Rabbit Anti-HGF

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GoatAnti-RabbitFcspecificIgG产品使用说明书

Goat Anti-Rabbit (Fc specific)IgG产品使用说明书
技术背景： NanoGen TM提供的多克隆抗体主要来自于宿主动物（BALB/c小鼠、家兔、山羊）抗血清、鸡卵黄等，单克隆抗体主要来自于小鼠杂交瘤克隆株。

本产品为以兔IgG Fc片段作为免疫原，制备山羊抗血清，经阴离子交换柱纯化，去除羊血清中其他非特异蛋白，特异识别兔IgG Fc片段的抗体，酶类如碱磷酶（AP）、辣根过氧化物酶（HRP）及其衍生物，荧光染料如荧光素（FITC）、罗丹明及其衍生物，TRITC，青色素（Cy3），藻红蛋白（R-PE）标记后，可用于科学研究。

与鼠IgG、山羊IgG和人IgG 无交叉反应。

二抗克隆性：多克隆
二抗免疫原：兔IgG Fc片段
二抗宿主动物：山羊
应用：免疫组化、免疫荧光、蛋白印记、细胞相关分析实验、流式细胞术。

产品推荐使用浓度：Western blotting/1:5000-1:10000
Enzyme immunoassays/1:1000-1:5000
具体实验过程中，应根据不同的使用用途选择IgG最适工作浓度。

保存说明：自生产之日起，-20℃可保存1年，经常使用可置4℃；为了更好保存、使用试剂，使用前后请适当离心（盖帽）；禁止反复冻溶。

备注：本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

免疫兔制备抗体流程

免疫兔制备抗体流程英文回答：Preparation of Antibodies in Immunized Rabbits.The process of producing antibodies in immunizedrabbits involves several key steps:1. Immunization: The rabbit is injected with the antigen of interest, which triggers an immune response. The antigen can be a protein, peptide, or other substance that the body recognizes as foreign.2. Antibody Production: In response to the antigen, the rabbit's immune system produces antibodies that arespecific to the antigen. These antibodies are produced by B cells, which are a type of white blood cell.3. Collection of Serum: Once the rabbit has produced a sufficient level of antibodies, blood is collected from therabbit. The serum, which contains the antibodies, is then separated from the blood cells.4. Purification of Antibodies: The serum is thenpurified to isolate the antibodies of interest. This can be done using various techniques, such as affinity chromatography or protein A/G purification.5. Characterization of Antibodies: The purified antibodies are characterized to determine their specificity, affinity, and other properties. This is important for ensuring that the antibodies are suitable for theirintended use.中文回答：免疫兔制备抗体流程。

Immunoway免疫组织化学试剂 Polymer HRP Goat Anti Rabbit I

Polymer HRP * Goat Anti Rabbit IgG(H+L)【产品货号】RS0010【产品名称】1、通用名称：Polymer HRP羊抗兔二抗即用型（免疫组织化学）2、英文名称：Polymer HRP * Goat Anti Rabbit IgG(H+L)【包装规格】类别规格工作液10mL/瓶、100mL/瓶【预期用途】免疫组织化学染色，配合Immunoway常规兔来源的浓缩型或即用型一抗使用。

【作用原理】数个过氧化物酶分子和数个二抗分子结合在同一多聚体上构成了一种简单而灵敏的显色系统【主要组成成份】磷酸盐缓冲液0.01mol/LGoat anti Rabbit HRP 大于0.05mg/L【储存条件及有效期】1、储存要求：2℃～8℃密封保存。

2、有效期：一年。

【样本要求】新鲜活检或外科样本组织，甲醛固定，固定时间8-24小时要求取材、脱水、石蜡包埋并制成蜡块。

配合Immunoway常规浓缩型或即用型一抗使用。

【检验方法】1、人体组织样本先经甲醛固定。

2、固定后的组织经过脱水等一系列操作制备成蜡块。

3、用切片机把组织蜡块切成切片。

4、手工操作免疫组化实验。

常规推荐步骤如下：4.1. 将需要进行实验的组织切片取出，插入玻片架上后放入60-65℃的烤箱中，烤片1-1.5h。

4.2. 将切片置于以下染色缸中梯度反应：二甲苯10分钟×2次二甲苯5分钟无水乙醇5分钟×2次95%乙醇5分钟85%乙醇5分钟PBS清洗3分钟×3次4.3. 抗原修复（方法见一抗供应商，或采用常规高压、微波、酶修复等）4.4.根据组织大小直接滴加内源性过氧化物酶阻断剂到组织上，通常为100uL, 直至完全覆盖组织。

