂经60－80目过筛后用工业Hc 浸泡48h 后用清水洗净，再用0.2NNao 中和，烘干后用磁铁除去其中带磁性之金属微粒，装入洁净容器内备用。
2、砂土管制备：将以上已处理好之砂土分装于1.2×12公分之小试管中，每管约装2克，塞上棉塞，先用2.0kg/cm 2高压灭菌1.5小时，间歇灭菌三次，再以160℃干热灭菌2小时，经无菌试验，即抽取一点砂土置于斜面试管中 36℃培养24小时才检查无杂菌后备用。
27－29℃48－72h 27－29℃ 18－24h 27－29℃36－48h3、砂土孢子的制作：选择生长良好，经过生产能力考查合格的优良试管斜菌种一支加入无菌水5ml，用接种针刮下孢子制成高浓度的孢子悬液用无菌吸管吸取0.2－0.3ml接入砂土管中，而后置入真空干燥器内，用真空泵间歇抽干，用石蜡封口，以后置于0－5℃冰箱中，在干燥情况下保存。
（二）斜面菌种的制备1、培养基：牛肉膏0.3%、蛋白胨1%、琼脂2%，调节7.5－8.0溶化后分装试管，加塞放入试管篓内包好灭菌。
2、灭菌：在消毒锅内 1.1kg/cm2下蒸气灭菌30分钟，等冷却到60－70℃时取出摆成斜面，空白培养2天观察无杂菌方可使用。
３、接种培养：将菌种试管斜面放在接种室内或无菌操作箱中，打开紫外线灯灭菌30分钟后关闭。
用接种环按操作规程刮取种子菌苔少许，转至新鲜斜面培养基上划线接种，然后放入30℃培养箱内3－4天，经检查正常，放入冰箱内备用。
苏云金杆菌生物杀虫剂(Bt)对烟青虫、棉铃虫的杀虫效果比较
青虫的杀虫效果均 随着试 验浓度 的下降 而ｌ￣ ， ２０ ｌ ｔ 即 ． ｔ ｒ 浓度处理 的防效 ＞１ ３ｒ ｎ Ｌ ． ｎ 浓度 处理 防救 ＞１０ ．
ｍ ＃Ｌ浓度处理防效 ； 药后 ５天防效 ＞药后 ３ 天防效。② 各生产厂的 Ｂ杀虫剂产品之间对烟青虫的杀虫救果有较 ｌ 大差异 ， 中以福建 莆田市微生 物厂 Ｂ 、 其 ｔ 湖北省农科 ＷＰ 院微生物实验厂 Ｂ ＷＰ美国雅培公司 ｔ 、 Ｂ Ｅ 种产 ｔ Ｓ３ Ｌ浓 品防效最好 ， ３ 这 种产 品的防效 较为近似。２ ０ ．
度处理 ． 以清水为对照。
１４ 试 验方 法 ．
采用浸叶法。先在 ２ 孔板上每孔加上 ０ ５ｍ ％琼 ４ ． ｌ ２ 脂液 ， 冷却凝 固用于保湿。然后 ， 将各种 Ｂ 杀虫剂分别配 Ｉ 成 １０ １３２０ ．、．． ． Ｌ３ 种浓度 药液。再将洗净凉干 的嫩 烟叶浸入各处理药液 中 ３ ５ｓ取出凉千 ， — ， 剪成宽 １ 、 衄ｌ 长 ３ｃ ａ条状 叶片 ， 用镊子将条 状 叶片放＾ ２ ４孔板孔 内． 每
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种植技术-Bt杀虫剂 技术有讲究
种植技术-Bt杀虫剂技术有讲究ｂt杀虫剂，即苏云金杆菌微生物杀虫剂，使用它杀灭害虫具有安全、对天敌无伤害、害虫难产生抗药性等特点，已经被广泛用于防治农作物害虫。
在实际应用中，由于有些农民朋友没有掌握方法，使用效果不尽如人意。
使用ｂt杀虫剂，技术上有很多讲究，农民朋友要掌握好。
掌握合理的施用浓度。
害虫的种类不同，对ｂt杀虫剂的敏感程度不同，因而施用浓度就不一样。
只有根据害虫的敏感度选择适宜的浓度，才能收到良好的防治效果。
如对稻苞虫、稻纵卷叶螟、菜青虫等敏感害虫，可使用５００～１０００倍稀释液。
对三化螟、棉铃虫等不太敏感的害虫，则要使用１００～２００倍稀释液。
选择在适宜的条件下施用。
ｂt杀虫剂的孢子在气温为２０～２５℃、相对湿度为８５％以上时活性最高，施用效果最好。
在气温为２０℃以下、日光长时间照射、强风暴雨等环境条件下活性较低，施用效果差，因而要避开这些不利的天气施用。
在强光和气温在２５℃以上时，下午５时左右施用为宜，阴天可全天施用。
施药时要将叶片下面和背面都喷透，才能提高药效。
粉剂宜在早晚有露水或小雨过后施用，以利药剂粘附在作物茎叶上，发挥毒杀作用。
确定适宜的施药时间。
ｂt杀虫剂的药效比化学杀虫剂来得慢一些，施药时间应比化学杀虫剂要提前２～３天，以卵孵盛期至１龄幼虫期施用效果最好，如在这一时期防治菜青虫防效可达９２％。
与化学杀虫剂混用。
为提高药剂的防治效果，特别是在害虫大发生和多种害虫混合发生时，宜与杀虫双、杀虫单、甲胺磷、三唑磷、敌敌畏、敌百虫等化学杀虫剂混用。
如单用ｂt乳剂，每亩用２００毫升，对稻纵卷叶螟的防效只有７０％～８０％，对二化螟的防效仅有６０％。
若每亩用ｂt乳剂１００毫升加１８％杀虫双水剂１００毫升，对稻纵卷叶螟的防治效果可达９５％左右。
每亩用ｂt乳剂２００毫升加杀虫双１００毫升，对二化螟的防治效果可达９５％。
目前市场销售的比双灵、绿杀螟、特杀螟、必杀螟等农药，均为ｂt粉剂或乳剂与杀虫单粉剂或杀虫双水剂的复配制剂，应优先选用。
无公害蔬菜常用农药杀虫剂
无公害蔬菜常用农药杀虫剂
生物农药
BT，中文名称为苏云金杆菌，是一种细菌杀虫剂。
该品种在我国主要菜区已全面使用并取得较好的经济效益。
但目前BT生产厂家很多，质量各异，使用时必须选择质量好的品种。
注意事项BT在气温稍高时效果较好，冬季使用效果较差，强光下会影响药效，宜在下午4时后使用。
BT对蚕毒性较大，养蚕区禁用。
不宜与杀菌剂配合使用。
虫瘟一号又称斜纹夜蛾NPV杀虫剂，是一种病毒杀虫剂。
该品种1998年才登记，登记厂家为广州市治斜纹夜蛾，并可兼治甜菜夜蛾、菜青虫等害虫，但对小菜蛾效果极差，目前开始在部分小市推广使用。
该药效果较慢，使用时可与适量快速杀虫剂混用，不宜与杀菌剂混合使用。
