高效液相色谱定量分析的误差来源与消除

高效液相色谱定量分析的误差来源与消除
石晓光
【摘要】在高效液相色谱定量分析中,实验结果的误差可能主要来源于样品的前处理、操作者的技术、仪器系统的稳定.
【期刊名称】《科技传播》
【年(卷),期】2011(000)003
【总页数】1页(P98-98)
【关键词】高效液相色谱;定量分析;误差
【作者】石晓光
【作者单位】浙江汇能动物药品有限公司,浙江杭州,310013
【正文语种】中文
【中图分类】R9
要提高分析结果的准确度，必须考虑在分析过程中可能产生的各种误差，采取有效措施，将这些误差减到最小。

1 样品处理过程中误差的来源
1.1 样品的前处理
样品的处理包括称量、溶解到标记稀释等步骤。

样品处理要尽量减少操作者的技术问题带来的误差，样品的稀释次数、稀释工具都是误差的来源[1] ，见表1、表2。

表1 溶液的制作称量标准物质的重量加溶剂制成溶液保存称量不准确器具的精
度差溶剂蒸发称量操作错误测量操作错误目标成分氧化、分解含有杂质稀释操作错误水合物不确定溶解度不够(温度变化)吸湿性溶液不均匀（浑浊，摇晃）
表2 目标成分稀释到容器上的可能性材料易吸附成分抑制吸附的溶剂玻璃阳离子[四级氨，金属离子] 降低PH胺添加高氯酸离子添加竞争离子金属阴离子螯合形成成分添加竞争离子[有机酸，b-二酮，单酚酮] 降低PH添加金属屏蔽剂聚合物疏水性高的成分降低极性
1.2 手动进样误差的来源
作为进样主力，仍是手动进样器。

如果使用方法不当，会引起色谱图问题，标准曲线无线性，重复性差。

定期对进样阀清洗和保养，可避免由进样阀引起的污染和堵塞，排除干扰峰，提高准确性。

进样量要大于定量环的3倍以上，这样才能防止部分样品由溢流管溢出从而导致定量分析的误差[2]。

2 仪器系统误差的来源
2.1 输液泵
在分析中因输液泵的故障[3]。

而引起分析结果的不准确是很常见。

如尘埃、垃圾等污染物进入输液流道内，引起配管堵塞，单向阀污染引起压力不稳，密封垫损坏导致系统漏液，柱塞干损坏引起无流动相流出，压力波动。

保证输液泵的稳定和正常运行对分析结果的准确性、降低误差是非常重要的。

2.2 检测器
用强溶剂清洗检测器，消除污染和堵塞[3]。

流动相脱气后使用，防止基线噪音，但氧气在流动相中的溶解度，跟流动相溶剂组成变化、温度上升、压力降低等因素的变化而析出，使流路内产生气泡，向检测器施加背压防止气泡的产生，见表3。

表3 检测器与耐压注：1）但池耐压到7Kg/cm2 ，2）但只有用Ag/AgCl参照电极时。

种类耐压（Kg/cm2）紫外（可见）吸光检测器～30电导检测器～30荧光检测器～5视差折光检测器 1弱（1）电化检测器 0（2）
2.3 流动相
引起流动相组成变化：配置引起的误差、线上混合泵失灵引起的比例误差、放置后组成的变化。

例如使用挥发性溶剂，真空脱气引起挥发性成分的损失；流动相吸收空气中二氧化碳引起PH改变[4]。

流动相组成变化对tR值大的组分影响最大。

反相溶剂微小的变化，会引起保留时间相当大的变化。

2.4 温度的变化
柱上没有恒温装置，通常会因温度引起保留时间的变化，应使用柱温箱，另外保持室内最小温差。

2.5 色谱柱
流动相对色谱柱进行冲洗30min后，每隔10min～20min重复进相同的样品，如保留时间不变表明以平衡。

应注意，柱可能对某一组分平衡，而对其它组分尚未平衡。

因此只有对所有的组分都平衡，才能正式分析样品。

2.6 分离
液相色谱分离引起的误差可用标准色谱图对照鉴别。

有时样品本身发生变化，杂质干扰。

处理时应注意基线的噪音和漂移、峰间的分辨率、峰形（拖尾、展宽等）。

3 结论
提高操作技能，工作认真谨慎，仔细观察可以控制的误差，尽量把能控制的误差减小到最低，分析结果的准确度将更高。

参考文献
【相关文献】
[1]刘珍.化验员读本[M].4版.化学工业出本社.上册:1-3：55-59.
[2]陈静，薛峰.液相色谱的故障分析与维修[J].Equipment Manufactring Technology，2007，
7:142，156.
[3]赵立平.液相色谱仪器的维护与故障消除[J].现代仪器，2004，2:56，58.
[4]吴方迪.色谱仪器维护与故障排除[M].化工工业出版社，2001:186-187.。