“黄水病”对拟穴青蟹免疫指标的影响

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广西养殖拟穴青蟹携带病原体状况的初步调查

广西养殖拟穴青蟹携带病原体状况的初步调查彭银辉;张琴;郭昱嵩;裴琨;蔡小辉;檀宁;陆志款;宋忠魁;刘旭佳;董兰芳【摘要】采用微生物分离培养技术和巢式PCR技术相结合方法对2011年采自广西北海南万和古城、钦州茅岭和钦州港、防城港企沙和公车的拟穴青蟹(Scylla paramamosain)携带寄生虫、细菌和病毒状况开展调查.寄生虫检测结果显示,仅钦州茅岭拟穴青蟹鳃组织中发现寄生虫茗荷(儿).细菌性病原体检测结果显示,共有11种病原性细菌存在于健康养殖拟穴青蟹体内,弧菌属细菌性病原出现频率最高,其中副溶血弧菌和溶藻弧菌在调查区域内均有分布,其他菌种则呈现一定的地域特异性.病毒性病原体检测结果显示,白斑综合症病毒仅在钦州茅岭拟穴青蟹检出,阳性率为4.94%；双顺反子病毒于北海古城和钦州茅岭拟穴青蟹检出阳性携带率为3.70%；呼肠孤病毒携带率则较高,北海、防城港以及钦州拟穴青蟹均有检出,阳性率达25.93%.由此可见,10-11月广西区内健康养殖拟穴青蟹携带弧菌和呼肠孤病毒的比例远远高于其他病原体,为拟穴青蟹携带的主要病原体.【期刊名称】《广东海洋大学学报》【年(卷),期】2012(000)004【总页数】6页(P78-83)【关键词】拟穴青蟹;病原体;寄生虫;细菌;病毒;广西【作者】彭银辉;张琴;郭昱嵩;裴琨;蔡小辉;檀宁;陆志款;宋忠魁;刘旭佳;董兰芳【作者单位】广西海洋研究所,广西海洋生物技术重点实验室,广西北海 536000;广西海洋研究所,广西海洋生物技术重点实验室,广西北海 536000;广东海洋大学,南海水产经济动物增养殖广东普通高校重点实验室,广东湛江524025;防城港市渔业技术推广站,广西防城港 538001;广西海洋研究所,广西海洋生物技术重点实验室,广西北海 536000;防城港市渔业技术推广站,广西防城港 538001;湛江市水产研究所,广东湛江 524000;广西海洋研究所,广西海洋生物技术重点实验室,广西北海536000;广西海洋研究所,广西海洋生物技术重点实验室,广西北海 536000;广西海洋研究所,广西海洋生物技术重点实验室,广西北海 536000【正文语种】中文【中图分类】S947.6养殖或野生水生动物本身是一个生物的集合体，包括大量的寄生虫、细菌和病毒，不仅对自身构成威胁，而且对生活在同一环境的其他生物体生存也存在潜在危害。

高发性拟穴青蟹细菌病的病原分离及鉴定

高发性拟穴青蟹细菌病的病原分离及鉴定作者：孙丽慧李倩蒋荣响林锋来源：《湖北农业科学》2019年第02期摘要：从患病拟穴青蟹（Scylla paramamosain）肝胰腺中分离到2种优势菌株，对2种优势菌株进行了鉴定和特性分析。

利用形态学观察、生理生化特性分析和16S rDNA序列测定法对细菌类别进行判定，并采用药敏试验对细菌的耐药性进行分析。

结果表明，这2种细菌分别为弧菌（Vibrio sp.）和希瓦氏菌（Shewanella），利用15種抗生素对2种细菌进行药敏试验分析，发现2种细菌对恩诺沙星、氟苯尼考、强力霉素高度敏感，对其他几种抗生素则有一定的耐受性。

研究进一步证实了海水致病性弧菌是拟穴青蟹细菌性疾病高发的主要原因，也表明希瓦氏菌可能是一种潜在病原菌，与弧菌协同作用，对拟穴青蟹规模化养殖造成危害，同时也为拟穴青蟹养殖过程中细菌性病害的确定和防治提供参考依据。

关键词：拟穴青蟹（Scylla paramamosain）;弧菌（Vibrio sp.）;希瓦氏菌（Shewanella）;16S rDNA;药敏试验中图分类号：S943; ; ; ; ;文献标识码：A文章编号：0439-8114（2019）02-0096-04DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2019.02.021; ; ; ; ; ;开放科学（资源服务）标识码（OSID）：拟穴青蟹（Scylla paramamosain）俗称青蟹，具有生长快、肉质鲜美、营养价值高等优点，是中国东南沿海重要的经济蟹类之一[1]。

