香菇多糖的提取工艺
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5、复合酶解,酸与热水相结合浸提法 向香菇处理物中加 适量纤维素 酶和果胶酶,目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类 物质的溶出。加 20倍体积的水在 40 ℃水浴恒温下浸泡 80min。后再迅速 升温煮沸 60min,用 4层纱布过滤后收集滤液, 再调节 pH分别为 4. 5、5.0、 5.5 ,进行酸浸提, 然后再用 4层纱布过滤后收集滤液。合并两次滤液。浓 缩。
复合酶解、 酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的改进工艺 原料 → 复合酶解→酶解液→ 水浸提→ 酸浸提→ 浸提物→ 真空浓缩→ 浓缩 液→ 酒精沉淀→ 沉淀物→ sevage法脱蛋白→ 水相→ 丙酮洗涤→ 多 糖粗制品
操作要点
1、原料预处理 选取质量合格的干香菇若干,经植物高速磨碎机 磨成粉末, 称取相应香菇粉末 , 加入适量酒精使香菇粉末成糊状。
香菇多糖(1entinan，LNT) 香菇多糖是从优质香菇子 实体中提取的有效活性成分，是香菇的主要有效成分， 是一种宿主免疫增强剂(host defense potentiator， HDP)，临床与药理研究表明，香菇多糖具有抗病毒、抗 肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用。
香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成 分，香菇多糖中的活性成分是具有分支的β— (1—3)— D—葡聚糖，主链由β—(1—3)连接的葡萄糖基组成，沿 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ链随机分布着由β—(1—6)连接的葡萄糖基，呈梳状 结构。
8 、 sevage法脱蛋白 将上述沉淀溶于适量的蒸馏水中,分别加 入 20 %体积的氯仿和 7 %体积的异戊醇生成絮状凝聚物, 用高速离 心机在 5000r pm离心 15min得沉淀。重复上述操作, 直至无凝聚物 生成。
9、丙酮洗涤脱水 将酒精沉淀物用丙酮洗涤脱水两次, 倒入放 有干燥滤纸的培养皿中 (滤纸重0.98g) ,然后将培养皿放在 50℃ 的 烘干箱中进行干燥 3h ,得到香菇多糖粗制品。
功能主治：不能手术或复发性胃癌、肝癌、膀胱癌， 使用本品能缓解症状，提高病人免疫功能，纠正微量元 素失调。
香菇多糖结构式：
香菇多糖的性质
香菇多糖为灰白色粉末，大多为酸性多糖，溶于 水、稀碱，尤其易溶于热水，不溶于乙醇、丙酮、 乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂，其水溶液呈透明黏 稠状。
目前主要集中在香菇中β ―( 1→3)―D 葡聚糖的研究 上, 其他多糖组分与生物活性之间的关系还有待进一步 的明确。目前多糖的提取率普遍不高,提高香菇多糖的 提取率已成为多糖产品开发需要解决的一个关键问题。
THANK YOU .
超滤-渗滤法可改善产品纯度
在30 ℃，0.3 MPa压力差下，用截留相对分子质量为50000的滤 膜对香菇多糖提取液进行超滤渗滤纯化，用Sevag法除去浓缩液中的 蛋白质，然后冷冻干燥，得到多糖制品。 超滤-渗滤法所得多糖制品的纯度为80.4 %，收率为1.59 %，渗滤时 浓缩液中的小分子糖类能够充分通过滤膜，提高了制品的纯度。超 滤-渗滤是一种有效的纯化香菇多糖的方法。
香菇多糖的提取工艺
香菇为侧耳科植物香蕈的子实体，是世界第二大食用菌， 也是我国特产之一，在民间素有“山珍”之称，是高蛋 白、低脂肪的营养保健食品。
现代医学和营养学不断深入研究，香菇的药用价值 也不断被发掘。香菇中麦角甾醇含量很高，对防治佝偻 病有效；香菇多糖（β～1，3葡聚糖）能增强细胞免疫 能力，从而抑制癌细胞的生长；香菇含有六大酶类的40 多种酶，可以纠正人体酶缺乏症；香菇中的脂肪所含脂 肪酸，对人体降低血脂有益。
主要的多糖提取方法有如下几种: 热水浸提法、 酸浸 提法、 碱浸提法、 微波法、 复合酶解等等,但是每种 方法都存在不足之处。
香菇多糖提取的工艺流程
多糖提取的常规工艺 原料→水(或酸)浸提→浸提物→真空浓缩→浓 缩液→酒精沉淀→沉淀物→ sevage法脱蛋白→水相→丙酮洗涤→多糖 粗制品
采用复合酶解工艺 原料→复合酶解→酶解液→ 真空浓缩→ 浓缩液 → 酒精沉淀→ 沉淀物→ 丙酮洗涤→ 多糖粗制品
