PRRSV、CSFV、PRV和PCV2四重实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

PRRSV、CSFV、PRV和PCV2四重实时荧光定量PCR检测
方法的建立及应用
李欣;杨莉;刘光亮;王文秀;刘海隆;曹宗喜;张艳
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2024(45)6
【摘要】为建立同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、
猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的四重荧光定量PCR(qPCR)检测
方法,针对PRRSV的ORF2基因、CSFV的5′UTR基因、PRV的gB基因、PCV2
的ORF2基因设计了引物及Taq Man探针,并进行反应体系优化,敏感性、特异性
验证,建立了同时检测上述4种病原的四重实时荧光定量PCR。

结果显示,所建立的四重荧光PCR扩增效率(E)、相关系数(R^(2))及曲线斜率均在正常范围内,检测PRRSV、CSFV、PRV、PCV2 E值、R^(2)、斜率分别为92.9%、0.998、-
3.504,90.7%、0.998、-3.566,9
4.3%、0.996、-3.466,94.2%、0.997及-3.470。

PRRSV、CSFV、PRV、PCV2重组质粒最低检出限分别达到10^(2)、10^(2)、
10^(2)、10^(3) copies/μL;四重qPCR反应体系中的多条引物间不发生交叉反应,经评价该方法特异性良好;批内和批间重复性试验结果显示,变异系数(CV)均在1%
以下,具有良好的重复性。

分别使用该方法和相应的国标荧光定量检测法对采集的298份临床样品进行检测对比,两种方法检测PRRSV、CSFV、PRV、PCV2阳性符合率分别为96.08%、96.38%、100%、94.95%,均在94%以上。

结果表明,建立
的检测方法方便、灵敏、高效、特异性强,适用于猪呼吸道疾病病原学、流行病学
研究以及临床病例的诊断,并为猪呼吸道疾病的预防和控制提供技术支撑。

【总页数】8页(P7-14)
【作者】李欣;杨莉;刘光亮;王文秀;刘海隆;曹宗喜;张艳
【作者单位】新疆农业大学动物医学学院;海南省农业科学院畜牧兽医研究所;海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室;山东省滨州畜牧兽医研究院
【正文语种】中文
【中图分类】S854.43;S858.28
【相关文献】
1.多重实时定量PCR快速检测PRRSV、CSFV和PCV2混合感染方法的建立
2.同时检测CSFV、PRRSV、PRV及PCV2多重荧光定量PCR方法的建立
3.PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV复合PCR检测方法的建立
4.CSFV,SIV,PCV2,PRV 和PRRSV多重PCR检测方法的建立及初步应用
5.CSFV、PRRSV、PEDV和PRV 四重荧光定量PCR方法的建立及应用
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。