离体蛙心灌注及多种因素对蛙心的影响汇总.

合集下载

离体蛙心灌流及某些离子药物对离体蛙心活动的影响

30
在蛙心插管中滴加乳酸，使心肌力发生改变的原因是（）。
收缩
H+抑制Ca2+的内流
H+与Ca2+竞争肌钙蛋白
H+抑制K+的内流
去甲肾上腺素肾上腺素
BDE
去甲肾上腺素肾上腺素
ABC
H+抑制Na+的内流
H+与Ca2+竞争钙调蛋白
AB
31
在蛙心插管中滴加碳酸氢钠，使心肌 OH-中和H+，使H+
收缩力发生改变的原因是（）。
浓度减少
H+减少促进Ca2+内流
H+减少促进Ca2+与肌 OH-促进Ca2+的内
钙蛋白的亲和力
流
OH-促进Ca2+ 与肌钙蛋白的亲和力
ABC
32
蛙心夹夹住心尖不在观察一些离子、药物对离体蛙心活宜过多，以免过度每次更换任氏液量动的影响时，应注意的事项包括（）牵拉造成心室损伤应该保持一致
心室舒张的程度
11
在离体蛙心灌流实验中，记录心搏曲线时，曲线的密度代表
心肌收缩的强弱
12
在离体蛙心灌流实验中，记录心搏曲线时，曲线的基线代表
心肌收缩的强弱
心跳节律心跳节律
心跳频率心跳频率
心室舒张的程度心室舒张的程度
E 5
静脉窦左主动脉上任意部位均可 β
β
β 以上均有可能 HCO3以上均错误
在蛙心插管中滴加ACh引起心肌收缩力
4 的改变是ACh与心肌上哪种受体结合的 M
N
α
V
结果。
在蛙心插管中滴加肾上腺素引起心肌

不同离子对蛙离体心脏活动的影响

不同离子对蛙离体心脏活动的影响08科2摘要：本次实验采用用蛙类斯氏离心心脏灌流法，采用1%、2%、4%三种不同浓度的钾、钠、钙溶液分别进行灌流实验。

结果表明：高浓度的氯化钠能够使心脏收缩和舒张的幅度均减小，但心脏频率基本山不变；KCl使蛙心活动减弱，甚至停在基线处。

并且浓度越大，减弱越快，基线越往上移动；氯化钙使蛙心收缩力和舒张增强，心率明显加快，且浓度越大影响越明显。

关键字：蛙心灌流不同离子浓度心脏活动影响前言蛙心离体后，用理化因素类似于两栖类动物血浆的任氏液灌注时，在一定时间内，仍保持有节律的舒缩活动，而改变灌流液的理化性质后，心脏的节律性舒缩活动亦随之改变，说明内环境理化因素的相对恒定是维持正常心脏活动的必要条件。

心脏的主要功能是兴奋和收缩。

兴奋以离子为基础，因此细胞外或血浆内的离子浓度变化对心脏有重要影响，其中钾钠钙最为重要。

因而，我们设计不同浓度的钾、钠、钙溶液对心脏进行灌流的实验。

初步研究这三种离子对心脏兴奋性的影响，以期加深对心脏正常功能的了解和初步探讨异常功能的形成原理。

1、实验材料和方法1.1【材料】1.1.1实验动物：蛙1.1.2实验器材：生物机能系统或BL-420生物信号采集系统，张力换能器，探针，外科剪，小手剪，烧杯，滴管，蛙心套管，蛙心夹，铁支架，试管夹，眼科镊，丝线，双凹夹，蛙板，蛙足钉等。

1.1.3实验药品：任氏液，氯化钠（1%，2%，4%），氯化钙（1%，2%，4%），氯化钾（1%，2%，4%），生理盐水等。

1.2【方法】（1）取蟾蜍1只，使头向下，将蛙针于枕骨大孔处向前插入颅腔左右摇动，破坏脑组织，再将针插入脊椎管，以破坏脊髓，动物全身软瘫。

（2）仰位固定于蛙板上，先用普通剪刀将胸部皮肤剪开，再将胸部肌肉及软骨剪去，用虹膜剪剪破心包膜暴露心肌。

（3）于主动脉干以下绕一线，左右放平，备结扎用。

在主动脉右侧分支下，再穿一线，尽量在远心端扎紧，左手提线，右手以眼科剪于左主动脉上向心剪一Ｖ形切口，将盛有任氏液的蛙心套管，通过主动脉球转向左后方，同时用镊子轻提动脉球，向插管移动的反方向拉，即可使插管尖端顺利进入心室，用主动脉干下的线结扎固定。

