角膜缘干细胞培养及研究进展
干细胞治疗角膜盲取得新进展
干细胞治疗角膜盲取得新进展
因角膜缘干细胞功能受损而导致的角膜盲是主要致盲疾病之一。
英国新一期《自然》杂志报告说，中美科研人员首次将皮肤干细胞诱导分化为角膜缘干细胞，并利用此类干细胞胜利修复角膜功能。
角膜上皮对维持角膜的透亮性至关重要，而角膜缘干细胞负责角膜上皮细胞的更新和组织重建。
角膜缘干细胞缺乏或功能特别会导致角膜上皮损伤无法修复，引发一系列临床转变并最终致盲，但这种干细胞的增殖、分化机制此前尚不清晰。
美国加州高校圣迭戈分校的讨论人员与中国中山高校同行一起发表报告说，他们在讨论中发觉了调控角膜缘干细胞分化的关键因子，它们能够识别信号通路，将皮肤干细胞分化为角膜细胞。
依据这一发觉，讨论人员创立了无滋养层体外增殖角膜缘干细胞的方法，将皮肤干细胞诱导分化为角膜缘干细胞。
在动物试验中，他们将皮肤干细胞重新编程后移植到兔眼角膜表面，结果胜利修复了眼表损伤，恢复了角膜的透亮性。
领导这项讨论的加州高校圣迭戈分校教授张康和中山高校教授刘奕志对记者介绍说，角膜缘干细胞移植受限于供体来源不足及异体移植排斥反应，而新技术可快速且廉价地由皮肤细胞分化，扩增出足量的角膜缘干细胞，从而解决这些问题，这将有助于角膜缘干细胞功能受损等相关疾病的治疗。
1。
角膜缘干细胞临床研究进展与发展趋势
角膜缘干细胞临床研究进展与发展趋势角膜缘干细胞是位于角膜缘基底上皮层底的一类特殊类型的上皮细胞，角膜缘干细胞研究一直是医学与生物工程的活跃领域之一。
近年来随着角膜缘干细胞的定位和分离技术、细胞标志物、调控因子的发现和应用，细胞培养技术的发展、体外扩增技术及培养角膜缘干细胞移植的材料不断改进与完善，以及精密设备和仪器的使用，有关角膜缘干细胞的研究已日益成为一个全球性的热点。
标签：角膜缘干细胞；回顾性研究；进展干细胞研究被誉为新世纪生物和医学技术领域可能取得革命性突破的项目，20世纪80年代角膜缘干细胞理论确立，在角膜缘干细胞研究中产生了一些新概念，角膜缘干细胞广泛应用于眼表疾病的治疗，角膜缘干细胞研究成为眼科界近年来发展较快的领域之一。
本文对近年来在角膜缘干细胞研究方面的新进展进行综述。
1 角膜缘干细胞治疗眼表疾病的机制角膜缘干细胞是位于角膜缘基底上皮层的特殊细胞。
角膜缘干细胞的高增殖潜力在角膜上皮的修复中具有重要作用，角膜缘干细胞为角膜上皮更新和修复之来源，角膜上皮有由周邊向中心移动的特性。
角膜上皮的更新是通过一种从角膜缘向角膜中央的向心性运动来完成的，上皮再生的源头位于角膜缘，角膜上皮的更新和创伤修复来源于角膜缘基底层的干细胞增生和分化。
角膜缘有丰富的Ⅳ型胶原纤维，该纤维仅存在于结膜和角膜缘基底膜，是构成干细胞增生分化局部微环境的重要组成部分。
2 角膜缘干细胞移植2.1 自体角膜缘干细胞移植：随着人们对角膜缘及其干细胞研究的进展，实验表明在促进眼表面愈合、减少角膜新生血管长入和假性胬肉形成方面，角膜缘移植明显优于球结膜移植，这进一步证明角膜缘移植的有效性。
该手术多是将自体健眼角膜缘部组织片移植到患眼角膜缘部受损区，自体角膜缘上皮移植不仅能为病变区角膜缘提供健康的上皮来源，使角膜恢复正常透明性，而且可为病变区结膜和巩膜组织提供正常的角膜缘干细胞，有效的阻止异常结膜源性组织增生，达到重建正常组织和牢固的角膜上皮层之目的，减少并发症，提高视功能，自体移植不存在免疫排斥，成功率高[1]。
角膜缘干细胞的进展及应用
其临床应 用， 而角 膜缘 干细胞 （ ｉ ａ ｓｅ ｃｌ Ｌｍｂｌ ｔ ｅ ， ｍ ｌ １ 角膜缘干细胞 的发现
维普资讯
３２ ４
Ｍｏ ｉ ｎＴ ｅｔ ｄＤ ａ ｒａ ｇ
现代 诊 断 与 治 疗
２ ０ Ｎｏ ３ ６ ０２ ｖ１ （ ）
・
综 述 ・
角膜 缘 干细 胞 的进 展及 应 用
易敬 林 ， 文 贤（ 钟 江Ｆ 酋人民医院眼科， 江西 南昌 ３００） ３０６
Ａｄ ａ ｃ ｓａ ｄ Ａｐ ｌ ａ ｉｎ ｏ ｍｂ ｌ ｔ ｍ ｅｌ ｖ ｎ ｅ ｎ ｐ ｉ ｔ ｆＬｉ ａ ｅ Ｃ ｌ ｃ ｏ Ｓ
ＹＩＪ ｇｌ ，Ｚ ＮＧ Ｗｅ － ｉ ｉ —ｎ ＨＯ ｎｘａ ｎ ｉ ｎ（Ｄ ｐ ｒｍｅ ｔ ｆ Ｏｐ ｔａｍｏ ｇ ，Ｔ ｅ Ｐ ｏ ｌ’ Ｈｏｐ ｔｌ ｆ Ｊａ ｇ ｉ ｅ ａ ｔ ｎ ｏ ｈｈ ｌ ｌ ｙ ｏ ｈ ｅｐｅ ｓｉ ｏ ｉｎ ｘ Ｓ ａ Ｐｒｖｎｅ Ｎａ ｃａ ｇ３ ０ ０ ， ｈｎ ） ｏ ｉ ｃ， ｎｈ ｎ ３ ０ ６ Ｃ ｉａ
膜缘基底细胞 符合 成体 干细胞 的一 般特 征。 分 化程 度 低、 如 增 殖周期 缓慢和高分裂增殖能力 。 ２ 角膜缘干细胞 的功能及 其培养液 的选择 ２ １ 角膜缘干细胞 的功 能 ． Ｓ ｈ ｒ ｒ ＿ 认 为角 膜上 皮的增 ｃｅ ｍｅ 等 ３ ］ 生方式 为 ：． Ｉ Ｃ＋短暂扩 充细胞 （ ａｓｉ ｔａ ｌｙｎ ｅ ． Ｓ Ｔｒｎｃ ｎ ｍｐｉ ｉ ｃｌ 存在 ｅ ｆ ｇ １ 角膜上皮基底 部） 一有丝 分裂后 细胞 （ ｏｔ ｔｔ ａ， Ｐ ｓ ｏｉ ｃ ｌ占角膜上 ｍｉ ｃ ｌ 皮绝大多数 的非 表 面细胞 ） 终 末分 化细 胞 （ ｒ ｎ ｌ ｉｅ— 一 Ｔｅ ａ ｙｄｆ ｒ ｍｉ ｌ ｆ ｅｔ ｔｄｃｌ 位于角膜表浅上皮细 胞 ） ｎｉ ｅ ｅ。 ａ ｌ 。 和短 暂扩充 细胞共 则是 角膜