近年来，青蟹养殖规模的逐步扩大，但由于养殖配合饲料相对滞后，冰鲜饵料极易导致水质恶化，从而导致青蟹病害日趋严重[2，3]。

目前，青蟹常见病害主要有病毒病、细菌病和寄生虫病[4]。

其中，已报道的细菌病主要致病菌有非液化摩拉氏菌[5]、辛辛那提弧菌[6]、溶藻弧菌[6]、副溶血性弧菌[6]、嗜水气单胞菌[7]、温和气单胞菌等[8]。

拟穴青蟹凝集素的活性及其部分性质_梁青龙

第３０卷第２期２０１２年３月泉州师范学院学报Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｑｕａｎｚｈｏｕ　Ｎｏｒｍａｌ　ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＶｏｌ．３０Ｎｏ．２Ｍａｒ．２０１２拟穴青蟹凝集素的活性及其部分性质梁青龙１，苏鑫龙２，戴聪杰２＊（１．泉州医学高等专科学校，福建泉州　３６２０００；２．泉州师范学院化学与生命科学学院，福建泉州　３６２０００）摘　要：采用生物化学的方法研究了拟穴青蟹凝集素的部分性质，结果表明：拟穴青蟹血清的凝集素可凝集兔子、鸽子、鸭子、鸡的动物血红细胞，并且对不同的红细胞的凝集效价有所不同，该凝集素的活性受Ｄ－半乳糖、麦芽糖、鼠李糖等３种糖所抑制．在温度为３０～４０℃，ｐＨ为７．０，盐度为２４时，拟穴青蟹血清凝集素活性最高．拟穴青蟹血清样品的凝集素受Ｃａ２＋的依赖性较小．关键词：拟穴青蟹；凝集素；性质①中图分类号：Ｑ９５９．２３３文献标识码：Ａ文章编号：１００９－８２２４（２０１２）０２－００７２－０４　拟穴青蟹［Ｓｃｙｌｌａ　ｐａｒａｍａｍｏｓａｉｎ（Ｅｓｔａｍｐａｄｏｒ，１９４９）］，属节肢动物门、甲壳纲、十足目、短尾亚目、梭子蟹科、青蟹属，广布于我国东南沿海，属于梭子蟹科（Ｐｏｒｔｕｎｉｄａｅ）暖水广盐性海洋蟹类，具有生长快、个体巨大、适应性强等特点，最大个体体重可达２ｋｇ．其肉味鲜美，营养价值高，是传统的名贵海产品，也是许多国家人工养殖的主要海洋蟹类品种［１－３］．凝集素是一种能与糖蛋白特异性结合的非免疫性蛋白或糖蛋白［４－５］，具有多种功能及化学性质．凝集素是许多无脊椎动物免疫的主要机能，其作为一种非特异性识别因子，识别自身和异己成分，包括外来入侵的病原菌，并可通过凝集、包围、调理、促进吞噬等方式将其排出体外［６－７］．凝集素还具有止血、凝固、物质运输及创伤修复等一系列作用［８］．目前一般认为，凝集素在甲壳动物免疫反应中主要充当识别因子，用于识别侵入机体内的外源异物，并发挥凝集作用．另外，凝集素还具有高度的调理作用，可在吞噬细胞和异物颗粒间形成分子连接，促进吞噬细胞对异物的吞噬作用，而达到免疫防御的目的［９］．本文测定了拟穴青蟹血清凝集素对某些动物红血球的凝集活性，并对其部分性质进行分析，以期为青蟹等甲壳动物的免疫防御机制的研究提供科学依据和基础材料．１　材料与方法１．１　材料１．１．１　实验试剂药品　ＴＢＳ、ＴＢＳ－Ｃａ２＋、抗凝剂、多种糖类、多种金属离子、０．０１５ｍｏｌ·Ｌ－１（ｐＨ　３．０～５．０）柠檬酸－Ｎａ２ＨＰＯ４缓冲液、０．０１５ｍｏｌ·Ｌ－１（ｐＨ　６．０～８．０）磷酸盐缓冲液、０．０１５ｍｏｌ·Ｌ－１（ｐＨ　９．０～１０．０）Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液、０．０１５ｍｏｌ·Ｌ－１（ｐＨ　１１．０～１２．０）Ｎａ２ＣＯ３－ＮａＨＣＯ３缓冲液、生理盐水等．１．１．２　实验材料　拟穴青蟹采自泉州新门菜市场，家鸡、番鸭、家鸽、家兔等动物的全血采自泉州市丰泽区东海镇后埔菜市场．１．２　方法１．２．１　实验材料的处理　对拟穴青蟹进行剪肢放血，将血淋巴液经４　５００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，弃沉淀物，即为含有凝集素的血清样品，将该血清样品放置于４℃冰箱中备用．将采集到的鸡、番鸭、鸽子以及兔子全血加入适量抗凝剂，放置于４℃冰箱中备用．①收稿日期：２０１１－０７－２０通信作者：戴聪杰（１９６６—），男，教授，博士，从事生理生化、浮游动物生理生态研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｏｎｇｊｉｅｄａｉ５０１＠１６３．ｃｏｍ．基金项目：福建省高校服务海西建设重点项目（Ａ１０１）；福建省自然科学基金资助项目（２００８Ｊ０４００２）；泉州市科技局技术研究与开发项目（２００８Ｎ４１）；福建省教育厅资助省属高校科研专项（Ｊｋ２０１００５０）１．２．２　凝血试验　（１）红细胞制备．按抗凝剂与各类血液的体积比１∶９的比例制成抗凝血，２　０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ除去血浆，再加１０倍体积的ｐＨ　７．４的ＴＢＳ溶液充分洗涤，１　０００ｒ／ｍｉｎ离心３ｍｉｎ弃上清（重复４次），最后用ＴＢＳ－Ｃａ２＋按红细胞积压体积配成体积分数为２％ＴＢＳ－Ｃａ２＋红细胞悬液［１０］．（２）红细胞凝集实验．首先在９６孔Ｖ型血凝板中每孔中加入２５μＬ　ＴＢＳ－Ｃａ２＋溶液，并把拟穴青蟹的血清样品加２５μＬ在各行首孔中，将其混匀后，再从第１孔中吸取２５μＬ混合液加入第２孔，以此类推作倍比稀释，最后一孔吸弃２５μＬ．然后在每孔中加入２５μＬ　２％ＴＢＳ－Ｃａ２＋红细胞悬液，混匀，并做空白对照，室温放置１～２ｈ后，肉眼观察各组凝集情况．无凝集时，红细胞沉于Ｖ型板孔底部，呈一光滑的小圆点；凝集时，红细胞相互聚集，形成一片絮状物，不下沉．红细胞凝集活力以产生凝集现象时的最大稀释倍数表示，此时，凝集素粗品的浓度为最低凝集浓度［１１］．１．２．３　糖抑制试验　糖抑制试验糖抑制试验在９６孔Ｖ型微量血凝滴定板中进行．试验用的５种糖为Ｄ－半乳糖（Ｄ－Ｇａｌａｃｔｏｓｅ）、Ｄ－甘露糖（Ｄ－Ｍａｎｎｏｓｅ）、Ｄ－果糖（Ｄ－Ｆｒｕｃｔｏｓｅ）、麦芽糖（Ｍａｌｔｏｓｅ）、鼠李糖（Ｒｈａｍｎｏｓｅ），其浓度均为２００ｍｍｏｌ·Ｌ－１．先往Ｖ型板每孔中加入２５μＬ的拟穴青蟹血清样品，再分别加入２５μＬ糖溶液，再加入ＴＢＳ－Ｃａ２＋鸽红细胞，在３７℃下保温１～２ｈ后，观察凝集情况［１２］．１．２．４　温度对凝集素活性的影响　先在９６孔Ｖ型血凝板上每孔加２５μＬ　ＴＢＳ－Ｃａ２＋缓冲液；然后把拟穴青蟹的血清样品分装入１．５ｍＬ离心管中，分别在４、２０、３０、４０、５０、６０、８０、１００℃水浴锅中放置２０ｍｉｎ，按顺序放入，按顺序取出，分别等量加入各行首孔中，并做倍比稀释，最后一孔吸弃２５μＬ，再加入２５μＬ等量２％兔红细胞悬液，混匀．室温下放置１～２ｈ后按顺序进行观察．以室温凝集素对兔红细胞的凝集效果做对照［１３］．１．２．５　ｐＨ对凝集素活性的影响　在测定ｐＨ对拟穴青蟹凝集素的凝集活性的影响实验时，使用梯度ｐＨ缓冲液：ｐＨ　７．０～９．０Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液；ｐＨ　６．０～８．０Ｎａ２ＨＰＯ４－ＮａＨ２ＰＯ４；ｐＨ　３．０～５．０Ｎａ２ＨＰＯ４－柠檬酸缓冲液；ｐＨ　９．９～１０．８３Ｎａ２ＣＯ３－ＮａＨＣＯ３缓冲液．在９６孔Ｖ型血凝板上每孔加２５μＬ　ＴＢＳ缓冲液．在各行首孔中分别加入等量拟穴青蟹血清样品溶液，并进行倍比稀释，最后一孔吸弃２５μＬ；再每孔加入等体积的２％的兔红细胞悬液，充分振匀．室温下放置１～２ｈ后观察．血凝活力以凝集素最大稀释倍数（２ｎ）表示，以ＴＢＳ溶液做对照［１４］．１．２．６　Ｃａ２＋对凝集素活性的影响　先在９６孔Ｖ型血凝板上每孔加２５μＬ　ＴＢＳ缓冲液，再在各行首孔中分别再加入２５μＬ拟穴青蟹血清样品，并做倍比稀释，最后一孔吸弃２５μＬ；并在每孔中分别加入０．０１、０．０２、０．０５ｍｏｌ·Ｌ－１的ＥＤＴＡ，用２％兔红细胞测定其凝集活力，对于受ＥＤＴＡ抑制的血清样品重新加入１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＴＢＳ－Ｃａ２＋溶液后，观察是否恢复凝集活性．血凝活力以凝集素最大稀释倍数（２ｎ）表示，以ＴＢＳ－Ｃａ２＋溶液做对照［１５］．１．２．７　盐度对凝集素活性的影响　在９６孔Ｖ型血凝板上每行分别加２５μＬ盐度为６‰、１２‰、１８‰、２４‰、３６‰、４８‰的不同ＮａＣｌ浓度的盐水，并在每行首孔中加入２５μＬ血清样品，进行倍比稀释，最后一孔吸弃２５μＬ；再加入等量的２％鸽子红细胞悬液，室温下放置１～２ｈ后，检测对鸽子红细胞的凝集活性［１６］．２　结果与分析２．１　血红细胞的凝集作用拟穴青蟹的血清样品对兔子红细胞、鸽子血红细胞、鸡血红细胞、鸭血红细胞的凝集效果见表１．结果显示，拟穴青蟹的血清样品对４种红细胞都有凝集作用．其中：对兔红细胞的凝集效价最高，为２９；对鸭红细胞的凝集效价最低，为２３．表１　拟穴青蟹血清样品对几种红细胞的凝集效价血红细胞类型兔子鸽子鸡鸭凝集效果２９　２６　２４　２３２．２　糖抑制作用表２是５种糖对拟穴青蟹血清样品凝集素凝集鸽红细胞的影响．结果显示，Ｄ－半乳糖、麦芽糖、鼠李糖３种糖对拟穴青蟹血清样品对鸽红细胞凝集有抑制作用；而Ｄ－甘露糖、果糖则无抑制作用．其他糖类对其是否有抑制作用依然有待研究．３７　第２期梁青龙，等：拟穴青蟹凝集素的活性及其部分性质　表２　拟穴青蟹的血清样品凝集素活性的糖抑制糖类Ｄ－半乳糖Ｄ－甘露糖麦芽糖鼠李糖果糖２００ｍｍｏｌ·Ｌ－１糖的抑制结果抑制不抑制抑制抑制不抑制２．３　热稳定性表３为不同温度下，拟穴青蟹血清样品凝集素凝集兔血红细胞的凝集效价．结果显示，当温度为４℃，凝集效价对比正常温度时有点低，３０～４０℃跟正常温度时的凝集效价一样，超过４０℃后，凝集效价逐渐下降，直至７０℃后，不产生凝集作用．表４　ｐＨ对拟穴青蟹血清样品的凝集作用的影响ｐＨ值４．０　５．０　６．０　７．０　８．０　９．０　１０．０凝集效价——２６　２９　２７　２６　２５表３　拟穴青蟹血清样品不同温度下的凝集效价温度／℃４　３０　４０　５０　６０　７０　８０凝集效价２７　２９　２９　２６　２３——２．４　ｐＨ对拟穴青蟹血清样品的凝集作用的影响表４为不同ｐＨ对拟穴青蟹血清样品的凝集作用的影响．结果显示，当ｐＨ为４或者５时，拟穴青蟹血清样品及兔红细胞皆为糊状，已经无法显示其凝集的效价了；当ｐＨ为７时，此时的凝集效价最高，而随着ｐＨ的下降或者升高，凝集效价都呈现下降趋势，至ｐＨ为１０时依然有凝集作用．２．５　Ｃａ２＋和ＥＤＴＡ对拟穴青蟹血清样品凝集兔红细胞的影响表５为Ｃａ２＋和ＥＤＴＡ对拟穴青蟹血清样品凝集兔红细胞的影响．结果显示，拟穴青蟹凝集素在ＥＤＴＡ处理之后仍具有活性，说明其对外源Ｃａ２＋的依赖性较小．表６　盐度对凝集活性的影响盐度／‰６　１２　１８　２４　３６　４８凝集效价２４　２５　２６　２９　２５　２４表５　Ｃａ２＋和ＥＤＴＡ对拟穴青蟹血清样品凝集兔红细胞的影响ＣＥＤＴＡ／ｍｍｏｌ·Ｌ－１对照组１０　２０　５０凝集效价２９　２４　２３　２２２．６　盐度对凝集活性的影响表６为不同盐度时，拟穴青蟹血清样品对鸽红细胞的凝集作用的影响．