超声波辅助提取-HPLC同时测定六味地黄成方制剂中马钱苷和丹皮酚的含量

·药物检验与分析·
超声波辅助提取 ＨＰＬＣ同时测定六味地黄成方制剂中马钱苷和丹皮酚的含量
潘小红，李　涛，刘玉玲，林　海，殷　帅 （湖南省药品检验研究院，湖南长沙４１０００１）
摘要：目的　建立了超声波辅助提取 ＨＰＬＣ同时测定５种六味地黄成方制剂中马钱苷和丹皮酚的含量。

方法　以ＡｇｉｌｅｎｔＳＢ ＡＱ（４ ６ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μ
ｍ）为分析柱，０ ２％磷酸溶液 乙腈为流动相，梯度洗脱，流速：０ ８ｍＬ·ｍｉｎ－１
；柱温：３５℃；于２４０ｎｍ和２７４ｎｍ同时测定马钱苷和丹皮酚的含量。

结果　马钱苷和丹皮酚浓度在０～４００μｇ范围内线性关系良好；５种成方制剂测定结果的重复性ＲＳＤ均小于３ ５％，精密度小于０ ６％，２４ｈ稳定性的ＲＳＤ在１ ５％以内；马钱苷和丹皮酚的回收率分别为９７ ９％～１０４ １％和９６ １％～１０２ ０％，ＲＳＤ小于３％。

结论　该方法操作简单准确、重现性好、具有较好的适用性，可用于马钱苷和丹皮酚的含量测定，以控制六味地黄成方制剂的质量。

关键词：超声波辅助提取；高效液相色谱法；中国药典；六味地黄
中图分类号：Ｒ９２７　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００６ ３７６５（２０２０） ０９ ００５２ ０４
作者简介：潘小红。

职称：高级实验师，主要研究方向：食品、药品和化妆品的检测和质量标准的建立及提高。

Ｅ ｍａｉｌ：Ｐａｎｘｉａｏｈｏｎｇ５６７８１＠１６３ ｃｏｍ
通讯作者：殷　帅。

职称：副主任药师。

主要研究方向为药品和化妆品的检测和质量标准的建立及提高。

Ｅ ｍａｉｌ：８６８９７９５３＠ｑｑ ｃｏｍ基金项目：湖南省自然科学基金（２０１６ＪＪ６０７９）
ＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＣｏｎｔｅｎｔｏｆＬｏｇａｎｉｎａｎｄＰａｅｏｎｏｌｉｎＬｉ ｕＷｅｉＤｉＨｕａｎｇＰｉｌｌａｎｄｉｔｓＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｂｙＵｌｔｒａｓｏｕｎｄ ＡｓｓｉｓｔｅｄＥｘｔｒａｃｔｉｏｎ ＨＰＬＣ
ＰＡＮＸｉａｏ ｈｏｎｇ，ＬＩＴａｏ，ＬＩＵＹｕ ｌｉｎｇ，ＬＩＮＨａｉ，ＹＩＮＳｈｕａｉ （ＨｕｎａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００１，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＬｏｇａｎｉｎａｎｄＰａｅｏｎｏｌｉｎｆｉｖｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｏｆＬｉｕＷｅｉＤｉＨｕａｎｇｂｙｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄ ＭＥＴＨＯＤＳ　ＴｈｅＡｇｉｌｅｎｔＳＢ ＡＱ（４ ６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μ
ｍ）ｗａｓａｄｏｐｔｅｄａｓａｎａｌｙｔｉｃａｌｃｏｌｕｍｎ Ｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎｏｆ０ ２％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄｓｏｌｕ ｔｉｏｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗｉｔｈａｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ０ ８ｍＬ·ｍｉｎ－１
Ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３５℃ Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｏｇａｎｉｎａｎｄｐａｅｏｎｏｌａｔｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｏｆ２４０ｎｍａｎｄ２７４ｎｍ ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒｅｌａ ｔｉｏｎｓｈｉｐｓｏｆｌｏｇａｎｉｎａｎｄｐａｅｏｎｏｌｗｅｒｅｇｏｏｄｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０ ４００μｇ Ｔｈｅｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ，ｐｒｅｃｉｓｉｏｎａｎｄ２４ ｈｏｕｒｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆＲＳＤｗｅｒｅｌｅｓｓｔｈａｎ３ ５％，０ ６％ａｎｄ１ ５％ Ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｓｏｆｌｏｇａｎｉｎａｎｄｐａｅｏｎｏｌｗｅｒｅ９７ ９％ １０４ １％ａｎｄ９６ １％ １０２ ０％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄＲＳＤｗａｓｌｅｓｓｔｈａｎ３％ ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅａｎｄｇｏｏｄａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ，ａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｏｇａｎｉｎａｎｄｐａｅｏｎｏｌｉｎｏｒｄｅｒｔｏｃｏｎｔｒｏｌｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆＬｉｕｗｅｉＤｉｈｕａｎｇａｎｄｉｔｓｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ＫＥＹＷＯＲＤＳ：Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ＨＰＬＣ；ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ；ＬｉｕＷｅｉＤｉＨｕａｎｇＰｉｌｌ
六味地黄丸、
六味地黄丸（浓缩丸）、六味地黄软胶囊、六味地黄胶囊、六味地黄颗粒均为《中华人民共和国药典２０１５年版》（一部）（以下简称中国药典收载的品种，是由熟地黄、牡丹皮、山药、山茱萸、泽泻、茯苓等六味中药经现代工艺提取
制成的一种复方制剂，具有滋阴补肾之功，主要用于肾阴亏虚
所致的头晕耳鸣，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精，消渴〔１〕。