角膜缘干细胞的体外培养和以羊膜为载体培养的角膜缘干细胞移植的实验研究
角膜缘干细胞的体外培养和以羊膜为载体培养的角膜缘干细胞移植的实验研究角膜重度混浊，隐见瞳孔；４分：角膜极度混浊，瞳孔不见。
（２）ＨＥ染色和免疫组化术黯１个月处死实验兔，取其眼球进行角膜组织病理学和免疫组化检查。
方法同去上皮羊膜上培养的角膜缘干细胞的胍染色和免疫维纯磅究。
４、统计学分析采髑ｓＰＳｓｌｌ’．５ｆｏｒｗｉｎｄｏｗｓ软件对数据进行统计学处理，实验数据以ｘ±ｓ表示，统计学方法采耀两样本ｔ检验，检验水准ａ＝Ｏ．０５，以Ｐ＜Ｏ．０５为有统计学差异。
结果一、角膜缘千细胞生长情况ｌ、原代培养缝织块剐接耪时，大部分细腿呈豳形，慈浆丰瀵透明。
接种２４小时后，组织块边缘即有细胞移杼出，形成“沙滩样”移行带。
４８一？２，ｊ、对，大部分组织块主的缨脆获移行带囱矫生长形成生长晕，２—５天时旺盛生长，组织块周围的生长晕迅速扩大，细胞排梦｜ｊ紧密，稻互连接呈膜状扩展。
７一ｌＯ天时细胞铺满培养瓶底，并汇会成单层，此时缨胞大小一致，多星卵圆形或多边形，具有角膜上皮细胞的典型形态特征（圈１）。
图１原代培养８天的角膜缘于细胞（×１００倍）绥鼹捧熨紧密，汇合戒擎瀑，大夺一致，多呈羚灏形躐多逮澎２、传代于羊膜上培养原代培养８天细胞形成擎层螽，消纯传代，将含有角膜缘于细胞的细胞憝滚接种子有羊膜的培养髓中。
１２小时瑶缅脆开始贴壁，２—３天细胞呈，』、片状生长，８一ｌＯ天细胞基本融合形成单层，跑体饱满，排列紧密，形状不十分翘则，但大多呈多兔形，细胞形态类似原代培莽的手缨胞（图２），气一液界面培养后，细胞生长速度加快，２—３周分佬为３—４屡的复层角膜上皮绷胞覆盖予整个羊膜，形成含焦膜缘于缀飚的羊膜楼片。
图２去上皮羊膜上生长１０天的角膜缘于细胞（×２００接）细胞基本融合形成单层，摊列紧密，形状不十分觏则，但大多呈多角形，细胞形态类似原代培养的干细胞３、培养细胞的形态学特征ＨＥ染色检查显示原代培养的角膜缘干细胞呈多角形，细胞核呈长圆形，核仁清晰，有２—３个核仁，位于细胞核的中央（阁３），偶觅核分裂现象。
角膜缘干细胞临床研究进展与发展趋势
针 灸 。结果 ： 治疗 组 总 有效 率 高 于 对 照组 。１ ８ ２ ９年 ， 拿 破 仑 的 军 医 ［ ４ ］王 安等 ． 十 四味连 黄烧 伤 软 膏 治疗 糖尿 病 足 溃疡 临床 分 析 Ｉ － Ｊ ］ ．
２ ０ １ ２ ， ４ ３ ． 发 现寄 生有 蛆 虫的伤 口不 易感 染 ， 且 愈合 较 其 他类 型 的 伤 口 明显 加 广 州 医 药 ，
细 胞研 究 中产生 了一 些新 概念 ， 角 膜 缘 千细 胞 广泛 应 用 于 眼表 疾 病 等 在 异体角 膜缘 移植术 前术 后使 用 了免 疫抑 制剂 同种异 体 角膜 缘 的治疗 ， 角 膜缘 干细胞 研究 成 为眼科 界近 年来发 展较 快 的领域 之 一 。 移植 获得成 功 。近年来 不 断有 新 的免 疫 抑制 药 物 出现 ， 免 疫排 斥 仍 本 文对 近 年来在 角膜 缘干 细胞研 究方 面 的新进 展进行 综 述 。
１ 角 膜 缘 千 细 胞 治 疗 眼 表 疾 病 的 机 制 角 膜 缘 干 细 胞 是 位 于 角 膜 缘 基 底 上 皮 层 的 特 殊 细 胞 。 角 膜 缘 干
角 膜 缘 干 细胞 临床 研 究进 展 与发 展 趋 势
杨 秀 荣
（ 贵 州省 玉屏 侗 族 自治县 人 民 医院 五 官科 贵 州 ５ ５ ４ Ｏ Ｏ Ｏ ）
【 摘要】 角膜缘 干 细胞是 位 于角膜缘 基底 上 皮层底 的一 类特殊 类 型的上 皮 细胞 ， 角 膜 缘 干 细 胞 研 究 一 直 是 医 学 与 生 物 工 程 的 活 跃 领
【 中图 分类 号］ Ｒ４
【 文献标 识码】 Ａ
【 文章 编号］ １ ０ ０ ４ —４ ９ ４ ９ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ —３ ５ —０ ２
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%5$67# 标记检测，发现被标记细胞有向角膜中心
移动趋向， 提示角膜上皮再生的源头位于角膜缘；
成功的体外培养出功能性类人角膜组织。 角膜的
组织工程研究至少面临着种子细胞的来源和载体 支架的选择这两个问题。角膜的组织工程化所需 要的种子细胞可以通过角膜缘干细胞、胚胎干细 胞的分离培养或者永生化角膜细胞得到，角膜缘 干细胞概念的提出及定位和干细胞移植技术的发 展等研究证实角膜缘干细胞是最佳选择。转基因 角膜干细胞移植在实验室研究阶段取得重大进 展。有学者从人的角膜中分离提纯出角膜干细胞， 用病毒转化术永生化角膜干细胞，并完成传代了
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干细胞研究被誉为新世纪生物和医学技术 领
本文就近年角膜缘干细胞的基础研究及其临床应 用做一综述。
域可能取得革命性突破的项目。按其功能干细胞 可分为全能干细胞和组织干细胞，前者能发育分 化形成完整的机体，后者是一种或几种组织的起 源细胞。按其分化阶段不同， 干细胞大致可分为胚 胎 干 细 胞 R3JI=?8$(5)>:3J)5366， S-7T 和 成 体 干 细 胞
