绿原酸

关于绿原酸
金银花的有效成分———绿原酸
金银花的主要有效成分之一为绿原酸。

绿原酸是咖啡酸与奎宁酸（1- 羟基六氢没食子酸）的酯，分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构，是一种苯丙素类化合物，化学名为3-O- 咖啡酰奎宁酸，结构式如图1所示。

图1 绿原酸结构式
绿原酸的药用历史悠久，具有抗菌、抗病毒等作用，对消化、血液系统和生殖系统疾病均有疗效。

近年，绿原酸及其衍生物被确认是大鼠肝微粒体中葡萄糖- 6- 磷酸位移酶的特效性抑制剂，显示出其在治疗糖尿病方面的良好前景。

绿原酸也是某些中药制剂质量控制的重要指标。

半水合物为针状结晶（水）。

110 ℃变为无水化合物，熔点208 ℃，[ α ]24D-35.2 ℃（ c=2.8）。

98%绿原酸
25 ℃水中溶解度为 4%，热水中溶解度更大；易溶于乙醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯，难溶于三氯甲烷、乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。

1.主要功用
生物活性
绿原酸具有广泛的生物活性，现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、医药和日用化工等多个领域。

绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。

抗菌、抗病毒
杜仲绿原酸有较强的抗菌消炎作用，桃叶珊瑚苷及其多聚体有明显的抑菌作用，桃叶珊瑚苷元对革兰氏阴性、阳性菌都有抑制作用。

桃叶珊瑚苷有抑菌、利尿作用，并能促进伤口愈合；桃叶珊瑚苷与葡萄糖苷一起预培养后还会产生明显的抗病毒作用，但其本身开不具有抗病毒功能。

日本爱知医科大学加龄医科学研究所经研究确认，从杜仲中提取的碱性物质有抗破坏人体免疫系统病毒的功能，这种物质有可能用于预防和治疗艾滋病。

抗氧化作用
绿原酸是一种有效的酚型抗氧化剂，其抗氧化能力要强于咖啡酸、对羟苯酸、阿魏酸、丁香酸、丁基羟基茴香醚（BHA）和生育酚。

绿原酸之所以有抗氧化作用，是因为它含有一定量的R-OH基，能形成具有抗氧化作用的氢自由基，以消除羟基自由基和超氧阴离子等自由基的活性，从而保护组织免受氧化作用的损害。

清除自由基、抗衰老、抗肌肉骨骼老化
绿原酸及其衍生物具有比抗坏血酸、咖啡酸和生育酚（维生素E）更强的自由基清除效果，可有效清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基，还可抑制低密度脂蛋白的氧化。

绿原酸对有效地清除体内自由基、维持机体细胞正常的结构和功能、防止和延缓肿瘤突变和衰老等现象的发生具有重要作用。

杜仲绿原酸含有一种可促进人体的皮肤、骨骼、肌肉中胶蛋白的合成与分解的特殊成分，具有促进代谢、防止衰退的功能，可用来预防宇航员因太空失重而引起的骨骼和肌肉衰退，同时发现杜仲绿原酸无论在体内还是体外，均有明显抗自由基作用。

抑制突变和抗肿瘤
现代药理实验证明杜仲绿原酸有抗癌和抑癌之功效，日本学者研究了杜仲绿原酸的变异原性抑制作用(antimutagenicity)，发现该作用与绿原酸等抗变异原性成分有关，揭示了绿原酸对肿瘤预防的重要意义。

蔬菜、水果中的多酚类如绿原酸、咖啡酸等可通过抑制活化酶来抑制致癌物黄曲霉毒素B1和苯并[a]-芘的变异原性；绿原酸还可通过降低致癌物的利用率及其在肝脏中的运输来达到防癌、抗癌的效果。

绿原酸对大肠癌、肝癌和喉癌具有显著的抑制作用，被认为是癌症的有效化学防护剂。

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对心血管保护作用
绿原酸作为一种自由基清除剂及抗氧化剂已被大量的试验证明，绿原酸的这种生物活性，对心血管系统能产生保护作用。

异绿原酸B对大鼠具有较强促进前异绿原酸B对大鼠具有较强促进前列腺环素（PGI2）的释放和抗血小板凝集作用；对豚鼠肺碎片感应的抗体诱导SRS-A释放抑制率达62.3%。

异绿原酸C也有促进PGI2释放作用。

另外，异绿原酸B 对血小板学栓素的生物合成和氢过氧化无诱发的内皮素损伤有极强的抑制作用。

降压作用
经多年临床试验证实的，杜仲绿原酸有明显的降压作用，而且疗效平稳，无毒、无副作用。

美国威斯康星大学研究发现杜仲绿降血压的有效成分是松酯醇二葡萄糖苷，桃叶珊瑚甙，绿原酸，和杜仲绿原酸多糖类。

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其它生物活性
由于绿原酸对透明质酸（HAase）及葡萄糖-6-磷酸酶（Gl-6-Pase）有特殊的抑制作用，所以绿原酸对于创伤的治愈、皮肤健康湿润、润滑关节、防止炎症以及体内血糖的平衡调控等都有一定得疗效。

