微生物实验实验一显微镜的使用及微生物形态观察详解演示文稿
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(4) 清洗血球计数板 计数后将血球计数板用自来水冲 洗干净，勿用硬物刷，吹干后镜检。若不干净，则必须重 复洗涤干净为止。
4-4
第27页，共31页。
五. 结果记录
1.
各中方格中菌数
12345 A
第一室
第二室
二室
B 菌数/ml 平均值
1 1
2.酵母菌死活细胞的比例？
六. 思考题
用此法计数的结果是活菌体还是死、活菌 体的总和？
(1) 25个中方格的计数板计算公式 总菌数 A 25 104 B 50000A B（个 / ml）
5 (2) 16个中方格的计数板计算公式 总菌数 A 16 104 B 32000A B（个 / ml）
5
4-3
第24页，共31页。
2. 区分酵母菌死活细胞基本原理
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝 色，还原型是无色。用美蓝对酵母菌的活细胞进 行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具 有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变 成无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活 细胞是无色的或淡蓝色，而死细胞或代谢作用的 衰老细胞则呈蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞 和活细胞进行鉴别。
4-5
第28页，共31页。
实验五活性污泥不同微生物种群的分 离培养与鉴别
一. 目的 1．掌握配制培养基和制备无菌水的方法。 2. 学会玻璃器皿的干热灭菌和培养基高压蒸汽 灭菌技术。
3. 学习倒平板的方法和两种分离微生物的基本 操作技术。
4. 学习微生物纯种分离、培养及菌落的观察。
5-1
第29页，共31页。
镜座（上有光源，亮度可调）
光学部分：目镜（10×、16×） 物镜（低倍镜10×、高倍镜40×、油镜100×） 聚光器（内有光圈调节） 光源（光量可调）
1-2
第3页，共31页。
显微镜放大倍数 = 目镜放大倍数 × 物镜放大倍数
物镜上的标识：
1 .25 (0.65、0.25) ↓
数值孔径
100(40、10） ↓
第20页，共31页。
五．实验结果
观察两种细菌的形态和颜色，绘出油镜下细菌 形态图，说明革兰氏染色的结果。
六．思考题
通过实验，你认为革兰氏染色成功关键是那一步？ 为了避免假阳性或假阴性出现，在对未知菌种做革兰氏 染色鉴定时，你认为应该怎样做？
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第21页，共31页。
实验四 微生物的计数
（显微镜直接计数法）
三. 实验内容
（一）培养基的制备及灭菌
1. 玻璃器皿的包扎与灭菌 （1） 六套培养皿一组, 用报纸包装。
（2） 取四支吸量管，在其吸端塞少许棉花后用长报纸条 包扎。
“油镜”。
第14页，共31页。
2．单染色法：
微生物不但个体微小，且无色半透明。要在显微镜下观 察清楚，必须染上颜色 。微生物细胞中含有大量的蛋白质 等一类两性电解质：在酸性溶液中结合质子带正电；在碱 性溶液中给出质子而带负电。等电点一般在pH=2~5。所以， 在中性、碱性或弱酸性溶液中，微生物细胞通常带负电荷。 碱性染料在电离时，染色部分是带正电荷的，容易与带负 电荷的菌体结合使之着色。经染色后的菌体细胞与背景形 成鲜明的对比，在显微镜下很容易观察。
３．显微镜的维护
（１）将载物台降至最低，取下标本片。 （２）将光量调至最小，关上电源。 （３）用镜头纸先檫目镜、物镜，再擦显微镜其它部分。 （４）将显微镜放入镜箱，还原。
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第6页，共31页。
（二）微生物形态的观察
1. 用低倍镜和高倍镜观察颤藻、曲 霉、青霉、酵母菌、放线菌、星藻示 范片。
2. 画出微生物形态图，并标明显 微镜的放大倍数。
微生物实验实验一显微镜的使 用及微生物形态观察详解演示
文稿
第1页，共31页。
优选微生物实验实验一显微镜 的使用及微生物形态观察
第2页，共31页。
三. 实验内容
(一) 显微镜的构造和使用方法
1. 构造
机械部分: 镜筒(双筒，两筒间距离可调，上装有目镜）
转换器（3孔，装有物镜） 载物台（中央圆孔、弹簧夹、移动器） 调节器（粗调、细调） 镜臂（支撑作用）
10 ╳ 10
颤藻
1-6
第7页，共31页。
实验二 活性污泥生物相的观察
一. 目的
1.学习测量微生物大小。 2.学习用压滴法制作标本片。
3. 观察几种原、后生动物，菌胶团及藻类个体形态。
二. 实验器材
1. 活性污泥混合液。 2. 单胞藻、新月藻、草履虫等示范片。
3. 显微镜、载玻片、盖玻片。
4. 目测微尺、物测微尺。
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第12页，共31页。
