银杏叶提取物磷脂复合物的制备_孙俊
银杏叶的提取物实验报告
一、实验目的本实验旨在通过提取和分离银杏叶中的有效成分，探讨银杏叶提取物的制备方法，并对其化学成分进行定性定量分析，为银杏叶的进一步开发和应用提供实验依据。
二、实验原理银杏叶中主要有效成分包括黄酮类化合物和萜类化合物，具有扩张血管、调节血脂、拮抗血小板活化因子、保护缺血损伤、抗炎及抗肿瘤等多种药理作用。
本实验采用溶剂提取法提取银杏叶中的黄酮类化合物，并利用高效液相色谱法对其含量进行测定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 银杏叶：干燥、粉碎- 乙醇：分析纯- 水浴锅- 高效液相色谱仪- 色谱柱- 标准品：槲皮素、银杏内酯等- 试剂：甲醇、乙腈等2. 实验仪器：- 电子天平- 粉碎机- 滤纸- 离心机- 恒温水浴锅四、实验方法1. 银杏叶提取液的制备：- 称取一定量干燥、粉碎的银杏叶，加入适量乙醇，浸泡一段时间后，水浴加热回流提取。
- 提取液过滤，滤液浓缩至适量，得银杏叶提取物。
2. 高效液相色谱法测定银杏叶提取物中的槲皮素含量：- 标准品溶液的制备：准确称取一定量的槲皮素标准品，用甲醇溶解并定容，得标准品溶液。
- 样品溶液的制备：准确称取一定量的银杏叶提取物，用甲醇溶解并定容，得样品溶液。
- 色谱条件：流动相：甲醇-水（体积比80:20）；流速：1.0ml/min；检测波长：254nm。
- 样品溶液和标准品溶液分别进样，记录色谱图，根据标准品溶液的峰面积计算样品溶液中槲皮素含量。
五、实验结果与分析1. 银杏叶提取液的制备：- 经过提取、过滤、浓缩等步骤，成功制备了银杏叶提取物。
2. 高效液相色谱法测定银杏叶提取物中的槲皮素含量：- 样品溶液色谱图显示，在254nm波长下，银杏叶提取物中存在一个与槲皮素标准品峰相似的峰，说明提取物中含有槲皮素。
- 根据标准品溶液的峰面积计算，银杏叶提取物中槲皮素含量为2.5%。
六、结论本实验采用溶剂提取法提取银杏叶中的黄酮类化合物，并利用高效液相色谱法对其含量进行测定，成功制备了银杏叶提取物，并确定了其中槲皮素含量。
一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用[发明专利]
![一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/7efb2656f121dd36a22d82cc.png)
专利名称：一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用专利类型：发明专利
发明人：孙炜炜,苗丽坤,陈胜,蹇顺华
申请号：CN201711273705.0
申请日：20171206
公开号：CN107802025A
公开日：
20180316
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种银杏叶提取物的制备方法及其在卷烟中的应用，包括如下步骤：(1)将新鲜银杏叶清洗沥干切片备用，采用乙醇溶液微波萃取浸提，过滤后收集滤液，得到银杏叶提取液A。
(2)收集步骤(1)中的银杏叶残渣，加水和生物制剂，水解发酵，向水解发酵液中加入乙醇恒温回流提取，过滤后得到银杏叶提取液B。
(3)将银杏叶提取液A和银杏叶提取液B合并后，经减压浓缩后得到银杏叶提取物。
本发明制备的烟用银杏叶提取物，具有银杏叶特有的药草香气特征，将其作为添加剂应用于卷烟中，与烟香协调，丰富卷烟香气量，有效解决了常规浸提工艺容易带来刺激性大、口腔残留较多的负面问题，具有清除卷烟主流烟气中自由基含量的作用。
申请人：湖北中烟工业有限责任公司
地址：430040 湖北省武汉市东西湖区金山大道1355号
国籍：CN
代理机构：武汉楚天专利事务所
代理人：雷速
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银杏叶提取物磷脂复合物的制备工艺研究
银杏叶提取物磷脂复合物的制备工艺研究
银杏叶提取物磷脂复合物的制备工艺研究主要包括以下几个步骤：
1. 银杏叶提取物的制备：将银杏叶粉碎并加入适量的溶剂（如乙醇或水），进行提取。
提取方法可以采用浸提、超声提取、微波辅助提取等，提取时间和温度可根据实际情况确定。
2. 磷脂的提取：选择适合的磷脂来源，如大豆磷脂、脱脂卵磷脂等。
将磷脂粉末加入适量的溶剂中，进行提取。
可以采用溶剂萃取、酶法提取等方法。
3. 磷脂与银杏叶提取物的复合：将提取得到的银杏叶提取物和磷脂按一定比例混合，加热搅拌使其充分混合。
4. 磷脂复合物的制备：将混合物进行浓缩、干燥等处理，得到磷脂复合物。
5. 质量控制：对制备得到的磷脂复合物进行质量检测，包括磷脂含量、提取物中有效成分含量、微生物检测等。
6. 应用研究：对制备得到的磷脂复合物进行应用研究，如对其抗氧化、抗炎、抗肿瘤等活性进行评价。
需要注意的是，在制备过程中，选用的溶剂、提取物比例、提取方法、加热温度等因素都会对最终产品的质量和活性产生重要影响，因此需要在实验过程中进行优化和调整。
同时，在制
备过程中还需要注意操作的卫生和安全，合理控制工艺参数，以保证制备得到的磷脂复合物的质量和稳定性。
