转基因猪骨髓间充质干细胞的分离及与猪胰岛的共培养研究

转基因猪骨髓间充质干细胞的分离及与猪胰岛的共培养研究朱淑芳;曲泽澎;陆赢;潘登科;牟丽莎
【期刊名称】《器官移植》
【年(卷),期】2024(15)1
【摘要】目的探讨α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)、GTKO/人补体调节蛋白hCD46插入、单磷酸胞嘧啶-N-乙酰神经氨酸羟化酶(CMAH)/GGTA1双基因敲除(Neu5GC/Gal)猪骨髓间充质干细胞(BMSC)的分离培养,以及与猪胰岛共培养对胰岛的保护作用。

方法从不同转基因修饰GTKO、GTKO/hCD46及Neu5GC/Gal猪中提取骨髓,采用全骨髓法分离猪BMSC后进行培养。

对BMSC进行形态学观察,并使用流式细胞术鉴定BMSC表面标志物。

同时,观察BMSC诱导的多向分化,通过绿色荧光蛋白(GFP)转染标记猪BMSC来实现对BMSC的标记和示踪。

将GFP转染标记的猪BMSC与猪胰岛细胞共培养,观察猪胰岛形态变化,与单纯猪胰岛细胞培养组进行比较。

结果猪来源的BMSC在体外培养时呈梭形,表达标志物CD29、CD44、CD73、CD90、CD105及CD166,不表达CD34、CD45,具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞分化的能力;通过GFP转染标记的猪BMSC能够实现BMSC的标记和示踪,且在细胞分裂后的子代细胞中也能够稳定表达。

猪BMSC对胰岛细胞有一定保护能力。

结论成功建立了GFP标记的GTKO、GTKO/hCD46及Neu5GC/Gal猪来源的BMSC,其对胰岛细胞具有一定的保护能力。

【总页数】8页(P55-62)
【作者】朱淑芳;曲泽澎;陆赢;潘登科;牟丽莎
【作者单位】广西中医药大学;深圳市第二人民医院深圳转化医学研究院;四川省医学科学院四川省人民医院临床免疫转化医学四川省重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】R617;Q78
【相关文献】
1.自体骨髓间充质干细胞和同种异体肋软骨细胞共培养修复五指山小型猪膝关节软骨缺损的实验研究
2.体外分离共培养诱导大鼠骨髓间充质干细胞定向分化为子宫韧带成纤维细胞的研究
3.大鼠骨髓间充质干细胞与大鼠胰腺岛管上皮细胞间接共培养向胰岛细胞分化的实验研究
4.猪骨髓间充质干细胞的分离培养及体外转化为心肌样细胞的实验研究
5.猪骨髓间充质干细胞的分离培养及核移植后重构胚胎发育能力的研究
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。