目前临床用于Ⅱ型糖尿病〔２〕，抗肿瘤〔３〕，护理妇女更年期综合征〔４〕，骨质疏松症〔５〕，儿童甲状腺功能亢进症肾阴虚型〔６〕，前列腺增生症〔７〕等疾病治疗。

中国药典含量测定项中，除六味地黄胶囊供试品溶液制备采用超声处理，六味地黄丸和六味地黄颗粒采用ＨＰＬＣ同时测定含量外，其余均采用加热回流１ｈ后，ＨＰＬＣ分别测定丹皮酚、马钱苷（莫诺苷）含量，测定提取时间长，操作相对较
繁琐。

文献报道ＨＰＬＣ同时测定几种含量〔８ １０〕，研究对象均
为单一成方制剂，且采用传统加热回流提取，不足以全面评价超声波辅助提取 ＨＰＬＣ同时测定马钱苷和丹皮酚含量方法的适用性。

本试验采用超声波辅助提取，通过优化色谱条件，采用ＨＰＬＣ同时对中国药典中５种共８批六味地黄成方制剂含量测定项相同的项目下马钱苷和丹皮酚进行测定，比对超声波辅助提取和传统加热提取的效果，以期为六味地黄成方制剂质量标准的提升提供一定的实验数据支撑。

１　材料与方法
１ １　试验原料　样品均在药店购买，共８批（见表１）。

表１　样品信息
编号名称厂家批号生产日期１六味地黄丸（小蜜丸）九芝堂股份有限公司２０１７０１０２４２０１７／１／１２２六味地黄丸（浓缩丸）九芝堂股份有限公司２０１７０９００４２０１７年９月２日３六味地黄丸（浓缩丸）九芝堂股份有限公司２０１８１００３０２０１８年１０月１９日４六味地黄丸（浓缩丸）北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂１７０７３４６９２０１７ １２ １３５六味地黄丸天津中新药业集团股份有限公司５８０７４５２０１７ ０５ １５６六味地黄软胶囊北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂１８１７０３０８２０１８ ０１ １８７六味地黄胶囊湖南康尔佳制药股份有限公司１７０９０１２０１７ ０９ ０５８六味地黄颗粒保和堂（焦作）制药有限公司２０１６０５０７２０１６／５／２９
１ ２　仪器与试剂　Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０Ｉｎｆｉｎｉｔｙ高效液相色谱仪（美
国安捷伦公司）；ＳＢＺＳ １２Ｄ超声波清洗器（中国ＳＣＩＥＮＴＺ公
司，２５０Ｖ，２５ＨＺ）；ＴＢ ２１５Ｄ电子分析天（美国ＤＥＮＶＥＲ公
司），ＵＶ ２５５０紫外可见分光光度计（日本岛津公司）。