实验三 微生物的染色 一. 目的
1. 学习微生物的染色技术，掌握微生物的单 染色法和革兰氏染色法。
2. 学习油镜的操作。
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第13页，共31页。
二．染色原理和油镜的工作原理
1．油镜工作原理
油镜的放大倍数最大（100），故镜头焦距短，直径小, 但所需光照强度却最大。从标本片透过的光线是从玻片进 入空 气，再进入镜头。由于玻璃和空气的介质密度不同， 有些光会 因折射或反射而 不能进入 镜头。物象就显 现不清。 为了不使通过的 光线有 所损失，须在油镜与玻片 之间加入折射率和玻璃 (n=1.52）相仿的香柏油 (n=1.515)。故而称之为
一．目的 1.了解血球计数板的计数原理，掌握血球计数 板的计数方法。
2.观察酵母菌的形态，学习区分酵母菌死活 细胞的方法。
二. 实验器材 显微镜、血球计数板、酵母菌液、美蓝染液、 盖玻片。
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第22页，共31页。
三．原理
1. 血球计数板计数原理
血球计数板是一块特制的载玻片，有四条竖槽和一条横槽。 横槽两边的平台上各有一个有九个大方格的方格网，中间大方格
所以在脱色处理时，类脂被乙醇溶解，细胞壁的通透性增大，使 结晶紫—碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细 胞被染上复染剂的颜色。
3-3
第16页，共31页。
三．实验器材
1．显微镜、香柏油、接种环、酒精灯等。
2．结晶紫染液、碘液、95%乙醇、沙黄染液。
3．菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。
3-4
5．水洗 傾倒去染液，斜置载玻片，用洗瓶小水流 沿玻片边缘冲洗，直至水呈无色为止。
6．干燥 室温自然干燥或用吸水纸吸干。
ห้องสมุดไป่ตู้3-5
第18页，共31页。
(二)革兰氏染色
完成单染色的1~6步骤后
7. 媒染 加媒染剂碘液使之覆盖1分钟，水洗，吸水纸吸 干。 8. 脱色 滴加95% 乙醇数滴使之覆盖16秒钟，立即水洗, 吸干。
第26页，共31页。
2. 酵母菌液的计数
(1) 镜检计数室 对计数板进行镜检。若有污物，则 用自来水冲洗，用电吹风吹干后 才能 进行计数。
(2) 加样品 在血球计数板上盖上盖玻片, 用滴管将 摇匀的酵母菌液由盖玻片边的小槽滴一小滴,菌液会自 动进入计数室，静置5分钟。
(3) 计数 将血球计数板置于载物台上，先用低倍 镜找到计数室的位置，再换高倍镜计数。每计数室计5 个中格（四角和中间）。计数原则：计上不计下，计 左不计右。芽体占母细胞一半时算一个。
线重合，顺着刻度线找出另一条重合线。算出低倍镜下目 测微尺每格的长度。换高倍镜用同样方法标定出高倍 镜下目测微尺每格的长度。
2-2
第9页，共31页。
测 微 尺 示 意 图
(2) 微生物大小的测量
将物测微尺取下，换上标本片，选择适当物镜测量 微生物的长度和宽度占目测微尺的格数，再按目测微尺1 格的长度算出微生物的长度和宽度。
9. 复染 用沙黄（番红）液复染 2 分钟，水洗，吸干。
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第19页，共31页。
(二) 镜检
先分别用低倍镜和高倍镜找到要观察的样品区域 后，用转换器将物镜转到空挡，在样品区域滴加香 柏油，再将油镜慢慢转到工作位置浸入油中。若不 清晰，慢慢转动微调直至清楚。
油镜用完后，用镜头纸沾取乙醇-乙醚混合液檫 拭油镜头。再用干的镜头纸檫干镜头。
3-2
第15页，共31页。
3．革兰氏染色法： 革兰氏染色法将细菌分为G＋和G- ，这由两类细菌细胞壁的结
构和组成的不同而决定。用结晶紫初染后，所有的细菌都染上蓝 紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘的复合物，增 强了染料与菌体的结合力。用乙醇脱色处理时，两类细菌的脱色
效果是不同的。G＋细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构 组成，且壁厚、类脂含量低，用乙醇脱色时使细胞壁脱水、网 状结构孔径缩小，通透性降低，使得结晶紫—碘的复合物不易 被洗脱而保留在细胞内。虽经洗脱和复染仍然保持初染剂的蓝 紫色。G-细菌则不同，由于其细胞壁肽聚糖层较薄，类脂含量高，
节合适光量。
（2）转动转换器，将低倍镜移至正下方。调节两目镜镜筒间的
距离。
（3）将载玻片放在载物台上夹住，移动观察对象于圆孔正中。
（4）侧视物镜，转动粗调将载物台上移，至载玻片距物镜头约
５ｍｍ时停止。
（5）双眼向目镜里观察，同时旋转粗调节器使载物台缓慢下移，
若标本显出但不清晰，可用细调节器调至清晰。若粗调旋转太快，超过
160 / 0.17
↓↓
放大倍数 镜筒长 盖玻片厚度
数值孔径： N.A. = n﹒s i n α/ 2 n — 玻片和物镜之间的折射率。 α— 光线最大射入角。
分辨率（最大可分辨距离）＝λ/ N.A.