CD CF
F6 多代的转基因角膜干细胞的培养；北京大学医
学部正在建立非病毒转化的角膜干细胞体外培养 体系。 工程化角膜构建成功的关键是选择 合 适 的 载 形成近 体作为细胞外基质 UM*VW来种植种子细胞， 似体内的正常结构。这种载体应支持细胞生长， 促 进融合， 具有良好的组织相容性， 光学中心的材料 应具有弹性和韧性， 并类似人角膜， 其物理特性必 须恒定， 前后曲率的形态保持稳定。! 胶原作为一 种结缔组织的结构蛋白，约占脊椎动物体内总蛋 广泛分布于体内的各个部位， 被广泛应 白的 !;X ， 用于工程化角膜。胶原最突出的优点是其所含有 的某些氨基酸序列使之能与细胞保持良好的亲和 力。(DD# 年 V@3RG@ 等 &((’以天然胶原为载体体外重 组角膜模型得到了具有上皮、基质和内皮三层体 外重建角膜； (DDD 年 5:PGR@3 等 &(!’离体重组人角膜 获得成功。同期研究表明， 用胶原海绵培养基质细
角膜缘干细胞移植的进展
角膜缘干细胞移植的进展眼科新进展2000年20卷第3期郭萍（综述）谢立信董晓光（审校）关键词：角膜缘干细胞；细胞移植；细胞培养角膜上皮的完整和无血管状态对维持角膜生理功能和透明性至关重要。
各种致病因素造成反复上皮缺损、糜烂、溃疡、新生血管长入，导致假性胬肉形成。
角膜上皮病变正成为角膜病主要致盲因素，其根本原因仍是角膜缘干细胞功能缺陷或数量不足。
解决问题的根本方法是采用角膜缘含干细胞组织移植术重建角膜上皮。
本文就近年来角膜缘移植方面的最新进展做一综述。
1自体角膜缘干细胞移植为了修复由于化学伤、热烧伤等引起的持续性角膜上皮缺损，Thoft［1］于1977年设计了自体结膜移植术，并取得一定疗效。
然而角膜上皮细胞和结膜上皮细胞毕竟是2种不同源性细胞群，修复后的角膜表面为结膜细胞表型，生化和生理特点不同于角膜细胞表型，细胞粘附不牢，容易脱落，因而角膜透明性也受到影响。
随着角膜缘干细胞理论的建立和发展［2-4］，结膜上皮移植术逐渐被角膜缘移植术所代替。
现代角膜缘移植术的理论是1989年Kenyon等［5］在总结Thoft结膜移植术经验的基础上提出来的，该手术是将自体健眼包括角膜缘含干细胞组织在内的球结膜片移植到患者受损的角膜缘部，术后取得良好效果。
Tsai等［6］通过实验表明：在促进眼表面愈合、减少角膜新生血管长入和假性胬肉形成方面，角膜缘移植明显优于球结膜移植，这进一步证明角膜缘移植的有效性。
自体移植不存在免疫排斥，成功率高，日益成为临床上一种成熟的手术方式。
但是对于双眼伤患者或相对健康眼实则为亚临床状态的患者，自体健眼干细胞移植将造成唯一有用眼视力不可逆的下降［7，8］，这是大多数患者难以接受以及临床医师所禁忌的。
自体角膜缘干细胞移植适应证的限制迫使人们寻取另外的方法，因此注意力转移到异体角膜缘干细胞移植上。
2同种异体角膜缘干细胞移植Tsai等［6］报道了应用同种异体角膜缘移植获得成功的病例：16只眼随访6～25mo，13只眼视力增进，10只眼上皮迅速愈合，12只眼角膜血管消失。
角膜缘干细胞的体外培养和以羊膜为载体培养的角膜缘干细胞移植的实验研究
角膜重度混浊，隐见瞳孔；４分：角膜极度混浊，瞳孔不见。
（２）ＨＥ染色和免疫组化术黯１个月处死实验兔，取其眼球进行角膜组织病理学和免疫组化检查。
方法同去上皮羊膜上培养的角膜缘干细胞的胍染色和免疫维纯磅究。
４、统计学分析采髑ｓＰＳｓｌｌ’．５ｆｏｒｗｉｎｄｏｗｓ软件对数据进行统计学处理，实验数据以ｘ±ｓ表示，统计学方法采耀两样本ｔ检验，检验水准ａ＝Ｏ．０５，以Ｐ＜Ｏ．０５为有统计学差异。
结果一、角膜缘千细胞生长情况ｌ、原代培养缝织块剐接耪时，大部分细腿呈豳形，慈浆丰瀵透明。
接种２４小时后，组织块边缘即有细胞移杼出，形成“沙滩样”移行带。
４８一？２，ｊ、对，大部分组织块主的缨脆获移行带囱矫生长形成生长晕，２—５天时旺盛生长，组织块周围的生长晕迅速扩大，细胞排梦｜ｊ紧密，稻互连接呈膜状扩展。
７一ｌＯ天时细胞铺满培养瓶底，并汇会成单层，此时缨胞大小一致，多星卵圆形或多边形，具有角膜上皮细胞的典型形态特征（圈１）。
图１原代培养８天的角膜缘于细胞（×１００倍）绥鼹捧熨紧密，汇合戒擎瀑，大夺一致，多呈羚灏形躐多逮澎２、传代于羊膜上培养原代培养８天细胞形成擎层螽，消纯传代，将含有角膜缘于细胞的细胞憝滚接种子有羊膜的培养髓中。
１２小时瑶缅脆开始贴壁，２—３天细胞呈，』、片状生长，８一ｌＯ天细胞基本融合形成单层，跑体饱满，排列紧密，形状不十分翘则，但大多呈多兔形，细胞形态类似原代培莽的手缨胞（图２），气一液界面培养后，细胞生长速度加快，２—３周分佬为３—４屡的复层角膜上皮绷胞覆盖予整个羊膜，形成含焦膜缘于缀飚的羊膜楼片。
图２去上皮羊膜上生长１０天的角膜缘于细胞（×２００接）细胞基本融合形成单层，摊列紧密，形状不十分觏则，但大多呈多角形，细胞形态类似原代培养的干细胞３、培养细胞的形态学特征ＨＥ染色检查显示原代培养的角膜缘干细胞呈多角形，细胞核呈长圆形，核仁清晰，有２—３个核仁，位于细胞核的中央（阁３），偶觅核分裂现象。
角膜缘干细胞培养后移植的研究进展
小 块 （ ～４ ｍ） 自于 自体或 同 种 异 体 （ 体或 尸 体 ） 膳 缘 １ ｒ 来 ａ 活 角 组 织 进 行 培 养 ， 获 得原 代 培 养 的 干 细 胞 ． 可 如进 行 传 代 ． 而 进 获 第 ｌ２ 培养 的细 胞 。 膜缘 干 细胞 原代 培养 主要 有 消 化 、代 角