威敌V-BT是由颗粒体病毒和BT复配而成，目前在我国开始推广，生产厂家为海南省南奇生长工程公司。
主要用于防治小菜蛾、菜青虫等。
生化农药
爱化菌素（齐螨素）是一种放线菌产生的抗生素，目前在我国流通品名甚多，包括进口的害极灭、国产的海正灭虫、赛福、爱福丁、虫螨克等。
主要用于防治小菜蛾、美洲斑潜蝇、螨类等，并取得了明显的经济效益和社会效益。
特异性能杀虫剂包括抑太保、卡死克、米满等。
主要用于防治夜蛾类害虫。
高效低毒低残留杀虫剂
5%高效大功臣是含量5%的吡虫啉，属硝基亚甲基类，高效低毒低残留。
主要用于防治刺吸性害虫如蚜虫、蓟马、白粉虱等，有很强内吸作。
微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌(Bt)的研究现状及应用
《微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌（Bt）的研究现状及应用》苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌，简称Bt。
苏云金杆菌的发现，为人们利用微生物消灭植物病虫害提供了美好的前景。
化学杀虫剂的长期使用对生态环境产生了严重的破坏，而害虫种群的抗药性也日益提高，因此生物杀虫剂因为其“绿色环保”的特点日益引起人们的广泛关注。
现在，人们已经用发酵罐大规模地生产苏云金杆菌并制成粉剂或可湿剂、液剂，应用于农业，对100多种害虫有不同的致病和毒杀作用。
苏云金芽孢杆菌是目前世界上产量最大、应用最广的生物杀虫剂。
本文简要介绍作为生物杀虫剂的Bt的发展历史、研究现状和应用情况。
研究历史[1]1901年，日本学者石渡繁胤（Ishiwata Shigetane）从虫尸体液中分离出苏云金杆菌猝倒变种（Bacillus.thuringiensis var.sott）成为苏云金杆菌研究的起点[2]。
1911年，Berliner发现一杆菌，并详细描述了该菌的形态和培养特征，定名为苏云金杆菌（Bacil-lus.thuringiensis），指明苏云金杆菌含伴孢晶体（Paraspora crystl）[3]。
1938年，苏云金杆菌商品化，用于防治地中海粉螟。
20世纪50年代许多国家进行了商业性生产。
1953年，Hannay第一次发现苏云金杆菌的杀虫活性与伴孢晶体有关，并和Fitz-James于1955年证实，伴孢晶体是一种蛋白质。
1981年，Schnept和Whiteley首次将HD21菌株伴孢晶体的基因克隆到大肠杆菌中，并得到表达。
20世纪60年代用血清学技术进行Bt的鉴定和分类。
自二次世界大战后，苏云金芽孢杆菌被广泛使用，至今已有60多年[4]。
由于其推广力度以及人们的农药使用意识的传统观念限制，目前生物农药仅占全部农药市场份额很少一部分，从此可看出，苏云金芽孢杆菌杀虫剂任然具有较大的发展潜力。
简介Bt是一种革兰氏阳性芽孢杆菌，为昆虫病原细菌，其菌体为短杆状、有鞭毛，一般单生或形成短链。
生物农药苏云金杆菌
编辑：杨风光**************文/ 赵国庆生物农药苏云金杆菌苏云金杆菌(Bt制剂)是在德国苏云金地区发现的一种细菌性杀虫剂。
常见商标名称：阿苏、苏力菌、菜蛙、天然之宝、敌宝、拂康、贝林、碧绿、碧星、娇蓝、金中、奇佳、芯钻、乐棵多、驱雀济农、百事威风、高点、九鲤、力道、灵秀、润奇、生绿、顺诺、应螟、真精、洲际、爱地益、塞诺菲、蛙先生、强敌315、杀虫菌1号、菌杀敌、青虫灵、都来施、农林丰、BT、Bt等。
苏云金杆菌性能原药为黄褐色晶体，属好气性蜡状芽孢杆菌群，在芽孢囊内内产生晶体，有12个血清型、17个变种，主要杀虫成分为内毒素和外毒素。
干粉在40℃以下稳定，碱性环境中分解，属低毒性杀虫剂，对人无毒性反应。
苏云金杆菌(Bt制剂)是一种有很多变种的芽孢杆菌，属细菌杀虫剂，由于杀虫范围广，防治效果好，不污染环境，生产工艺先进，目前世界上已有几十个国家500余个厂家获准登记，商品种类达100余种，年生产能力达50余万吨，是生物杀虫剂第一品牌。
苏云金杆菌杀虫剂作用方式主要是胃毒作用，苏云金杆菌从害虫口腔进入消化道后，在体内大量繁殖，同时吸收虫体内的营养物质，使害虫不能正常生长发育；同时细菌还产生大量毒素，使害虫形成败血症死亡。
病死虫体颜色加深变黑，并软化腐烂失去原形，一般均有臭味。
我国生产的苏云金杆菌大多加入0.1%～0.2%菊酯类杀虫剂，可加快害虫死亡。
苏云金杆菌特点1.选择性强，对人畜安全。
只对病虫害有作用，一般对人、畜及各种有益生物(包括动物天敌、昆虫、蜜蜂、传粉昆虫及鱼、虾等水生生物)比较安全，对非靶标生物的影响也比较小。
2.对生态环境影响小。
苏云金杆菌的活性成分完全存在和来源于自然生态系统，最大特点是极易被日光分解，是一种来于自然，归于自第12月 上半月刊然正常的物质循环方式。
因此可以认为对自然生态环境安全、无污染。
3.生产过程节能环保。
生产加工生物农药，一般主要利用天然可再生源，如农副产品的豆饼、花生饼、菜籽饼、鱼粉、麦麸或某些植物体等，原材料的来源十分广泛、生产成本比较低廉。
生物农药---苏云金杆菌
理化性质
• 原药为黄褐色固体 微酸性至中性 粉末 革兰氏阳性横裂繁殖 • 自溶后释放出芽孢和伴孢晶体
作用。
环境效应
苏云金芽孢杆菌产生的毒素在土壤中通过生物 降解和自然失活作用得以减少或消除，苏云金芽 孢杆菌产生的 毒素可直接被土壤微生物降解或进 入靶标害虫和非靶标害虫体内后被“消化”降解 ，另外太阳光中紫外线的照射，也可使苏云金芽 孢杆菌产生的毒素分解。其中，微生物降解是消 除土壤中 苏云金芽孢杆菌产生的毒素的重要途径 。