λ—波长
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第4页，共31页。
2. 显微镜的使用
低倍镜的使用
（1）双手取出显微镜置于实验台上，接上电源，打开开关，调
二. 实验器材
1.培养皿、试管、吸管、锥形瓶等。 2.牛皮纸等包扎材料。 3. 10% HCl、10% NaOH、精密pH试纸。 4. 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂。 5. 高压蒸汽灭菌锅等。 6. 活性污泥。 7．接种环、酒精灯、恒温箱(培养箱)等。 8．结晶紫染液。 9. 显微镜、载玻片
第30页，共31页。
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第10页，共31页。
2.压滴法观察活性污泥中生物相
（1）压滴法制作标本片 用滴管取活性污泥混合液一小滴，放在
载玻片中央。取一块盖玻片先将一边与混合 液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在混 合液上。片内不能有气泡。 （2）观察活性污泥中生物相
先用低倍镜观察活性污泥中菌胶团、原 生动物、后生动物。画出所观察到的生物形 态图。标明名称、放大倍数和微生物的大小。
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第8页，共31页。
三. 实验内容
1. 微生物大小的测定 (1) 标定目镜测微尺
装在目镜上的目测微尺中央刻有等分为100格或 更多格的标尺，使用前要用物测微尺标定。物测微尺 中央刻有1mm长的标尺，等分为100格，10μm／格。
将物测微尺的刻度朝上放在载物台上，用低倍镜找出物测微 尺的刻度，移动物测微尺使其第一条线与目测微尺的第一条
焦点没有看到标本，则必须重复（4）、
(5)步骤。不能在眼睛观察
目镜的同时旋转粗调，以防物镜与载玻片相碰撞，造成损坏。
1-4
第5页，共31页。
高倍镜的使用
在用低倍镜找到观察目标后，若需要进一步放大观察，将其移到 视野中央。用转换器将高倍镜移到镜筒下方，将光量调大一点。若标本
不清晰，用细调上下转动使之清晰。（此时不再动粗调）
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四．实验内容
(一) 单染色
1．涂片 取一块载玻片，用记号笔划分出两区域并做上记
号，在两区域中央各滴半滴无菌水，用接种环以无菌操作法分 别取两种菌种在左右两滴水中，和匀后涂成薄膜。
2．干燥
3．固定
4．染色
分钟。
室温自然干燥或吹干。 涂面朝上，通过火焰2~3次。 在涂片薄膜上滴加结晶紫染液，使之覆盖2
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3. 观察几种藻类的个体形态 观察几种藻类的个体形态，画出生物形态图，标
明名称、放大倍数。
四.实验结果 1.低、高倍镜下目测微尺每格的长度。 2.画出2~3种污泥中所观察到的生物形态图。标
明名称、放大倍数和微生物的大小。 3.画出两种藻类生物形态图，标明名称、放大倍
数和微生物的大小。 。
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四. 实验内容
1. 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别
(1) 在载玻片上加半滴美蓝染液，在染液上滴一滴 菌液。取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后 慢慢将盖玻片放下盖在菌液上。
(2) 将标本片放3分钟后，先用低倍镜然后用高 倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并根据颜色 来区别死活细胞。
为计数室：边长为１ｍｍ，深为0.1mm，容积为0.1mm3(10-4ml)。
计数室有两种规格：一是分为16个中方格，每中方格中有25个小方格； 另一种是分为25个中方格，每中方格有16个小方格。两种都共有400 个小方格。
血球计数板正面结构图
计数室放大图
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计数：
数出5个中方格中的总菌数A，若菌液的稀释倍 数为B，则计算公式如下：
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五. 结果记录
1.