一
趺－ 养 ２ 培 ～３周 当在 羊 膜 上 培 养 的细 胞 形 成 多层 时 再进 行移 植 。许 多 学 者 … 在进 行 角 膜 缘 千细胞 培 养时 常 把 于 细胞 ３ ３细 胞 ｆ 纤 维 细 胞 ， 同 培 养 ， 们 为角 膜土 皮 Ｔ 成 共 他 细胞 的增 殖 能 力 在 与成 纤 维 细 咆 其 同培 养 耐 明 显提 高 ． 凼这 两种 细 胞 分 茁 的 细 胞 圄 ｒ能 够 相 互 作 用 献 报 道 干 细 咆 文
植 术 后 的处 理 等 方 面 的研 究作 一简 要综 述 。 【 键词 】 角 膜绿 千 细 胞 关 培养 移 植 载 体 羊 膜
眼 部 的化 学 或 热 烧 伤 、 ｔｎ ｅｓ Ｊ ｈ ｓｎ综 舍 征 、 天 Ｓｅ ｖｎ － ｏ ｎｏ 粪
能衰竭症＿ ｒ
－
疱疮 、 手术创 伤和药物毒性等多种原 因都能导致 角膜缘干细
培养和组织 块培养两种方法 ：ｏ ｗ ｂＲ Ｊ Ｓ ｈ ａ ｌ 将角膜缘组织块在
培养器 皿上培养 ， 当细 咆培 养 到 一 定 程 度 时 进 行 消 化 ． 后 然
进行传 代 － 把消化 过 的单个 细胞 接种 在 载体 羊膜 Ｌ继续 培
养 ．～ ３ 后 进 行 移 植 。Ｔ ａ Ｒ １ 周 ｓｉ Ｊ等 ０和 Ｋ ｉ ｍ［ Ｎ 等 把 ｏｚ － ｕ 角 膜 缘组 织 块 直 接 放 在 羊 膜 进 行 培 养 ．～ ３天更 换 培 养 液 ２
角膜缘干细胞外培养体系的建立
角膜缘干细胞体外培养体系的建立摘要近年来，人们对角膜缘干细胞的科学认识使得眼表疾病的治疗取得了突破性进展。
除了常用的羊膜移植和角膜缘干细胞移植，生物组织工程学的发展提供了另外一种崭新的可供选择的治疗方式：培养的角膜缘干细胞移植。
目前角膜缘干细胞组织工程的研究正在广泛开展，合理的体外培养体系是取得良好结果的最重要的前提。
本研究旨在建立完善的人角膜缘干细胞组织工程复合体的体外培养体系，为进一步的临床应用作准备。
为此我们首先采用兔对角膜缘干细胞的培养进行了初步摸索，之后建立了人角膜缘成纤维细胞滋养层的制备方法，最后建立了完整的以羊膜为载体的人角膜缘干细胞培养体系，并采用人角膜缘成纤维细胞作为滋养层，以进一步提高生物组织工程复合体在临床应用的安全性。
第一部分兔角膜缘干细胞两种培养方法的比较在角膜缘干细胞的体外培养中，最重要的是保证在培养体系中含有一定数量的干细胞，并且所用的培养体系能较好地维持角膜缘干细胞的原始细胞特性。
组织块培养操作较为简单，是目前角膜缘干细胞培养中最常用的方法。
细胞悬液法培养较为少用，但采用细胞悬液法，干细胞混在细胞悬液中直接进入培养体系，理论上应更为合理。
在本研究中，我们建立了细胞悬液法培养体系，并与组织块法进行了比较，以期确定合理的角膜缘干细胞体外培养方法。
采用滋养层上皮细胞培养体系，分别用组织块法和细胞悬液法进行兔角膜缘干细胞培养。
在进ｌ亍细胞悬液法培养时，使用中性蛋白酶ＩＩ（ＤｉｓｐａｓｅＩＩ）和胰蛋白酶进行分步消化，以获得角膜缘上皮细胞悬液；采用流式细胞技术检测细胞悬液中间质细胞的含量；扫描电镜观察去除上皮的角膜缘基质表面，以确认能充分去除上皮细胞；采用细胞克隆形成试验检测细胞悬液形成克隆的能力。
在进行两种方法的比较时，通过免疫组织化学技术观察两种方法培养的单层角膜缘上皮细胞ＡＮｐ６３的表达，采用流式细胞技术检测培养的细胞波形蛋白和角质蛋白的表达。
对流式细胞结果，使用ＳＰＳＳｌｌ．０进行Ｍａｎｎ—ＷｈｉｔｎｅｙＵ检验。
人眼角膜缘干细胞病理学研究
人眼角膜缘干细胞病理学研究
人眼角膜缘干细胞病理学研究是一项复杂而又有关重要的研究，它主要是研究
角膜缘部分的病理学，深入探究角膜缘干细胞的功能，特点，结构和行为等。
角膜缘干细胞是眼内特殊的神经系统，其功能远不止于最基本的视觉功能，它
还可以维护眼部的正常眼蜡膜的状态，参与调节眼外环境的细胞生长及运动，以保护眼组织不受外界刺激。
角膜缘干细胞在保护眼组织和维护眼部正常环境方面发挥着重要作用。
人眼角膜缘干细胞病理学研究分析了角膜缘干细胞的结构与功能，通过统计分
析及实验，深入探讨角膜缘干细胞的膜信号通路、导联网络、蛋白合成机制等方面。
这些研究有助于解答角膜缘疾病的病因、发病机理等，进而更好地预防和治疗角膜缘性疾病，从而有助于保护眼组织，提高眼睛的健康状态。
目前，人眼角膜缘干细胞病理学研究已经取得了突破性进展，但是同时也暴露
出角膜缘干细胞疾病种类繁多，病因细节复杂，检测和治疗技术尚未成熟的问题，以及不足的脱离植入体的机制缺陷。
随着研究的持续深入，人眼角膜缘干细胞病理学研究将带来眼部组织健康的更多保护。
角膜缘干细胞体外培养的研究进展
２０ ０７正
右 江 民族 医 学 院学 报
第 ６期
室上性 心动过速 的对 比研 究［］兰 州大学学 报 ，０ ５ ３ Ｊ． ２ ０ ，１
（ ）２ ． ３ ：０
查的临床意义 ［］ 山东医学 ，０ ３４ （ ） １ ． Ｊ． ２ ０ ，３ ４ ：５ 食 ３例 ［０ 朱霞 ． 管心 房调搏 治疗 老年人 室上 性心 动过 速 ３ ２］ ［］ 浙江医学 ，０ ２２ （ ）４ ３ １ ． Ｊ． ２ ０ ，４ ７ ：１ —４ ４ 杨蔚 南 ． 连续减频 法经 食 管心房 调搏 复律 阵发 ［１ 洪俊旦 ， ２］ 性室上性心动过速的探讨［ ］中国心脏起搏与心电生理 Ｊ．