结果显示，在盐度为６‰～４８‰时，拟穴青蟹血清对鸽红细胞都具有凝集活性，并呈现先高后低的趋势；当盐度在２４‰时，凝集活性最高．３　讨论凝集素是一类具有独特生理活性的蛋白质或糖蛋白，在拟穴青蟹的免疫过程中发挥着重要的作用．从表１可以看出拟穴青蟹血清样品对不同的红细胞凝集效果呈现不同的效价，这与文［１７－１８］的结果相似，与凝集素的作用机理相关，可能是由于各种红细胞的表面的糖蛋白各异而导致结合效果的差异．锯缘青蟹的血清凝集素可被Ｄ－半乳糖抑制［１９］，表２显示出拟穴青蟹也同样被Ｄ－半乳糖抑制，还同时被麦芽糖、鼠李糖所抑制．能对血清中凝集素产生抑制的糖类一般被认为是其结构互补于凝集素的结合部位，从而可确定出凝集素结合部位对糖的特异性．另一方面，凝集素对动物红细胞的凝集可看作是这些细胞表面的多糖或糖蛋白的识别性结合，这在无脊椎动物的免疫中起重要作用［２０］．糖抑制试验的结果可为分离和纯化拟穴青蟹血清凝集素时亲和层析柱的选择提供基础资料和科学依据［１９］．凝集素的热稳定性主要由凝集素的活性位点的性质所决定的，若活性位点为肽链或蛋白质，则由于肽链或蛋白质受热后其空间构象会发生变化使其失去活性，因而这类凝集素的热稳定性较差；但如果活性位点为糖链，糖链在受热时依然能较好的保持其活性，所以这类凝集素的热稳定性较好．由表３可知，拟穴青蟹血清样品凝集素的耐热性较好，由此可以推断其凝集素的活性位点可能为糖链．曾缓缓等人经研究得出，拟穴青蟹的适宜生存的ｐＨ为７．５～９．０，过高或者过低都会导致其免疫力下降［２１］．本实验拟穴青蟹血清样品凝集素凝集作用效果较好的ｐＨ范围为７．０～９．０，与其所得出的结论相一致，进一步证实了拟穴青蟹生存的最适宜ｐＨ为中性偏碱，即为７．０～９．０．本实验中，拟穴青蟹血清样品的凝集素在６‰～４８‰盐度范围内依然有活性，与其为海产养殖品，并具有广盐性有关［１－３］．陈建明等人研究得出拟穴青蟹大眼幼体适宜盐度为２０．５‰～２６．５‰，幼蟹适宜盐度为１０．５‰～２６．５‰［２２］，本实验的得出的拟穴青蟹血清样品的凝集素凝集效果最佳盐度也在这区间，与其研究相符．不过其所能承受的最高盐度依然有待研究．４７　泉州师范学院学报２０１２年３月　参考文献：［１］　林琪，李少菁，黎中宝，等．中国东南沿海青蟹属（Ｓｃｙｌｌａ）的种类组成［Ｊ］．水产学报，２００７，３１（２）：２１１－２１９．［２］　ＫＥＥＮＡＮ　Ｃ　Ｐ，ＤＡＶＩＥ　Ｐ　Ｆ　Ｊ，ＭＡＮＮ　Ｄ　Ｌ　Ａ．ｒｅｖｉｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｇｅｎｕｓ　Ｓｃｙｌｌａ　Ｄｅ　Ｈａａｎ，１８３３（Ｃｒｕｓｔａｃｅａ：Ｄｅｃａｐｏｄａ：Ｂｒａｅｈｙｕｒａ：Ｐｏｒｔｕｎｉｄａｅ）［Ｊ］．Ｔｈｅ　Ｒａｆｆｌｅｓ　Ｂｕｌｌ　Ｚｏｏｌ，１９９８（４６）：２１７－２４５．［３］　马凌波，张凤英，乔振国，等．中国东南沿海青蟹线粒体ＣＯＩ基因部分序列分析［Ｊ］．水产学报，２００６，３０（４）：４６３－４６８．［４］　孙册，朱政，莫汉庆．凝集素［Ｍ］．北京：科学出版社，１９８６．［５］　李桂生，纪伟尚，徐怀恕，等．对虾体内酚氧化酶活性规律的初步研究［Ｃ］／／对虾苗期细菌病害的诊断与控制：欧盟欧洲委员会资助项目研究论文集．北京：海洋出版社，１９９９：１２２－１２７．［６］　ＨＡＬＬ　Ｊ　Ｌ，ＲＯＡＬＡＮＤＳ　Ｄ　Ｔ．Ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ　ｏｆ　ｌｏｂｓｔｅｒ　ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎｓⅠ．Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ－ｉｓｔｒｙ，１９７４，１３（４）：８２１－８２７．［７］　ＨＡＬＬ　Ｊ　Ｌ，ＲＯＡＬＡＮＤＳ　Ｄ　Ｔ．Ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ　ｏｆ　ｌｏｂｓｔｅｒ　ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎｓⅡ．Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ　ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓ－ｔｒｙ，１９７４，１３（４）：８２８－８３２．［８］　ＬＡＣＫＩＥ　Ａ　Ｍ．Ｉｎｖｅｒｔｅｂｒａｔｅ　ｉｍｍｕｎｉｔｙ［Ｊ］．Ｐａｒａｓｉｏｌｏｇｙ，１９８０，８０：３９３－４１２．［９］　钱沛锋．甲壳动物免疫机制初探［Ｊ］．渔民致富指南，２００８（２１）：４６－４７．［１０］　ＷＯＮＧＡ　ＪＡＣＫ　Ｈ，ＥＤＷＩＮ　ＣＨＡＮ　Ｈ　Ｙ，ＮＧ　Ｔ　Ｂ．Ａ．Ｍａｎｎｏｓｅ／ｇｌｕｃｏｓｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｌｅｃｔｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｅｖｅｒｇｒｅｅｎ　ｃｈｉｎｋａｐｉｎ（Ｃａｓｔａｎｏｐ－ｓｉｓ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａｅｔ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ，２００８：１０１７－１０２２．［１１］　唐海淑，宁雪飞．骆驼蓬种子凝集素粗品活性的初步研究［Ｊ］．西北植物学报，２０１０，３０（４）：６４５－６５１．［１２］　戴聪杰，陈寅山．脊条褶虾蛄血清及肌肉提取液凝集活性的比较［Ｊ］．台湾海峡，２００３，２２（１）：３２－３７．［１３］　ＷＡＮＧ　Ｙ　Ｌ，ＣＨＥＮ　Ｙ　Ｐ，ＨＵＡＮＧ　Ｗ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｅｓｔｓ　ｏｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ　ｃｈａｒａｎｔｉａ　Ｌ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，２００８，３４（２）：６７－７１．［１４］　王庆忠，张鹭，吴耘红，等．１４种蔬菜中凝集素的提取和生物活性研究［Ｊ］．中国热带医学，２００８，８（５）：７４９－７５２．［１５］　王庆忠，张鹭，吴耘红，等．菜豆凝集素的提取和部分性质研究［Ｊ］．中国临床医药研究杂志，２００８（４）：１－４．［１６］　柯佳颖．泥蚶凝集素的分离纯化、理化性质及血清的免疫因子研究［Ｄ］．福州：福建师范大学，２００６．［１７］　刘雪兰，余这一，李槿年．中华绒毛蟹血清凝集素的生物学特性［Ｊ］．中国水产科学，２００６，１３（３）：３６５－２７０．［１８］　周春花，黎敏，吴小平，等．军山湖中华绒螯蟹血清凝集素特性分析［Ｊ］．淡水渔业，２００８，３８（５）：７－９．［１９］　戴聪杰．甲壳动物血清中凝集素的凝集作用及影响因素［Ｊ］．泉州师范学院学报，２００２，２０（６）：７６－８１．［２０］　曹广力，朱越雄，薛仁宇，等．中华绒螯蟹血清中外源凝集素的凝集作用影响因素［Ｊ］．水产养殖，１９９９（５）：１６－１８．［２１］　曾缓缓，艾春香，刘建国，等．ｐＨ胁迫对拟穴青蟹体内几种免疫因子的影响［Ｊ］．厦门大学学报：自然科学版，２００８，４７（３）：４１３－４１８．［２２］　陈建明，沈斌乾，潘茜，等．拟穴青蟹大眼幼体和幼蟹对盐度的适应性研究［Ｊ］．中国水产，２０１０（６）：６８－６９．Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　Ｌｅｃｔｉｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　Ｃｒａｂ　Ｓｃｙｌｌａ　ＰａｒａｍａｍｏｓａｉｎＬＩＡＮＧ　Ｑｉａｎｇ－ｌｏｎｇ１，ＳＵ　Ｘｉｎ－ｌｏｎｇ２，ＤＡＩ　Ｃｏｎｇ－ｊｉｅ２（１．Ｑｕａｎｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｆｕｊｉａｎ　３６２０００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｑｕａｎｚｈｏｕ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｊｉａｎ　３６２０００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｎ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　ｌｅｃｔｉｎ　ｉｎｓｅｒｕｍ　ｏｆ　Ｓｃｙｌｌａ　ｐａｒａｍａｍｏｓａｉｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｌｅｃｔｉｎ　ｉｎ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　Ｓｃｙｌｌａ　ｐａｒａｍａｍｏｓａｉｎｃａｎａｇｇｌｕｔｉｎａｔｅ　ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ　ｏｆ　ｒａｂｂｉｔ，ｄｏｖｅ，ｄｕｃｋ，ｃｈｉｃｋｅｎ，ａｎｄ　ｈａｄ　ａ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｔｏ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ．Ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ　ｃａｎ　ｂｅ　ｓｌｉｇｈｔｌｙ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｂｙ　Ｄ－Ｇａｌａｃｔｏｓｅ，Ｍａｌｔｏｓｅ，Ｒｈａｍｎｏｓｅ．Ｔｈｅ　ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ　ｗｏｕｌｄ　ｂｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｆｒｏｍ　３０ｔｏ　４０℃，ｐＨ　ｉｓ　７．０，ｓａｌｉｎｉｔｙｉｓ　２４．Ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ　ｉｓ　ｌｅｓｓ　ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｅｄ　ｏｎ　Ｃａ２＋．Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｃｙｌｌａ　ｐａｒａｍａｍｏｓａｉｎ；ｌｅｃｔｉｎ；ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ５７　第２期梁青龙，等：拟穴青蟹凝集素的活性及其部分性质　。