各中方格中菌数
12345 A
第一室
第二室
二室
B 菌数/ml 平均值
1 1
2.酵母菌死活细胞的比例？
六. 思考题
用此法计数的结果是活菌体还是死、活菌 体的总和？
(1) 25个中方格的计数板计算公式 总菌数 A 25 104 B 50000A B（个 / ml）
5 (2) 16个中方格的计数板计算公式 总菌数 A 16 104 B 32000A B（个 / ml）
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2. 区分酵母菌死活细胞基本原理
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝 色，还原型是无色。用美蓝对酵母菌的活细胞进 行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具 有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变 成无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活 细胞是无色的或淡蓝色，而死细胞或代谢作用的 衰老细胞则呈蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞 和活细胞进行鉴别。
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实验五活性污泥不同微生物种群的分 离培养与鉴别
一. 目的 1．掌握配制培养基和制备无菌水的方法。 2. 学会玻璃器皿的干热灭菌和培养基高压蒸汽 灭菌技术。
3. 学习倒平板的方法和两种分离微生物的基本 操作技术。
4. 学习微生物纯种分离、培养及菌落的观察。
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镜座（上有光源，亮度可调）
光学部分：目镜（10×、16×） 物镜（低倍镜10×、高倍镜40×、油镜100×） 聚光器（内有光圈调节） 光源（光量可调）
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显微镜放大倍数 = 目镜放大倍数 × 物镜放大倍数
物镜上的标识：
1 .25 (0.65、0.25) ↓
数值孔径
100(40、10） ↓
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五．实验结果
观察两种细菌的形态和颜色，绘出油镜下细菌 形态图，说明革兰氏染色的结果。
六．思考题
通过实验，你认为革兰氏染色成功关键是那一步？ 为了避免假阳性或假阴性出现，在对未知菌种做革兰氏 染色鉴定时，你认为应该怎样做？
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实验四 微生物的计数
（显微镜直接计数法）
三. 实验内容
（一）培养基的制备及灭菌
1. 玻璃器皿的包扎与灭菌 （1） 六套培养皿一组, 用报纸包装。
（2） 取四支吸量管，在其吸端塞少许棉花后用长报纸条 包扎。
“油镜”。
第14页，共31页。
2．单染色法：
微生物不但个体微小，且无色半透明。要在显微镜下观 察清楚，必须染上颜色 。微生物细胞中含有大量的蛋白质 等一类两性电解质：在酸性溶液中结合质子带正电；在碱 性溶液中给出质子而带负电。等电点一般在pH=2~5。所以， 在中性、碱性或弱酸性溶液中，微生物细胞通常带负电荷。 碱性染料在电离时，染色部分是带正电荷的，容易与带负 电荷的菌体结合使之着色。经染色后的菌体细胞与背景形 成鲜明的对比，在显微镜下很容易观察。
３．显微镜的维护
（１）将载物台降至最低，取下标本片。 （２）将光量调至最小，关上电源。 （３）用镜头纸先檫目镜、物镜，再擦显微镜其它部分。 （４）将显微镜放入镜箱，还原。
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（二）微生物形态的观察
1. 用低倍镜和高倍镜观察颤藻、曲 霉、青霉、酵母菌、放线菌、星藻示 范片。
2. 画出微生物形态图，并标明显 微镜的放大倍数。
微生物实验实验一显微镜的使 用及微生物形态观察详解演示
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优选微生物实验实验一显微镜 的使用及微生物形态观察
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三. 实验内容
(一) 显微镜的构造和使用方法
1. 构造
机械部分: 镜筒(双筒，两筒间距离可调，上装有目镜）
转换器（3孔，装有物镜） 载物台（中央圆孔、弹簧夹、移动器） 调节器（粗调、细调） 镜臂（支撑作用）
10 ╳ 10
颤藻
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实验二 活性污泥生物相的观察
一. 目的
1.学习测量微生物大小。 2.学习用压滴法制作标本片。
3. 观察几种原、后生动物，菌胶团及藻类个体形态。
二. 实验器材
1. 活性污泥混合液。 2. 单胞藻、新月藻、草履虫等示范片。
3. 显微镜、载玻片、盖玻片。
4. 目测微尺、物测微尺。
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实验三 微生物的染色 一. 目的
1. 学习微生物的染色技术，掌握微生物的单 染色法和革兰氏染色法。