室温10分钟，PBS清洗3分钟×3次。

此步骤通常在水浴法、酶法等温和抗原修复后加入。

或者组织本身含有较多内源性过氧化物酶中加入。

4.5. 根据组织大小滴加一抗到组织上，通常为100uL,直至完全覆盖组织。

猪瘟兔体交互免疫试验原理

猪瘟兔体交互免疫试验原理概述猪瘟是一种由猪瘟病毒引起的高度传染性、致死性的动物传染病。

为了防控和治疗这种疾病，科学家们开展了大量的实验室研究。

其中，猪瘟兔体交互免疫试验被广泛应用于检测和鉴定抗体，以评估生物样品中对猪瘟抗原的免疫反应。

基本原理免疫反应与抗体免疫系统是机体对抗外来入侵的重要防线。

当机体暴露在一种新的抗原（如细菌、寄生虫或者其他外源性物质）时，机体会产生特异性的抗体来识别并中和这些外来入侵物。

抗体是一类由B细胞分泌的蛋白质分子，也称为免疫球蛋白（immunoglobulin, Ig）。

每个抗体分子都具有两个相同的重链和两个相同的轻链。

通过变异区域（variable region），每个抗体可以识别并结合特定的抗原。

猪瘟兔体交互免疫试验猪瘟兔体交互免疫试验是一种间接的免疫反应检测方法，用于鉴定生物样品中对猪瘟抗原的免疫反应。

该方法通过将待检样品与已知含有抗体的标准血清或者已知抗原的标准血清进行反应，来判断待检样品中是否存在特异性的抗体。

实验步骤以下是一般情况下进行猪瘟兔体交互免疫试验的主要步骤：1.准备实验所需材料和设备：包括标准血清、待检样品、洗涤缓冲液、酶联免疫吸附试剂（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）板、底物等。

2.预处理标本：将待检样品进行适当的处理，以去除可能干扰试验结果的物质。

3.涂覆标准血清或抗原：将已知含有抗体或者抗原的溶液加入到ELISA板中，并使其在板上均匀分布。

4.孵育：将待检样品与已涂覆的标准血清或抗原一起加入到ELISA板中，然后在适当的温度和时间条件下进行孵育，以促进抗体与抗原的结合。

5.洗涤：通过洗涤缓冲液洗去未结合的物质，以减少背景干扰。

6.添加二抗：加入与待检样品中可能存在的免疫球蛋白特异性结合的二抗。

这些二抗通常是由其他动物（如兔子）产生，并且被标记有酶或荧光物质，以便于检测。

7.孵育和洗涤：将ELISA板再次孵育和洗涤，以使未结合的二抗被洗去。

兔IFRG基因的克隆及表达分析

果显示兔ＩＲ基因在大肠杆菌中得到了良好的表达。ＦＧ关键词：ＲＩＧ基因；因克隆；ＴＰＲ；核表达Ｆ基Ｒ —Ｃ原中图分类号：７５Ｑ８Ｑ８；７６文献标识码：Ａ文章编号：０８— ６２２１）３— ０５— ３１０９３（００００００
ｔ，ｅｅ３０６；．Ｃｌｇｆｉｃｅｃ，ｕａｇＮｒｌｉｅｓｙＦｙｎｎｕ２６４，ＣｉａｙＨｆｉ０３３ｏｌｅｏｆＳｉｎｅＦｙｎｏｍａＵｎｖｒｉ，ｕａｇＡｈｉ３０１ｈｎ）２ｅＬｅｔ
（．ＣｌｇｆｉｃｎｅＡｈｉｎｖｒｔ，ｅｅ２０３；．ＣｌｇｆｎａＳｉｃ，ｎｕＡｒｕｕａＵｉｒ— １ｏｅｅｏＬｅＳｉｃ，ｎｕＵｉｓｙＨｆ３０９２ｏｅｅｏＡｉｌｃｎｅＡｈｉｇｃｌｒｎｅｓｌｆｅｅｉｉｌｍｅｉｔｌｖｉ
ｐｅｓｎｖｃｏｐＴ４（），ＧｂｅｏｂｅｎｙｅｉｓｏｃｍｂａｔＧＭ—一ＧａｄｐＴ（）ｔｅｃｒｃｒｃｍｂｒｉｅｔＥ－１ｅ一ｓｏｒ朋ｙｈｕｌｅｚｍｓｇｔｎｏｒｏｉｎｐＥＴ，ｎＥ４１Ｃ，ｈｒｔｅｏｉｔｄｄｅｉｆｅｎ朋ｏｅ —
摘要：实验通过对兔子基因组ＤＡ进行ＰＲ获得兔ＩＲ基因，其克隆到ｐＥＴ载体，酶切鉴定和测序结ＮＣＦＧ将ＧＭ— 双

