BD Accuri C6简要操作流程
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1,开机
(1)开电脑,开软件,放置一管ddH2O在上样处
(2)开启机器,仪器自动执行“Startup”,时间大约5min;
(3)“Startup”完成后,仪器状态显示“Cytometer Connected and ready”;
(4)推荐上样前运行ddH2O 15min;
2,采集样品
(1)放置样品于上样处;
(2)设置采样条件,包括采样数目或时间或体积,上样速度和阈值;
(3)选择样品位置,命名样品名称,点击“run”,开始采样。
3,画图
(1)点击“Histogram”或“Dot Plot”或“Density Plot”,该图形将显示获取的样品;
(2)点击坐标轴参数,从下拉菜单选择需要的参数(如“FSC-A”,“FL1-A”);
(3)点击“Plot Spec”,选择“linear”或“log,设置坐标轴显示范围;
(4)右击坐标轴参数,选择“Rename Parameters”,输入需要新的坐标轴名称;
(5)选择Display下Events Display Settings,选择需要显示的细胞数
4,设门
(1) 点击任一设门工具,圈定特定的区域,设置为门;
(2) 点击图形上的“Gate”,选择该图形需要应用的门;
(3) 在“Gate”对话框内,选择多重门的逻辑关系,“Include”或“Exclude”或
“Intersect”,然后点击“Apply”。
(4) 选择需要显示的细胞数
5,设置补偿
(1) 点击“Set Color Compensation”;
(2) 选择需要补偿的荧光参数,输入补偿值;
(3) 应用该补偿至当前样品管或所有的样品管;(4) 点击“Save & Close”。
6,图像放大缩小
(1) 点击“Zoom In” ,可放大指定区域;
(2) 点击“Zoom Out” ,可返回之前的区域大小。
7,分析统计
A:预览选择的样品的图形
B:所有的Plots的列表
C:所有的Plots,Gates以及统计学的列表,可从中选择需要显示的信息
D:所有的样品的列表,可从中选择需要分析的样品
E:编辑后的统计学信息
8,存储文件
Accuri C6的存储文件后缀为.C6,该文件包含FCS文件,Instrument Settings 以及分析模板,点击File下Save,可保存完整的.C6文件。
在每次获取样品之后,FCS文件会自动被保存,如需输出FCS文件,可点击File下Export FCS Files。
9,关机清洗
(1) 放置一管ddH2O,运行2分钟
(2) 放置一管0.5%-1%有效氯的清洗液,运行2分钟;
(3) 放置一管ddH2O,运行2分钟,运行结束后ddH2O保留在上样处;(4) 退出软件,关闭电脑;
(5) 关闭电源键,仪器会自动Shutdown,时间约为13min,完成后仪器电源键自动关闭。