ALS的诊断与治疗

2. 自由基氧化损伤学说：
(1) ALS与SOD1基因突变：
ALS病人90%为散发性（SALS），10% 为家族性（FALS）。20%的FALS病人和 3%～4%的SALS病人可检测到SOD1基因的 错义突变。SOD1基因位于常染色体21q21.221.3，迄今为止，共发现83种错义突变。 SOD1基因突变的ALS病人与其它ALS病人 无论在临床表现还是病理方面均十分相似， 因此，研究这部分ALS的发病机制有助于全 面了解ALS的发病机理 。
ⅲ. 多种因素如脑组织缺血缺氧可导致神经元能 量代谢障碍，使胞外Glu水平增高、Glu受体敏 感性增加，从而引致神经元损伤 。 ⅳ. Glu受体亚基的基因缺陷可导致Glu受体功能的 异常 。
ⅴ.某些外源性兴奋性毒素也对神经元有损伤作 用。 BOAA（-N-乙二酰-氨基-L-丙氨酸）是一 种非NMDA受体激动剂，它可引起锥体束、脊 髓前角细胞和胶质细胞的变性、死亡。 BMAA （-N-甲基-L-丙氨酸）是NMDA受体、非 NMDA受体和代谢型受体共同的激动剂，它可 通过兴奋毒性作用或直接干扰mRNA代谢使神 经元死亡 。
正常情况下，神经细胞胞浆中Glu浓度为 10mmol/L，而胞外Glu的浓度只有1umol/L 。胞 外Glu低浓度的维持是由高亲和性Na+/K+依赖的 Glu转运蛋白承担的。目前，三种高亲和性Glu 转运蛋白已被克隆，其中GLAST1和GLT1分布 在胶质细胞，EAAC1主要分布于神经元 。
(2) 兴奋毒性机制：
5. 环境因素： 6. 病毒感染：
英国某些地区的ALS患病人群中，既往有较 高的脊髓灰质炎发病史，因而推测两病之间可 能存在密切关系，是否为脊髓灰质炎病毒或脊 髓灰质炎样病毒的慢性感染。但在ALS患者的 血清及脑脊液中均未发现脊髓灰质炎病毒抗体。 在ALS患者的神经组织中亦未找到脊髓灰质炎 病毒、病毒有关的抗原以及的病变以颈段为著，亦为经常和早期受 累部位，随病情发展可至胸段或腰段脊髓。脊 髓前角细胞大量脱失，固缩，体积变小，伴有 不同程度的胶质细胞增生。脊髓前根内有变性， 重者可见轴索变性及髓鞘脱失。 肌肉为神经源性萎缩，周围神经在严重病 例可见轴索变性及不同程度的脱鞘。
(4)蛋白酪氨酸硝基化与运动神经元选择性 死亡：
运动神经元轴索有的长达1米，轴索可占 细胞总体积的99%以上。轴索最重要的结构蛋 白是神经微丝（NF），NF由3个亚单位组成， 分别为：轻链（NF-L）、中链（NF-M）和重 链（NF-H）。 NF-L的主要功能是聚集连接，在其中起关 键作用的是Tyr，每条NF-L含20个Tyr，其中 头段96个氨基酸中有9个是Tyr，它通过疏水键 连接不同的NF-L。
SOD1基因突变后，相应酶的三维结构改变， 其与Zn的亲和力下降，无法维持袋形，Cu暴露。 突变的SOD1如果敲除了Cu，则其毒性作用消 失，进一步说明“Cu的暴露”在突变SOD1的 毒性中起关键作用 。
(3)细胞内ONOO—的生成及其进一步的作用：
O2— 在被SOD1清除的同时，可与NO反应生 成过硝酸根（ONOO— ） ，这一反应速度是 SOD1清除O2—速度的3倍 。 ONOO—具有很强的硝化能力，它可将蛋 白中的酪氨酸（Tyr）硝化为3-硝基酪氨酸 （NTYR）。这一过程需要Cu的参与，正常 SOD1的Cu 位于袋底，不会与ONOO—反应， 而突变SOD1由于与Zn的亲和力低下，使Cu暴 露，故可诱导ONOO—对Tyr的硝化反应生成 NTYR。
近年来对CNTF的研究较多，它主要在雪旺 氏细胞表达，能减缓神经元死亡的过程。动物 试验显示CNTF基因的破坏可产生肌萎缩及运动 神经元的消失，在ALS脊髓侧角其免疫活性显 著下降。
1993年，美国和加拿大开始进行CNTF治疗 ALS的多中心II/III期临床双盲实验。但因CNTF产 生明显的副作用且受试病人肌力反而比未受试 病人差，此实验被迫终止。有人分析CNTF疗效 不好的主要原因是其半衰期太短。此外，CNTF 本身就可以作为致热源使病人产生恶病质。如 何延长CNTF作用的有效时间并减少其副作用是 CNTF治疗ALS的关键。