兔多克隆抗体的制备流程

兔多克隆抗体的制备流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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1. 免疫原制备。

选择具有免疫原性的抗原，如蛋白质、多肽或多糖等。

奥曲肽抑制重症急性胰腺炎大鼠诱生型一氧化氮合酶

・善宁园地・奥曲肽抑制重症急性胰腺炎大鼠诱生型一氧化氮合酶黄鹤光　冷希圣　杨波作者单位:100044　北京市,北京大学人民医院普通外科(黄鹤光、杨波现在福建医科大学附属协和医院普外科) 一般认为奥曲肽(善宁)治疗急性胰腺炎的显著疗效常与抑制胰酶、消化液分泌有关〔1〕,重症急性胰腺炎(S AP )急性期常伴有急剧的全身病理生理改变,细胞因子和炎症介质的过度表达可引起急性胰腺炎组织损伤〔2,3〕,诱生型一氧化氮的过量产生可明显引起细胞毒性作用以及脏器血供的低灌注〔4〕。

本研究探讨奥曲肽缓解急性胰腺炎的病情,是否还通过抑制过量产生的一氧化氮(NO )。

材料和方法1.实验动物:雄性S D 大鼠200～250g128只,清洁级,购自中国科学院上海实验动物中心。

随机分为假手术组8只,S AP 组60只,治疗组60只,其中S AP 组和治疗组各观察20只动物死亡率。

2.大鼠重症急性胰腺炎模型制作:参照Schmidt等〔5〕方法并加以改进氯胺酮(50mg/kg )和3%苯比妥钠(30mg/kg )腹腔麻醉经右颈外静脉行右心房插管,无菌条件下,手术显微镜下,十二指肠降部的肠壁处逆行穿刺胆胰管,微量药液注射泵注射5%牛磺胆酸钠(Sigma 公司)110ml/kg ,注射速度012ml/min ,注射持续10min 。

肉眼下,大鼠胰腺组织出现充血、水肿后方开始后续实验。

假手术组仅翻动胰腺后关腹,治疗组于诱发S AP 后皮下注射奥曲肽(诺华公司),每次14μg/kg q8h ×2d 。

3.诱发重症急性胰腺炎6,12,24,48h 后,自大鼠右心房导管抽血1ml ,肝素抗凝,离心后吸取上清液置-20℃冰箱保存待测。

重氮化反应法测定NO(试剂由南京建成生物工程研究所提供)。

常规方法测血清淀粉酶和血钙。

4.取大鼠胰头3mm ×3mm ×3mm 大小组织块,作4μm 厚切片行HE 染色切片,病理检查。

兔子肝细胞生长因子elisa试剂盒使用说明书

兔子肝细胞生长因子（HGF）elisa试剂盒使用说明书Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml X 1瓶酶标试剂：3 ml X 1 瓶（48）/6 ml X 1 瓶（96）【兔子肝细胞生长因子（HGF） elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算以标准物的浓度为横坐标，0D值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的0D值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml X 1 瓶0.5ml X 1 瓶2-8C保存酶标包被板：1X 481X 962-8 C保存样品稀释液：3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存显色剂A液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存显色剂B液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存终止液：3ml X 1 瓶6ml X 1 瓶2-8 C保存浓缩洗涤液：（20ml X 20倍）X 1瓶（20ml X 30倍）X 1瓶2-8C保存实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔子肝细胞生长因子（HGF）水平。

用纯化的兔子肝细胞生长因子（HGF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肝细胞生长因子（HGF），再与HRP标记的肝细胞生长因子（HGF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的肝细胞生长因子（HGF）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）,通过标准曲线计算样品中兔子肝细胞生长因子（HGF）浓度。