性状
• 100亿活芽孢/g可湿性粉剂或悬浮剂
剂型
• 150亿活芽孢/g可湿性粉剂 • 按我国 农药毒性分级标准属 于低毒 杀虫剂 白鼠经口每千克体重2×10的22次方 活 芽孢给药无死亡 对人对家畜类安 全
毒性
苏云金伴孢晶体
显微镜下的Bt
二 、来源及生产技术
Bt主要是由昆虫病原细菌发酵产物加工成的 制剂采用传统的分批深层发酵技术。 培养基成分为：大豆粗粉15 g/L , 葡萄糖 5 g/L ，淀粉5 g/L 。 分批发酵的最终产物含有细胞、孢子、胞 外酶和蛋白质、其他低分子量物质和杀虫结 晶蛋白质。经高速连续流离心分离、丙酮沉 淀后，生成的粘稠糊状物再与各种辅助剂（ 润湿剂、粘着剂、稳定剂）混合，最后制成 粉剂或液体包装出售。
三 、作用谱及作用方式 主要防治对象
按昆虫类型分类 直翅目、鞘翅目
按应用途径分类
苏芸金杆菌
新型生物农药——Bt杀虫剂即苏芸金杆菌的简称，Bt杀虫剂是利用Bt杀虫菌，经培养生产的一种微生物制剂。
这种杀虫菌，在生长发育过程中产生芽孢并形成一种蛋白质毒素，在显微镜下观察，通常是不规则的菱形结晶，叫做伴孢晶体。
当害虫蚕食了伴孢晶体和芽孢之后，在害虫的肠内碱性环境中，伴孢晶体溶解，释放出对鳞翅目幼虫有较强毒杀作用的毒素。
这种毒素使幼虫的中肠麻痹，呈现中毒症状，食欲减退，对接触刺激反应失灵，厌食，呕吐，腹泻，行动退缓，身体萎缩或卷曲。
一般对作物不再造成危害，经一段发病过程，害虫肠壁破损，毒素进入血液，引起败血症，同时芽孢在消化道内迅速繁殖，加速了害虫的死亡。
死亡幼虫身体瘫软，呈黑色。
所以，害虫只有把Bt细菌吃到肚子里，再经过一个发病过程，才能死掉，大约48小时方能达到杀灭害虫的目的，不象化学农药作用那么快，但染病后的害虫，上吐下泻，不吃不动，不再危害作物。
因此，使用Bt杀虫剂杀虫时，不要心急。
Bt杀虫剂与化学农药相比有许多优点第一，对人畜无毒，使用安全。
Bt细菌的蛋白质毒素在人和家畜、家禽的胃肠中不起作用。
第二，选择性强，不伤害天敌。
Bt细菌只特异性地感染一定种类的昆虫，对天敌起到保护作用。
第三，不污染环境，不影响土壤微生物的活动，是一种干净的农药。
第四，连续使用，会形成害虫的疫病流行区，造成害虫病原苗的广泛传播，达到自然控制虫口密度的目的。
第五，没有残毒，生产的产品可安全食用，同时，也不改变蔬菜和果实的色泽和风味。
第六。
不易产生抗药性，这只是相对而言。
人类与有害昆虫的斗争，是极其艰苦和复杂的，最近已经发现了抗药性的报道，但不象化学农药产生的那么快。
Bt杀虫剂的生产和应用Bt杀虫剂的生产方法主要有液体深层发酵和半固体发酵两类。
河北省科学院生物研究所研究成功的两步法生产，是在半固体发酵方法的基础上加以改进、完善和创造而总结出来的有效、简便、实用的Bt杀虫剂生产技术，其生产工艺简单，规模可大可小，特别适合在农村中小企业中推广，可以大幅度降低杀虫剂的生产成本，对微生物农药的发展，起了积极作用。
苏云金杆菌(BT)毒素及其应用
苏云金杆菌（BT）毒素及其应用苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis, BT）是一种属于芽孢杆菌科的厌氧革兰氏阳性细菌，被广泛应用于生物农药领域。
其特殊之处在于它所产生的杀虫毒素对昆虫具有高度选择性和毒杀力，而对其他生物如人类和哺乳动物等无害。
苏云金杆菌通过杀虫毒素中的晶体蛋白（crystal protein, Cry）来对昆虫进行毒杀作用。
Cry毒素是一种孢晶蛋白，具有独特的作用机制。
其在昆虫肠道内会被消化酶切割，产生一种活性物质，结合并破坏肠道上皮细胞的细胞膜，导致肠道溶解和细胞死亡。
这一过程会导致昆虫水分和营养丧失，最终导致昆虫死亡。
苏云金杆菌毒素的应用主要集中在农业方面。
作为一种生物农药，它对昆虫的毒杀力非常高效，尤其适用于各类害虫的防治。
由于BT毒素对昆虫具有高度选择性，对其他生物无害，因此其在生态环境中的施用相对安全可靠。
同时，BT产品对环境的污染也很小，对人体的副作用也非常低。
因此，BT毒素被认为是一种环保、安全、有效的农药。
在实际应用中，BT毒素主要以两种形态存在：一种是悬浮液，可以直接喷洒在作物上，通过作物表面的附着和昆虫食用来实现毒杀作用；另一种是基因工程改造后的杂质，通常用于生产转基因植物。
这些转基因植物通过在其基因中导入BT毒素的编码序列，实现对害虫的防治。
这种转基因技术的应用使得BT毒素能够更加方便地被作物吸收，并在昆虫发生侵害时迅速发挥作用。
除了农业领域，BT毒素还被应用于其他一些领域。
在医学上，BT毒素被用作治疗和预防各种寄生虫病的药物。
在环境保护方面，BT毒素还可以被用来控制蚊蝇等各类害虫的繁殖。
此外，BT毒素还可以用于基因工程技术的研究和发展。
总之，苏云金杆菌（BT）毒素是一种对昆虫具有高度选择性和毒杀力的生物农药。
其应用广泛，可用于农业、医学、环境保护等多个领域。
随着技术的不断发展，BT毒素的应用将进一步扩展，为人类的生活和生产带来更多的益处。
常用生物农药介绍(杀虫剂和杀菌剂)
1.1 Bt杀虫剂苏云金杆菌属于活体细菌农药，以胃毒作用为主，在生长发育过程中产生一种蛋白质毒素，被鳞翅目害虫蚕食入体后，溶解释放出较强毒性，使害虫中毒、厌食、上吐下泻，不再危害，一段时间后引起败血症死亡。