1978年，Olney等人发现向未成年动物注 射某些兴奋性氨基酸可致中枢神经系统局部损 毁，而且不同氨基酸对神经元毒性的大小与其 产生兴奋性电位的能力有关。Onley将这种由 于暴露于兴奋性氨基酸而导致的神经元损伤称 为“兴奋毒性”。 当胞外Glu浓度过高时，主要通过两方面作 用使神经元受损。首先，AMPA受体激活导致 Na+大量内流，继发Cl-和水份的内流，使神经 元严重水肿，细胞急性肿胀而死亡，这一过程 较快；其次，NMDA受体激活使Ca2+大量内流， 胞内Ca2+浓度持续增高而引起一系列毒性反应， 这一过程相对较慢 。
（四） 临床表现：
ALS可分为三型，即散发型（或称经 典型）、家族型（5%～10%）、西太平 洋型（又称关岛型）。
起病以中年或中年以后多见，40岁 以下起病者亦不少见。国内报告最早发病 为18岁。发病年龄与发病高峰均较国外稍 早。男性多于女性。起病隐袭，呈慢性进 展病程，部分患者为亚急性病程，少数者 起病后呈急剧进展，可于病后半年左右死 亡。
随着病情的发展，肌无力和萎缩可延至颈 部、躯干、面肌及延髓支配的肌肉，表现为抬 头困难，转颈障碍，呼吸肌受累出现呼吸困难， 延髓支配肌肉受累则有吞咽困难、咀嚼费力、 发音障碍等。延髓麻痹通常出现于疾病晚期， 但也可于手肌萎缩不久后出现，少数情况下为 首发症状。
（三） 病理：
大脑皮层双侧中央前回巨大锥体细胞呈现部 分或完全消失，锥体细胞深染固缩，核与核仁 不易辨认，呈三角形。大脑及脑干小血管壁内 或血管周围可有淋巴细胞 浸润。皮质延髓束及 皮质脊髓束变性。锥体束的变性最早在脊髓低 位，以后可向高位或脑干内发展。
脑干运动神经核的变性，以舌下神经、迷 走神经、面神经、副神经、三叉神经多见。细
ⅵ.少数家族性ALS病人可发现SOD1基因的错义 突变。突变SOD1转基因鼠MN对Glu介导的兴 奋毒性的敏感程度较正常小鼠的MN增高。 SOD1基因突变后，细胞内自由基产生增多、 线粒体功能丧失是可能是MN对Glu毒性敏感性 增加的原因。
一系列大规模临床实验显示，Glu受体拮抗 剂--riluzole可延长散发性ALS病人的生存期， 这从另一个侧面证实了兴奋毒性与ALS的发病 密切相关。
(2) SOD1基因突变与Cu暴露：
早先认为，SOD1基因突变后，SOD1的活性 降低，其清除O2—的能力下降，O2—增多，通 过氧化途径损伤运动神经元。但其具体的作用 机制不清，且无法解释为何选择性的损伤运动 神经元。 现在的观点认为，SOD1基因突变后，相应 酶的结构改变而产生了毒性。正常的SOD1由两 个结构相同、方向相反的亚基组成，每个亚基 各含一个原子的Cu和一个原子的Zn。SOD1有 许多折叠，肽链折叠成袋形，Cu位于袋底， Zn位于袋口， Zn对于维持袋形并维持Cu的稳 定具有重要作用。
肌萎缩侧索硬化 诊断与治疗
一、肌萎缩侧索硬化（ALS） 二、进行性脊肌萎缩（SMA） 三、原发性侧索硬化（PLS） 四、进行性球麻痹（PBP）
肌萎缩侧索硬化--ALS
（一）概况：
1869年Charcot首次报告，本病为全球 分布，患病率约4-6/10万人口，年发病率 约0.4-1.8/10万人口，死亡率则为2/10万人 口。
Beal等人和Ferrante等人分别发现FALS病人和 突变SOD1转基因鼠脊髓前角细胞NTYR含量和免 疫源性都明显增高，从而证实了氧化损伤在 FALS发病机制中的作用。
Beal等人发现，SALS病人前角细胞NTYR含 量明显增高。北医三院鲁明等发现，SALS病人 脑脊液中NTYR含量较正常人增高。从而证实 了SALS与自由基氧化损伤同样有密切关系 。
