细菌数量的测定

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等有机溶剂脱水使其干燥。
干燥后放回计数板盒,注意安全,玻璃 易碎!
微生物学实验 细菌数量的测定
细菌数量的测定
实验目的:
1.学习微生物数量测定中常用的基本原理 2.掌握几种测定细菌数量的方法
3.学会使用血细胞计数板进行计数。
细菌数量的测定
测定方法 1 显微镜直接计数(计数板计数、载玻片计数) 2 平板菌落计数 3 比浊法
材料用具 菌种: 酵母菌 仪器: 显微镜、血细胞计数板、计数器、无菌 吸管、滤纸、盖玻片
血细胞计数板 (希里格式25×16、,麦式 16×25)
计数室
正面图
载玻片 盖玻计数室(中间大方格)的长和宽各为 1mm , 深 度 为 0.1mm , 其 体 积 为
_0_._1___mm3 ,合_1_×__1_0__-4__mL。
计数室
计数室分为25中格(双线边) 每一中格又分为16小格 计数室是由_2_5_×__1_6_=_4_0_0_个小格组成
细菌数量的测定
5 计算菌液浓度 1 ml培养液中酵母菌数量(个/ml)=
平均每个中格酵母细胞数×25×104 ×稀释倍数 80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数
细菌数量的测定
6 血细胞计数板的清洁
血细胞计数板使用后,用自来水冲洗, 切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风
机吹干,或用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮
细菌数量的测定
操作步骤 1 菌液稀释 2 加样
将计数板水平放置试验台上,盖上盖玻片于 计数室上方,用吸管将菌液吹吸均匀,然后吸取 少量菌液,从计数板一侧中间平台与盖玻片接触 的边缘处加样,让菌液自行渗入并充满计数室, 多余的菌液用滤纸吸去
加样一气呵成,不可有气泡产生,不可使盖 玻片悬浮
细菌数量的测定
3 定位计数室 现在低倍镜下
找到计数板大方 格的位置,转换 高倍镜后,适当 调暗光线至计数 室线条清晰为止
4 计数
选取如图5个中方格,进 行计数。当遇上细胞位于 分界线上时,按如下规则 计数: 记上不记下,记左不计右
A1
A2
A5
A3
A4
记上不记下,记左不计右
计数室细胞数量太多,则菌液需要稀释再计数, 每个中方格细胞数量不超过50个为宜。
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