苏云金杆菌药效较缓慢，一般在施用后2～3天起效，残效期7～10天左右；18℃以上才能发挥杀虫作用，温度愈高，害虫取食愈多，效果愈好；能有效防治棉铃虫、菜青虫、小菜蛾、斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、银纹夜蛾、刺蛾、尺蠖等鳞翅目害虫的幼虫，防治效果达到80%～90%。
1.2 核型多角体病毒一类专性昆虫病毒，属于病毒杀虫剂。
核型多角体病毒寄主范围较广，主要寄生鳞翅目昆虫，但是一种病毒只能寄生一种昆虫或其邻近种群。
常见的有棉铃虫核型多角体病毒、斜纹夜蛾核型多角体病毒、甜菜夜蛾核型多角体病毒、苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒、甘蓝夜蛾核型多角体病毒、茶尺蠖核型多角体病毒、松毛虫质型多角体病毒等。
核型多角体病毒经昆虫的口或伤口感染，经口进入虫体的病毒被胃液消化，游离出杆状病毒粒子，进入昆虫体腔，侵入细胞增殖，从而破坏昆虫细胞结构，之后再侵入健康细胞，直到昆虫致死。
该类病毒只能在活的寄主细胞内增殖，病虫死亡后通过粪便和死虫再传染其他昆虫，或通过卵传到昆虫子代，使病毒病在害虫种群中流行，从而控制害虫危害。
1.3 灭幼脲灭幼脲是一种昆虫激素类农药，属生物化学农药，为苯甲酰脲类昆虫几丁质合成抑制剂，能侵入昆虫和卵的表皮，通过抑制昆虫表皮几丁质合成酶和尿核苷辅酶的活性，来抑制昆虫几丁质合成从而导致昆虫不能正常蜕皮而死亡。
灭幼脲可杀卵和幼虫，宜在初龄幼虫期用药，虫龄越大，防效越差，对成虫无效。
以胃毒作用为主，兼触杀作用，害虫在药后3天开始死亡，5天达死亡高峰，持效期15～20天；对鳞翅目及蚊蝇幼虫活性高，用于防治桃树潜叶蛾、茶黑毒蛾、茶尺蠖、菜青虫、甘蓝夜蛾、小麦粘虫、玉米螟及毒蛾类、夜蛾类等鳞翅目害虫。
1.4 苦参碱苦参碱是一种植物源农药，属广谱杀虫剂，兼有杀菌活性和调节植物生长功能。
微生物杀虫剂_苏云金杆菌_Bt_
苏云金杆菌（Ｂ．ｔ）是一种细菌杀虫剂，是由昆虫病原细菌苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌ－ｌｕｓｔｈｕｒｇｉｅｎｓｉｓ）的发酵产物加工的制剂。
此菌１９１１年因贝利纳（Ｅ．Ｂｅｒｌｉｎｅｒ）发现于德国苏云金地区而得名，属芽孢杆菌，革兰氏染色阳性，横裂繁殖。
一、苏云金杆菌（Ｂ．ｔ）的杀虫机制和杀虫范围苏云金杆菌（Ｂ．ｔ）制剂是胃毒剂，进入昆虫消化道后，伴孢晶体（主要成分为蛋白质）被昆虫碱性肠液破坏成较小单位的δ－内毒素，使中肠停止蠕动、瘫痪，中肠上皮细胞解离、停食，芽孢则在肠中萌发，经被破坏的肠壁进入血腔，大量繁殖，使害虫得败血症而死。
目前已知苏云金杆菌有３０多个变种，某些变种营养体对数生长时期产生β—外毒素，耐热，是一种腺嘌呤核苷酸，也起杀虫作用。
苏云金杆菌杀虫谱广，能防治上百种害虫，对鳞翅目幼虫特别有效。
目前苏云金杆菌（Ｂ．ｔ）及其混配制剂已用于防治蔬菜、水稻、玉米、棉、果树、茶树和林区等害虫。
如防治菜青虫、小菜蛾、稻苞虫、稻纵卷叶螟、玉米螟、棉铃虫、枣尽蠖、松毛虫、烟青虫、茶卷蛾、茶尺蠖等百种虫害，是应用最广的微生物杀虫剂。
中国５０年代初曾从法国引进苏云金杆菌，并进行防治玉米螟试验，１９５９年又从捷克引进苏云金杆菌，１９６１年从前苏联引进苏云金杆菌蜡螟变种青虫菌。
与此同时，四川省农科院植保所与农业部成都药械厂合作从事苏云金杆菌的研发工作，至今全国已发展到８０个厂家开发生产，使用面积达近６００万公顷。
目前苏云金杆菌（Ｂ．ｔ）的开发工作正在向改善工艺流程和提高产品质量方向发展，同时继续寻找自然存在的Ｂ．ｔ新菌系和利用分子生物学技术已确定的菌系基因形成转合的Ｂ．ｔ菌系。
近年来四川省农科院植保所植保技术工程公司与湖北康欣农药业有限公司（湖北省农科院Ｂｔ研究开发中心）合作推广应用苏云金杆菌（Ｂ．ｔ）。
二、苏云金杆菌（Ｂ．ｔ）杀虫效果好，持效期较长，并有后效作用据上海市蔬菜技术推广站用生绿Ｂ．ｔ粉剂（１６０００国际单位／ｍｇ），亩用３０ｇ、５０ｇ和７０ｇ防治小菜蛾，施药后７天的平均防效分别为７４．４％、８２．１％和９０．３％；５％抑太保乳油用亩５０ｍｌ，防治小菜蛾，施药后７天的平均防效为７９．９％。
生物农药3苏云金杆菌Bt-PPT精品文档
植物疫苗--Incide
禾本科杂草狗牙根中寄生细菌(• Clavibacter • xyli •
subsp.cynodontis)
构建遗传工程杆状病毒杀虫剂
杆状病毒杀虫需时较长，限制了它的商品价值 插入对昆虫有效的毒素、激素等基因,垂直传播
以蓝细菌等构建Bt杀蚊工程菌 蚊子：疟疾、黄热病、• 登革热和丝虫病等疾 病传播媒介，幼虫以微生物水藻和细菌为食
cry1Aa cry1Ab cry1Ab /cry1C cry1Ac
cry1C cry2A cry3A
cry9C
Transgenic cotton
Transgenic corn
Transgenic forest
四、 分类及命名1、鉴源自及分类(1) 生理生化：碳源、氮源、酶、代谢物 (2) 酯酶电泳 (3) H抗原: 德语Hauch(扩散) 英、日、美、法4位专家建议 (1982)--H.• de Barjac博士(法国) (4) PCR
3、Mode of action
Midgut epithelial Cell perforation
Sepsis death
生物活性物质
蛋白质 胞内 芽胞 苏云金芽胞杆 菌活性因子 蛋白质 胞外 核苷类