丹皮酚对照品（批号：１１０７０８ ２００５０６）、马钱苷对照品（批
号：１１１６４０ ２０１６０６），均来源于中国食品药品检定研究院。

本实验所有试剂均为色谱纯，所有水均为Ｍｉｌｌｉ Ｑ纯水仪
制备。

１ ３　实验方法
１ ３ １　仪器条件的选择：色谱柱：ＴｈｅｒｍｏＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣＡｃ
ｃｌａｉｍＴＭ１２０、ＡｇｉｌｅｎｔＴＣ Ｃ
１８（２）、ＡｐｏｌｌｏＣ
１８
、Ａｇｉｌｅｎｔ５ＴＣ Ｃ
１８
（２）、ＡｇｉｌｅｎｔＳＢ ＡＱ、ＣＮＷＡｔｈｅｎａ ＷＰ，１００ＡＣ
１８
（４ ６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；检测器：二极管阵列；检测波长：马钱苷（２４０ｎｍ）、丹皮酚（２７４ｎｍ）；流速；０ ８ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温：３５℃；进样量：１０μＬ；流动相：甲醇（Ａ） ０ ０２％磷酸溶液（Ｂ）。

１ ３ ２　标准品溶液的制备：称取马钱苷对照品９ ３８ｍｇ，丹皮酚对照品２３ ９８ｍｇ，分别至２５ｍＬ容量瓶中，加甲醇，溶解，定容至刻度，马钱苷、丹皮酚储备溶液浓度分别为０ ３７２２ｍｇ·ｍＬ－１，０ ９５８６ｍｇ·ｍＬ－１，用流动相稀释配制马钱苷、丹皮酚０～４００μｇ·ｍＬ－１系列标准溶液，２００～６００ｎｍ最大波长扫描，绘制对照品标准曲线，计算回归方程。

１ ３ ３　供试品溶液的制备：①加热回流提取：取样品研细，六味地黄丸１ ０ｇ、六味地黄丸（浓缩丸）０ ５ｇ、六味地黄软胶囊０ ５ｇ、六味地黄胶囊０ ２５ｇ、六味地黄颗粒１ ０ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入５０％甲醇５０ｍＬ，密塞，称定重量，加热回流１ｈ，放冷，再称定重量，用５０％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

②超声提取：参照回流提取取样，置具塞锥形瓶中，精密加入５０％甲醇５０ｍＬ，超声３０ｍｉｎ，冷却，滤过，取续滤液，即得。

１ ３ ４　样品测定：按１ ３ ３供试品溶液的制备中加热回流提取和超声提取对８批六味地黄成方制剂进行测定。

１ ３ ５　重复性、精密度、稳定性试验：不同成方制剂选取一批，各称取６份，根据样品测定结果选取１ ３ ３供试品溶液的制备最优提取制备样品，按１ ３ １色谱条件进行测定；选取其中２份，一份连续进样６次，一份分别在０，４，８，１２，１６，２０，２４ｈ进样测定，每次进样量１０μＬ。

马钱苷、丹皮酚的精密度、稳定性以直接计算峰面积的ＲＳＤ表示，重复性以峰面积与取样量比值的ＲＳＤ表示。

１ ３ ６　回收率试验：精密称取已知含量的样品，平行３份，分别加入马钱苷、丹皮酚储备溶液各１ｍＬ，参照１ ３ ３供试品溶液的制备。

２　结果与分析
２ １　最大吸收波长的选择　通过紫外分光光度计和二级管阵列检测器在波长１９０～４００ｎｍ下做最大波长扫描。

结果表明马钱苷在２４０ｎｍ、丹皮酚在２７４ｎｍ处有最大吸收波长，跟《中国药典》２０１５年版一部规定一致，故选择马钱苷在２４０ｎｍ，丹皮酚在２７４ｎｍ测定，紫外最大吸收波长扫描图（见图１）。

图１　紫外扫描图
２ ２　流动相的选择　考察了甲醇、乙腈体系，甲酸、乙酸与磷酸体系和各自浓度对马钱苷、丹皮酚色谱峰分离度、半峰宽、理论踏板数及灵敏度等指标对３种成分的综合影响，结果发现：乙腈 ０ ２％磷酸明显优于其他流动相，最佳的流动相梯度（见表２）。