pH胁迫对拟穴青蟹体内几种免疫因子的影响

１．Ｏ５和对照组（调节ｐ的海水，Ｈ６７士０３．未Ｈｐ．６．）
实验进行到第１３５７９天时取样．次从各组取样、、、、每３只．养殖用海水一律先经干净的海砂二次过滤沉淀后使用，１ｍｏ／１１ｍｏ／ＯＨ的试剂调节用ｌＬＨＣ，ｌＬＮａ设定的ｐ在试验阶段每天上午和下午测定ｐ值并Ｈ，Ｈ
进行调节．１２２实验条件．．
我们主要研究ｐ胁迫对拟穴青蟹ＰＳＨＯ，ＯＤ，【Ｌ等免疫指标的影响，免疫学角度探讨ｐ对，，从Ｈ其生理生化影响的机制，以期为蟹类环境免疫学研究
积累资料，同时为拟穴青蟹健康养殖的病害防治和水质调节提供理论依据．
对Ｕ活性影响不显著（＞Ｏ０）对肌肉和肝胰腺总ＳＯ活性影响显著（＜００）相同ｐ下肝胰腺总ＳＤ活性差ｐ．５，Ｄｐ．５；ＨＯ异显著（＜００）肌肉和血清总Ｓｐ．５，ＯＤ活性差异不显著（＞００）综上所述，Ｈ胁追对拟穴青蟹的免疫反应影响显ｐ．５．ｐ著，ｐ．～９０范围内，免疫力强．在Ｈ７５．其
以及血清、肉和肝胰腺超氧化物歧化酶（ｕｅｏｉｅｉｔｓ，ＯＤ，菌酶（ｓｚｍｅＵＬ活性和抗菌力（ｎｉｃｅｉ肌ｓｐｒｘｄｓａｅＳ）溶ｄｍｕ１ｏｙ，）ｙａｔａｔｒｂ —

锯缘青蟹黄水病病原

•病原概述•病原的发现与鉴定•病原的致病机理目录•病原的流行与防控•病原的分子生物学研究•研究展望01病原定义病原分类病原特征病毒在锯缘青蟹体内主要存在于鳃、肝、肌肉等组织中。

