病理石蜡切片中出现的问题及解决办法
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病理石蜡切片中出现的问题及解决办法
石蜡切片包括取材、固定、脱水、透明、包埋、切片、染色、封固一系列环节。
一张好的切片应平展、无裂纹、无脆烂、厚薄均匀。
当然一张切片的好坏每一环节都很重要,如出现问题,都将影响切片的质量。
而最易出现,最难解决的问题是切片这一环节,下面是我多年工作中总结的经验,仅供参考。
1 切片弯曲不成直带
1·1原因
蜡块上下两边或左右两边不平行。
蜡块与刀片口不平行。
切片刀锋利程度不一致。
组织外形不整。
1·2解决办法
将蜡快四边反复修平对称。
调节蜡块夹持器与切片刀平行。
移动切片刀,更换刀口位置。
在修整组织时,注意修切整齐。
2 切片上卷,不能形成蜡带
2·1原因
切片刀不锋利。
刀口斜度过大,或刀片过厚。
石蜡硬度过大。
蜡块四周留蜡边太少。
2·2解决办法
暂停切片,重新磨刀,或更换刀片。
调整切片角度,12度一15度左右。
切片适宜厚度为4—6微米。
蜡块太硬,可更换熔点较低石蜡,重新包埋。
重新包埋,或将蜡块四周溶化,放入包埋框中补蜡。
3 切片皱褶甚多,不能张开成一平片
3·1原因
石蜡熔点太低或室温过高。
切片刀不够锋利。
切片刀上粘有残余石蜡,刀口不洁。
切片刀倾斜度太小。
组织渗蜡时间不够,或脱水透明不够。
3·2解决办法
可将蜡块置于冰箱中冰冻后切片,并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或更换石蜡。
室温过高,可开动空调器降温。
将切片刀磨锐利再行切片。
调整切片到最适当的角度。
切片刀不洁,可用二甲苯将刀口拭干净,拭刀口最好用棉花。
组织浸蜡不够,可重复浸蜡过程。
4 切片上有裂缝,或出现裂纹
4·1原因
切片刀有小缺口,或刀口不平整。
蜡块中有沙尘、小气泡。
包埋中石蜡冻结太慢,或蜡块出现小白点。
4·2解决办法
换刀或更换刀片。
过滤石蜡重包埋。
5 切片脆烂组织脱出与蜡分离
5·1原因
组织脱水透明不够。
浸蜡时间过长,蜡温过高。
透明时间不足,或组织中含有乙醇。
5·2解决办法
按组织大小,厚薄选择脱水透明时间。
控制蜡温和浸蜡时间。
重新脱水、浸蜡、包埋。
6 切片厚薄不均
6·1原因
切片机微动部分失灵,齿轮跳格。
切片机上的组织块,夹持器或刀松动,切片刀角度太大或太小。
蜡块太大或太硬。
6·2解决办法
维修调整机器。
组织块重新取材包埋。
以上这些是我在实际工作中的一些经验,也就是说在石蜡切片中如果出现以上任何一种问题,都可能利用这些方法解决,并能取得良好的效果。