目的：本试剂盒用于测定兔子血清，血浆及相关液体样本中肝细胞生长因子（HGF）的含量。

《2024年Bdh2基因敲除的小鼠胚胎干细胞的生物特性研究》范文

《Bdh2基因敲除的小鼠胚胎干细胞的生物特性研究》篇一一、引言近年来，随着基因编辑技术的发展，基因敲除技术已成为研究基因功能的重要手段。

Bdh2基因作为一种重要的生物分子，其功能在多种生物过程中发挥着重要作用。

本研究以Bdh2基因敲除的小鼠胚胎干细胞为研究对象，探讨其生物特性的变化。

本文旨在阐述实验方法、结果与讨论以及相关的文献回顾，从而全面了解Bdh2基因敲除后小鼠胚胎干细胞的生物特性。

二、文献回顾Bdh2基因是一种具有氧化还原酶活性的基因，参与了细胞的多种生物过程。

在之前的研究中，Bdh2基因被认为与能量代谢、细胞凋亡等生理过程密切相关。

近年来，关于Bdh2基因敲除小鼠模型的研究逐渐增多，揭示了其在胚胎发育、细胞增殖及分化等方面的作用。

然而，关于Bdh2基因敲除后小鼠胚胎干细胞的生物特性研究尚不充分，因此，本研究具有重要的研究价值。

三、实验方法本研究采用CRISPR/Cas9基因编辑技术对小鼠胚胎干细胞进行Bdh2基因敲除，然后通过细胞培养、细胞增殖、分化及转录组测序等技术手段，对敲除后的小鼠胚胎干细胞的生物特性进行研究。

四、实验结果1. 细胞形态学观察：Bdh2基因敲除后的小鼠胚胎干细胞在形态上与野生型干细胞存在一定差异，表现为细胞大小、形状及生长速度等方面的变化。

2. 细胞增殖能力：通过细胞计数和增殖曲线分析，发现Bdh2基因敲除后的小鼠胚胎干细胞的增殖能力较野生型干细胞有所降低。

3. 细胞分化能力：通过诱导分化实验，发现Bdh2基因敲除后的小鼠胚胎干细胞在向不同类型细胞分化的过程中存在差异，部分类型的分化能力增强，而部分类型的分化能力减弱。

4. 转录组测序分析：通过转录组测序分析，发现Bdh2基因敲除后的小鼠胚胎干细胞的基因表达谱发生了显著变化，涉及多种生物过程和信号通路。

五、讨论根据实验结果，我们可以得出以下结论：Bdh2基因在小鼠胚胎干细胞的生长、增殖和分化过程中发挥重要作用。

Bdh2基因敲除后，小鼠胚胎干细胞的形态、增殖能力和分化能力均发生了一定程度的变化。

Rabbit Anti-chicken IgG FITC

北京索莱宝科技有限公司Rabbit Anti-chicken IgG/FITCCat.Number:K0035R-FITCQuantity size：0.1mLStorage：Shipped at4℃,Store at-20℃(Avoid repeated freeze/thaw cycles).Concentration:2mg/mL Buffer=0.01M TBS(pH7.4)with1%BSA,0.03%Proclin300and50%Glycerol. Background:Immunoglobulin G(IgG),is one of the most abundant proteins in serum with normal levels between8-17mg/mL in adult blood.IgG is important for our defence against microorganisms and the molecules are produced by B lymphocytes as a part of our adaptive immune response.The IgG molecule has two separate functions;to bind to the pathogen that elicited the response and to recruit other cells and molecules to destroy the antigen.The variability of the IgG pool is generated by somatic recombination and the number of specificities in an individual at a given time point is estimated to be1011variants.Also known as:Immunoglobulin GSpecificity:Rabbit Polyclonal IgG,affinity purified by Protein A.Reacts with:chk.Immunogen:Full length plasma protein.Predicted Molecular Weight:150kDa.Application:Flow-Cyt=1:100-1000IF=1:100-1000Excitation spectrum:495nmEmission spectrum:519nmNot yet tested in other applications.Optimal working dilutions must be determined by the end user.Important Note:This product as supplied is intended for research use only,not for use in human,therapeutic or diagnostic applications.Page1of1。

免疫兔制备抗体流程

免疫兔制备抗体流程英文回答：Preparation of Antibodies from Immunized Rabbits.Introduction.Antibodies are specialized proteins produced by the immune system in response to exposure to foreign substances, known as antigens. They are essential for recognizing and neutralizing pathogens, such as bacteria and viruses. Immunized rabbits are a common source of antibodies for research and diagnostic purposes.Procedure.1. Immunization.Rabbits are initially immunized with the target antigen. This can be done through various routes, includingsubcutaneous, intramuscular, or intraperitoneal injection. The antigen is often formulated with an adjuvant, such as Freund's adjuvant, to enhance the immune response.2. Antibody Production.Following immunization, the rabbit's immune system produces antibodies against the specific antigen. These antibodies circulate in the blood and can be collected from serum or plasma.3. Serum Collection.Blood is drawn from the rabbit at regular intervals after immunization. The blood is allowed to clot, and the serum is separated by centrifugation. The serum contains the antibodies produced in response to the antigen.4. Antibody Purification.The antibodies present in the serum are purified using various techniques, such as precipitation, chromatography,or affinity-based methods. Purification removes impurities and concentrates the specific antibodies.5. Characterization.The purified antibodies are characterized to determine their specificity, affinity, and titer. These parameters are assessed using methods like enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) or Western blotting.Applications.Antibodies from immunized rabbits have numerous applications in research and diagnostics:Western blotting.Immunohistochemistry.Flow cytometry.Immunoassays.Vaccine development.Advantages of Using Immunized Rabbits.Immunized rabbits provide several advantages for antibody production:High antibody yield.Specificity for the target antigen.Consistent antibody production.Ease of handling and maintenance.中文回答：制备免疫兔抗体流程。