绿原酸对多种疾病和病毒还有较强的抑制和杀灭作用。

绿原酸有降血压、抗菌、抗病毒、消炎、增高白血球、预防糖尿病、显著增加胃肠蠕动和促进胃液分泌等药理作用，对急性咽喉炎症有明显的疗效。

研究表明，口服绿原酸能够显著的刺激胆汁的分泌，具有利胆保肝的功效；它还可有效抑制H2O2引起的大鼠红细胞溶血作用。

2.绿原酸的应用
医药保健
卫生部《药品标准》收录具有清热解毒、抗菌消炎的中成药170种，均含有绿原酸且为主要成分。

目前，在银黄制剂、双黄连制剂等药品的生产中，已将绿原酸作为质量控制的重要指标之一。

绿原酸等多酚类物质被称为“第七类营养素”，被广泛用于保健行业，添加了绿原酸的保健药品具有清热解毒、养颜润肤、解除烟酒过多等特点。

Microherb 从植物中提取的99%绿原酸纯品可作为二类新药开发，此外绿原酸还是重要的化学试剂，在生化分析和化学工业中都具有广泛的应用。

食品行业
天然的食品抗氧化剂越来越受到消费者的欢迎，从杜仲叶中提取和分离的绿原酸是一种新型高效的酚型抗氧化剂。

如在猪油中加入少量绿原酸，可提高猪油的抗氧化稳定性，增长保质期。

绿原酸具有增香和护色作用，可用于食品和果品的保鲜。

它可在某些食品中取代或部分取代目前常用的人工合成的抗氧化剂。

Hirazawa等将绿原酸用于鱼片的保鲜后，发现其效果要优于茶叶提取物和α-生育酚。

绿原酸还被用于果汁的保鲜，可有效防止饮料和食品的腐败变质；Wilska等的研究还发现，绿原酸可大大提高草莓等新鲜果汁色泽的稳定性。

化妆品行业
Facino等研究了以绿原酸为代表的天然多酚物质，发现它们可以保护胶原蛋白不受活性氧等自由基的伤害，并能有效防止紫外线对人体皮肤产生的伤害作用。

现已有多项添加绿原酸后用于抗脲酶化妆品、皮肤防晒剂和防止紫外线和染发剂对头发损伤的洗发水的欧洲专利。

绿原酸的提取工艺正是由于绿原酸良好的药用价值以及良好的应用前景，国内外已有不少文献对金银花中绿原酸的分析、测定及提取工艺的研究，但提取方法各不相同。

主要流程大致可以分为粗提、分离纯化、成品的制备等步骤，其中粗提方法很多。

3.1 绿原酸的提取方法
回流提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，回流提取，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下提取、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。

超声提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，超声波处理，
过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下处理、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。

微波提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置微波炉中处理一定的时间，取出冷却，再置微波炉中同样条件处理，如此重复6次，过滤，真空干燥至粉末。

渗漉法提取：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置冰箱冷却，待结冰后取出，冰融化后装入渗漉筒，收集渗漉液真空干燥至粉末。

煎煮法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，煎煮一定的时间，过滤、滤渣，再用同样的方法煎煮相同时间，过滤，合并滤液真空干燥至粉末。

浸提法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，室温静置24h，过滤，滤液真空干燥至粉末。

4 绿原酸的分离、纯化工艺
将提取液过滤，浓缩，拌入聚酰胺，真空烘干，研磨，过筛，得粗品，经聚酰胺柱层析分离，得产品得率和产品纯度(绿原酸含量)。

另外可以绿原酸含量为指标，分别考察聚酰胺目数、洗脱剂、物料比、柱径与柱长比、流速、洗脱剂用量等影响因素，优化出最佳的分离工艺参数。

对分离后的产品，选用不同的溶剂进行重结晶，从中选出最佳的溶剂进行精制，得到绿原酸精品。

当然，分离纯化还有很多方法，比如利用大孔树脂也同样可以纯化绿原酸。

5 绿原酸的含量测定
精确称取原料1.00g，加入30mL95%乙醇溶液，置于索氏提取器中回流提取，55℃回流提取4h，放置冷却至室温，过滤，定容至50 mL，摇匀，精确吸取提取液0.1 mL，稀释至4 mL，以95 %乙醇作对空白，在紫外分光光度计331 nm处测定吸光度A值，按绿原酸的标准曲线计算其绿原酸的含量。

6 绿原酸的提取工艺对比
6.1 提取溶剂的选取：提取溶剂主要有两种，即水和乙醇（工业乙醇），不同的提取方法可以采用不同的提取溶剂。

乙醇的提取效果明显好于水，但水作为溶剂，虽然提取率相对较低，但对环境无污染，生产成本相对较低，工业生产切实可行，所以目前仍然是大工业生产普遍采用的提取方法。

6.2 提取方法的选取：采用相同的溶剂、不同的提取方法对绿原酸进行提取，提取率最高的方法为超声波法，其次为煎煮法、微波法、浸提法等。