杂志 ，０ ３ １ （ ）２ ２ ２ ０ ，７ ４ ：７ ． ［２ 翟永新 ． ２］ 阵发性室上性心动过 速三种终 止发作 方法的疗 效 比较 ［］岭南心血病杂志 ，０ ４ １ （ ） ３４ Ｊ． ２ ０ ，０ ５ ：５ ． 宋书峰 ， 李春 生 ， 王明 空 ， 经 食 管调搏 与 药物转 复 阵 等． ［３ ２］ 发性室上速的疗效对 比［］实用医学杂志 ，０ ６ ２ （ ） Ｊ． ２０ ，３ ８ ：
１ （０ ：４ ． ４１）８９ 刘松 ， 辛辉 ． 射频 消融术前 行经食 管 房 调搏 检 ７ ｔ ［９ 郑方胜 ， １］
李 食管 心房 调搏 超速 抑制 终止 Ｐ Ｖ Ｓ Ｔ疗 ［４ 时建华 ， 公义 ． ２］ 效观察 ［］ 山东 医药 ，０ ４４ （８ ：９ Ｊ． ２ ０ ，４ ２ ） ３ ．
文章编号 ：１０ —５ １ （０ ７０ —０ ９ —０ ０ １ ８ ７ ２ ０ ）６ ９ ７ ３ ２ ２ 角膜缘干细胞 的分离和培养 常用 的分 离方法有 组织块 ． 直 接培养 、 消化法及两种方法同时应用 的混合法。 ２ ２ １ 组织块培养法 将上述组织块剪成 １ ｌｌ ｒｍ×ｌ ．． ｎｌ ×１ Ｔ ａ ｍｍ 大小 ， 放入含少量纯胎 牛血清培 养瓶 中密闭 ２ ， 慢加 入少量 ｈ缓 培养 基 ，７ ， ％０３ ，５ ３℃ ５ ２９ ％湿度孵化箱过 夜 ， 日补加培 养基。 次 接 种后 ３天 首 次换 液 ， 以后隔 日换 液 ， 日倒置 显 微镜 观 察。 每 此法操 作环节少 ， 细胞 损伤小 ， 减少 污染 机会 。但 培养 时 间 可 长， 细胞成分复杂 ， 常混有纤维 细胞 ， 分离和纯化较困难。 ２ ２ ２ 酶消化法 将组织块剪成 ２ ｍ ×２ ｍ 大小 ， ｎ ．． ｎ１ ｎ１ Ｈａｋ液 冲 洗 ２次 ， ．５ ／ １２ ｇ Ｌ胰 蛋 白酶 与 ０ ２ ／ Ｄ Ａ １ １混合 为 消化 ．ｇＬＥ Ｔ ： 液 ， 量 为 组 织 量 的 ３ －５ 用 ０ ０倍 ， 消化 １ － １ｍｉ 组 织 块 疏 松 ， ０ ５ ｎ到 弃去 消化液 。Ｈ ｎ ａｋ液冲洗 ２次 ， 除 Ｅ Ｔ 消 Ｄ Ａ消化作 用 ， 加入等 量 ２０ ／ ０ ｍｌＬ胎牛血 清 的细胞培养 液终 止胰 蛋 白酶消 化。吸 出 培养液后再 加入新的培养液 ２次 ， 消除残余 消化作用 。然后加 入 培养液进 行吹打使 细胞分散 ，００ ／ 离心 ５ ｎ 取重 悬细胞 １０ ｒ ， ｍｉ， 以 １０×１ Ｌ接种量移入有孔培 养板进行 培养 。此法 可在较 ０ ０／ 短时 间内获 得细胞进 行培养 和研究 ， 操作 复杂 ， 消化 时 间 但 对 和 温度的控 制有较高的要求。 ２ ２ ３ 混合法 即上述两种方法 同时使用 。组织块消 化后所 ．． 得 的细胞悬液 移人培养器进行 培养的 同时 ， 组织块也 一起移 将 人同时培养 。此 法培养 的细胞 易存 活 ， 形成 膜 片时 间短 ， 获得 的细胞 中含有 少量纤 维细胞 ， 能增加 上皮 膜 片的张 力强 度 ， 既 又能起到“ 饲细胞 ” 的作用 ， 促进 细胞生 长 ， 有利 于细胞 成膜 生 长进行移植研究 。 ． ３ 培 养 基 的 选 择 角膜缘干细胞 在 体外培 养时 具有极 高 的增殖 潜力 。由于 各人采用 的培养基不同 ， 增殖力亦有 所不 同。 目前用于 角膜缘 干细胞 的基础 培养液 主要有 Ｉ Ｍ、 ＭＥ Ｆ１（ ： ）Ｍ１９ ） ＭＥ Ｉ Ｍ／ ２ １ １ 、 ９ 、 ） Ｍ１９ Ｆ ２ １１ 、 Ｒ 一１４ ９ ／ １ （ ：） Ｐ ＭＩ ６ ０等 。目前 大多采用 Ｄ Ｍ／ １ ＭＥ Ｆ ２ （：） １ １及添加激素的上皮细胞 培养液 （ Ｈ Ｍ） 基本 培养基 ， ＳＥ 做 加 入 １ ％小 牛血清 ，．ｍｇ ｍｌ ０ ０ ３ ／ 谷氨酸胺 ，、 ｕ ｎ 胰岛素 ， ．ｐ ／ ０ Ｉ／ ｉ ｌ ０ ５． ｇ ｍｌ 氢化 可的松 ，０ ｇｍｌ 皮生 长 因子 ， ． ８ １ｎ ／ 表 ０ １ｍｍｏＡ 腺 嘌 呤 ， ｌ ０ １ ／ ．ｍｇ １霍乱毒素 等。但 何种培 养基 最适 于培养 角膜 缘 干细
干细胞在眼科临床和基础研究中的相关进展
干细胞在眼科临床和基础研究中的相关进展发表时间：2019-01-21T10:51:06.640Z 来源：《大众医学》2018年11月作者：王新乔[导读] 干细胞是一种多潜能细胞，其特性是具有定向分化与增殖的能力，如果机体内环境发生变化时，干细胞的分化潜能可以被体内不同信号途径所激活并定向分化为不同细胞和组织，因此干细胞有万能细胞之称。
摘要：干细胞是一种多潜能细胞，其特性是具有定向分化与增殖的能力，如果机体内环境发生变化时，干细胞的分化潜能可以被体内不同信号途径所激活并定向分化为不同细胞和组织，因此干细胞有万能细胞之称。
在眼科领域，干细胞为眼内功能障碍细胞的修复再生带来了希望，对角膜瘢痕、非新生血管性黄斑变性、色素性视网膜炎及斯特格氏病具有一定的治疗价值。
关键词：干细胞；眼科临床；基础研究；相关进展、1眼科研究中涉及的相关干细胞研究1.1角膜缘干细胞角膜缘干细胞的主要存在场所为角膜缘基地细胞，与角膜上皮更新有着紧密的联系。