热点实验：WB,IH,IF,ICC实验

4、实验委托者之需要提供样品，即可完成整个实验。

Fig 1：Lanes:Lane 1Lane 2Lane 3Lane 4Lane 5Lane 6 Rows(IOD)(IOD)(IOD)(IOD)(IOD)(IOD) Rock1242.39337.97229.78233.16151.48205.53 Rock2233.48219.11238.76191.61151.18203.66 GAPDH160.18130.47141.06156.13147.77151.07样本编号253828232624WB操作规程一．设备和试剂1．设备① 电泳电源Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell,Mini Teans-Blot Module,and PowerPac Basic Power Supply (BIO-RAD,Catalog#165-3323)② 电泳仪及附件Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell (BIO-RAD,Catalog#165-3301)③ 电转仪及附件Mini Teans-Blot Elecreophoresis Transfer Cell (BIO-RAD,Catalog#170- 3930) ④ NC膜PIERCE，Catalog#88018⑤ 滤纸Whatman,3MM CHRC．电泳缓冲液，1L3g Tris-Base、14.4g 甘氨酸、1g SDS，加蒸馏水至IL，pH应该在8.3左右。

也可以制成10×的储存液，在室温下长期保存。

D．电泳转移缓冲液,1L3g Tris-Base、14.4g 甘氨酸、甲醇200ml, 加蒸馏水至1L, 也可以制成10×的储存液，在湿温下长期保存。

E．5×样品缓冲液,10ml0.6ml 1mol/L的Tris-HCl（Ph6.8）、5ml 50%的甘油、2ml 10%的SDS、0.5ml 2-巯基乙醇、1ml 1%溴酚蓝，0.9ml的蒸馏水，可在4℃保存数周，或在-20℃保存数月。

猪瘟兔体交互免疫试验原理(一)

猪瘟兔体交互免疫试验原理(一)猪瘟兔体交互免疫试验猪瘟兔体交互免疫试验是一种用于检测猪瘟病毒抗体的常用方法。

以下是该测试的工作原理和相关应用介绍。

原理猪瘟病毒猪瘟是一种病毒性疾病，目前没有特效的治疗方法。

猪瘟病毒属于科学家分离出的一个病毒家族，大小约为85纳米。

免疫原和抗原在进过猪瘟病毒感染后，人/动物的身体会制造与病毒抗原相对应的抗体。

抗体是一种由人或动物免疫系统制造的高分子树脂，可与病毒抗原结合而形成协同作用。

试验过程猪瘟兔体交互免疫试验使用了抗原和抗体的结合原理。

一般而言，将病毒抗原混合浸注到肓性化兔红细胞里，抗原与兔红细胞表面的抗体形成免疫物质复合物，称为“肓性化红细胞凝集原（HRTR）”。

反应原理试验证明，由于免疫血清中存在病毒抗体，因此可以在抗原的HRTR上选择相应的反应物，以实现抗体的检测。

如果病毒抗体存在于样品中，则可引起抗原及红细胞与抗体复合物的形成。

应用猪瘟兔体交互免疫试验被广泛应用于猪瘟的诊断和预防工作。

试验对象一般是疑似猪瘟患畜的血样或血浆，基本可以确定病畜的感染程度、生物学性质和免疫状态。

该试验方法还可用于其他人和动物的免疫测定，例如鸡、狗以及鱼类等。

其优点在于操作简便、快速、灵敏度高，且速度较其他试验方法快，只需几分钟就可获得结果。

此外，该方法还可适用于体外免疫疗法的药物筛选和剂量检测，对于病毒性疾病的研究和疾病治疗也具有广阔的应用前景。

结论总的来说，猪瘟兔体交互免疫试验是一种非常实用和有效的病毒抗体检测方法。

其采用了高效的免疫物质原理，对于预防猪瘟疫情、检测动物健康以及研究病毒性疾病等方面都具有非常广泛的应用价值。

优点猪瘟兔体交互免疫试验相较于传统的病毒抗体检测方法，有以下几个优点：1.操作简单方便，不需要复杂的实验设备及技术；2.只需要少量的样品即可检测抗体，不会对动物体质产生太大的影响；3.检测结果准确，能够满足临床与实验室的需求。