01病原的发现病原的分离与鉴定病原的培养特性病原体可在海水、淡水、土壤等多种环境中存活和繁殖。

01基因编码蛋白基因缺失或突变致病相关基因毒素蛋白粘附蛋白致病相关蛋白致病相关代谢产物代谢产物积累病原菌在生长过程中产生的某些代谢产物可能在一定条件下大量积累，这些代谢产物可能对宿主细胞有毒害作用。

代谢产物调节某些代谢产物可能参与了病原菌与宿主之间的相互作用，通过调节宿主免疫反应或代谢过程来影响致病效果。

01流行特点防控策略养殖环境管理合理控制养殖密度，避免过度拥挤。

养殖密度控制饲料管理疾病监测与治疗01020403定期进行疾病监测，发现病蟹及时隔离治疗。

保持养殖水域清洁，定期更换水，减少污染源。

选用优质饲料，避免污染源的引入。

防控效果评估环境改善发病率降低经济效益提升01对病原菌的基因组进行测序，获得基因组序列，为后续研究提供基础数据。

基因组测序对测序得到的基因组进行注释，预测基因的功能和表达。

基因组注释分析病原菌基因组的变异情况，研究病原菌的进化和适应机制。

基因组变异分析基因组学研究蛋白质组学研究蛋白质相互作用研究蛋白质修饰研究蛋白质表达分析比较基因组学研究病原菌比较基因组学分析比较不同病原菌的基因组，寻找与疾病发生相关的共有基因和特性基因。

病原菌进化和系统发育分析通过比较基因组学方法，分析病原菌的进化和系统发育关系，揭示其适应和演化过程。

比较基因组学与流行病学通过比较基因组学方法，研究病原菌的流行病学和传播途径，为疾病防控提供参考。

01030201研究现状与不足锯缘青蟹黄水病是一种严重的病害，目前对于该病的病原和发病机制尚不完全清楚，缺乏有效的防治措施。

现有的研究主要集中在病原的分离和鉴定上，对于病原的生态学、遗传学和流行病学等方面的研究还不够深入。

青蟹的病害及防治―黄斑病

如阿昔洛韦、利巴韦林等，适用于青蟹黄斑病病原菌为病毒感染的情况。
注意事项与副作用
合理用药
根据青蟹的体重、病情及药物特性选择合适的药物和剂量，避免过量使用或滥用。
停药期
在药物治疗期间，应定期检查青蟹的状态，如病情已得到控制，应及时停药，避免药物蓄积对青蟹造成不良影响。
副作用与注意事项
部分药物可能对青蟹的肝、肾功能有一定影响，因此在用药期间应密切关注青蟹的生命体征及食欲、活动等情况，如有异常应及时停药并寻求专业帮助。
总结词
一养殖户在发现青蟹出现黄斑病后，采用了口服抗菌药物和外涂消毒剂的方法进行治疗，最终成功治愈了青蟹黄斑病。
详细描述
该养殖户在发现青蟹出现黄斑病后，立即将病蟹进行隔离，并口服了抗菌药物，以防止疾病在体内扩散。同时，他们还使用了外涂消毒剂对病蟹进行消毒处理，以减轻病情。经过一段时间的治疗后，青蟹病情得到了有效控制，黄斑病症状逐渐消失。为确保治疗效果的持久性，他们还加强了日常管理，定期检查水质和饲料质量，保持养殖环境的卫生和安全。
05
青蟹黄斑病的综合防治措施
加强病害监测与预警
监测水质
定期检测水质中的氨氮、亚硝酸盐、溶解氧等指标，确保水质的稳定。
观察蟹体
定期检查青蟹的体表、附肢和鳃部，观察是否有黄斑病的症状。
预警系统
建立黄斑病的预警系统，通过数据分析及时发现异常情况，采取预防措施。
提高养殖管理水平
1 2
合理放养
控制青蟹的放养密度，避免过度养殖导致病害的发生。
苗种选择与检疫
苗种选择
选择健康无病害的苗种，避免从疫区引进苗种。
苗种检疫
对新引进的苗种进行隔离观察，确认无病害后方可混养。

锯缘青蟹黄水病病原研究及综合防控初报

锯缘青蟹黄水病病原研究及综合防控初报锯缘青蟹简称青蟹，是我国浙江、福建和广东等东南沿海省份的主要养殖品种，因其肉质鲜美，营养丰富，经济价值高而得到持续快速发展，产值达几十亿元。

”黄水病”（亦称白水病、白浆病）是目前青蟹养殖发展中的主要疾病之一，其发病范围广、死亡率高，给养殖青蟹造成重大经济损失，严重制约了青蟹养殖的健康发展。

该病主要表现为病蟹蟹体消瘦，肌肉白浊，打开蟹盖可见到不同程度的土黄色或浊白色牛奶状液体等症状。

自该病发生以来，不少研究者对其发病原因进行研究，但结果各不相同，其病原至今仍有较大的争议，纪荣兴等1998报道非液化摩拉氏菌是”黄水病”的病原，毛之娟等2001曾报道辛辛那提弧菌等是”黄水病”的病原，宋振荣等1998认为病毒是肌肉坏死”黄水病”的病原，而韩新全等则认为环境因素是诱发”黄水病”的根本原因。

笔者通过大量取样发现，所有”黄水病”病蟹的血淋巴和组织中均可发现大量的寄生原虫，经过病原、组织病理、电镜观察以及分子生物学方法研究，确定血卵涡鞭虫Hematodinium.sp 是引起养殖青蟹”黄水病”的重要病原。

现将调查的初步情况报告如下，希望能为该病的诊断和防治提供科学依据。

1、流行情况该病主要发生在南方沿海养殖锯缘青蟹当中，在浙江的象山港、三门湾和乐清湾一带，包括三门、玉环、乐清、宁海、象山等地每年均有不同程度的发生，并往往呈暴发性流行趋势，流行率通常在30%～50%左右，平均死亡率达20%，病情重的围塘，死亡率可达60%～70%以上，个别塘甚至出现绝产，给养殖生产带来极大损失。

该病通常病情发展缓慢，从发病到死亡往往持续较长时间，但具有传染性，发病率和死亡率高。

初步研究发现，其流行与季节、温度、盐度等环境因子、个体大小及性别等可能存在一定的关系。

主要发生在每年的6月份～10月份的夏秋季节，其中以7～9月高水温期为发病流行高峰，尤其是在温盐度环境变化较大的梅雨季节和台风季节，会在短时间内出现死亡高峰。

锯缘青蟹(Scylla serrata)脑中FSH和LH的免疫识别

锯缘青蟹(Scylla serrata)脑中FSH和LH的免疫识别叶海辉;黄辉洋;李少菁;王桂忠【期刊名称】《自然科学进展》【年(卷),期】2006(016)006【摘要】为研究甲壳动物卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的存在与分布,我们应用免疫细胞化学技术对FSH和LH在锯缘青蟹(Scylla serrata)脑中的分布进行了定位研究.结果显示:在近成熟期雌蟹和精子细胞期雄蟹脑中检测到FSH中等免疫阳性反应和LH弱免疫阳性反应,免疫阳性细胞分布在前脑的前中胞体群和后脑的后侧胞体群.发育早期雌蟹和精原细胞期雄蟹未见FSH和LH免疫阳性反应.研究结果表明:FSH和LH存在于锯缘青蟹脑中并具有发育阶段特异性,可能参与性腺发育及精卵成熟的调节.【总页数】3页(P768-770)【作者】叶海辉;黄辉洋;李少菁;王桂忠【作者单位】厦门大学海洋系,近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门,361005;厦门大学海洋系,近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门,361005;厦门大学海洋系,近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门,361005;厦门大学海洋系,近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门,361005【正文语种】中文【中图分类】Q95【相关文献】1.盐度变化对锯缘青蟹Scylla serrata免疫因子的胁迫影响 [J], 马月钗;杨玉娇;王国良2.锯缘青蟹视神经节FSH和LH的免疫识别 [J], 叶海辉;黄辉洋;李少菁;王桂忠3.锯缘青蟹Scylla serrata黄水病血液病理学分析 [J], 丁小丰;王国良4.锯缘青蟹(Scylla serrata)呼肠孤病毒5个结构蛋白互作分析 [J], 熊尚凌;邢峻梁;范东洋;袁洋洋;朱四东;林旦璆;杨季芳;陈吉刚5.换水量与循环水量对锯缘青蟹Scylla serrata (Forsk(a)l)仔、幼蟹生长存活率的影响 [J], 于忠利; 王建刚; 乔振国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