2. 学习油镜的操作。
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二．染色原理和油镜的工作原理
1．油镜工作原理
油镜的放大倍数最大（100），故镜头焦距短，直径小, 但所需光照强度却最大。从标本片透过的光线是从玻片进 入空 气，再进入镜头。由于玻璃和空气的介质密度不同， 有些光会 因折射或反射而 不能进入 镜头。物象就显 现不清。 为了不使通过的 光线有 所损失，须在油镜与玻片 之间加入折射率和玻璃 (n=1.52）相仿的香柏油 (n=1.515)。故而称之为
一．目的 1.了解血球计数板的计数原理，掌握血球计数 板的计数方法。
2.观察酵母菌的形态，学习区分酵母菌死活 细胞的方法。
二. 实验器材 显微镜、血球计数板、酵母菌液、美蓝染液、 盖玻片。
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三．原理
1. 血球计数板计数原理
血球计数板是一块特制的载玻片，有四条竖槽和一条横槽。 横槽两边的平台上各有一个有九个大方格的方格网，中间大方格
所以在脱色处理时，类脂被乙醇溶解，细胞壁的通透性增大，使 结晶紫—碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细 胞被染上复染剂的颜色。
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三．实验器材
1．显微镜、香柏油、接种环、酒精灯等。
2．结晶紫染液、碘液、95%乙醇、沙黄染液。
3．菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。
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5．水洗 傾倒去染液，斜置载玻片，用洗瓶小水流 沿玻片边缘冲洗，直至水呈无色为止。
6．干燥 室温自然干燥或用吸水纸吸干。
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(二)革兰氏染色
完成单染色的1~6步骤后
7. 媒染 加媒染剂碘液使之覆盖1分钟，水洗，吸水纸吸 干。 8. 脱色 滴加95% 乙醇数滴使之覆盖16秒钟，立即水洗, 吸干。
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2. 酵母菌液的计数
(1) 镜检计数室 对计数板进行镜检。若有污物，则 用自来水冲洗，用电吹风吹干后 才能 进行计数。
(2) 加样品 在血球计数板上盖上盖玻片, 用滴管将 摇匀的酵母菌液由盖玻片边的小槽滴一小滴,菌液会自 动进入计数室，静置5分钟。
(3) 计数 将血球计数板置于载物台上，先用低倍 镜找到计数室的位置，再换高倍镜计数。每计数室计5 个中格（四角和中间）。计数原则：计上不计下，计 左不计右。芽体占母细胞一半时算一个。
线重合，顺着刻度线找出另一条重合线。算出低倍镜下目 测微尺每格的长度。换高倍镜用同样方法标定出高倍 镜下目测微尺每格的长度。
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测 微 尺 示 意 图
(2) 微生物大小的测量
将物测微尺取下，换上标本片，选择适当物镜测量 微生物的长度和宽度占目测微尺的格数，再按目测微尺1 格的长度算出微生物的长度和宽度。
9. 复染 用沙黄（番红）液复染 2 分钟，水洗，吸干。
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(二) 镜检
先分别用低倍镜和高倍镜找到要观察的样品区域 后，用转换器将物镜转到空挡，在样品区域滴加香 柏油，再将油镜慢慢转到工作位置浸入油中。若不 清晰，慢慢转动微调直至清楚。
油镜用完后，用镜头纸沾取乙醇-乙醚混合液檫 拭油镜头。再用干的镜头纸檫干镜头。
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3．革兰氏染色法： 革兰氏染色法将细菌分为G＋和G- ，这由两类细菌细胞壁的结
构和组成的不同而决定。用结晶紫初染后，所有的细菌都染上蓝 紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘的复合物，增 强了染料与菌体的结合力。用乙醇脱色处理时，两类细菌的脱色
效果是不同的。G＋细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构 组成，且壁厚、类脂含量低，用乙醇脱色时使细胞壁脱水、网 状结构孔径缩小，通透性降低，使得结晶紫—碘的复合物不易 被洗脱而保留在细胞内。虽经洗脱和复染仍然保持初染剂的蓝 紫色。G-细菌则不同，由于其细胞壁肽聚糖层较薄，类脂含量高，
节合适光量。
（2）转动转换器，将低倍镜移至正下方。调节两目镜镜筒间的
距离。
（3）将载玻片放在载物台上夹住，移动观察对象于圆孔正中。
（4）侧视物镜，转动粗调将载物台上移，至载玻片距物镜头约
５ｍｍ时停止。
（5）双眼向目镜里观察，同时旋转粗调节器使载物台缓慢下移，
若标本显出但不清晰，可用细调节器调至清晰。若粗调旋转太快，超过
160 / 0.17
↓↓
放大倍数 镜筒长 盖玻片厚度
数值孔径： N.A. = n﹒s i n α/ 2 n — 玻片和物镜之间的折射率。 α— 光线最大射入角。
分辨率（最大可分辨距离）＝λ/ N.A.
