用双氢青蒿素防治卡氏肺孢子虫肺炎的实验研究

图 1 PCP 大鼠 BALF 涂片 GMS 染色 ( ×400)
图 2 PCP 大鼠肺病理切片 HE 染色 ( ×200)
表 1 各组大鼠平均肺重/ 体重
检查 组别
大鼠数
A
10
B
14
C
13
D
15
E
14
F
15
G
15
平均肺重 (g) ±标准差
0178 ±01053 1102 ±01183 0190 ±01178 0182 ±01056 0185 ±01053 0184 ±01046 0181 ±01054
prophylaxis and therapy of PCP was estimated by change of the ratio of lung weight to body weight and the burden ofPneumonia carinii ( Pc) 1 Results Fourteen rats were randomly killed at the end of the 6th week for the etiologic and pathologic examination1 All of the rats were seriously infected by Pc1 much lower mean ratio of lung weight to body weight , mean count of Pc cyst/ mg of lung and moder2
【关键词】 肺炎 ; 卡氏肺孢子虫 ; 大鼠模型 ; 双氢青蒿素 ; 甲氧磺胺嘧啶 - 磺胺甲基异恶唑 中图分类号 : R38213 ; R28915 文献标识码 : A
An experimental study on the prophylaxis and therapy of Pneumocystis carinii pneumonia with dihydroarteminsinin Wang Jiancheng , An Yijun and Guo Zengzhu1 Beijing Tropical Medicine Research Institute , Beijing , 100050 , China
【Key words 】 Pneumonia ; Pneumocystis carinii ( Pc ) ; Rat model ; dihydroarteminsinin ( DHA ) ; Trimethoprim -
suifamethoxazole (TMP - SMZ)
卡氏肺孢子虫肺炎 ( Pneumocystis carinii pneumonia , PCP) 多见于免疫功能低下或缺陷人群 。随着肿瘤化 疗患者 、接受免疫抑制剂治疗的器官移植者 、自身免 疫病患者以及获得性免疫功能不全患者等高危人群的 扩大 , 特别是 1984 年发现首例艾滋病以来 , PCP 发 病率呈急剧增加的趋势 。PCP 是艾滋病患者最主要的 并发症和死因 , 据统计未经药物预防的艾滋病患者约 80 % 感染 PCP〔1〕, 被视为艾滋病患者的 “标志病”。 目前防治 PCP 的主要药物为甲氧磺胺嘧啶 - 磺胺甲 基异恶唑 ( TMP - SMZ) 、戊烷脒 、氨苯砜等 , 这类药 物虽能收到较满意的疗效 , 但某些患者存在严重的副 作用或耐药性 , 戊烷脒雾化吸入还可增加卡氏肺孢子
虫 ( Pc) 肺外感染的机会〔2〕, 因此有必要观察一些新 药防治 PCP 的效果 。双氢青蒿素具有良好的抗疟原 虫 、血吸虫 、弓形虫作用〔3、4〕, 本文观察其防治大鼠 PCP 的效果 。现将结果报告如下 。 1 材料与方法 111 PCP 大鼠模型的建立〔5〕
取 180 g 左右 Wistar 雌性大鼠 , 经腹股沟皮下注 射醋酸可的松 25mg , 每周两次 , 连续 6 周 。每周测 体重一次 , 根据体重变化 , 适当调整醋酸可的松用 量 。饮水中加四环素以预防继发性细菌感染 , 浓度为 015mg/ ml 。密切观察受试动物 , 出现睁眼无力 、弓 背 、耸毛 、严重呼吸困难等症状的弱鼠应单独笼养 ,
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第 1 卷 第 1 期 临床和实验医学杂志 Vol11 , No11 2002 年 3 月 Journal of Clinical and Experimental Medicine May1 ,2002
病鼠 PCP 的症状及体征为精神萎靡 、厌食 、行 动迟缓 、弓背 、呼吸急促 、体毛斑片状脱落 、体重减 轻等 。6 周内陆续死亡 21 只 , 死亡率为 1911 %。随 机抽取的 14 只大鼠均为重度 Pc 感染 。在肺印片 、 肺匀浆及支气管灌洗液 (BALF) GMS 染色涂片中均 见到黑褐色的圆形 Pc 包囊 , 其囊壁具有括号状特征 性结构 (图 1) 。
及时处死检查 。 112 分组及 PCP 的防治方案