相关学者通过对角膜缘干细胞的研究后发现，其所具备的“V ogt”栅栏结构特性主要存在与角膜基底部并与其关系密切。
干细胞不但可以增殖、分化为常丕细胞还可以形成一道屏障，用来阻滞结膜上皮细胞的移动并可以组个结膜上皮细胞进入到角膜表面，确保角膜可以有正常的功能与透明性。
当角膜出现白斑、溃疡或是化学烧伤等疾病时可以降低角膜缘干细胞的数量。
在眼科临床治疗中单眼疾病的患者可以通过角膜缘干细胞实现移植治疗；而双眼疾病的患者可以利用亲属干细胞进行角膜缘干细胞的移植。
1.2结膜干细胞结膜干细胞移植的主要位置为结膜上窟窿部位，利用组织培养可以实现结膜干细胞的扩增，当羊膜载体扩增到一定程度是时可以治疗结膜滤过泡渗漏。
1.3小梁网干细胞在猴子的Schwalbe利用小梁网干细胞可知，其可与角膜内皮细胞相连接，角膜内皮细胞密度要低于中央角膜细胞。
在进行青光眼患者治疗时可以使用小梁网干细胞移植方式，可有效的改善防水外流的情况。
眼科医学与干细胞研究的近期进展
眼科医学与干细胞研究的近期进展眼睛是人类感知外界的一个重要工具，眼疾和视力问题对人的生活和工作都会造成极大的影响。
近年来，随着干细胞研究的不断深入，越来越多的科学家开始探索干细胞技术在眼科医学中的应用。
本文将会探讨眼科医学与干细胞研究的近期进展。
一、干细胞研究与眼角膜修复眼角膜属于眼部组织中较易受损的部位，长期佩戴隐形眼镜、烧伤、化学伤、角膜感染、角膜病变及老年等因素都可能导致眼角膜损伤和失明。
传统的治疗方法主要是移植角膜组织，但是由于供体有限和免疫排斥等问题，移植手术并不是一个理想的解决方案。
针对这一问题，干细胞技术提供了新的思路。
研究表明角膜上皮细胞可以通过体外扩增进行干细胞的转化，然后再通过人工培育，制造出有效的角膜移植物。
由于自体干细胞移植不会引起免疫排斥反应，这种方法可以成功地避免传统角膜移植中的排斥问题。
目前，这种技术在临床实践中已经初步得到验证，在一定程度上解决了角膜组织缺乏的疑虑。
二、干细胞研究与视网膜治疗视网膜位于眼球内部，是帮助人们辨别颜色和光线的重要组织之一。
视网膜疾病主要包括糖尿病性视网膜病变、黄斑变性和视神经病变等，这些疾病在临床中造成的失明病例居高不下。
干细胞研究的进展为这些疾病的治疗带来了新的希望。
在糖尿病性视网膜病变治疗中，干细胞可以通过生长因子和细胞因子的作用促进视网膜细胞增殖、恢复受损的神经功能。
在黄斑变性治疗中，干细胞可以分化为不同类型的视网膜细胞，从而恢复受损的视网膜结构和功能。
在视神经病变治疗中，干细胞的秀发性分化和再生特性可以恢复损伤的视神经功能。
三、干细胞研究与视网膜修复的局限性虽然干细胞技术在视网膜治疗中取得了显著的成果，但是目前这种技术还存在一些局限性。
首先，由于干细胞的来源有限，而且分化和培育过程中的环境因素会影响干细胞的效果和活性，所以研究需要更多的时间和资源。
其次，干细胞治疗涉及到很多法律和伦理问题。
虽然干细胞研究在理论上可能解决很多疾病，但是全面实现仍需要时间。
角膜缘干细胞的研究新进展
角膜缘干细胞的研究新进展宋念艺【摘要】干细胞(stem cell,SC)是具有自我更新能力和分化潜能,能够高度分化的功能细胞。
干细胞按其生存阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。
按分化潜能的大小,又可分为3种类型,即全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞(又称专能干细胞)[1]。
角膜缘干细胞(limbal stem cells,LSCs)既是成体干细胞又是单能干细胞,它的发现是近20年来眼科学最重要的进展之一。
本文将就LSCs的有关概念、标志物、培养与鉴定以及临床应用等方面的最新研究进展做一综述。
1 LSCs的部位与形态角膜缘位于透明角膜和不透明巩膜之间的移行区,具有特殊的结构:①表面不光滑,有许多放射状突起;②没有前弹力层;③后弹力层逐渐消失;④血管和淋巴管丰富;⑤有充足的色素。
其中,位于角膜缘外2/3处的Vogt栅栏(Palisades of Vogt)被认为是干细胞栖息之处,呈乳头样突起,它使血管与上皮细胞之间紧密接触,为角膜缘基底细胞提供充足的营养和细胞因子。
现已公认LSCs位于角膜缘基底部形成的特殊“Vogt栅栏”内,是角膜上皮增殖和分化的源泉。
其证据主要有:①1971年Davanger等首先提出角膜缘的“Vogt栅栏”,并观察到此处的细胞水平向...【期刊名称】《长江大学学报：医学卷》【年(卷),期】2006(000)006【总页数】3页(P)【关键词】干细胞;角膜;进展【作者】宋念艺【作者单位】长江大学医学院;湖北荆州【正文语种】中文【中图分类】R329干细胞(stem cell，SC)是具有自我更新能力和分化潜能，能够高度分化的功能细胞。
干细胞按其生存阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。
按分化潜能的大小，又可分为3种类型，即全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞(又称专能干细胞)[1]。
