食品微生物学实验思考题

实验一显微镜的使用和细菌简单染色
六、思考题
1.用油镜观察时应注意哪些问题？
由于油浸镜的工作距离很短(0.19mm左右)，故使用时必须特别小心。

在低倍镜找到要观察的部位以后，将镜筒升起，在标本上加一滴香柏油，转换油镜头，从侧面注视，用粗调螺旋将镜筒小心下降，使油镜头浸入油滴，直到几乎与标本接触为止(注意切勿压在标本上，以免压碎玻片，甚至损坏油镜头)。

从目镜观察，先用粗调螺旋徐徐升起(只准上升镜筒，不能向下调节)，当视野中有模糊的标本物像时，改用细调螺旋调节，直到标本物像清晰为止，如转动粗调螺旋已使镜头离开油镜，应重新调节，直至调到看清物像为止。

3.什么是物镜的同焦现象？
一般情况下，当五项在一种物镜中已清晰聚焦后，转动转换器将其它物镜工作时，物像基本保持在聚焦状态。

实验二革兰氏染色法
六、思考题
1．哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？
菌龄、图片厚度、染色均匀度、脱色时间、脱色均匀度等。

其中脱色时间是关键。

2．革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老？为什么？
菌龄太老，其中的部分细胞可能已经死亡或自溶，造成细胞壁的通透性增强，染色结果可能出现假阴性。

3．革兰氏染色时，初染前能加碘液吗？
不能。

初染前加碘液的话就会先和染料结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞壁进入细胞质膜，达不到初染效果。

4.不经过复染，能否区别革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌？
可以。

因为脱色后G+是紫色的而G-是无色的，所以已经可以区分了。

但是如果不经复染的话，镜检时看不清G-的细胞形态。

5.制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节？
涂片、固定、脱色
6.为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察？
因为如果制片和油镜镜头之间有水层，透过载玻片的光线就会发生折射而不能完全进入镜头，从而降低视野的亮度；另外，由于水层的折射，会降低显微镜的分辨率，造成图像不清晰。

7.如果图片未经热固定会出现什么问题？加热温度过高、时间过长又会怎样？
实验四放线菌、酵母菌、霉菌形态观察
六、思考题
1．酵母菌死活细胞观察中，美兰液有何作用？
美兰的氧化态为蓝色，还原态为无色。

活细胞由于新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力。

因此活细胞为无色，死或衰老细胞呈蓝色。

2. 为何要用乳酸-石碳酸溶液作霉菌的水浸片？
霉菌菌丝较粗，易收缩变形，而且孢子很容易分散。

乳酸石碳酸溶液能使细胞不变形，具有防腐杀菌的作用，能保持较长时间不干燥，本身呈蓝色，具有一定的染色效果。

实验五微生物大小的测定和显微镜直接计数
六、思考题
1．为什么随放大倍数的改变，目镜测微尺的每格相对的长度也会改变？能找出这种变化的规律吗？
因为随着放大倍数的改变，被观察的物体被放大，而目镜测微尺在目镜中，没有被放大。

放大倍数增加几倍，目镜测微尺的每格相对的长度就缩小几倍。

2.能否用血球计数板在油镜下进行计数？为什么？
不能。

计数时滴在血球计数板上的是菌悬液，相当于在镜头和计数板直接加了一层水。

水层会降低视野的亮度和显微镜的分辨率，造成图像不清晰。

实验六食品中细菌总数的测定
六、思考题
3.食品中检出的细菌总数是否代表食品上的所有细菌数？为什么？
不能。

菌落总数只能代表需要菌的数量。

食品中的厌氧细菌在该条件下不能生长出菌落。