缺点除了优点之外，猪瘟兔体交互免疫试验也存在以下几个缺点：1.需要一定的实验室仪器设备支持，例如循环水温箱、显微镜等，这增加了成本和时间成本；2.对于样品中存在的免疫大分子可能产生假阳性反应，需要进行动物流行病学调查才能确定结果的真实性；3.在同种物质结构差异性大或体液样品不同情况下可能会产生误差，需要相应的质控方案来保证结果的准确性。

Anti-FLAG（DYKDDDDK）免疫磁珠说明书

Anti-FLAG（DYKDDDDK）免疫磁珠Cat#：MIP0064（本品仅用于科学研究，不可用于诊断及治疗）一．背景信息Flag-Tag（DYKDDDDK），常用于真核蛋白质重组表达标记。

Anti-FLAG（DYKDDDDK）免疫磁珠，由高品质的FLAG抗体与磁珠共价偶联制成, 具有高载量（至少为0.6mg protein/ml磁珠），高特异性，操作迅速便捷，性质稳定，可反复使用的特点，可用于FLAG标签融合蛋白的亲和纯化及免疫（共）沉淀。

二．性能指标应用范围：可用于Met修饰的N端FLAG融合蛋白（Met-FLAG–Protein），N端FLAG融合蛋白（FLAG–Protein）和C端FLAG融合蛋白（Protein-FLAG）的亲和纯化及免疫（共）沉淀。

抗体属性：小鼠单克隆抗体，IgG2a亚型。

磁珠属性：琼脂糖包裹的超顺磁珠，平均粒径50um。

载量：0.5mL纳米磁珠，共价偶联2mg Anti-FLAG单克隆抗体，可纯化或沉淀至少0.6mg FLAG融合蛋白。

强度：竞争洗脱，可反复使用5次以上。

成分：0.5mL共价偶联Anti-FLAG单克隆抗体的磁珠, 溶于1ml PBS中。

保存方法：在加入了0.2‰叠氮钠的PBS保存液中，4℃可保存1年。

三．说明书阅读指南四．用前必读1.以下试剂及设备，需要客户自备，试剂推荐配方见说明书附件1, 推荐蛋白质制备方案见附件2。

磁力架1个，1.5mL 离心管若干细胞裂解液，酸性洗脱液，中和液，PBS，2x蛋白上样缓冲液, 3xFLAG多肽(货号Q7007)待测抗原样品及检测抗体2.注意事项（开箱前必读）1)本产品在在加入了0.2‰叠氮钠的PBS保存液中，4℃可保存1年，冷藏条件下运输。

2)勿离心、冷冻、干燥磁珠，勿使用超声处理磁珠，勿使酸处理磁珠时间超过10min。

3)混匀磁珠时，请采用移液枪轻柔吹打，柔和涡旋，上下颠倒及摇床混匀等方法。

勿使用超声等方法。

非洲猪瘟病毒A137R蛋白多克隆抗体的制备与应用

中国预防兽医学报Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine第43卷第1期2021年1月V ol.43No.1Jan.2021doi ：10.3969/j.issn.1008-0589.202003013非洲猪瘟病毒A137R 蛋白多克隆抗体的制备与应用向志达1,2，张涛清2，张元峰2，黄丽2，杨玉莹1*，翁长江1,2*（1.长江大学动物科学学院，湖北荆州434025；2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/基础免疫创新团队，黑龙江哈尔滨150069）摘要：非洲猪瘟（ASF ）是由非洲猪瘟病毒（ASFV ）感染引起的一种高致病性病毒性传染病。

为制备兔抗ASFVA137R 蛋白多克隆抗体，本研究以ASFV Pig/HLJ/2018分离株基因组DNA 为模板扩增ASFV A137R 基因，将其克隆至原核表达载体pET-21a （+）中，构建重组表达质粒pET-21a-A137R ，转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞后经IPTG 诱导表达，SDS-PAGE 检测结果显示，表达的A137R 重组蛋白分子质量约15.0ku ，其主要以可溶形式表达。

利用HisTrap 亲和层析和凝胶过滤层析纯化获得高纯度的A137R 重组蛋白，利用该纯化重组蛋白免疫新西兰大白兔，制备抗ASFV A137R 蛋白多克隆抗体，经Protein G 亲和层析介质纯化后经western blot 、间接免疫荧光和免疫共沉淀试验检测结果显示，制备的兔抗ASFV A137R 蛋白的多克隆抗体能特异性地识别HEK293T 细胞中瞬时表达的ASFV Flag-A137R 蛋白和ASFV 感染猪肺泡巨噬细胞中表达的ASFV A137R 蛋白。