6、 真空浓缩 将上述滤液用旋转蒸发器在75℃ , 0.09Pa大气 压下进行浓缩, 收集浓缩液。并用高速离心机在 6000rpm离 心 15min , 目的是去除蛋白质和杂质,得上清液。
7 、 酒精沉淀分离 在浓缩液中加入 4倍体积的 95%乙醇, 使 香菇多糖呈絮状凝胶物沉淀析出,而大部分蛋白质和其它成分保留在 溶液中, 再用高速离心机在 7000rpm下离心 15min得沉淀。
3、 酸浸提 向香菇处理物中加盐酸溶液使其最终浓度分别为 0.3mol/L、 0.4mol/L、 0.5mol/L , 置于 60℃ 恒温水浴中浸提 8h , 加适量的NaOH 中和至中性,过滤, 浓缩。
4、 复合酶浸提法 向香菇处理物的中加入适量纤维素酶和果胶酶, 目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类物质的溶出。 往酶解后的香菇处理物中加入 20倍体积的蒸馏水,并在 40℃ 水浴恒温下 浸泡 80min。迅速升温沸腾90min ,后过滤得滤液。离心沉淀,上清液浓缩, 乙醇沉淀。
2、 热水浸泡 向香菇处理物中加入 20倍体积的蒸馏水,并在 40℃ 水浴恒温下浸泡 4 h。放置冰箱冷冻柜中冷冻过夜。将香菇浸 泡液从冰箱中取出, 解冻后在恒温水浴箱内分别抽提 30min、 60min、 90min ,用 4层纱布过滤后收集滤液。向滤渣中加入20倍体积的蒸馏 水再抽提一次, 沸煮时间同上用 4层纱布过滤后收集滤液,合并两次滤 液。
前景展望 随着分子生物学的发展和香菇多糖研究的不断深入，
科学家们已经开始在基因水平探讨香菇多糖生物活性机制。 多糖生物活性与结构间的关系的研究还落后于核酸与蛋白 质的研究。在提取工艺的改善过程中，不仅可以考虑将多 种提取手段结合起来优化提取工艺，还可以通过遗传育种、 基因重组 、物种诱变等手段选育出高产多糖的香菇菌株， 提高香菇的多糖含量，以增加多糖的提取率，降低生产成 本。
复合酶解、 酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的改进工艺 原料 → 复合酶解→酶解液→ 水浸提→ 酸浸提→ 浸提物→ 真空浓缩→ 浓缩 液→ 酒精沉淀→ 沉淀物→ sevage法脱蛋白→ 水相→ 丙酮洗涤→ 多 糖粗制品
操作要点
1、原料预处理 选取质量合格的干香菇若干,经植物高速磨碎机 磨成粉末, 称取相应香菇粉末 , 加入适量酒精使香菇粉末成糊状。
香菇多糖(1entinan，LNT) 香菇多糖是从优质香菇子 实体中提取的有效活性成分，是香菇的主要有效成分， 是一种宿主免疫增强剂(host defense potentiator， HDP)，临床与药理研究表明，香菇多糖具有抗病毒、抗 肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用。
香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成 分，香菇多糖中的活性成分是具有分支的β— (1—3)— D—葡聚糖，主链由β—(1—3)连接的葡萄糖基组成，沿 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ链随机分布着由β—(1—6)连接的葡萄糖基，呈梳状 结构。
8 、 sevage法脱蛋白 将上述沉淀溶于适量的蒸馏水中,分别加 入 20 %体积的氯仿和 7 %体积的异戊醇生成絮状凝聚物, 用高速离 心机在 5000r pm离心 15min得沉淀。重复上述操作, 直至无凝聚物 生成。
9、丙酮洗涤脱水 将酒精沉淀物用丙酮洗涤脱水两次, 倒入放 有干燥滤纸的培养皿中 (滤纸重0.98g) ,然后将培养皿放在 50℃ 的 烘干箱中进行干燥 3h ,得到香菇多糖粗制品。
功能主治：不能手术或复发性胃癌、肝癌、膀胱癌， 使用本品能缓解症状，提高病人免疫功能，纠正微量元 素失调。
香菇多糖结构式：
香菇多糖的性质
香菇多糖为灰白色粉末，大多为酸性多糖，溶于 水、稀碱，尤其易溶于热水，不溶于乙醇、丙酮、 乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂，其水溶液呈透明黏 稠状。
目前主要集中在香菇中β ―( 1→3)―D 葡聚糖的研究 上, 其他多糖组分与生物活性之间的关系还有待进一步 的明确。目前多糖的提取率普遍不高,提高香菇多糖的 提取率已成为多糖产品开发需要解决的一个关键问题。
THANK YOU .
