牛冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

牛冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用
何琪富;郭紫晶;李然;周军;岳华;张斌;汤承
【期刊名称】《畜牧兽医学报》
【年(卷),期】2018(49)10
【摘要】本试验的目的是建立更加灵敏的检测牛冠状病毒(BCoV)的RT-PCR方法,并对川西北草原牦牛病料进行BCoV病原检测.选择BCoV聚合酶基因Nsp7-Nsp9片段设计引物,通过反应条件和体系优化,建立检测BCoV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测.结果显示:所建方法特异性和重复性好,灵敏性达到1×10-2 pg·μL-1;该方法对肉牛和牦牛BCoV都有良好的检测效果,优于比较的两种以BCoV N基因为靶点的RT-PCR方法;对2016年采集的川西北草原牦牛病料进行了BCoV的检测,结果显示;125份腹泻牦牛粪便样本中BCoV的检出率为
71.20％,98份患呼吸道疾病的牦牛鼻腔棉拭子中BCoV的检出率为72.45％.此次建立的BCoV RT-PCR检测方法特异性和重复性好、灵敏度高;BCoV是当前川西北草原牦牛腹泻和呼吸道疾病综合征的重要病原.
【总页数】7页(P2292-2298)
【作者】何琪富;郭紫晶;李然;周军;岳华;张斌;汤承
【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;国家民委青藏高原动物疫病防控创新团队,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;国家民委青藏高原动物疫病防控创新团队,成
都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;国家民委青藏高原动物疫病防控创新团队,成都610041
【正文语种】中文
【中图分类】S852.659.6
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