本研究为进一步探究ASFV A137R 蛋白的功能、其在ASFV 感染及致病性中的作用和诊断技术研究奠定了基础。

关键词：非洲猪瘟病毒；A137R 蛋白；多克隆抗体中图分类号：S852.4文献标识码：A文章编号：1008-0589（2021）01-0060-05Preparation and application of polyclonal antibody against Africanswine fever virus-encoded A137R proteinXIANG Zhi-da 1,2,ZHANG Tao-qing 2,ZHANG Yuan-feng 2,HUANG Li 2,YANG Yu-ying 1*,WENG Chang-jiang 1,2*(1.College of Animal Science,Yangtze University,Jingzhou 434025,China;2.Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy ofAgricultural Sciences,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin 150069,China)Abstract :African swine fever (ASF)is a highly pathogenic viral infectious disease caused by African swine fever virus.To prepare rabbit polyclonal antibody against ASFV A137R protein,the genomic DNA isolated from ASFV Pig/HLJ/2018strain was used as a template to amplify ASFV A137R gene.The target gene was then subcloned into the bacterial expression vector pET-21a to construct the recombinant plasmid pET-21a-A137R.The recombinant plasmid was transformed into E.coli BL21(DE3)and induced by the addition of IPTG to express A137R protein.SDS-PAGE result showed that the recombinant protein was expressed in a soluble form with a molecular mass of 15.0ku.The recombinant protein A137R was purified by HisTrap affinity chromatography and gel filtration chromatography.Two New Zeal white rabbits were immunized with the purified recombinant protein A137R to prepare anti-ASFV A137R polyclonal antibody,and the antibody was then purified by a protein G affinity chromatography column.The results of western blot,indirect immunofluorescence assay and immunoprecipitation showed that收稿日期：2020-03-10基金项目：非洲猪瘟病毒感染与致病机制（31941002、CAAS-ZDXT2018007）作者简介：向志达（1994-），男，湖北宜昌人，硕士研究生，主要从事非洲猪瘟病毒蛋白功能研究.*通信作者：E-mail ：**********************；*********************.cn*Corresponding author向志达，等.非洲猪瘟病毒A137R蛋白多克隆抗体的制备与应用第1期非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由ASF病毒（ASFV）感染引起的一种高致病性病毒性传染病，ASFV急性感染可导致家猪死亡率接近100%[1]。

RabbitAnti-GoatFcspecificIgG-Biotin产品使用说明书

Rabbit Anti-Goat(Fc specific) IgG-Biotin产品使用说明书技术背景：生物素（biotin，B）广泛分布于动、植物组织中，常从含量较高的卵黄和肝组织中提取，分子量244.31Da.，生物素分子有两个环状结构：咪唑酮环（亲和素结合的主要部位）、噻吩环，C2上侧链戊酸的末端羧基经化学修饰可成为带有多种活性基团的衍生物。

链霉亲和素（Streptavidin，SA，也称链霉抗生物素蛋白）是链霉菌Streptomyces avidinii分泌的、分子量大小为65kD的同源四聚体蛋白质。

链霉亲和素对生物素（即维生素B7或维生素H）具有极高的亲和力，解离常数（Kd）约为10−14 mol/L，分子的每条肽链都能结合一个生物素，即一个链霉亲和素能结合四个生物素。

链霉亲和素-生物素复合物对有机溶剂、变性剂（如尿素）、洗涤剂（如SDS与曲拉通）、蛋白水解酶类、极端温度以及pH具有良好耐受力，因此被广泛应用于分子生物学和生物纳米技术中。

本产品为生物素标记的家兔抗山羊（Fc片段特异性）抗体，特异识别山羊IgG Fc片段，纯化后的酶标抗体对其他物种血清蛋白无交叉反应性，与Ig 类蛋白不存在交叉反应。

利用其与亲和素标记试剂(如亲和素修饰抗体、核酸探针和蛋白)的高亲和力，以及多级放大效应，可用于生物检测。

二抗克隆性：多克隆二抗免疫原：山羊IgG Fc片段二抗宿主动物：家兔二抗来源：家兔抗血清应用：免疫组化、免疫荧光、蛋白印记、细胞相关分析实验、流式细胞术。

产品推荐使用浓度：Western blotting/1:500-1:5000Enzyme immunoassays/1:10000-1:20000具体实验过程中，应根据不同用途选择合适的量子点标记物工作浓度。