２ ３　色谱柱考察　不同成分对不同色谱柱具有专一性要求，采用高效液相色谱法同时测定马钱苷、丹皮酚，对色谱柱提出了更高的要求。

选用了参考文献报道及实验室常用的６款
Ｃ１８色谱柱进行了考察，结果发现ＡｇｉｌｅｎｔＴＣ Ｃ１８（２）（４ ６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）、Ａｇｉｌｅｎｔ５ＴＣ Ｃ１８（２）（４ ６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）、ＡｇｉｌｅｎｔＳＢ ＡＱ（４ ６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）３款色谱柱具有非常好的分离度，理论踏板数均大于６０００，本实验所有数据采用Ａｇ ｉｌｅｎｔＳＢ ＡＱ分析所得（见图２）。

表２　流动相梯度序号时间Ａ（０ ２％磷酸）
乙腈流速（
ｍＬ·ｍｉｎ－１
）１０ ００８５１５０ ８２９ ００８５１５０ ８３９ ５０７８２２０ ８４１６ ００７８２２０ ８５１６ ５０４５５５０ ８６２４ ５０４５５５０ ８７２５ ００８５１５０ ８８
２７ ００
８５
１５
０
８
图２　马钱苷和丹皮酚高效液相图
２ ４　线性方程考察　两种标准标准溶液，浓度在０～４００μｇ范围内线性关系良好。

马钱苷为ｙ＝２ ０１８３ｘ－２３ ０６１，Ｒ＝０ ９９９８；丹皮酚为ｙ＝７ ４８２４ｘ＋１０４ ９８，Ｒ＝０ ９９９８。

２ ５　不同提取方法对样品测定结果分析　不同提取方法测定马钱苷和丹皮酚的结果（见表３）。

表３　不同提取方法测定的结果
编号名称
马钱苷含量（
％）加热回流
提取超声波
辅助提取相对标准
偏差ＲＳＤ（％）丹皮酚含量（％）加热回流
提取超声波
辅助提取相对标准
偏差ＲＳＤ（％）１六味地黄丸（小蜜丸）０ ０９１８０ ０８７５３ ３９０ １５９６０ １５０３４ ２４２六味地黄丸（浓缩丸）０ ２０９２０ ２２５８５ ４００ ２８４３０ ３０８７５ ８２３六味地黄丸（浓缩丸）０ ２１６７０ ２３３２５ １９０ ３０８３０ ３３２５５ ３４４六味地黄丸（浓缩丸）
０ ２７１３０ ２９８６６ ７７０ １８５８０ ２０９２８ ３８５六味地黄丸０ １１１５０ １２７１９ ２５０ １３０３０ １４７６８ ８０６六味地黄软胶囊０ ２９８０ ２４０７１５ ０４０ ３５３１０ ２７４４１７ ７４７六味地黄胶囊０ ２０７３０ ２１５３２ ６８０ ９２２３１ １３２４１４ ４６８
六味地黄颗粒
０ １１９８
０ １４８
１４ ８９
０ １４２８
０ １６５３
１０ ３３
根据《中国药典２０１５年版》（四部）９１０１药品质量标准分析方法验证指导原则精密度的要求，样品中待测成分含量在０ １％，重现性ＲＳＤ要求为６％。

从表３种可以看出，共５批样品的ＲＳＤ大于６％，除编号６号六味地黄软胶囊外，其余４批采用超声波辅助提取，马钱苷、丹皮酚含量测定结果均大于加热回流提取。

查看各制剂的〔制法〕，六味地黄软胶囊为：将〔处方〕六味药材分步蒸馏、提取、水煎、浓缩、减压干燥，粉粹成细粉，加入牡丹皮挥发性成分及精制大豆油，混匀，制成软胶囊；其余制剂均对〔处方〕药材分步处理后，合并提取液，干燥，磨成细粉，加入挥发性成分、药材原粉或药渣细粉，制丸、压制成片或制成胶囊。

大豆油的加入是否影响超声波辅助提取的结果需要进一步探讨，但超声波辅助提取有利于细胞破裂，可以增加〔制法〕中加入药材原粉和药渣细粉制剂中有效成分的溶出。

另外不同厂家生产的六味地黄丸浓缩丸，采用不同提取方法，含量测定结果也有一定区别，如样品编号２、３、４、５的六味地黄（浓缩丸），２、３号为九芝堂股份有限公司生产的不同批次产品，４号为北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂生产，５号为天津中新药业集团股份有限公司，样品编号２、３测定结果的ＲＳＤ均在６％以内，４、５号ＲＳＤ＞６％，推测原因可能与不同制药厂的生产工艺相关。