环境因子对拟穴青蟹生理生化影响

环境因子对拟穴青蟹生理生化影响运用酶学分析方法和组织学技术,研究了水体中不同浓度氨氮、亚硝酸盐、pH和盐度胁迫对拟穴青蟹生理生化以及鳃、肝胰腺显微结构的影响,探讨环境因子胁迫下拟穴青蟹生理生化的响应及免疫防御机制,以期为其健康养殖和水质管理提供理论指导,并为甲壳动物环境生理学研究积累基础资料。

本试验的主要结果和结论如下:1氨氮胁迫对拟穴青蟹生理生化以及鳃、肝胰腺显微结构的影响过滤海水中分别添加氨氮（以氯化铵作为氨氮源）0 mg·L-1（对照组）、10mg·L-1、20 mg·L-1、30 mg·L-1、40 mg·L-1,胁迫24 h,48 h,72 h,96 h对拟穴青蟹生理生化及组织、器官显微结构影响的结果表明,拟穴青蟹血清PO活性在氨氮胁迫前期（24 h、48 h）随氨氮浓度的升高而增高,而在胁迫后期（72 h、96 h）却无明显规律;各组的拟穴青蟹血清PO活性,胁迫48 h时最高,与其它各组间差异显著（P<0.05）,胁迫72 h时均为最低,这与拟穴青蟹THC变化有些相似,各组拟穴青蟹THC也是在胁迫48 h时最高,但在胁迫96 h时最低。

此外,高浓度胁迫（C30、C40）时,拟穴青蟹THC一直处于较低水平,C40组与其它各组间差异显著（P<0.05）。

拟穴青蟹鳃中SOD活性除C40组外,其余各组在胁迫前期随氨氮浓度的升高而升高,而在胁迫后期则随氨氮浓度的升高而下降,C40组拟穴青蟹鳃中SOD活性随胁迫时间的延长而一直呈下降趋势;血清SOD活性与鳃SOD活性变化趋势相似,但C40组拟穴青蟹血清SOD活性在氨氮胁迫48 h时最大,且与其它各组间差异显著（P<0.05）;各组拟穴青蟹肝胰腺和肌肉的SOD活性变化趋势与鳃SOD活性相同。

大黄多糖对拟穴青蟹免疫相关基因表达的影响

大黄多糖对拟穴青蟹免疫相关基因表达的影响文英;曹劲松;张泽蕙;钟名其;陈洁辉;章跃陵【摘要】运用RT-PCR技术探索拟穴青蟹(Scylla paramamosain)注射免疫增强剂——大黄多糖(rhubarb polysaccharide,RP)后11个免疫相关基因的表达变化情况.结果发现,大黄多糖刺激拟穴青蟹4d后,血细胞中4个基因(丝氨酸蛋白酶抑制因子、过氧化氢酶、过氧化物还原酶和酚氧化酶原)表达水平分别上调1.1倍、4.1倍、1.3倍和2.1倍,与对照组相比,存在极显著(P＜0.01)或显著性差异(P＜0.05).肝胰腺中5个基因表达变化显著(P＜0.05),其中丝氨酸蛋白酶抑制因子、过氧化物还原酶和抗脂多糖因子3个基因表达分别上调2.1倍、4.8倍和1.7倍;过氧化氢酶和溶菌酶仅在实验组中表达,未见其在对照组表达.由此推测,丝氨酸蛋白酶抑制因子、过氧化氢酶、过氧化物还原酶、酚氧化酶原、抗脂多糖因子和溶菌酶6个基因可能与拟穴青蟹免疫增强有关.【期刊名称】《中国水产科学》【年(卷),期】2015(022)003【总页数】6页(P387-392)【关键词】拟穴青蟹;大黄多糖;RT-PCR;免疫增强相关基因【作者】文英;曹劲松;张泽蕙;钟名其;陈洁辉;章跃陵【作者单位】汕头大学理学院生物学系海洋生物研究所,广东汕头515063;汕头大学理学院生物学系海洋生物研究所,广东汕头515063;汕头大学理学院生物学系海洋生物研究所,广东汕头515063;汕头大学理学院生物学系海洋生物研究所,广东汕头515063;汕头大学理学院生物学系海洋生物研究所,广东汕头515063;汕头大学理学院生物学系海洋生物研究所,广东汕头515063【正文语种】中文【中图分类】S917拟穴青蟹（Scylla paramamosain）因具有生长快、适应性强、肉味鲜美、营养价值高等特点，目前已发展成为我国水产养殖的一个重要分支。

如何治疗青蟹的黄水病_水产养殖_...

如何治疗青蟹的黄水病_水产养殖_...
翌年的7月～8月与9月～10月份是青蟹黄水病的多发期，对青蟹养殖生产危害匪浅。

一、发病原因
该病发生的主要原因是高温季节水质、底质差，细菌大量繁殖引起。

7月～10月昼夜温差大，加剧了该病的发生。

每当春夏季虾类养殖发病旺季，虾蟹混养池(塘)所养的青蟹，虽然能对低剂量的白斑病毒有抵抗力，但出现病虾大量死亡沉积于池底时，一旦池内鲜活饵料短缺，对原来已感染过'黄水'病菌但还未发病的青蟹，觅食了这些死虾后，会在大剂量的白斑病毒感染助动下，很快发病，并开始大批量集中死亡。

二、发病症状
因在临死前肌肉液化成'黄水'而得名，每年春夏之交的发病率要比秋季高，严重时死亡率达70%以上，直接影响到青蟹的健康生长。

三、如何防治
发病前半个月用生石灰25ppm或二溴海因0.3ppm进行全池泼洒预防，同时结合内服复方环丙沙星，用量为每天每100公斤蟹体施用3克，连用3天，可预防该病的发生。

对已发病的池塘应连续消毒3天，内服复方环丙沙星，每天每100公斤蟹体施用5克，连服5天～7天有较好治疗效果。

锯缘青蟹免疫增强剂的筛选及在病害防控中的应用

锯缘青蟹免疫增强剂的筛选及在病害防控中的应用锯缘青蟹（Scylla serrata）是我国主要的海水甲壳类养殖品种,总产量达到10.85万吨,占世界总养殖产量的88.14%。

近年来养殖锯缘青蟹发生大规模疾病和死亡。

青蟹发生的疾病有黄水病、弧菌病、纤毛虫病、白芒病、褐斑病、黄斑病等,病原包括细菌、病毒、环境因素及不明病因的疾病。

2006年青蟹全国平均发病率为13.77%左右,全年经济损失为2.29亿元,严重制约了青蟹养殖健康可持续发展。

作者研究了温度、pH、促进剂、抑制剂、菌体及免疫多糖对锯缘青蟹血细胞裂解物（HLS）酚氧化酶（phenoloxidase,PO）活力的影响。

试验结果表明:锯缘青蟹PO的最适作用温度为25℃,最适pH值为7.8;SDS、Ca2+、Mg2+均可提高PO的活力,其中Ca2+和Mg2+的最佳反应浓度分别为50 mmol/L和150 mmol/L,SDS的最佳反应浓度为2.5 mg/mL;叠氮钠、二乙基二硫代氨基甲酸钠、乙二胺四乙酸、Cu2+对PO活力有不同的抑制作用。