杀虫晶体蛋白 免疫抑制因子A 肠毒素 辅助蛋白 自身诱导物抑制蛋白 活芽胞 死芽胞 芽胞衣 营养期杀虫蛋白 酶类 溶血素 苏云金素
几丁质酶 卵磷酯酶C
多元醇类 双效菌素
脊椎动物门 半索动物门 腕足动物门
癌细胞
节肢动物门
鳞翅目 双翅目 鞘翅目 膜翅目 螨类 等9个目
环节动物门 苔藓动物门 软体动物门 植物线虫 线虫动物门
活 性 谱
棘皮动物门
苏云金芽孢杆菌功能简介
苏云金芽孢杆菌
【适用范围】生物肥料、生物农药的应用。
【产品特点】
苏云金芽孢杆菌是一种广谱杀虫的细菌制剂，简称苏云金杆菌，又简称BT，是生物农药产品中开发最早、成效最大的品种。
粮食作物、经济作物、瓜果蔬菜类、茶树、烟草、药材、森林、花卉、观赏植物等均可使用。
苏云金芽孢杆菌对人畜、鱼类、蜜蜂安全，但对家蚕高毒。
杀虫机理：苏云金芽孢杆菌是内生芽孢的土壤细菌，在芽孢形成初期会形成菱形伴孢蛋白质晶体，对敏感昆虫有特异性的防治作用，并形成圆形或椭圆形芽孢。
当昆虫取食后，伴孢晶体在昆虫肠内碱性环境下降解(PH值10左右)，并通过中肠酶的消化作用，晶体毒素原变为具有活性的毒素，与昆虫中肠细胞膜上受体结合，破坏细胞结构，致使昆虫麻痹，全身瘫痪，上吐下泻，停止进食。
同时芽孢从破坏了的肠壁侵入体腔血液萌发成菌体，大量繁殖引起败血症。
开始虫体腹部发黑，以后全部发黑并很快死亡，死亡的虫子多是倒悬在枝叶上。
杀虫范围：BT可防治农林果蔬等作物上的鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目等32科150多种昆虫，能防治水稻的三化螟，稻螟蛉，稻纵卷叶螟，直纹稻苞虫等，棉花的灯蛾，棉大卷叶螟，棉铃虫，棉小造桥虫等，旱粮的玉米螟，高粱条螟，旋花天蛾，蔬菜的菜青虫、小菜蛾、苎麻赤峡蝶，烟青虫，茶花虫，柑橘黄凤蝶，林木中的马尾松毛虫、西伯利亚松毛虫、沙枣尺螞、刺蛾等。
【主要成分】苏云金芽孢杆菌活芽孢、发酵代谢产物、固态发酵基质。
bt蛋白的抗虫原理
bt蛋白的抗虫原理BT蛋白的抗虫原理。
BT蛋白，全称为苏云金杆菌杀虫蛋白，是一种天然的杀虫剂，被广泛应用于农业生产中。
它的抗虫原理主要是通过作用于害虫的消化系统，引起虫体中毒而达到杀虫的效果。
下面将详细介绍BT蛋白的抗虫原理。
首先，BT蛋白的抗虫原理是基于苏云金杆菌的特殊生物学特性。
苏云金杆菌是一种土壤中常见的芽孢杆菌，它在自然界中起着重要的生态作用。
苏云金杆菌在自然条件下会产生一种名为晶体蛋白的毒素，即BT蛋白。
这种毒素对于某些害虫具有高度的选择性毒杀作用，而对于其他昆虫、鸟类、哺乳动物等生物则没有明显的毒性作用，因此被广泛应用于农业生产中，成为一种绿色、环保的杀虫剂。
其次，BT蛋白的抗虫原理是通过害虫的消化系统发挥作用的。
当害虫摄食了含有BT蛋白的作物或者土壤中的芽孢，BT蛋白会在害虫的消化系统中释放出来。
在害虫的碱性肠道中，BT蛋白会被激活并形成毒素晶体，这些毒素晶体会破坏害虫肠道的细胞膜，导致细胞内外液体失衡，最终导致害虫死亡。
由于BT蛋白对害虫的选择性毒杀作用，它可以有效地控制玉米螟、棉铃虫、番茄斑点虫等多种害虫，而对于益虫和其他非靶标生物的影响较小。
另外，BT蛋白的抗虫原理还包括其对害虫的生长发育和繁殖的影响。
BT蛋白在害虫体内的毒杀作用不仅可以导致害虫死亡，还可以影响害虫的生长发育和繁殖能力。
研究表明，BT蛋白可以干扰害虫的饲料摄取、生长发育和繁殖过程，从而减少害虫的数量和危害程度。
这种抗虫原理不仅可以有效地控制害虫，还可以减少对农药的需求，降低农业生产中的化学残留和环境污染。
综上所述，BT蛋白的抗虫原理是基于苏云金杆菌的特殊生物学特性，通过作用于害虫的消化系统，引起虫体中毒而达到杀虫的效果。
它对害虫具有高度的选择性毒杀作用，对益虫和其他非靶标生物的影响较小，是一种绿色、环保的杀虫剂。
同时，它还可以影响害虫的生长发育和繁殖能力，从而减少害虫的数量和危害程度。
因此，BT蛋白在农业生产中具有重要的应用前景和推广价值。
微生物农药——BT农药
杀虫机理
苏云金杆菌可寄生130多种鳞翅目幼虫。 苏云金杆菌可寄生 130多种鳞翅目幼虫。 130多种鳞翅目幼虫 此外，膜翅目、 双翅目、 此外，膜翅目、双翅目、直翅目和鞘翅 目中的一 些昆虫也可被此菌感染。 目中的一些昆虫也可被此菌感染。 控制 毛虫、小蔡蛾、棉铃虫等。 毛虫、小蔡蛾、棉铃虫等。 苏云金杆菌杀虫的作用在于它所产生的 某些毒素。这些毒素 主要是δ 某些毒素。这些毒素主要是δ内毒素和 外毒素。
在昆虫病原细菌中， 在昆虫病原细菌中，以 苏云金杆菌在害虫 防治中的应用最为广泛， 效果也最好。 其杀虫 范围有一定的广谱性， 并且具有不亚于某些化 学杀虫剂的速效性。 学杀虫剂的速效性。在这一点上苏云金杆菌 优 于真菌和病毒制剂。
苏云金杆菌的生态习性
(1)营养条件 苏云金杆菌是弱寄生菌，容易培养，能利用的碳、 苏云金杆菌是弱寄生
BT的制备
用玉米粉,豆饼粉,NaH2PO4和NaCl来调整原料粉 中C,N,P,Cl含量,使其分别处于3-20%,1-10%, 0.512%,0.1-1.0%的范围内,加入5%-30%的谷壳, 10%30%的水,搅拌均匀得到固态发酵培养基,灭 菌后介 入苏金云芽孢杆菌菌种,发酵,干燥,粉碎 得到苏金云 芽孢杆菌农药原粉
微生物农药——BT农药
什么是微生物农药
包括农用抗生素和活体微生 物农药.为利用微 生物或其代谢产 物来防治危害农作物的病,虫, 草, 鼠害及促进作物生长.它包括以菌 治虫,以 菌治菌,以菌除草等.这 些微生物农药包括细 菌,真菌,病 毒或其代谢物.
