挖心灌流实验报告

一、实验目的
1. 学习离体器官蛙心灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。

3. 掌握心肌细胞自律性、兴奋性、传导性及收缩性的相关生理机制。

二、实验原理
蛙心灌流实验是生理学中常用的实验方法，通过将蛙心取离体后，采用人工灌流的方法，模拟心脏在体内的生理环境，使心脏在一定时间内保持节律性收缩和舒张。

实验过程中，通过改变灌流液的成分，观察其对心脏活动的影响，从而了解心肌细胞在不同理化环境下的生理特性。

三、实验材料与仪器
1. 实验材料：青蛙、常用手术器械、蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、任氏液、
0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸。

2. 实验仪器：手术显微镜、秒表、移液器、分析天平、培养箱、恒温器等。

四、实验方法与步骤
1. 蛙心插管法：取一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，暴露心脏周围的大血管。

在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。

将心脏取出，放入培养皿中，用任氏液洗净血液。

2. 蛙心固定：用棉线将心脏的主动脉和肺动脉结扎，固定在支架上。

3. 蛙心灌流：将蛙心夹在蛙心夹上，连接张力传感器和计算机采集系统。

将灌流
液滴入蛙心夹中，调整灌流速度，使心脏保持节律性收缩和舒张。

4. 观察与记录：观察心脏的收缩幅度、节律、心率等指标，并记录实验数据。

5. 改变灌流液成分：分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸等灌流液替换原灌流液，观察心脏活动的变化。

五、实验结果与分析
1. 正常灌流液条件下，心脏保持节律性收缩和舒张，收缩幅度适中，心率稳定。

2. 当用0.65%NaCl灌流液替换原灌流液时，心脏收缩幅度稍微减小，心率稍微减弱。

这是因为Na+、Cl-浓度降低，导致心肌细胞内外离子浓度差减小，心肌兴奋
性降低。

3. 当用2%CaCl2灌流液替换原灌流液时，心脏收缩幅度稍微加大，心率稍微加快。

这是因为Ca2+浓度升高，促进心肌细胞动作电位2期Ca2+内流，心肌收缩力增强。

4. 当用1%KCl灌流液替换原灌流液时，心脏收缩幅度稍微加大，心率稍微加快。

这是因为K+浓度升高，与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制，导致心肌兴奋性降低，
心肌收缩力减弱。

5. 当用1：10000肾上腺素灌流液替换原灌流液时，心脏收缩幅度加大，心率加快，房室传导加速，心肌收缩力增强。

这是因为肾上腺素能激活β受体，促进心肌细
胞兴奋性增加。

6. 当用1：10000乙酰胆碱灌流液替换原灌流液时，心脏收缩幅度减小，心率减慢，房室传导减慢，心肌收缩力减弱。

这是因为乙酰胆碱能激活M受体，抑制心肌细胞兴奋性。

六、结论
通过本实验，我们学习了离体器官蛙心灌流的方法，观察了理化因素对蛙心活动的影响。

实验结果表明，心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性都与钠、钾、钙等离子有关。

外源性给予肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。

七、讨论
1. 本实验采用离体蛙心灌流法，模拟心脏在体内的生理环境，使心脏在一定时间
内保持节律性收缩和舒张，为研究心肌细胞生理特性提供了良好的实验条件。

2. 实验结果表明，心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性都与钠、钾、钙
等离子有关。

这些离子在心肌细胞膜上发挥着重要作用，维持心脏的正常功能。

3. 外源性给予肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心
脏的作用，提示心肌细胞上存在相应的受体，参与心脏活动的调节。

八、展望
1. 在今后的实验中，可以进一步探讨不同离子对心肌细胞生理特性的影响，为心
血管疾病的治疗提供理论依据。

2. 可以研究心肌细胞在不同病理状态下的生理特性，为心血管疾病的诊断和治疗提供新的思路。