发现拟态弧菌SS060818、气单胞菌MrM0602、金黄色葡萄球菌ATCC25923、溶壁微球菌AS1.634对PO有激活作用,其中拟态弧菌和气单胞菌激活作用显著,金黄色葡萄球菌、溶壁微球菌对PO有弱激活作用;肽聚糖、拟态弧菌脂多糖粗提物可显著提高PO活力,肽聚糖、脂多糖的最佳激活浓度2.7 mg/mL、0.5 mg/mL。

此外,建立了超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶、吞噬等青蟹非特异性免疫指标的测定方法。

通过酚氧化酶体外增强试验,开展了青蟹免疫增强的筛选试验。

选择了30多种中草药和食用菌,提取其免疫多糖,测定了免疫多糖对青蟹血淋巴酚氧化酶（PO）的增强作用。

锯缘青蟹黄水病原研究及综合防控初报

锯缘青蟹黄水病原研究及综合防控初报
许文军;施慧;徐广庆;史海东;蒋天水
【期刊名称】《中国水产》
【年(卷),期】2006(369)008
【摘要】锯缘青蟹简称青蟹，是我国浙江、福建和广东等东南沿海省份的主要养殖品种．因其肉质鲜美，营养丰富，经济价值高而得到持续快速发展，产值达几十亿元。

“黄水病”（亦称白水病、白浆病）是目前青蟹养殖发展中的主要疾病之一．其发病范围广、死亡率高，给养殖青蟹造成重大经济损失．严重制约了青蟹养殖的健康发展。

该病主要表现为病蟹蟹体消瘦，肌肉白浊．打开蟹盖可见到不同程度的土黄色或浊白色牛奶状液体等症状。

【总页数】3页(P54-56)
【作者】许文军;施慧;徐广庆;史海东;蒋天水
【作者单位】浙江省海洋水产研究所,316100;浙江省海洋水产研究所,316100;浙江省三门县技术推广站,317100;浙江省普陀区海洋与渔业局,316100;浙江省普陀区海洋与渔业局,316100
【正文语种】中文
【中图分类】S9
【相关文献】
1.锯缘青蟹人工育苗研究初报 [J], 吴琴瑟
2.锯缘青蟹Scylla serrata黄水病血液病理学分析 [J], 丁小丰;王国良
3.锯缘青蟹细菌性传染病的病原菌研究 [J], 毛芝娟;卓华龙;杨季芳;吴雄飞
4.应用PCR方法检测患"黄水病"锯缘青蟹中的血卵涡鞭虫 [J], 施慧;许文军;李鹏飞;徐汉祥;史海东
5.锯缘青蟹人工育苗试验初报 [J], 刘英杰;杨金晓
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pH突变对拟穴青蟹免疫因子的胁迫影响

pH突变对拟穴青蟹免疫因子的胁迫影响刘璐;杨玉娇;王国良【期刊名称】《宁波大学学报（理工版）》【年(卷),期】2009(022)004【摘要】以拟穴青蟹为材料,在实验室条件下测定了pH 6.5、pH 7.0、pH 7.5、pH 8.0、pH 8.5各梯度胁迫0h、24h、48h、72h、96h时青蟹的血细胞总数(THC)、血细胞吞噬能力及血清中溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化物酶(POD)、酚氧化酶(PO)及溶血素等相关免疫因子的活力变化.结果表明:长时间胁迫使各免疫指标值下降,显示可抑制免疫因子的活性,其中THC、LZM和溶血素活力下降明显.小幅度(pH 7.05、pH 8.02)突变下短时间内各项指标值有所上升,而后下降;大幅度(pH 6.45、pH 8.44)突变各项指标值显著降低.pH胁迫24 h后对照组的THC显著高于其他各组;pH 7.05、pH 6.45、pH 8.02组的溶血素活力显著低于对照组;pH 8.44、pH 6.45组的血细胞吞噬作用和ACP活力显著低于对照组.可见THC、溶血素、血细胞吞噬能力、PO和POD可作为pH胁迫对拟穴青蟹抗病力影响的重要参考依据.【总页数】6页(P484-489)【作者】刘璐;杨玉娇;王国良【作者单位】宁波大学,生命科学与生物工程学院,浙江,宁波,315211;宁波大学,生命科学与生物工程学院,浙江,宁波,315211;宁波大学,生命科学与生物工程学院,浙江,宁波,315211;宁波大学,医学院,浙江,宁波,315211【正文语种】中文【中图分类】S968.25【相关文献】1.番石榴叶水提物对拟穴青蟹抗病毒病能力及部分血清免疫因子的影响 [J], 王博;李加儿;冯娟;马红玲;申亚阳;郭志勋;2.番石榴叶水提物对拟穴青蟹抗病毒病能力及部分血清免疫因子的影响 [J], 王博;李加儿;冯娟;马红玲;申亚阳;郭志勋3.pH胁迫对拟穴青蟹体内几种免疫因子的影响 [J], 曾媛媛;艾春香;刘建国;徐华;陈宇锋;李少菁4.汞胁迫对拟穴青蟹(Scylla paramamosain)主要消化和免疫因子的影响 [J], 李文静;陈强;杨欢;黎中宝;陈太容;吴传奇5.pH胁迫对日本对虾非特异性免疫因子及RNA/DNA比值的影响 [J], 赵先银;李健;李吉涛;何玉英;张喆;常志强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

环境胁迫对养殖锯缘青蟹主要免疫因子的影响

环境胁迫对养殖锯缘青蟹主要免疫因子的影响近年来养殖锯缘青蟹发生大规模死亡现象，严重制约了青蟹养殖健康持续发展。

青蟹疾病的发生是机体自身的抗病力水平、病原微生物以及环境条件等多种因素相互作用和影响的结果。

对疾病问题的研究必须从多个角度入手综合考虑。

其中从环境角度入手，研究环境因子对锯缘青蟹抗病力与病原生物致病力的影响是根本解决病害的重要对策之一。

本文从诸多环境因子中选择盐度、pH、氨氮、温度为代表，从青蟹的免疫力，主要包括血细胞密度、血清溶菌酶活力、血清碱性磷酸酶及酸性磷酸酶活力等多个角度，研究了上述环境因子对青蟹抗病力发生的影响。

本研究主要结果如下：1．盐度胁迫对养殖锯缘青蟹免疫因子的影响以健康的养殖锯缘青蟹为实验材料，比较了不同盐度突变条件下青蟹抗病力的差别。

实验结果表明盐度突变对养殖锯缘青蟹血细胞密度、血清溶菌酶活力、血清酸性磷酸酶和碱性磷酸酶均有影响，且大幅度长时间的盐度胁迫可显著影响青蟹的抗病力。

表明这4种指标可以作为盐度胁迫对青蟹抗病力影响分析的重要参考依据，而盐度可以作为影响青蟹抗病力的重要环境因子。

2．pH胁迫对养殖锯缘青蟹免疫因子的影响以健康的养殖锯缘青蟹为实验材料，比较了不同pH突变条件下青蟹抗病力的差别。

实验结果表明pH突变对养殖锯缘青蟹血细胞密度、血清溶菌酶活力、血清酸性磷酸酶和碱性磷酸酶均有影响，且大幅度长时间的pH胁迫可显著影响青蟹的抗病力。

表明这4种指标可以作为pH胁迫对青蟹抗病力影响分析的重要参考依据，而pH可以作为影响青蟹抗病力的重要环境因子。

3．氨氮胁迫对养殖锯缘青蟹免疫因子的影响以健康的养殖锯缘青蟹为实验材料，比较了不同氨氮突变条件下青蟹抗病力的差别。

实验结果表明氨氮对养殖锯缘青蟹血细胞密度(THC)、血清溶菌酶活力、血清酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)均有影响，且大幅度长时间的氨氮胁迫可显著影响青蟹的抗病力。