微生物农药的分类
包括细菌,真菌,病毒,原生动物,线虫等,主要是前三者 微生物杀虫剂：细菌杀虫剂 真菌杀虫剂 虫剂
bt农药的介绍btbacilussthuringiensis苏云金芽孢杆菌用途最广开发时间最长产量最大应用最成功占生物防治剂总量的95以上已有60多个国家登记了120多个品种美国用以防治蔬菜害虫和玉米害虫的面积分别占总面积的80和50销售额从80年代末的4000万美元上升到90年代的5亿多美元内第一家bt杀虫剂生产企业我国目前已登记的bt杀虫剂粉剂有16种液剂12种生产厂家达76家年产量达20108kg30108kg由中国构建的高效杀虫重组苏云金杆菌已于2000年底通过了安全评价并获准进行商品化生产bt的杀虫机理bt毒蛋白在虫子体内被分解成有毒的多肽这些多肽与虫肠上皮细胞一些特异受体蛋白结合破坏细胞膜最后导致害虫死亡
苏云金杆菌BT油悬浮剂OD的研制
苏云金杆菌BT油悬浮剂OD的研制标签：油悬浮剂OD 增稠剂配方溶剂乳化剂分类：剂型研究2009-12-10 19:53苏云金杆菌(Baeillus thuringiensis，简称Bt)制剂是目前国内外研究最多、产量最大、应用最广的一类微生物杀虫剂，对马尾松毛虫、美国白蛾、杨扇舟蛾、舞毒蛾、尺蠖、菜青虫、玉米螟等林农害虫具有良好的防治效果。
目前Bt剂型主要是水悬浮剂和可湿性粉剂，在使用过程中需用水稀释，抗蒸发能力较差，雾滴直径小，易漂移，低空飞行作业效率低，影响使用效果，不适宜飞机防治。
我们研制的Bt油悬浮剂具有渗透性和黏附性强、抗蒸发、耐贮藏和增效等优点，特别适合飞机超低容量喷雾防治森林害虫。
1材料与方法1．1材料Bt原粉，本单位自备。
溶剂有棉子油、蓖麻油、桐油、液体石蜡、豆油、A1、A2、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯等25种；增稠剂有膨润土、硬脂酸铝、QH凝胶、龙胶粉、F1、黄原胶等11种：分散剂有拉开粉、NNO、LFS、B1、碳黑等15种。
1．2方法1．2．1溶剂的筛选制备Bt油悬浮剂用的固体原药在亲脂溶剂中的溶解性能欠佳，为提高分散度，要求分散介质黏度较大。
同时要求溶剂闪点高(开口闪点大于70℃)，毒性和挥发性低，以适应飞机超低容量喷雾。
在搜集溶剂时首先选择开口闪点大于70℃、挥发性低的棉子油、蓖麻油等25种溶剂。
1)兼容性试验：将定量的Bt原粉与溶剂混合，在54℃±2℃的温度下贮存14d，通过生测．筛选出与 Bt兼容性良好的溶剂。
2)单元溶剂的筛选：将溶剂与Bt原粉按一定的比例配制成17 600 IU·μL-1Bt油悬浮剂，通过对其悬浮率、流动性等物理性状的测定筛选出较好的单元溶剂。
悬浮率通常采用悬浮的液层高度占总液面高度(悬浮液高度+清液层高度)的百分率来表示。
3)二元溶剂的筛选：为了获得更好的物理性状，故进行二元溶剂的筛选。
将筛选出的单元溶剂按一定比例配成二元溶剂，以供进一步选择之用。
常用农药异名的识别总结
常用农药及除草剂异名及作用简介一、杀虫杀螨剂1、苏云金杆菌：BT、B·T、Bt、苏力菌、先得力、先得利、先力、灭蛾灵、杀虫菌1号、敌宝、力宝、康多惠、快来顺、包杀敌、菌杀敌、都来顺、苏得利、苏力精、苏利菌等（注：冒号前为常用农药的名称，冒号后为异名，下同）。
苏云金杆菌是从自然界中筛选出的一大类细菌型微生物杀虫剂，属于胃毒剂。
和阿维菌素一样，也是生物发酵产品。
苏云金杆菌是目前在农业上应用最为广泛的生物杀虫剂，杀虫谱广，能防治上百种害虫，对鳞翅目害虫特别有效,可防治蔬菜、水稻、玉米、棉、果树、茶和林区的稻苞虫、稻纵卷叶螟、玉米螟、松毛虫、菜青虫、小蛾、茶卷叶蛾、茶毛虫等。
残效10天左右，与少量敌百虫、敌敌畏、对硫磷混用有增效作用。
不能与敌菌丹、消螨普及碱性农药混用。
阴天、雨后或傍晚施药效果好，防止阳光中紫外线杀菌。
苏云金杆菌制剂可喷雾使用，也可喷粉，泼浇或灌心，对人畜安全，对作物无药害，不伤害蜜蜂和其他益虫，对蚕有毒。
2、除虫脲：灭幼脲1号、伏虫脲、氟菌杀、二氟脲、敌灭灵、二福隆等。
除虫脲为苯甲酸基苯基脲类除虫剂，主要是胃毒和触杀作用。
害虫接触药剂后，不能在蜕皮时形成新表皮，虫体畸形而死亡。
杀死害虫的速度比较慢。
主要剂型 20%悬浮剂。
纯品为白色结晶，原粉为白色至黄色结晶粉末。
不溶于水。
难溶于大多数有机溶剂。
对光、热比较稳定，遇碱易分解、在酸性和中性介质中稳定，对人、畜、鱼、蜜蜂等毒性较低，属于无毒极农药。
对鳞翅目幼虫特效(但对棉铃虫防效不好)，对双翅目、鞘翅目多种害虫也有效，能防治对有机磷、氨基甲酸脂、拟除虫菊酯等杀虫剂已产生抗药性的害虫。
主要对悬浮剂、可湿性粉剂对水喷雾，用于粮食作物、蔬菜、果树、茶树、林木等作物及卫生防疫、防治稻纵卷叶螟、粘虫、玉米螟、玉米铁甲虫、草地螟、菜青虫、小菜蛾、斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、豆野蛾、柑橘潜叶蛾、木虱、苹果金纹细蛾、枣尺蠖、枣步曲、茶尺蠖、茶毛虫、松毛虫、天幕毛虫、美国白蛾、杨毒蛾、侧柏毒蛾以及蚊蝇的幼虫等害虫。
三种生物农药的使用方法
三种生物农药的使用方法一、苏云金杆菌的使用：1.蔬菜害虫在菜青虫或小菜蛾卵孵化盛期，用 3.2%可湿性粉剂兑水1000-2000倍液喷雾，有理想的防治效果。
2.棉花害虫在棉铃虫卵孵化盛期，用3.2%可湿性粉剂兑水1000-2000倍液喷雾有好的效果。
3.水稻害虫每亩用菌粉50克兑水稀释2000倍液喷洒，可防治稻苞虫、稻螟；用BT乳剂400-600倍液可防治稻纵卷叶螟。