２ ６　重复性、精密度、稳定性测定结果　根据２ ５样品的测
定结果，六味地黄软胶囊按１ ３ ３供试品溶液的制备①加热回流提取制备，其余按②超声提取制备样品，５种成方制剂测定结果的重复性ＲＳＤ均小于３ ５％，精密度小于０ ６％，稳定性的ＲＳＤ在１ ５％以内，说明方法重现性好，马钱苷与丹皮酚均较稳定。

２ ７　回收率试验　５种成方制剂的马钱苷回收率在９７ ９％～１０４ １％，丹皮酚的回收率在９６ １％～１０２ ０％，ＲＳＤ小于３％，方法具有较好的适用性（见表４）。

３　结论
３ １　超声波提取技术已经广泛应用于天然药物中各种有效成分的提取分离，并取得了很好的效果；采用ＨＰＬＣ同时测定多组分含量，可以节约大量分析时间，减少操作的繁琐。

马钱苷和丹皮酚为５个六味地黄成方制剂含量测定项下需要测定的共同项目，毛蕊花糖苷为地黄含量测定项指标，莫诺苷、熊果酸为部分六味地黄成方制剂含量测定项下指标，后期将进一步开展采用超声波辅助提取
ＨＰＬＣ同时测定上述５种成分的准确含量，以达到全面实现六味地黄成方制剂的质量控制。

３ ２　色谱条件优化时发现，用甲醇或乙腈体系为流动相，对马钱苷和丹皮酚保留时间的影响很大，但对色谱柱专属性要求不高；考察了不同厂家的６根Ｃ１８柱，其中３根都可以满足分析要求，说明对色谱柱具有较好的耐受性。

表４　加样回收率试验
序号样品名称取样量
（ｇ）马钱苷回收率计算
丹皮酚回收率计算样品含量（％）测的量
（ｍｇ）回收率
（％）平均值
（％）ＲＳＤ（％）样品含量（％）测的量
（ｍｇ）回收率
（％）平均值
（％）ＲＳＤ
（％）１
六味地黄丸小蜜丸
０ ５０３４０ ０８７５０ ８０６５９８ ３９９ ０
１ ７
０ １５０３１ ６７８１
９６ １９８ １
２ １
０ ４９２７０ ０８７５０ ７９５２９７ ８１ ７０２４１００ ３０ ５０３４０ ０８７５０ ８１６３
１０１ ０１ ６９５７
９８ ０２
六味地黄丸浓缩丸
０ ２５１７０ ２２５８０ ９３１３９７ ５９７ ９
１ ２
０ ３０８７１ ７２２８
９８ ７９９ ３
１ ３
０ ２５１８０ ２２５８０ ９２９８９７ １１ ７４３５１００ ８０ ２４９９０ ２２５８０ ９３３６
９９ ２１ ７１５６
９８ ５３
六味地黄软胶囊
０ ２５６１０ ２９８１ １３２９９９ ３１０１ ４
２ ４
０ ３５３１１ ８５３７
９９ ０９９ ０
０ ９
０ ２６０２０ ２９８１ １６３０１０４ １１ ８７７１１００ ００ ２５４６
０ ２９８
１ １３３４
１００ ７１ ８３９５
９８ １４
六味地黄胶囊
０ １３０２０ ５１５３１ ０４１３９９ ５１００ １
１ ６
１ １３２４２ ４５２１
１０２ ０１００ ４
１ ４
０ １３４６０ ５１５３１ ０６１８９８ ９２ ４８１６９９ ９０ １３６７０ ５１５３１ ０８３６
１０１ ９２ ４９９５
９９ ３５六味地黄颗粒０ ５０２７０ １４８１ １２１３１０１ ４９９ ９
１ ３
０ １６５３１ ８００９
１０１ ２９９ ８
１ ２
０ ４９３８０ １４８１ ０９９８９９ １１ ７６５８９９ １０ ５０２７
０ １４８
１ １１３４
９９ ２
１ ７８０６
９９ １
３ ３　传统加热回流和超声辅助提取测定结果表明，超声辅助提取可以用于六味地黄成方制剂含量测定中，方法学试验，５个成方制剂测定结果的重复性ＲＳＤ均小于３ ５％，精密度小于０ ６％，稳定性的ＲＳＤ在１ ５％以内，马钱苷回收率在９７ ９％～１０４ １％，丹皮酚的回收率在９６ １％～１０２ ０％，ＲＳＤ小于３％，说明方法稳定、重现性好、具有较好的适用性。

