不同植酸酶样品耐温性能的研究

１６数 据 处 理 ．
３分析 与讨 论 ３１制备 耐 高 温植 酸酶 产品 的主要 方 法 ．
所 有数 据 均为 ３个 平行样 品结果 的平 均 数 ， 各
平 行样 测定 结果 相对 偏 差小 于 ８ ％。
２结 果与分 析 ２１ 酸 酶样 品酶 活测 定结 果 ．植
（） １改造 微 生 物植 酸酶 基 因及其 筛 选相 应 的生
产 菌种 。
（ ） 用 包 被 、 囊 化 等 剂 型 技 术增 强 植 酸酶 ２采 微
的耐热 性 。
本 实 验 所 选 用 的植 酸 酶 产 品保 证 值 为 ５０ ００ Ｕｇ ／。由表 ３测 定结 果可 知 ， 所有 产 品测定 结果 均 大
针对 饲 用植 酸 酶来讲 ， 如果 能够 通 过微 生 物基
算 出的 酶 活 性 ， ｇ Ｕ／ ；
Ｆ —试样溶液反应前的总稀释倍数 ； —
ｍ— — 试 样 质 量 ，； ｇ
３） — 反 应 时 间 。 （ —
１ ．植酸酶活性保存率计算 ．２ ５
植 酸 酶 活性 保 存 率 （ ＝水 浴 处 理 后 植 酸 酶 活性 －水 ％）
浴 处理 前 植 酸酶 活性 ×１ ０ ０％
广 东饲料 第 ２ 卷第 ９ ０ 期
２ １ 年 ９月 ０１
不 同植 酸酶辑 品耐 温性 能 的研 究
崔细鹏 周平发 王敏 史宝军
（ 广东溢多利生物科技股份有限公司， 广东饲料添加剂生物工程技术研究开发中心， ５９６ ） 珠海 １００
［ 中图分类￣］ ８ ６７ ８ １． ［ 文献标识码】 Ａ ［ 文章编９１０ ５ ８ １ （Ｏ １ ０ — ０ ６ ０ １０ — ６３ ２ ｌ ）９ ０ ３ — ３
植 酸 酶 活Ｊ （ ｇ ｌ Ｕ／） ￣ － Ｆ
水 溶 液 经 高 温作 用 后 ， 酶活 保存 率在 ９ ％以上 ， ０ 充
分说 明样 品 ６ 耐高温植酸酶本 身具有一定 的耐热
性能 。
表 ４ 水 浴 法 （ ５ ） 植 酸 酶 活 性 的 影 响 结 果 ７℃ 对
式 中 ： — — 根 据 实 际样 液 的吸 光 值 由 直线 回 归 方程 计 ｃ
准确 称 取 Ｏ６０ ． ４ｇ在 １５ｏ烘 至 恒 重 的基 准 ８ ０ Ｃ 磷 酸 二 氢 钾 于 １０ｍ ０ Ｌ容 量 瓶 中 ，用 乙 酸 缓 冲 液 （．５ｍ ｌＬ ｐ ．） 解 ， 定容 至 １０ｍ 浓度 为 ０２ ｏ Ｈ５５溶 并 ｌ ０ Ｌ，
５ ． ｍ ｔｏ Ｌ ０ ｌ 。按照 表 １比例稀 释 成不 同浓 度， ０ ｏ ／ 按照
些解 决方 法 ： 高植 酸酶 添加 量 、 提 包被 技术 ， 用 采
表 ２进 行操 作 。 以无 机 磷为 横 坐标 ， 光值 为纵 坐 吸 标 ， 出 回归方程 （＝Ｘ ｈ 。 列 ｙａ＋ ）
表２