4.玉米害虫每亩用菌粉50克，兑水稀释2000倍液灌玉米心叶或每亩用菌粉100-200克，掺入3.5-5公斤细砂充分拌匀制成颗粒剂，然后投放玉米喇叭口内，可防治玉米螟。
5.贮粮害虫每10平方米粮堆表层，用BT乳剂1公斤与粮食拌匀，可防治对马拉硫磷产生抗性的仓库害虫和印度谷螟、棕斑螟等，而且不影响小茧蜂、寄生螨类对害虫的寄生。
二、白僵菌的使用防治松毛虫的几种方法：①用菌液在林间喷雾。
菌粉用水稀释配成菌液，每毫升菌液含孢子一亿个。
适用于水源方便，林木较低的松林。
②取菌粉与3%的敌百虫粉混合均匀，每克混合粉含孢子一亿个，每亩林木喷混合粉0.6-0.8公斤。
松毛虫死亡较快，而白僵菌又能在死虫体内迅速繁殖，扩大再感染增加防效③将四龄以上害虫的幼虫采回喷药液后再放回林中，每一点放400-500条虫，带菌活虫自由爬行扩大感染面。
此法适用各种龄期的松林。
④回收发病死亡的僵尸虫，放到白僵菌未扩散到的林内，可继续扩大感染面。
防治玉米螟可采用每克含70亿孢子、孢子萌发率90%左右的白僵菌菌粉，以1：10倍掺和煤渣粉做成颗粒剂，撒在玉米喇叭口内，每亩用颗粒剂3.5—5公斤，或者以1：100倍兑水做成液剂灌心，每亩用菌液30-40公斤。
施药时注意掌握好用药时机，可有效防治第一代玉米螟危害。
防治大豆食心虫可在秋季幼虫脱荚前，向大豆地里撒施白僵菌粉，每亩用量5-6公斤，能收到良好的防治效果。
注意事项：①白僵菌杀虫剂对家蚕、柞蚕染病力强，因此在饲养家蚕、柞蚕的地区不宜使用；②菌液要随配随用。
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问题
• 厂家多、规模小、质量难保证：2000-3000万 产值只有3-4家。 • 菌种剂型单一：只登记Btk 、Bti； • 生产水平相对落后，后处理简单：碟片式分离 损失30%以上。 • 质检 • 提纯：向抗生素学习，现在8%，上20%就好。
十、应用
(1) 蔬菜 (2) 棉花 (3) 水稻 (4) 玉米、高梁、小麦 (5) 果树、茶叶、花卉 (6) 烟草和油料害虫 (7) 森林害虫 (8) 仓贮害虫 (9) 卫生昆虫
9种鱼、鸡、鼠、猪、兔、猴、牛、鸟、鸭、鹅 人体：口服、饲喂、吸入、注射 β-外毒素：哺乳动物有害 Bt近缘Bc（产生食物毒素、引起腹泻、呕吐、恶心） Ba（人、畜炭疽病和头部生病、肺损伤和肠道感染） Bti 溶液的伴孢晶体毒素对动物有毒 肠毒素
5、剂型
(1) 液剂: 普遍、方便 水剂、乳剂、油剂 (2) 可湿性粉剂: 主产品，保存、包装、运输方便 (3) 胶囊剂: 防止阳光、高温、干燥对芽孢和晶体 的破坏，又使毒性成分逐渐释放，保
未来的路在延伸
资源：新基因 集合各种优势，构建多功能工程菌 转基因植物的扩大 发酵水平的提高 各种酶的研究和利用 代谢途径的了解 功能基因组学、蛋白质组学
Bacillus thuringiensis
苏云金芽孢（胞）杆菌
内
• 发展历史 • 形态特征及生理 生化 • 生物活性物质 • 分类及命名 • 分离
容
• • • • • 菌种选育 菌种保藏 生态学和地理分布 生产 应用
一、发展历史
一、发展历史
1901：日本石渡发现家蚕猝倒病 1911：Berliner命名 1938：法 Sporeine 第一个商品制剂 1953：Hannay 伴孢晶体 1959：β-exotoxin 1970：HD-1 1977：Bti---医学 线虫、防病、抗癌 105年，农业—医学
2、生理生化: 要求不高。 碳 源: 淀粉、糊精、麦芽糖、葡萄糖 N 源: 牛肉膏、蛋白胨、酵母粉、花生饼粉、 豆饼粉、鱼粉、玉米浆 无机盐: K2HPO4、MgSO4、CaCO3。主要元素 有磷、硫、镁、钾、钠、钙，微量元素锰、 锌、硅、铁，所需甚微，水杂质即可满足， 多了有毒。 温 度: 10-40℃，28-32℃适。 pH：微碱性条件 氧: 好氧 紫外线 抗生素及化学物: 放线菌素D、氯霉素、红霉素。 乳化剂抑制 发酵工程的前提
France: Pasteur Institute Dr. de Barjac
Vegetative cell of Bacillus thuringiensis
Spore and parasporal crystal
spore
Crystal
Crystal diversity of B. thuringiensis
几丁质酶 卵磷酯酶C
多元醇类 双效菌素
脊椎动物门 半索动物门 腕足动物门
癌细胞
节肢动物门
鳞翅目 双翅目 鞘翅目 膜翅目 螨类 等9个目
环节动物门 苔藓动物门 软体动物门 植物线虫 线虫动物门
活 性 谱
棘皮动物门
动物线虫
丝虫
纽形动物门
腹毛纲 轮虫纲
扁形动物门
海绵动物 原始后生动物
血吸虫,肺吸虫
原生动物
杀虫防病多功能工程菌
未来：
杀虫、抗病、除草、增产、固氮
植物抗虫基因的显著优点
育种期限短，目的性强 连续性保护，任何时期作用，避免反复多次 喷洒农药，不受气候影响和环境干扰 仅对取食转基因作物的那些害虫才有效，对
非靶生物没有影响
抗虫物质只存在于植物体内，在土壤和地下
水中无残留，不存在环境问题。
能保护那些难以喷洒到的植物部位如根部
东北、云南、武汉、华中、山东等。
(2) 寄主虫名：蜡螟、玉米螟、松毛虫等。
(3) 分离者：Kurstak、Thompson、Morrison等。
(4) 病症：猝倒、亚毒、杀虫等。
五、分离
昆虫 土壤：大本营，土壤习居菌。 Martin和Travers：2年（72个），24菌种， 85年。 叶片 苔藓 60000：菌株非凡重视程度 昆虫体(22%) 土壤(44%) 贮藏物（18%） 其他（16%）
1901 Lepidopteran