蛙心灌流实验报告

实验二离体蛙心灌流实验专业: 学号: 姓名:实验目的1•学习离体器官（蛙心）灌流的方法。

2.观察理化因素对蛙心活动的影响。

二、实验原理蛙心的灌流：蛙心无营养性血管，离体之后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间，心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。

心肌：1任氏液：正常对照含有NaC k CaC2、KC、NaH2PQ、N&HPQ和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。

灌流：细胞』液C爼州心肌细胞动作电位期间C护+内流H心肌细胞胞浆C屛+浓度W心肌收缩力卄%CaQ灌流:细胞外液C汁浓度显著升髙膜内■外C B孝度梯度增大慢反应细胞4期. 自动去极速度:=r—~ ==工作细胞动為电位期间C』内流怦' ---肌浆C乳浓度料肌浆cf浓度持续升高自律性'Cn古与肌钙蛋白结合数量忖心率专心肌收缩力怦C強与肌钙蛋白只结合币解离心肌持续收缩%KC灌流:辘楝K理度協牖K帥制層内沆郞•屉糕梯黠小1Ca纳巔少1 ,觴且位軸值诙小1 f'rtv瞅奋7嫦1 1鶉电位与胃电住般作用减小J灯的电雌减小「1 111心M瞅葩升高细胞膜对通透性4窦房结细胞最大复极电位绝对值增大.4期K 亠外流增加动作电位期iWCa^內流只心肌收缩力井心率*7. 心得安3受体阻断剂，抑制肾上腺素与8. 阿托品M 受体阻断剂，抑制Ach 减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。

细胞外液Q 浓度显著升高膜内■外哎浓度梯度减小静息电位绝对值减小至■55inVNa 通道失活心肌细胞兴奋性丧失心脏停»于舒张状态:10000 E 灌流肾上腺素(E) 心肌细胞膜Bj 受体结合6呜肌钙蛋自亲细胞膜対C 尹通透性彳和力#肌浆网摄C0速度t4期自动去极化速度丰复扱期肌浆C 必浓度降低速度聲心肌舒张丰:10000 Ach 灌流自律性齐心率彳浆网对A C 产逋透性I IT动作电位期钳t间C 尹内流丨丨 Jr心肌收缩力存乙酰胆＜(Ach) 心肌细胞膜M 受体结合TC1抑制钙通道自律性*3受体结合，使E 不能发挥作用。

某些因素对离体蛙心心脏活动的影响实验报告

心交感神经与去甲肾上腺素
心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上腺素，激动心肌细胞膜上的ß受体，产生正性变力、正性传导、正性变时等效应。
实验目的
1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。
2.用离体蛙心灌流的方法观察：
① K+、Ca2+ ② 酸、碱度 ③ 肾上腺素（E）
乙酰胆碱（Ach）
对心脏活动的影响
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
结果分析与讨论
3. 1%KCl灌流：
[K+ ]o↑
AP平台期缩短 Ca2+内流↓ 兴奋-收缩耦联↓ 收缩力↓
结果分析与讨论
4. 1:10000 E灌流与心肌β1受体结合 cAMP Ca2+内流↑ 肌浆网释放Ca2+↑ 兴奋-收缩耦联↑ 收缩力↑
4期 If 、I CaT通道↑
离体蛙心灌流及某些离子、药物对离体蛙心活动的影响
(perfusion of frog’s heart)
主要内容
相关理论知识实验部分
实验目的
实验对象实验仪器与药品实验步骤
结果分析与讨论
相关理论知识
正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。
观察项目
一、描记正常心搏曲线
曲线幅度 —— 收缩的程度曲线疏密 —— 心率曲线基线 —— 舒张的程度
观察项目
二、观察离子、药物和酸碱的影响 1)更换任氏液为3%氯化钙溶液1～2滴，记录心率和收缩幅度，冲洗（下同） 2)滴加1～2滴1%氯化钾溶液 3)滴加1～2滴1：10000去甲肾上腺素溶液 4)滴加1～2滴1：10000肾上腺素溶液 5)滴加1～2滴1：10000 乙酰胆碱溶液 6)滴加1～2滴 2.5%碳酸氢钠溶液 7)滴加1～2滴3%乳酸溶液