保存说明：自生产之日起，-20℃可保存1年，经常使用可置4℃；为了更好保存、使用试剂，使用前后请适当离心（盖帽）；禁止反复冻溶。

备注：本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

大鼠再生肝细胞的分离和培养

大鼠再生肝细胞的分离和培养杨军英;刘芳;李涛;刘慧兵【摘要】建立大鼠2/3肝切除模型,分别于术后恢复0h、6h、12h、24h、48 h、72 h、120 h、168 h等时间点,采用原位胶原酶消化和密度梯度离心法分离、纯化再生肝细胞,获得的再生肝细胞活性95％以上,纯度96％以上.用DMEM培养液添加其他物质后培养再生肝细胞,在培养的96 h内,肝细胞生长状态良好,具有分泌白蛋白和合成尿素的功能.细胞的DNA合成主要在培养24h以后,72 h时达到高峰.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2014(033)003【总页数】5页(P440-444)【关键词】大鼠;再生肝细胞;细胞培养;白蛋白;尿素;DNA合成【作者】杨军英;刘芳;李涛;刘慧兵【作者单位】河南师范大学生命科学学院,省部共建细胞分化调控重点实验室,河南新乡453007;河南师范大学体育学院,河南新乡453007;河南师范大学生命科学学院,省部共建细胞分化调控重点实验室,河南新乡453007;河南师范大学生命科学学院,省部共建细胞分化调控重点实验室,河南新乡453007;河南师范大学生命科学学院,省部共建细胞分化调控重点实验室,河南新乡453007【正文语种】中文【中图分类】Q2-33;Q959.837再生生物学和再生医学的发展使其应用日益广泛。

肝脏在受到药物、毒素、部分切除或者严重的病毒性感染等刺激之后，残余肝脏细胞能够迅速增生恢复至原肝重，维持正常的肝脏生理功能(Fausto，2006)。

对于肝细胞再生的研究不仅能揭示肝脏对于损伤的修复机理，用于指导其他器官功能紊乱的研究(Yamazaki et al.，2011)，还能用于揭示肝癌、肝硬化等肝脏疾病的发生、发展、治疗和修复机理(Hixson et al.，2000)。

肝细胞是肝脏功能的主要完成者，肝细胞再生是肝损伤修复的第一道屏障(R iehle et al.，2011)。

原代培养的肝细胞较好的保留了肝细胞分化状态和代谢活性，排除了其他复杂因素影响(邓颖等，2006)，在药物代谢、药物毒理学、致癌作用、肝病机理等方面的研究非常普遍，也是目前肝细胞移植研究的种子细胞之一(Nagald et al.，2001)。

二抗鼠抗兔IgG单克隆抗体

兔IgG IP二抗（Rabbit IgG IP-True Antibody）【品名】兔IgG IP 二抗：鼠抗兔IgG单克隆抗体Rabbit IgG IP-True Antibody: Mouse anti-Rabbit IgG Monoclonal Antibody【产品货号】 M0809-1【抗体类型】鼠单克隆抗体，一抗，IgG1, 克隆号：1-14【产品批号】M080825【种属特异】兔【抗体用途】IP, WB, ELISA【产品性状】液体【产品规格】100ul/管【抗体浓度】0.38mg/ml【产品简介】兔IgG IP二抗为鼠抗兔IgG单克隆抗体，该抗体不能识别经SDS-PAGE电泳分离的兔IgG 轻链与重链，可识别结构完整的兔IgG分子，即可识别自然状态下非变性的兔IgG分子。

在IP试验中，使用此抗体可以获得非常好的IP（immunoprecipitation）实验结果，避免兔IgG重链（50kDa）与轻链(25kDa)的干扰；另，对于蛋白质分子量与重链（50kDa）或轻链（25kDa）相接近的目标蛋白也能使用该抗体进行IP试验。

本产品未标记辣根过氧化物酶（HRP），在使用时需要与酶标抗兔IgG抗体（如HRP-羊抗兔IgG 抗体）配合使用。

【免疫原】纯化的兔IgG【推荐使用】IP 1:500-1,000; WB 1:500-1,000; ELISA 1:1,000-2,000【贮存】贮存于-20℃. 贮存缓冲液配方: 1*TBS (pH7.4), 0.5%BSA, 25%Glycerol. Preservative: 0.05% Sodium Azide.【有效期】12 个月【纯化方式】Balb/c小鼠腹水，Protein A纯化图1：目标蛋白分子量为37kDa..目标蛋白经抗目标蛋白兔多抗免疫沉淀试验，电泳转膜，使用RabbitIgG IP二抗检测，显示特异性目标蛋白条带，在兔IgG重链（50kDa）与轻链(25kDa)处没有出现相应的条带图2：兔IgG电泳后转膜，A:为Rabbit IgG IP二抗检测结果，不能识别兔IgG重链与轻链；B:使用常规抗兔二抗检测，显示兔I gG重链与轻链条带。