液 体植 酸酶 制 粒后 喷涂 技术 、 过 微生 物菌 株遗 传 通 改 良开发 耐高 温植 酸酶产 品等 。 实 验 旨在 介绍 如 本 何 检测 植酸 酶本 身是 否 具有 真正 的耐高 温性 能 ， 以 便 为 植 酸酶 能 在 高 温制 粒 情 况 下得 到更 好 的应 用 提供 参 考 。
骤 ，测 定 植 酸 酶 活 性 ，并 计 算 植 酸 酶 活性 保 存 率
要从事酶工程及发 酵工程等方 面的研究。
３ ・ ６ ຫໍສະໝຸດ ・广 东饲 料 第 ２ ０卷第 ９期
２ １ 年 ９月 ０１
（ ， ％）简称 ７ ５℃水 浴 法 。 １５ 酸 酶 活性保 存 率 的计算 ．植 １ ．植 酸酶 活性 计算 ．１ ５
清 液 ５ｍ 放入 到 已经 升 温至 ７ Ｌ， ５℃ 的恒温 水 浴锅 中处理 ，准确 计 时处 理 ５ ｎ后 取 出 ，用缓 冲 液 Ⅱ ｍｉ （Ｈ５５０１ 乙酸 一乙酸 钠 缓 冲 溶 液 ） 释 ， 样 ｐ ．，．Ｍ 稀 使
液酶浓度保存在 ０ ／ Ｌ ．Ｕｍ 左右待反应＿ ４ 按照表 ２ 步
酶活 性损 失较 大 。 随着 对植 酸酶 耐热 性方 面 的研究 工作 的发 展 ， 决 制粒对 植 酸酶 活 性 的影 响 目前 有 解
一
是通 过基 因工 程技 术 改造 得 到 的耐高 温 的植 酸酶 。
各 样 品 出厂酶 活保证 值 ： ０ ／ ５ ０Ｕｇ。 ０
１ ． 准曲线 绘制 ３标
在 日粮 中添 加 植 酸 酶不 仅 可 以提 高 动 物对 植 酸磷 的利 用 ，而且 可 以降 低磷 在粪 便 中的排 出量 ， 但 为 了发 挥 功效 植 酸 酶 必须 在 到 达 胃肠 道 时具 有 活性 。 固体剂 型植 酸 酶一般 在饲 料加 工调 质和 制粒 前添 加 ， 制粒 过程 中 ， 经过 高温 蒸 汽作用 ， 在 需 导致
１材料 与方 法
１１试 剂 及 仪 器 ．
参 照 Ｇ ／ ８ ３ — ０ ９ ＢＴ １ ６ ４ ２ ０ 。 １ ． ２酶样 品 来源
表 １
１ ． ４实验 步骤 与方 法
准 确称 取 植 酸 酶样 品 １ ．０ｇ 量 人 １ ０ｍＬ缓 ００ ， ０
冲溶液 Ｉ （Ｈ５５０１ 乙 酸 一乙酸钠 缓 冲溶 液 ） Ｉ ｐ ．，．Ｍ ， ６种 市 售 商 品耐 高 温植 酸 酶 ， 分别 依 次标 注 为 “ 品 ｌ样 品 ２ 样 品 ３ 样 品 ４ 样 品 ５ 样 品 ６ 均 样 、 、 、 、 、 ， 为 ２ １ 取得 。根据 各 自产 品说 明 ， 中样 品 １ ０ ０年 其 ５是 通过 剂 型技术 增 强植 酸 酶 的耐温 性能 ，样 品 ６
［ 收稿 日￣］ｏ １ ０ — ５ ２ ｌ— ８ １ ［ 作者简 介】 崔细鹏 （９ ０ 男， １８ 一） 汉族 ， 湖南长沙人 ， 学士 ， 主
提取 ４ ｉ。待溶解混合完成后 ， ５ ｎ ｍ 取部分上述溶液 转 移 到离 心 管 中 ，０ ０ｒ ｉ， 心 ｌｍｉ ， 上 ４０ ｒ ｎ 离 ／ ａ Ｏ ｎ后 取