离子及药物对离体蛙心脏活动得影响

一实验目的1、学习制备离体蛙心脏及离体心脏灌流的方法。

2、观察钠离子、钾离子、钙离子3种离子，去甲肾上腺素、乙酰胆碱、温度、酸碱度等因素对心脏活动的影响。

3、通过实验使学生初步对递质、受体、受体兴奋剂及受体阻断剂的概念有所感知。

二实验原理心脏正常的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行，一旦适宜的环境被破坏，例如酸碱度及离子浓度的急剧改变等，心脏的活动就会受到影响。

在整体内，心脏的活动受自主神经的双重支配，交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素，使心肌收缩力量增强，心率加快；而迷走神经兴奋时，其末梢释放乙酰胆碱，使心肌收缩力量减弱，心率减慢。

强心甙类药物能够增强心肌收缩能力，减慢心率。

青蛙心脏离体后，用理化特性近似于血浆的任氏液灌流，在一定时间内，可保持其比较稳定的节律性收缩和舒张。

改变任氏液的组成成分，如改变Na+﹑K+﹑Ca2+ 的浓度及酸﹑碱度等，心脏跳动的频率和幅度就会发生相应的改变。

当血钾离子过高时，心肌兴奋性、自律性、传导性和收缩性均降低，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。

而血钙离子升高时，心肌收缩力增强，但过高时可使心室停搏于收缩期。

而血钙离子降低时，心肌收缩力减弱。

血钠离子轻微变化对心肌影响不明显，只有发生明显变化时才会影响心肌的生理特性，钠离子剧烈升高时心脏的兴奋性和自律性虽升高，但兴奋的传导性和收缩性却下降，严重时可使心脏停搏于舒张期。

三使用仪器、材料1、实验仪器：生物信号采集处理系统，张力换能器，小动物手术器械，蛙板，细线，滴管，烧杯，蛙心夹，蛙心插管，滴管，万能支架等2、实验材料：0.4%肝素-任氏液插管用，任氏液，0.65%氯化钠，2%氯化钙，1%氯化钾，1%乳酸，2.5%碳酸氢钠，1：10000肾上腺素，1：10000乙酰胆碱，1：5000阿托品等溶液四. 实验步骤1、双毁髓法处死青蛙2、蛙类离体心脏制备3、实验装置连接4、记录不同离子及药物对心脏收缩的影响先描记正常的蛙心搏动曲线作为对照，注意观察心搏频率、心室的收缩和舒张程度。

离体蛙心-灌流和影响

松结；在左主A下再穿一线结扎。
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.蛙心插管 1.2 在主动脉根部剪一斜口，将插管插入动脉圆锥，在心室收缩时将插管插入心室，结扎固定。
实验步骤
二、连接仪器和装置
1.用试管夹将蛙心管固定在铁支架上
2.把张力换能器固定铁支架支台上，在心室舒张期将与换能器相连的蛙心夹夹在心尖上。
用，对静息电位无影响。 [Ca2+]o ↑，可使心肌细胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。
相关理论知识
迷走神经和乙酰胆碱
迷走神经兴奋时，节后纤维释放Ach,激动心肌细胞膜上M型胆碱受体，产生负性变力、负性传导、负性变时等效应。
心交感神经与去甲肾上腺素
心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上腺素，激动心肌细胞膜上的ß受体，产生正性变力、正性传导、正性变时等效应。
曲线幅度 —— 收缩的程度曲线疏密 —— 心率曲线基线 —— 舒张的程度
观察项目
二、观察离子、药物和酸碱的影响 1)更换任氏液为3%氯化钙溶液1～2滴，记录心率和收缩幅度，冲洗（下同） 2)滴加1～2滴1%氯化钾溶液 3)滴加1～2滴1：10000去甲肾上腺素溶液 4)滴加1～2滴1：10000肾上腺素溶液 5)滴加1～2滴1：10000 乙酰胆碱溶液 6)滴加1～2滴 2.5%碳酸氢钠溶液 7)滴加1～2滴3%乳酸溶液
相关理论知识
影响心肌细胞电生理特性的原因
1.心肌的自动节律性
（1）最大复极电位与阈电位的差距（2）4期自动除极速度
2.心肌的兴奋性
（1）静息电位水平：依赖于细胞外K+浓度（2）Na+通道的性状
相关理论知识
影响心肌细胞电生理特性的原因