角膜缘干细胞(limbal stem cells，LSCs)既是成体干细胞又是单能干细胞，它的发现是近20年来眼科学最重要的进展之一。
角膜缘干细胞体外培养的研究进展
角膜缘干细胞体外培养的研究进展周瑛;高晓唯【摘要】角膜缘干细胞是位于角膜缘Vogt栅栏区的一种成体单能干细胞,其可通过自我更新以补充角膜上皮的损伤修复,在维持正常角膜上皮完整性、角膜透明度以及维持正常视力中发挥着重要作用.各种原因造成的角膜缘干细胞缺失将导致患者角膜混浊、眼表血管化,最终失明,目前治疗相关疾病的主要方法为体外培养角膜缘干细胞后再行移植治疗,其中如何高效地体外扩增角膜缘干细胞成为治疗成功与否的关键,本文就角膜缘干细胞定位、获取方法以及体外扩增方式等进行综述.【期刊名称】《国际眼科杂志》【年(卷),期】2018(018)009【总页数】4页(P1612-1615)【关键词】角膜缘干细胞;三维细胞培养;体外扩增【作者】周瑛;高晓唯【作者单位】830000 中国新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,新疆医科大学临床医学院;830000 中国新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,中国人民解放军第四七四医院眼科;830000 中国新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,中国人民解放军第四七四医院眼科【正文语种】中文0引言角膜的正常结构和功能的维持依赖于角膜缘干细胞的不断增殖、分化和移行，角膜缘干细胞一旦受到损伤，如化学烧伤、热损伤等会引起部分或完全的角膜缘干细胞缺失，角膜上皮的自我更新能力随之下降，从而导致结膜上皮和新生血管向角膜生长、角膜慢性炎症以及纤维组织内生等病理改变[1]，临床可表现为角膜上皮的反复缺失、角膜结膜化和血管化等症状，最终导致角膜失去透明性和屈光功能。
角膜缘干细胞缺失是导致角膜混浊以及各类角膜移植手术失败的主要原因，临床主要采用角膜缘干细胞移植的方法治疗角膜缘干细胞缺失，近些年研究人员对角膜缘干细胞的体外培养、鉴定、移植技术等方面做了大量研究，其中如何高效体外扩增角膜缘干细胞成为研究的重点与焦点，本文就角膜缘干细胞定位、获取方法以及体外扩增方式等进行综述。
1角膜缘干细胞的定位及培养1.1角膜缘干细胞定位角膜缘为透明角膜与不透明巩膜的移行区，宽约1.5～2.0mm，从解剖学上看，其前界位于连接角膜前、后弹力层止端的平面，后界位于经房角内的巩膜突或虹膜根部并垂直于眼表的平面。
角膜缘干细胞在眼科的应用进展
角膜缘干细胞在眼科的应用进展宋曲园1 综述,马雅玲2 审校 (1.宁夏医学院,宁夏 银川 750004;2.宁夏医学院附属医院眼科,宁夏 银川 750004)[关键词] 角膜缘干细胞;载体;移植中图分类号:R772.2 文献标识码:A 文章编号:1004-0412(2007)04-0445-03 角膜是位于眼球前部的透明组织,起着眼球保护膜和“透光窗”的重要功能。
角膜上皮的更新及创伤愈合过程,有赖于角膜缘干细胞的增殖、移行。
当角膜缘干细胞缺失,会使角膜上皮增殖能力丧失、屏障功能下降,致使眼部出现不同程度的病理改变。
角膜缘干细胞(L i m bal stem cells,LSCs)的发现是近几十年来眼科学最重要的进展之一,其移植技术也是最先应用于眼科的成体干细胞移植技术。
本文从LSCs定位鉴定、培养载体、临床应用三方面对其在眼科的应用进展进行阐述。
1 L SC s的发现、定位及鉴定 1971年Davanger等[1]发现角膜上皮有由周边向中心移动的特性,据此提出角膜缘干细胞存在的假说。
1986年Scher mer等[2]首次通过实验证明角膜上皮干细胞位于角膜缘基底层,尤其是Vogt栅栏区乳头状结构中的角膜缘基底细胞层;且增生方式为:干细胞→短暂扩充细胞→有丝分裂后细胞→终级分化细胞。
目前关于角膜缘干细胞存在于角膜缘的实验证据有:1.1 角蛋白的测定:角膜上皮表达3对角蛋白。
其中相对分子质量为64000的碱性角蛋白(K3)在角膜上皮细胞独特表达,AE5单克隆抗体是针对K3角蛋白的特异性抗体,其在结膜上皮表达阴性,而在角膜缘上皮细胞、角膜上皮表达阳性[2]。
表明角膜缘基底细胞含有角膜上皮干细胞,提示角膜上皮再生的源头位于角膜缘。
1.2 角膜缘上皮细胞的克隆化培养:可通过细胞克隆化形成的3种细胞形态来判断细胞的增殖能力,即全克隆(代表极高的增殖力)、旁克隆(增殖力较弱)、部分克隆(全克隆至旁克隆的过渡)。
人角膜缘干细胞原代培养的研究的开题报告
人角膜缘干细胞原代培养的研究的开题报告题目：人角膜缘干细胞原代培养的研究一、研究背景和意义角膜作为眼球的透明前部，能够对入射光进行聚焦和折射，是视觉系统中不可或缺的组成部分。
角膜缺损或疾病的发生对人类视力健康造成了极大的威胁。
干细胞为治疗这类疾病提供了新的思路，其中，角膜干细胞被誉为“天然的复合物材料”，具有很大的潜力用于角膜缺损的修复。
目前，大多数角膜干细胞研究都集中在缓慢增殖的中央区干细胞上，而对于缓慢增殖的边缘区干细胞的研究相对较少。
但是，边缘区干细胞是一组生命力很强的细胞，具有很高的自我复制能力和丰富的干细胞特性，因此可能是更好的用于角膜修复的细胞来源。
因此，对角膜缘干细胞的研究具有重要的科学意义和临床应用价值。