超滤-渗滤法可改善产品纯度
在30 ℃，0.3 MPa压力差下，用截留相对分子质量为50000的滤 膜对香菇多糖提取液进行超滤渗滤纯化，用Sevag法除去浓缩液中的 蛋白质，然后冷冻干燥，得到多糖制品。 超滤-渗滤法所得多糖制品的纯度为80.4 %，收率为1.59 %，渗滤时 浓缩液中的小分子糖类能够充分通过滤膜，提高了制品的纯度。超 滤-渗滤是一种有效的纯化香菇多糖的方法。
香菇多糖的提取工艺
香菇为侧耳科植物香蕈的子实体，是世界第二大食用菌， 也是我国特产之一，在民间素有“山珍”之称，是高蛋 白、低脂肪的营养保健食品。
现代医学和营养学不断深入研究，香菇的药用价值 也不断被发掘。香菇中麦角甾醇含量很高，对防治佝偻 病有效；香菇多糖（β～1，3葡聚糖）能增强细胞免疫 能力，从而抑制癌细胞的生长；香菇含有六大酶类的40 多种酶，可以纠正人体酶缺乏症；香菇中的脂肪所含脂 肪酸，对人体降低血脂有益。
主要的多糖提取方法有如下几种: 热水浸提法、 酸浸 提法、 碱浸提法、 微波法、 复合酶解等等,但是每种 方法都存在不足之处。
香菇多糖提取的工艺流程
多糖提取的常规工艺 原料→水(或酸)浸提→浸提物→真空浓缩→浓 缩液→酒精沉淀→沉淀物→ sevage法脱蛋白→水相→丙酮洗涤→多糖 粗制品
采用复合酶解工艺 原料→复合酶解→酶解液→ 真空浓缩→ 浓缩液 → 酒精沉淀→ 沉淀物→ 丙酮洗涤→ 多糖粗制品
6、 真空浓缩 将上述滤液用旋转蒸发器在75℃ , 0.09Pa大气 压下进行浓缩, 收集浓缩液。并用高速离心机在 6000rpm离 心 15min , 目的是去除蛋白质和杂质,得上清液。
7 、 酒精沉淀分离 在浓缩液中加入 4倍体积的 95%乙醇, 使 香菇多糖呈絮状凝胶物沉淀析出,而大部分蛋白质和其它成分保留在 溶液中, 再用高速离心机在 7000rpm下离心 15min得沉淀。
3、 酸浸提 向香菇处理物中加盐酸溶液使其最终浓度分别为 0.3mol/L、 0.4mol/L、 0.5mol/L , 置于 60℃ 恒温水浴中浸提 8h , 加适量的NaOH 中和至中性,过滤, 浓缩。
4、 复合酶浸提法 向香菇处理物的中加入适量纤维素酶和果胶酶, 目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类物质的溶出。 往酶解后的香菇处理物中加入 20倍体积的蒸馏水,并在 40℃ 水浴恒温下 浸泡 80min。迅速升温沸腾90min ,后过滤得滤液。离心沉淀,上清液浓缩, 乙醇沉淀。
2、 热水浸泡 向香菇处理物中加入 20倍体积的蒸馏水,并在 40℃ 水浴恒温下浸泡 4 h。放置冰箱冷冻柜中冷冻过夜。将香菇浸 泡液从冰箱中取出, 解冻后在恒温水浴箱内分别抽提 30min、 60min、 90min ,用 4层纱布过滤后收集滤液。向滤渣中加入20倍体积的蒸馏 水再抽提一次, 沸煮时间同上用 4层纱布过滤后收集滤液,合并两次滤 液。
前景展望 随着分子生物学的发展和香菇多糖研究的不断深入，
科学家们已经开始在基因水平探讨香菇多糖生物活性机制。 多糖生物活性与结构间的关系的研究还落后于核酸与蛋白 质的研究。在提取工艺的改善过程中，不仅可以考虑将多 种提取手段结合起来优化提取工艺，还可以通过遗传育种、 基因重组 、物种诱变等手段选育出高产多糖的香菇菌株， 提高香菇的多糖含量，以增加多糖的提取率，降低生产成 本。