1977 Dipterans
1980s Colepterans, nematodes 1990s Mites, protozoa 1998 tumor cell
二、 形态特征及生理生化
1、形态特征 周鞭(无鞭)、G+、H抗原、O抗原 芽孢: 石碳酸复红、孔雀绿 芽晶: 芽孢高抗逆，菌株保存方式 晶体典型为菱形、也有圆形、方 形、椭圆形、不规则形，1个（几 个)毒素、无毒
植物疫苗--Incide
禾本科杂草狗牙根中寄生细菌(• lavibacter •yli • C x
subsp.cynodontis)
构建遗传工程杆状病毒杀虫剂
杆状病毒杀虫需时较长，限制了它的商品价值 插入对昆虫有效的毒素、激素等基因,垂直传播
以蓝细菌等构建Bt杀蚊工程菌 蚊子：疟疾、黄热病、• 革热和丝虫病等疾病 登 传播媒介，幼虫以微生物水藻和细菌为食
3、Mode of action
Midgut epithelial Cell perforation
Sepsis death
生物活性物质
蛋白质 胞内 芽胞 苏云金芽胞杆 菌活性因子 蛋白质 胞外 核苷类
杀虫晶体蛋白 免疫抑制因子A 肠毒素 辅助蛋白 自身诱导物抑制蛋白 活芽胞 死芽胞 芽胞衣 营养期杀虫蛋白 酶类 溶血素 苏云金素
大部分δ-内毒素偏爱的氨基酸密码子往往是植物 最不喜爱的密码子，尤其是在GC• 量极高的单子叶植 含 物如玉米。因此，Btδ-内毒素基因中密码子用法的改 造会导致单子叶植物和双子叶植物上异源基因表达的 增强。
问题
工程植物的安全性 基因的表达量 基因的定位表达 昆虫的抗性•
2、命名
(1) 采集地: 苏云金、肯尼亚、以色列、九州、
3、机构
美国：Ecogen公司：9000株
农业部Brownsville Lab，HD-X系列 Ohio州立大学，大量突变株。 法国：巴斯德研究所（WHO昆虫病原细菌参考 中心）3500株 英国：温室作物研究所H.Burges博士HB-X系列 日本：九州大学Aizawa和Ohha博士、北海道大学 IIZUKA• 授 教 国内：华中农大、中国林业科学院、湖北农科院、 中科院武汉病毒所、南开大学、福建农大
疟原虫
cry4A, cry4B, cry11A, cyt1A subsp. isrealensis
Dipterans
novel toxin genes:
cry5, cry6, cry7, cry8, cry1Ea
mites, nematodes, protozoa
Meloidogyue sp.
Used genes for transgenic plants
六、菌种选育
高毒力 良好的发酵和生产性能 对原材料的要求 生产稳定性 退化 现有菌株 育种技术
七、菌种保藏
2004.2.15. 100多位世界微生物专家齐聚北京，在“21 世纪微生物资源中心的使命”的国际学术研讨会 上达成共识：建立全球共享的微生物资源中心是 大势所趋。 微生物菌种保藏专门机构：59个国家 菌种保藏中心：495个，90万余株。美国的ATCC （综合最大， 12万株）。美国农业部的NRRL （最大农业微生物菌种中心，8万株）。中国农业 微生物菌种保藏管理中心(ACCC) 仅3000多株。
与发展新型杀虫剂相比，投资较少。
Bt基因的表达和修饰
原核生物基因表达调控系统具有原核生物特性， 真核生物不能识别和运用这套表达调控系统 Bt毒蛋白基因在转基因植物中的表达与其长度有关 mRNA不稳定和翻译效率低 基因修饰
置换核苷酸残基
广泛修饰：66.6％密码子第三位的A或T碱基被G或C• 取代
密码子偏爱(codon preference)
九、 生产
1、概况
1938：法国 60年代后: 多国 中国: 1976，年产量超过30000吨 液体深层发酵、半固体发酵 噬菌体 后处理工艺
培养基优化/后处理
正交设计 二次回归旋转设计 均匀设计 板框压滤 连续离心 超滤
2、产品标准化
芽孢 生物测定：初孵家蚕、菜青虫、棉铃虫、小菜蛾 蛋白晶体
3、安全性问题
中国发展史
1941： 蒲蛰龙 菜青虫 解放初 ：孟雨 法国 1955：曹骥 法国商品分离、Lab杀虫 1959 ：张履鸿(苏)刘崇乐(福州人)捷克-玉米螟 1961： 彭中允 (苏) 1965 武汉、长沙生产 1986- 攻关、火炬、技改、863、973 改革开放为生物工程发展提供了机遇！
Activity spectrum of B.t.
八、生态学和地理分布
1、地理区域
日本：发源地，广泛分布 美国：主要分布东部和东南部，类似于中国， 该地区是农业比较发达的地区。 中国：十分丰富。集中东北、华中、• 东、 华 华南，西部和西北分离数较少。 生物多样性：澳大利亚、新西兰、丹麦、越南
2、地理环境
(1) 饲养昆虫 (2) 贮藏产品 (3）土壤 (4) 植物体表面
护剂可防止紫外辐射的伤害
我国Bt现状
80家，139个产品，产量4万吨 应用5000-6000万亩次，复配48家，登记产 品74个，106个厂、213个产品 山东：24 河南：7 湖北：7 福建：6 山西：6 有机食品论证：Bt已通过，阿维菌素不行
质量标准化 • 1995：农业部标准：生测 • 1999：化工部：毒蛋白 • 2004.9：公布了原粉、WP、 悬浮剂三个国家标准
两大难题需予克服:一是有效性，二为安全性 蓝细菌(Cyanobacterium)：一种生活在水体表 面，• 营养要求不高，容易为蚊子幼虫摄食的 对 光能细菌。一些种能适应淡水和盐水环境，• 对 温度耐性亦较宽。它们容易用染色体或质粒转 化，外源基因的表达载体亦已构建。以枯草杆菌和其它芽孢菌 Nhomakorabea建的工程菌