蛙心灌流及各种理化因素对心脏活动的影响

蛙心灌流及各种理化因素对心脏活动的影响心脏正常的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行，一旦适宜的环境被破坏，例如酸碱度及离子浓度的急剧改变等，心脏的活动就会受到影响。

强心甙类药物能够增强心肌收缩能力，减慢心率。

蟾蜍心脏离体后，用理化特性近似于血浆的任氏液灌流，在一定时间内，可保持其比较稳定的节律性收缩和舒张。

改变任氏液的组成成分，如改变Na+﹑K+﹑Ca2+的浓度及酸﹑碱度等，心脏跳动的频率和幅度就会发生相应的改变。

1. K＋对心脏活动的影响：总体看来心肌对细胞外K＋浓度变化比较敏感；但是不同部位心肌的敏感性有所不同，心房肌最敏感，房室束－浦肯野纤维系统次之，窦房结敏感性较低。

细胞外液钾浓度增高时，对兴奋性的影响与其浓度增高的程度有关。

当K＋浓度轻度或者中度升高时，细胞内外K＋的浓度梯度减小，K＋外流的力量减弱,静息电位（RP）的绝对值减小,和阈电位(TP)差值减小,细胞的兴奋性增高；当K＋的浓度大幅度的升高，RP的绝对值减小（膜内－55mv左右）时，钠通道的开放效率降低，钠通道逐渐失活，兴奋性降低或者丧失，严重时，可导致心肌停搏于舒张状态。

此时，仅由Ca2＋的内流来构成动作电位，故上升支小而缓慢，使兴奋传导速度减慢，传导性降低。

当细胞外K＋的浓度升高时，细胞膜对钾的通透性增高，心室肌细胞复极过程加速，平台期缩短，不应期也缩短。

高钾对心肌收缩功能有抑制作用。

因为细胞外的K＋和Ca2＋在细胞膜上有竞争性抑制；因此当膜外K＋的浓度升高时，平台期内流的Ca2＋减少，心肌细胞内的Ca2＋浓度难于升高，减小了Ca2＋的兴奋－收缩偶联作用，从而减弱了心肌收缩能力。

4期自动除极速度减慢，导致窦房结自律性降低，心率减慢。

2. Ca2＋对心脏活动的影响：细胞外Ca2＋在心肌细胞膜上对Na＋的内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。

某些因素对离体蛙心活动的影响

(8)酸碱的影响：加3%乳酸1～2滴，待效应明显后，再加1滴2.5%NaHCO3，观察曲线的变化。
【注意事项】
1、制备离体心脏标本时，勿伤及静脉窦。 2、蛙心夹应在心室舒张期一次性夹住心尖，避免因
夹伤心脏而导致漏液。
3、每一观察项目都应先描记一段正常曲线，然后再加药并记录其效应。加药时应在心跳曲线上予以标记，以便观察分析。
7、标本制备好后，若心脏功能状态不好（不搏动），可向插管内滴加1～2滴3%CaCl2或1：10， 000肾上腺素，以促进（起动）心脏搏动。在实验程序安排上也可考虑促进和抑制心脏搏动的药物交换使用。
8、谨防灌流液沿丝线流入张力传感器内而损坏其电子元件。
【思考题】
1、用实验说明内环境相对恒定的重要意义。 2、分析有的蛙心标本套管内液面升降不明显的原
KCl
CaCl2 NaHCO3 NaH2PO4 Glu
水
6.5g 0.14g 0.12g 0~ 2g 0.01g 2.0 g 100பைடு நூலகம்ml
（其中 glu 可加可不加，加的话可以多保存几天）
(3)向套管内加1－2滴3% CaCl2溶液（较细的套管需少加）溶液，作好加药记号，观察心搏曲线的频率及振幅变化。当曲线出现明显变化时，应立即吸去套管中的灌流液，并做好冲洗标记，迅速用新鲜任氏液清洗2－3次，待心搏恢复正常。
4、各种滴管应分开，不可混用。 5、在实验过程中，插管内灌流液面高度应保持恒定；
仪器的各种参数一经调好，应不再变动。
6、给药后若效果不明显，可再适量滴加，并密切注意药物剂量添加后的实验结果。给药量必须适度，加药出现变化后，就应立即更换任氏液，否则会造成不可挽回的后果，尤其是K＋稍有过量，即可导致难以恢复的心脏停跳。