一旦Tyr被硝化，则疏水键被破坏，NF-L失 去连接功能，不同的NF-L彼此解聚，NF的结构 被破坏，导致轴索转运障碍，线粒体功能丧失， 运动神经元死亡。此外，Tyr还对信号转导有一 定作用，由于NTYR不能被酪氨酸激酶磷酸化， 使得信号转导阻滞，加速了神经元的死亡。 因为运动神经元是含NF-L最丰富的神经元， NF-L又与Zn有高亲和力，故可使突变SOD1与 Zn的亲和力进一步减低，加重ONOO—对Tyr 的硝化，从而选择性的使运动神经元变性、死 亡。
早期症状为肌肉无力，肌肉萎缩及肌束颤 动。常自上肢远端手部肌肉开始，可自一侧手 肌开始，数月后可波及对侧；也可双侧手肌同 时受累，随后波及前臂的肌肉及上臂和肩胛部 肌肉。部分病人可以三角肌或冈上下肌无力开 始，造成肩胛下垂，抬肩或臂上举无力。少数 病人可以下肢起病，表现下肢无力、沉重、走 路无力，骨盆带肌肉受累后可有上台阶、楼梯、 蹲下起立的困难，下肢肌肉萎缩。
4. 神经营养因子与ALS
神经营养因子（NTF)是一类由靶细胞 提供 的特殊多肽或蛋白质。NTF比较突出的特性为 有选择地作用于外周和中枢神经系统的特定神 经元，增强其存活、生长和分化的生物效应。 因而可防止神经细胞的自然死亡，促进受损神 经元的再生。 主要的NTF包括神经生长因子（NGF）、睫 状神经细胞营养因子（CNTF）、脑源性神经细 胞营养因子（BDNF）、胰岛素样生长因子 （IGF）、及成纤维细胞生长因子（FGFs）等。
对于无SOD1基因突变的ALS，其具体的作 用机制仍不十分清楚。我们认为某些环境毒素 可能会直接损伤SOD1，使其结构改变，产生与 SOD1基因突变类似的后果。
3. 自身免疫学说：
(1) 细胞免疫： (2) 体液免疫：
80年代末期，应用不同的实验技术发现 10%-75%的ALS病人神经节苷酯（GM1）抗体 滴度增高。但许多周围神经病如AIDP、CIDP、 多灶性运动神经病等均可见该抗体滴度增高。 现在的观点认为GM1抗体与ALS的关系不大。
这些NTF通过结合于细胞表面的受体而发挥 各自的作用。BDNF能有效保护因切断轴索所引 起的下运动神经元的减少。IGF能促进脊髓前角 细胞的生长，在ALS脊髓IGF结合密度减低， ALS的NGF受体异常。1993年，美国、加拿大和 欧洲进行了IGF-I治疗ALS的大规模多中心III期临 床双盲实验，经过9个月的治疗，受试组的 Appel量表评分明显好于对照组，提示IGF-I可减 缓病人运动功能的丧失。
（二） 发病机制：
1. 兴奋性氨基酸毒性作用学说：
(1) 兴奋性氨基酸的代谢：
Glu是中枢神经系统最主要的兴奋性递质。 Glu是通过其受体发挥效应的。 a. 离子型： NMDA受体 非NMDA受体: AMPA受体和KA 受体 b. 代谢型: 属于G蛋白耦连的受体。
中枢神经元之间的兴奋性突触传递主要由 NMDA受体和AMPA受体介导， NMDA受体对Ca2+ 有高通透性，由NMDA受体介导的突触反应十 分缓慢；AMPA受体一般只通透Na+和K+，但也 有少数对Ca2+有较高的通透性，AMPA受体介导 的突触反应非常迅速。
当胞内游离钙过多时，Ca2+可进入并聚集 在线粒体内，损伤氧化磷酸化，造成ATP合成 不足；另一方面，由于肌纤维、肌浆网和线粒 体中钙依赖性ATP酶的超常活动，ATP消耗增 多，两者均能使ATP耗竭，从而导致细胞结构 和功能的破坏 。
胞内Ca2+超负荷还能激活各种降解酶，包括 蛋白激酶C、磷脂酶、核酸内切酶、黄嘌呤氧 化酶、一氧化氮合成酶等，这些酶有的直接损 伤细胞结构，有的促使自由基生成过多，通过 氧化作用破坏细胞膜、RNA和蛋白质，使细胞 死亡 。
(3) 兴奋毒性与ALS
ⅰ.国内鲁明等发现ALS病人脑脊液中Glu水平 增高，这为ALS的兴奋毒性作用机制提供了直 接证据 。
ⅱ. Rothstein等人发现ALS病人脑和脊髓存在 高亲和性钠依赖Glu转运蛋白的功能缺失，这 种缺失是针对转运蛋白GLT-1的。这种Glu再 摄取功能的缺陷只特异性的出现于ALS病人。