参考文献
〔１〕国家药典委员会编 中国药典（２０１５年版一部）〔Ｓ〕 北京：中国
医药科技出版社，２０１５
〔２〕闫旭 关于六味地黄丸治疗糖尿病肾病２５例的临床研究〔Ｊ〕 继
续医学教育，２０１７，３１（１２）：１５６ １５７
〔３〕黄琳，吴秋云，皮真，等 六味地黄丸抗肿瘤作用机理探讨〔Ｊ〕 中
兽医医药杂志，２０１８，３７（６）：８１ ８３
〔４〕郭美霞 针刺结合六味地黄丸治疗及护理妇女更年期综合征的
疗效观察〔Ｊ〕 世界最新医学信息文摘，２０１７，１７（１０２）：２０３ ２０６ 〔５〕陶乐维，陆灏 六味地黄丸治疗骨质疏松症研究进展〔Ｊ〕 上海中
医药杂志，２０１７，５１（增刊１）：２８５ ２８７
〔６〕陈钰，何琼笑 六味地黄丸联合西药治疗儿童甲状腺功能亢进症
肾阴虚型３
２例临床观察〔Ｊ〕 中医儿科杂志，２０１９，１５（１）：６３ ６５ 〔７〕袁冰，臧桐，孙凤岭 六味地黄配合前列康治疗前列腺增生症临
床观察〔Ｊ〕 中国医师杂志，２００４，增刊：２５９ ２６０
〔８〕王慧，潘永，邱洪 ＨＰＬＣ测定六味地黄胶囊中马钱昔的含量〔Ｊ〕
中国医院药学临床专集，２０１６，３６：３７９
〔９〕林雨芹，季巧遇，邵坚，等 ＨＰＬＣ法测定六味地黄膏中莫诺苷和马
钱苷含量〔Ｊ〕 江西中医药大学学报，２０１８，３０（２）：７４ ７６ 〔１０〕李桂本，王海波，李振国 ＨＰＬＣ波长切换技术同时测定知柏地黄
丸（浓缩丸）中莫诺苷、芒果苷、马钱苷和丹皮酚的含量〔Ｊ〕 药物分析杂志，２０１５，３５（１）：１２５ １２８
作者简介：陈　锋，男。

学历：硕士研究生。

职称：主管药师。

主要从事医院药学研究。

Ｅ ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｆｅｎｇ８７１２２４＠１６３ ｃｏｍ基金项目：广东省韶关市卫生计生科研计划项目（Ｙ１８０８１）。

高效液相色谱法测定痔复康颗粒中芦丁的含量
陈　锋１，孟庆海２，赖新华１，徐晓梅１，林晓春１，王仲洪１，郑锦坤１（１ 粤北人民医院，广东韶关５１２０２６；２ 南京中医药大学，江苏南京２１００２３）
摘要：目的　建立测定痔复康颗粒中芦丁含量的高效液相色谱方法。

方法　色谱柱采用ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎＡＱ Ｃ１８（
４ ６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；乙腈 ０ １％甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱；流速：１ ０ｍＬ·ｍｉｎ－１
；检测波长：２５４ｎｍ；柱温：３５℃；进样量：１０μＬ。

结果　芦丁进样量在２ ５～１６０μｇ·ｍＬ－１
范围内与峰面积呈现良好的线性关系（ｒ＝０ ９９９９）；平均加样回收率为９９ ７８％（ＲＳＤ为１ ３８％，ｎ＝６）；４批供试品中芦丁平均含量为０ ２８６２５ｍｇ·ｇ－１。

结论　该测定方法操作简便、准确，可用于痔复康颗粒中芦丁的含量分析。

关键词：痔复康颗粒；高效液相色谱；含量测定；芦丁
中图分类号：Ｒ９２７　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００６ ３７６５（２０２０） ０９ ００５５ ０３。