[VEGF]hTERT复合调控序列介导HSV-tk自杀基因诱导肿瘤细胞的凋亡

[VEGF]hTERT复合调控序列介导HSV-tk自杀基因诱导肿瘤
细胞的凋亡
崔文璟;潘风光;刘燕玲;张玉静
【期刊名称】《中国生物制品学杂志》
【年(卷),期】2008(21)2
【摘要】目的构建人端粒酶催化亚单位(hTERT)核心启动子及血管内皮生长因子(VEGF)增强子复合调控序列的真核表达载体,并检测在复合调控序列调控下HSV-tk自杀基因对肺癌细胞A549和肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响。

方法构建复合调控序列[VEGF]hTERT和胸苷激酶(tk)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-[VEGF]hTERT-tk和PCMV启动子的真核对照表达载体pcDNA3.1(+)-tk,转染肺癌细胞A549和肝癌细胞SMMC-7721,G418筛选抗性克隆,给入前药丙氧鸟苷(GCV),MTT比色法测定细胞生长抑制率,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率。

结果质粒pcDNA3.1(+)-[VEGF]hTERT-tk和pcDNA3.1(+)-tk经双酶切及PCR鉴定,证明构建正确。

转染了带有不同启动子的真核表达载体的肿瘤细胞,在给入前药GCV 后均能表现出对细胞生长的抑制作用,GCV对A549细胞的抑制率大于SMMC-7721细胞,并能引起肿瘤细胞凋亡。

[VEGF]hTERT在A549细胞中的活性较在SMMC-7721中高。

结论HSV-tk自杀基因在肿瘤细胞内瞬时表达即能引起靶细胞凋亡,且复合调控序列在肿瘤细胞中的活性较通用真核细胞转录启动子PCMV高,为深入进行自杀基因治疗的研究提供了一定理论依据。

【总页数】4页(P103-106)
【关键词】复合调控序列;自杀基因;凋亡;肿瘤细胞
【作者】崔文璟;潘风光;刘燕玲;张玉静
【作者单位】吉林大学人兽共患病研究所;吉林大学实验动物中心
【正文语种】中文
【中图分类】Q78
【相关文献】
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