λ—波长
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2. 显微镜的使用
低倍镜的使用
（1）双手取出显微镜置于实验台上，接上电源，打开开关，调
二. 实验器材
1.培养皿、试管、吸管、锥形瓶等。 2.牛皮纸等包扎材料。 3. 10% HCl、10% NaOH、精密pH试纸。 4. 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂。 5. 高压蒸汽灭菌锅等。 6. 活性污泥。 7．接种环、酒精灯、恒温箱(培养箱)等。 8．结晶紫染液。 9. 显微镜、载玻片
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2.压滴法观察活性污泥中生物相
（1）压滴法制作标本片 用滴管取活性污泥混合液一小滴，放在
载玻片中央。取一块盖玻片先将一边与混合 液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在混 合液上。片内不能有气泡。 （2）观察活性污泥中生物相
先用低倍镜观察活性污泥中菌胶团、原 生动物、后生动物。画出所观察到的生物形 态图。标明名称、放大倍数和微生物的大小。
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三. 实验内容
1. 微生物大小的测定 (1) 标定目镜测微尺
装在目镜上的目测微尺中央刻有等分为100格或 更多格的标尺，使用前要用物测微尺标定。物测微尺 中央刻有1mm长的标尺，等分为100格，10μm／格。
将物测微尺的刻度朝上放在载物台上，用低倍镜找出物测微 尺的刻度，移动物测微尺使其第一条线与目测微尺的第一条
焦点没有看到标本，则必须重复（4）、
(5)步骤。不能在眼睛观察
目镜的同时旋转粗调，以防物镜与载玻片相碰撞，造成损坏。
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高倍镜的使用
在用低倍镜找到观察目标后，若需要进一步放大观察，将其移到 视野中央。用转换器将高倍镜移到镜筒下方，将光量调大一点。若标本
不清晰，用细调上下转动使之清晰。（此时不再动粗调）
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四．实验内容
(一) 单染色
1．涂片 取一块载玻片，用记号笔划分出两区域并做上记
号，在两区域中央各滴半滴无菌水，用接种环以无菌操作法分 别取两种菌种在左右两滴水中，和匀后涂成薄膜。
2．干燥
3．固定
4．染色
分钟。
室温自然干燥或吹干。 涂面朝上，通过火焰2~3次。 在涂片薄膜上滴加结晶紫染液，使之覆盖2
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3. 观察几种藻类的个体形态 观察几种藻类的个体形态，画出生物形态图，标
明名称、放大倍数。
四.实验结果 1.低、高倍镜下目测微尺每格的长度。 2.画出2~3种污泥中所观察到的生物形态图。标
明名称、放大倍数和微生物的大小。 3.画出两种藻类生物形态图，标明名称、放大倍
数和微生物的大小。 。
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四. 实验内容
1. 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别
(1) 在载玻片上加半滴美蓝染液，在染液上滴一滴 菌液。取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后 慢慢将盖玻片放下盖在菌液上。
(2) 将标本片放3分钟后，先用低倍镜然后用高 倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并根据颜色 来区别死活细胞。
为计数室：边长为１ｍｍ，深为0.1mm，容积为0.1mm3(10-4ml)。
计数室有两种规格：一是分为16个中方格，每中方格中有25个小方格； 另一种是分为25个中方格，每中方格有16个小方格。两种都共有400 个小方格。
血球计数板正面结构图
计数室放大图
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计数：
数出5个中方格中的总菌数A，若菌液的稀释倍 数为B，则计算公式如下：