本研究旨在建立一种可行的原代培养方法来孵化人角膜缘干细胞，并通过对其细胞形态学、增殖能力、干细胞标记物表达等特性的分析，进一步探讨人角膜缘干细胞在角膜修复中的应用潜力。
二、研究计划2.1 研究方法2.1.1 原代培养方法的建立收集人角膜缘组织，进行原代培养。
切割组织并筛选细胞，将细胞培养在含有角膜培养基、成纤维细胞生长因子、角膜上皮生长因子等细胞生长所需的培养因子的培养基中。
通过显微镜观察，待细胞密集度达到一定水平后进行子代培养。
2.1.2 细胞形态学、增殖能力的评估采用显微镜观察细胞形态学变化，如细胞形态、大小、长相等，并通过CCK8试剂测定细胞生长曲线，评估细胞增殖能力。
2.1.3 干细胞标记物的检测采用流式细胞术检测干细胞标记物表达情况，如CD34、CD133、ABCG2等。
2.2 预期结果本研究旨在建立人角膜缘干细胞的原代培养方法，并分析其细胞形态学、增殖能力、干细胞标记物表达等特性。
预期可得到较完整的角膜缘干细胞细胞株，并初步评估其用于角膜修复的应用潜力。
三、研究进度安排3.1 文献调研和实验准备（1-2周）3.2 建立角膜缘干细胞原代培养方法（3-4周）3.3 细胞形态学、增殖能力的评估（1-2周）3.4 干细胞标记物的检测（2-3周）3.5 结果分析、撰写论文（2-3周）四、研究预期成果本研究旨在建立人角膜缘干细胞的原代培养方法，并分析其在形态学、增殖能力、干细胞标记物等方面的特性。
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等功能 ：角膜 上 皮是一 种 不 断 自我更 新 的组 织 ， 每天
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研究 ２０ ０ ２年 ４月 第 ２ ０卷 第 ２期
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综
述
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角 膜 缘 干 细 胞 培 养 及 研 究 进 展
汪 玲 刘先 宁 综述 朱 寿萍 审 檀 Ｃｕ ｔ ｒ ｆ ｃ ｒ ｅ ｌｅ ｉｈ ｌ ｍ ｔ ｍ ｅｌ ｎｄ ｔ ｅ ａ ｖ ｃ ｓ ｉ ｔ ｎ ｅ ｔｇ ｔｏ ｌｕ ｅ ｏ ｏ ｎ ａ ｐ ｔ ｅｉ ｕ ｓｅ ｃ ｌ ａ ｄ ａ ｅ ｎ ｉｓ ｉ ｖ ｓ ａ ｎ ｓ ｈ ｎ ｉ ｉ
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摘要
角 膜 缘 干 细 胞是 一种 特殊 类 型 的细 胞 ， 于 角膜 缘 基 底 上 皮 层 ， 角 膜 上 皮 更 新 和 创 伤 愈 台 中 起 重 要 作 用 位 在
方 面 的研 究进 展作 一综 述 。
关键 词
分 类号
角膜 缘
Ｒ ７ ７２
干 细胞
细胞培养
羊 膜
角 膜 上 皮 具 有 保 护 眼 球 ， 定 泪膜 ， 持 角 膜 透 明 稳 维
细 胞 均 为 有 丝 分 裂 后 细 胞 （ ｏｔ ｉ ｔ ｅ ， Ｍ ， ｐ ｓ ｍ ｔ ｉ ｃｌ Ｐ Ｃ） 具 ｏｃ ｌ
对 于角 膜 缘 干 细 胞 缺乏 或 功 能 障 碍 的疾 病 ， 养角 膜 缘 干 细胞 进 行 移 植 将 是一 种 重 要 且 有 效 的 治 疗 方 法 对 角 膜 绿 干 培 细 胞 的 生 物学 特 性 和解 剖定 位 、 响 培 养 的 于 细胞 增 殖 的 调 控 因 素 、 养 的角 膜 缘 干 细 胞 移 植 、 植 所 需 载 体 的 选 择 等 影 培 移
理 改变 。 ｌ 干 细 胞 概 述
的细 胞 ，ＭＣ属 于 无 增生 能 力 的 细胞 ， 有定 型 的 细 Ｐ 具
胞 分 化 。在 组 织 成 熟 的 过 程 中 ， ＭＣ最 终 发 展 为 表 达 Ｐ 这 种 组 织 功 能 的 Ｔ Ｃ 除 了 ｓ 以 外 ， 有 的 细 胞 都 Ｄ 。 ｃ 所 有 ～ 定 的 寿命 而 注 定 要 死 亡 。 在 自我 更 新 组 织 内 ， 干 细 胞 是 细 胞 谱 系 的起 源 ， 最 终 成 为 细 胞 增 殖 和 分 化 并 的 源 泉 。 因 此 ， 们 在 研 究 疾 病 发 生 机 制 时 ， 分 析 整 我 应
ｃ ｒ ｅ ｌｅ ｉｈ ｌｕ ｓｅ ［ｃ ｌ ｆｅｓ ｎ ｉ ｏ ｔｎ ｎｄ ｐｐ ｏ ｃ ｔ ｈ ｔｅ ｔ ｎ ｆｅ ｍｅ ｓｅ ｏｎ ａ ｐｔｅｉ ｍ ｔｎ ｅｌ ｏ ｒ ａ ｍｐ ｒａ ｔａ ａ ｒａ ｈ ｏ ｔ ｅ ｒａｍｅ ｔｏ ｏ ￣ ｔｍ ｃ ｌ ｅ ｃｅ ｃ ｒ ｄ ｓｕ ｃｉｎ． ｉ ｓ ｅｌｄ ｆ ｉｎ ｙ ｏ ｙ ｆｎ ｔｏ Ｔｈｓ ｉ
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ｆ ｒｎｉｔｄ ｃ ｌ ， Ｄ 。Ｓ 和 Ｔ ｆ ｅ ｔ ｅ ｅｌ Ｔ Ｃ） Ｃ ｅ ａ ｓ ＡＣ属 于 有 增 生 能 力
更 新及创 伤愈合 的 过程 ， 赖 于 角膜 上 皮 干 细胞 的 增 有 殖、 移行 。当角膜 缘 干细胞 的供 给发生 衰竭 或不足 时 角膜 表 面的稳 定性 将 会 被 破坏 ， 出现 各种 不 相 同的 病