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中华中医药学刊银杏叶提取物磷脂复合物的制备孙 俊,陈志鹏,蔡宝昌(南京中医药大学,江苏省中药炮制重点实验室,江苏南京210029)摘 要:目的:确定银杏叶提取物(GBE)与大豆磷脂形成复合物的最佳工艺。
方法:以银杏总黄酮与大豆磷脂的复合率为评估标准,采用单因素考察进行系统研究,对所制得的复合物进行D SC 分析,并测定其在不同p H水溶液中的表观油水分配系数。
结果:该制备方法的复合率达99%以上,研究表明磷脂复合物明显改善了银杏总黄酮的脂溶性。
结论:GBE 磷脂复合物的形成受反应溶剂和反应物料比例的影响较大;复合物的脂溶性较提取物明显提高。
关键词:G BE ;磷脂复合物;制备工艺;表观油水分配系数中图分类号:R285 文献标识码:A 文章编号:1673-7717(2009)12-2671-03Preparation of G i n kgo Biloba Ext ract phospholipi d com plexS U N Jun ,C HEN Zh-i Peng ,CA I Bao -Chang(J i angs u K ey Laboratory of Ch i neseM ed i ci n e Processing ,Nan ji ng Un ivers it y of TCM,Nan ji ng 210029,Jiangs u,Ch i na)A bstrac:t O bjective :To choose the opti m al for m ulati on for the co mp l ex of G i nkgoB il oba Ex tract(GBE)w it h phospho -lipi ds .M ethods:T o use si ng le-factor st udy and t he complex ing rate of to tal flavono i ds as assess m ent cr iteria ,the co m plexwere ana l yzed by DSC and w ere deter m i ned apparent o il-w ater distri buti on coe fficients i n different p H aqueous so l ution .R esults:T he complex i ng rate was over 99%and the study shows tha t phospholi p i d complex si gnificantl y i m proved the t o tal flavono ids o f GBE fa t-soluble .Conclus ion:The for m ulati on o f t he comp l ex w as grea tly i nfl uenced by t he so l vent and reac -tion rati o and t he G inkgo Bil oba Ex tract phospho lipi d co mp l ex fat-so l ub l e had been enhanced si gnificantl y .K ey w ords :g i nkgo b iloba ex tract ;phospho li p i d comp l ex ;preparati on process ;apparen t o il water pa rti tion coeff-i c i ent收稿日期:2009-07-08作者简介:孙俊(1985-),女,江西九江人,2007级硕士研究生,研究方向:中药质量标准研究。
通讯作者:蔡宝昌(1952-),男,教授,博士研究生导师,博士,研究方向:中药炮制。
银杏叶为银杏科植物银杏G inkgo biloba L.的干燥叶,其提取物具有活血化瘀通络的功效[1],现代药理研究表明GBE 对心血管系统有广泛而显著的作用[2-4],其主要活性成分为银杏黄酮醇苷和银杏萜内酯[5],而银杏黄酮醇苷脂溶性低,小肠透过性差,生物利用度低,大大降低了临床疗效。
文献报道[6-7],天然活性成分与磷脂在一定条件下复合,得天然活性成分磷脂复合(phy t o so m es 或pho spho li p i d co m plex ),其活性较原化合物有明显的改善,有效地提高了天然活性成分在体内的吸收,显著地改善了其生物有效性,降低了毒副作用及用量。
本文将GBE 卵磷脂复合物的制备条件进行全面系统的研究,采用高效液相色谱法测定复合物中的总黄酮含量,并计算复合率,以此为指标,采用单因素考察找到银杏提取物与磷脂形成复合物的最佳条件,获得较高的复合率。
并对其进行热分析,测定其在不同p H 溶液中表观油水分配系数及稳定性,为中药口服制剂的研究提供帮助。
1 试药与仪器1.1 试药GBE (邳州富伟生化制品有限公司,含银杏黄酮\24%,银杏内酯\6%);大豆卵磷脂(上海太伟药业有限公司,含PC50%);槲皮素(批号:100081-200406)、山柰酚(批号:110861-200606)、异鼠李素(批号:110860-200407)(供含量测定用)均购于中国药品生物制品检定所;无水乙醇,四氢呋喃,二氯甲烷,乙酸乙酯,正辛醇等均为分析纯,甲醇为色谱纯。