将大鼠随机分为 7 组 : ①正常对照 (A) 组 : 未 注射醋酸可的松 ; ②未预防对照 (B) 组 : 注射醋酸 可的松满 6 周后立即处死 ; ③未治疗对照 ( C) 组 : 注射醋酸可的松满 6 周后 , 停药观察 2 周 , 于 8 周 末处死 ; ④双氢青蒿素小剂量长程预防 (D) 组 : 注 射醋酸可的松满 3 周后开始灌服双氢青蒿素 , 30mg/ kg , 每日一次 , 连续灌药 3 周后处死 ; ⑤双氢青蒿素 小剂量长程治疗 ( E) 组 : 注射醋酸可的松 6 周 , 停 药后开始灌服双氢青蒿素 , 30mg/ kg , 每日一次 , 连 续 2 周 , 于 8 周末处死 ; ⑥双氢青蒿素大剂量短程 治疗 ( F) 组 : 注射醋酸可的松 6 周 , 停药后开始灌 服双氢青蒿素 , 60mg/ kg , 每日一次 , 连续 5 天 , 停 药观察 1 周 , 于 8 周末处死 ; ⑦TMP - SMZ 标准剂量 治疗对照 ( G) 组 : 注射醋酸可的松 6 周 , 停药后开 始灌服 TMP/ SMZ , 每 kg 体重 50mg/ 250mg , 每日一 次 , 连续 5 天 , 停药观察 1 周 , 于 8 周末处死 。 113 疗效考核指标 11311 肺重/ 体重测定 : 计算各实验大鼠肺脏与其处 死前体重的比值 。 11312 肺虫荷量测定 : 按文献〔6〕方法制备肺匀浆 , 取定量肺匀浆标本制备六甲四胺银 ( GMS) 染色涂 片 , 计数涂片中的 Pc 包囊数 , 换算成各鼠每毫克肺 组织荷 Pc 包囊数 。 11313 肺泡 Pc 感染率测定〔6〕: 肺病理切片经 GMS 染色后 , 在高倍镜下观察 100 个肺泡 Pc 感染情况 : ≤25 % 的肺泡内含有 Pc 包囊为无或轻度感染 ; 若 > 25 % 的肺泡含有 Pc 包囊则为重度感染 。 2 结 果 211 大鼠 PCP 模型的检查结果
ate or serious infection rates of pulmonary alveoli were found in Group D , E and F received DHA than that of the control group B and C received no drug for the prophylaxis and therapy ( P < 0105 , or 0101) 1 But there were no significant difference among the 4 groups from D to G1 Conclusions DHA could be used for the prophylaxis and therapy of PCP in the rat models , and its therapeutic efficacy was similar to that of standard dose TMP - SMZ1
病鼠肺脏呈淡红色 , 肿胀 , 表面及切面可见点状 或斑片状灰白色病灶 , 质地坚韧 , 挤压时切面有少量 泡沫状渗出物流出 。病理切片可见肺泡间隔增宽 , 间 质血管明显充血 , 并有散在的大单核细胞及淋巴细胞 浸润 , 肺泡腔内有较多染成嗜伊红的泡上皮细胞肿胀 、增生 (图 2) 。 212 用双氢青蒿素防治大鼠 PCP 的效果 21211 各组大鼠肺重/ 体重结果 (表 1)
第 1 卷 第 1 期 临床和实验医学杂志 Vol11 , No11 2002 年 3 月 Journal of Clinical and Experimental Medicine May1 ,2002
基础与实验研究
【Abstract】Objective To estimate the ettect of dihydroarteminsinin (DHA) on the prophylaxis and therapy of Pneumocystis carinii pneumonia (PCP) 1 Methods To develop PCP animal model , female Wistar rats were immunosuppressed by subcutaneous injection of 25mg cortisone acetate twice a week for 6 weeks1 The rats were randomly divided into 7 groups : group A was normal con2 trol ; group B and C were controls received no drug for prophylaxis or therapy ; group D was given DHA at a dose of 30mg/ kg·d for three weeks from week 4 to week 6 , group E was given DHA at a dose of 30mg/ kg·d for two weeks , group F was given DHA at a dose of 60mg/ kg·d for five days , group Gwas given TMP - SMZ at a dose of 50mg/ 250mg/ kg·d for five days1 The efficiency of DHA on the
文章编号 : 1671 - 4695 ( 2002) 01 - 0033 - 04
用双氢青蒿素防治卡氏肺孢子虫肺炎的实验研究
北京热带医学研究所 (100050) 王建成 安亦军 郭增柱
【摘要】 目的 观察双氢青蒿素防治大鼠卡氏肺孢子虫肺炎 ( PCP) 的效果 。方法 经皮下注射醋酸可的松诱 导大鼠发生 PCP。将受试大鼠随机分为实验组和对照组 , 双氢青蒿素防治方案分为小剂量长程预防 、小剂量长程治疗 及大剂量短程治疗三种 。用肺重/ 体重 、肺虫荷量及肺泡卡氏肺孢子虫 ( Pc) 感染率 3 项指标考核防治效果 。结果 抽样检查证实大鼠已成功诱导 PCP , 均为重度感染 。方差分析及卡方检验显示 , 用双氢青蒿素防治的三组大鼠的三项 指标均明显低于两个未防治对照组 ( P < 0105 或 0101) , 与甲氧磺胺嘧啶 - 磺胺甲基异恶唑 ( TMP - SMZ) 标准剂量治 疗对照 ( G) 组无显著性差异 ( P > 0105) 。结论 双氢青蒿素能有效防治大鼠的 PCP , 效果与标准剂量 TMP - SMZ 接 近。