所以应当采取有效措施降低养殖池的氨氮浓度，以避免病害的发生。

拟穴青蟹病害研究进展

拟穴青蟹病害研究进展
郑天伦
【期刊名称】《水产科学》
【年(卷),期】2014(000)005
【摘要】拟穴青蟹（Scylla paramamosain）俗称青蟹，曾经被误鉴定为锯缘青
蟹（S ．serrata）［1］，具有生长快、肉质鲜美、营养价值高等优点，是我国东南沿海重要的经济蟹类之一［2］。

但随着青蟹养殖规模的扩大及养殖时间的推移，青蟹的病害日趋严重［3-4］。

近年来，国内外学者对拟穴青蟹的病害进行了大量的研究，笔者综述了其主要研究成果。

【总页数】5页(P326-330)
【作者】郑天伦
【作者单位】浙江省水产技术推广总站，浙江杭州 310012
【正文语种】中文
【中图分类】S945
【相关文献】
1.我国苹果主要病害研究进展与病害防治中的问题 [J], 李保华;王彩霞;董向丽
2.中国茶树病害研究进展（I）文献,新病害,流行规律 [J], 高旭晖;高曙晖
3.食用菌菌丝体侵染性病害与竞争性病害研究进展 [J], 边银丙
4.主栽食用菌的细菌性病害研究进展 [J], 刘晨光;王青;边银丙;肖扬
5.特殊生境放线菌在植物病害防治中的研究进展 [J], 樊炳君;曹艳茹;赵洪莹;周萍;
焦钰;朱国兴;魏薇
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第４期
周曼曦，： “ 等黄水病 ”对拟穴青蟹免疫指标的影响
１数据处理．４
的血细胞用于血细胞吞噬能力的测定．
１３检测方法．
用ＳＳ６数据分析软件进行单因素Байду номын сангаас差分ＰＳ１．０析，结果用平均值 ± 标准差表示．
２结果与分析
浙江省优秀科技期刊一等奖
“ 黄水病＂对拟穴青蟹免疫指标的影响
周曼曦，丁小丰一国良，，王，
（．１宁波大学生命科学与生物工程学院，浙江宁波３５１；１２１
２宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江宁波３５１）．１２１
摘要：以血细胞分析和酶学分析方法，比较研究了患 “ 黄水病”拟穴青蟹和正常拟穴青蟹的细胞
处取血，将血淋巴液与抗凝剂１：２混匀，静置于４ ℃冰箱中１２，经３０ｍｎ４Ｃ冷冻离心～ｈ００・ｉｒｏ１ｍｎ取上清液，０ｉ，用于相关酶活力的测定；沉淀
收稿日期：２１＿７０．０１１＿７ｏ宁波大学学报（理工版）网址：ｔ：３ｂｂ．ｕｃｈｌ／ｘ．ｕｄ＿ｐ／ｎｅｎ基金项目：长江学者和创新团队发展计划（Ｒ０３ＩＴ７４）；浙江省科技厅重大攻关项目（０５２３２０Ｃ１０８）：州市科技重大项目（２００１）温￥０８０８第一作者：周昱曦（９７）女，１８一，湖南零陵人，在读硕士研究生，主要研究方向：水产动物病害防治．－ａ：７６４７＠ｑｏＥｍｉ３０２６４ｑ．ｍｌｔ通讯作者：王国良（９５，浙江定海人，１５一）男，教授，主要研究方向：水产动物病害防治． — ｉｗａｇｕｌｎ＠ｎｕｄ．Ｅｍａ：ｎｇｏｉｇｂ．ｕｃｌａｅｎ
１１实验用蟹．
海重要海洋经济蟹类之一．已在浙江、江苏及福建
等省进行广泛的人工养殖．然而，近些年常暴发一
种以甲壳内出现黄色腔液，即血淋巴呈黄色或浊白不凝液体为主要症状的流行性疾病，俗称青蟹 “ 黄水病”，严重制约了青蟹养殖产业的发展．有关青蟹 “ 黄水病”的病原病因较复杂，有人认为是细菌性病原引起Ｉ，】也有报道是血卵涡鞭虫ｆ但３】，周素琴、丁朋晓等研究发现环境变化或恶化是引起青蟹 “ 黄水病” 发生的主要诱因【】近几年，４．已有学者从ｐＨ、铵氮、重金属离子等胁迫对青蟹免疫因子影响方面开展研究［］在实验条件下分析了６，培
免疫及血清免疫酶指标．结果表明：患病拟穴青蟹与正常拟穴青蟹不同性别之间血细胞密度、３
种血细胞比例和ＬＭ、ＡＣ、Ａ、ＳＤ、Ｐ酶活性差异皆不显著（００）同性别之间变ＺＰＫＰＯＯ．５，而
化明显，差异极显著（＜．）雄性患病拟穴青蟹与正常拟穴青蟹的血细胞吞噬百分Ｉ（Ｐ和血尸０１０；￣Ｐ）Ｅ清ＬＭ活力没有明显差别（＞．）Ｚ尸０５０，而雌性患病拟穴青蟹ＰＰ和ＬＭ均显著低于正常拟穴青蟹Ｚ（＜．）ＰＯ５０；同性别的患病青蟹Ｐ极显著低于正常青蟹（＜．１患病拟穴青蟹与正常拟穴青蟹不ＩＰ０）０；
第２卷第４２１Ｏ４期，０１月年ｌ
Ｖ１４Ｎｏ４Ｏｃ．０ｉｏ．．，ｔ２１２
宁波大学学报（理工版）
ＩＵＮＡＦＮＮＧＯＵＶＥＳＴＮＳＥ）ＯＲＬＯＩＢＮＩＲＩＹ（Ｅ
首届中国高校优秀科技期刊奖
环境因子变化与青蟹免疫水平之间的关系，但对在养殖环境中自然发生 “ 黄水病”的青蟹的免疫功
在 “ 黄水病” 发生高峰季９ｌ月）于浙ｉ三￣Ｏ，工门县青蟹养殖塘采集试验用拟穴青蟹雌雄各ｌ５只，其具有典型 “ 黄水病” 症状；对照用正常青蟹取自同
一
养殖区但取材时间避开 “ 黄水病”的发生时期，雌
２１血细胞密度及各型血细胞比例变化．
拟穴青蟹（ｙａｐｒｍｍｓｉ隶属节肢动Ｓｌａａａｏａ）ｃｌｎ物门（ｒｒｐｄ）甲壳纲（ｒｓｃａ、十足目Ａｔｏｏａ、ｈＣｕｔｅ）ａ
（ｅａｏａ、梭子蟹科（ｏｕｉｅ是我国东南沿Ｄｃｐｄ）Ｐｒｎｄ）ｔａ，
氧化物歧化酶（Ｏ）ＳＤ、过氧化物酶（Ｏ）ＰＤ、酚氧化
酶（Ｏ活性作为青蟹免疫水平的指标，比较研究Ｐ）自然患病拟穴青蟹和正常拟穴青蟹在免疫指标上
的差异及变化，探索养殖拟穴青蟹疾病暴发与机体免疫能力之间的关系为养殖拟穴青蟹病害防控提供理论基础和实验依据．
１材料与方法
雄青蟹各ｌ只，５经血清检测，无病，每只重约１０．５ｇ１血样采集与处理．２
用一次性无菌注射器从青蟹第三步足基关节
能变化尚未见报道．笔者以血细胞密度（Ｈ）ＴＣ、血细胞比例、血细胞吞噬能力以及血清溶菌酶
（Ｚ、ＬＭ）酸性磷酸酶（Ｃ）碱性磷酸酶（Ｋ）超ＡＰ、ＡＰ、
同性别之间ＰＤ活性差异不显著（＞．）Ｏ尸０５，同性别之间ＰＤ活性显著高于正常拟穴青蟹（＜０ＯＰ
０５．．）０
关键词：拟穴青蟹；黄水病；免疫指标
中图分类号：９５￥４文献标识码：Ａ文章编号：０１５３２１）０．０４０１０—１２（０１４０１．５