1.2 仪器Shi m adzu LC -20A 高效液相色谱仪:LC -20A B 泵,SPD -M 20A 检测器(岛津公司);RE -52A 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);H J-6A 恒温磁力加热搅拌器(金坛市鑫鑫试验仪器厂);数显恒温水浴锅HH -6(国华电器有限公司);M ETTLER TO LEDO AL 104电子天平。
2 试验方法与结果2.1银杏总黄酮含量测定2.1.1色谱条件色谱柱:H edera ODS -2柱(4.6mm @250mm ,5u m );流速:1mL #m i n -1;检测波长:370n m;柱温:30e ;流动相:甲醇-0.4%磷酸(60B 40);进样量:10L L 。
2671中华中医药学刊2.1.2标准曲线的制备及方法学研究精密称取槲皮素,山柰酚及异鼠李素对照品适量,用甲醇溶解稀释成含槲皮素40L g/mL、山奈酚31.2L g/mL、异鼠李素20.8L g/mL的混合溶液,再用甲醇稀释成含槲皮素1.6、4、8、20、40L g#mL-1,山柰酚1.248、3.12、6.24、15.6、31.2L g#mL-1,异鼠李素0.832、2.08、4.16、10.4、20.8L g#mL-1的系列标准溶液,分别进样测定。
以浓度c(L g#mL-1)为横坐标,峰面积A为纵坐标进行线性回归,得槲皮素标准曲线为:A=88398c-8130.1,r=0.9999,表明槲皮素在1.6~40L g/mL范围内与峰面积线性关系良好。
山奈酚标准曲线为:A=86705c-8081.4,r=0.9999,表明山奈酚在1.248~31.2L g/mL范围内与峰面积线性关系良好。
异鼠李素标准曲线为:A=85475c-3088.6,r=0.9999,表明异鼠李素在0.832~20.8L g/mL范围内与峰面积线性关系良好。
取上述高、中、低浓度的混合标准溶液,分别于1天内重复测定5次,得日内RSD为0.28%、0.61%、0.44%,连续5天测定,得日间RSD为0.51%、0.49%、0.93%。
2.1.3样品的测定精密称取制备好的磷脂复合物约80m g,加甲醇20mL,25%盐酸5mL,置水浴(85e)中加热回流1h,取出,迅速冷却至室温,移至50mL量瓶中,用少量甲醇分次洗涤容器,洗液并入量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得,进样测定。
2.2制备工艺评价标准的建立利用GBE不溶于二氯甲烷,而磷脂与银杏磷脂复合物均易溶于二氯甲烷的特性,将一定量的银杏提取物与磷脂在一定条件下反应后,减压除去反应溶剂,然后再加入适量二氯甲烷,充分溶解其中的磷脂及复合物,过滤,收集滤液,将二氯甲烷蒸干,收集固体,测定黄酮的复合率。
总黄酮醇苷含量=(槲皮素含量+山奈酚含量+异鼠李素含量)@2.51按下式计算黄酮复合率[8]:黄酮复合率(%)=复合物中总黄酮的量参加反应银杏总黄酮的量@100%2.3单因素影响试验2.3.1反应溶剂GBE与磷脂质量比为1B1,银杏叶总黄酮的浓度为10mg#mL-1,在室温下反应1h的条件下,分别考察在四氢呋喃、乙酸乙酯、二氯甲烷、无水乙醇等不同溶剂中的复合率。
结果显示,以四氢呋喃和无水乙醇为溶剂时银杏叶总黄酮与磷脂的复合率较高,考虑到四氢呋喃毒性比较大且价格贵,因此选用无水乙醇作为反应溶剂。
见表1。
表1溶剂对复合率的影响(n=6)溶剂名称四氢呋喃乙酸乙酯无水乙醇二氯甲烷复合率(%)73.232.570.931.22.3.2GBE与磷脂的质量比反应溶剂为无水乙醇,GBE的浓度为10mg#mL-1,在室温反应1h的条件下,考察GBE与磷脂反应的质量比分别为1B0.5、1B1、1B2、1B3情况下的复合率。
结果显示,形成复合物的复合率随着磷脂比例的增加而增加,但在质量比为1B3的情况下所制备的复合物呈比较难干燥,而1B1、1B2所得复合物复合率差不多,因此选定质量比为1B1。
见表2。
表2提取物与磷脂比对复合率的影响(n=6)提取物与磷脂比1B0.51B11B21B3复合率(%)83.498.998.899.52.3.3反应时间的影响反应溶剂为无水乙醇,提取物的浓度为10m g#mL-1,提取物与磷脂的质量比为1B1,反应温度为室温的条件下,考察反应时间分别为1、1.5、2、3h时的复合率,结果可见提取物与磷脂在2h之后基本反应完全,因此选定2h为适宜的反应时间。
见表3。
表3反应时间对复合率的影响(n=6)时间(h)1 1.523复合率(%)72.189.198.598.72.3.4提取物浓度的影响反应溶剂为无水乙醇,提取物与磷脂的质量比为1B1,室温反应2h的条件下,考察提取物的反应浓度分别为8、10、15、20mg#mL-1时的复合率。
结果显示,复合率随着提取物的浓度的增加而降低,选定10mg#mL-1为反应浓度。
见表4。
表4提取物浓度对复合率的影响(n=6)提取物浓度(m g#mL-1)8101520复合率(%)99.198.786.974.52.3.5反应温度的影响反应溶剂为无水乙醇,提取物的浓度为10m g#mL-1,提取物与磷脂的质量比为1B1,反应2h的条件下,考察反应温度分别为室温、40、60e时的复合率。