离体蛙心灌流及某些离子药物对离体蛙心活动影响

实验结果
实验项目
任氏液 2% CaCl2 1% KCl 1：10000 E 1：10000 Ach 2.5% NaHCO3
3% 乳酸
收缩强度处理前处理后
心率处理前处理后
结果分析与讨论
1.任氏液：正常对照 2. 3%CaCl2灌流： [Ca2+ ]o ↑
Ca2+内流↑ [Ca2+]i↑
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
结果分析与讨论
3. 1%KCl灌流： [K+ ]o↑
AP平台期缩短 Ca2+内流↓
兴奋-收缩耦联↓
收缩力↓
结果分析与讨论
4. 1:10000 E灌流与心肌β1受体结合 cAMP Ca2+内流↑ 肌浆网释放Ca2+↑
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
4期 If 、I CaT通道↑ 4期自动去极速度↑
曲线幅度 —— 收缩的程度曲线疏密 —— 心率曲线基线 —— 舒张的程度
观察项目
二、观察离子、药物和酸碱的影响 1)更换任氏液为3%氯化钙溶液1～2滴，记录心率和收缩幅度，冲洗（下同） 2)滴加1～2滴1%氯化钾溶液 3)滴加1～2滴1：10000去甲肾上腺素溶液 4)滴加1～2滴1：10000肾上腺素溶液 5)滴加1～2滴1：10000 乙酰胆碱溶液 6)滴加1～2滴 2.5%碳酸氢钠溶液 7)滴加1～2滴3%乳酸溶液
相关理论知识
影响心肌细胞电生理特性的原因
1.心肌的自动节律性
（1）最大复极电位与阈电位的差距（2）4期自动除极速度
2.心肌的兴奋性
（1）静息电位水平：依赖于细胞外K+浓度（2）Na+通道的性状
相关理论知识

青蛙心功能影响因素的机能实验

青蛙心功能影响因素的机能实验【目的】利用离体蛙心的灌流方法，观察高钾、高钙、低钙、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。

【原理】作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋。

因此，只要将离体的蛙心保持在适宜的环境中，在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动，因而可将其作为实验对象进行处理和观察。

另一方面，心脏正常的节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定，并受多种神经、体液因素的调控，离体心脏一样，当改变灌流液的成分或给予某些活性物质刺激，可以引起心脏活动的改变。

高钾可引起心肌细胞自律性、兴奋性、传导性和收缩性都降低，心脏收缩力减弱、心跳减慢，严重可致心脏停搏于舒张状态；高钙可使心肌收缩力增强，钙浓度过高时可使心肌停搏于收缩状态，而低钙使收缩力减弱；血钠的一般变化对心肌生理特性影响不大。

肾上腺素对心脏具有兴奋作用，使心率加快、传导加快和收缩力增强，故在临床上用作强心剂；乙酰胆碱对心脏具有抑制作用。

【材料】蟾蜍或蛙；计算机生物信号处理仪，张力换能器；蛙心夹，滑轮，铁支架，双凹夹，蛙心插管，蛙类手术器械，滴管；任氏液，0.65%NaCl溶液，3%CaCl2溶液，1%KCl溶液，1∶10 000肾上腺素溶液，1∶100 000乙酰胆碱溶液，1%普萘洛尔溶液。

【方法和步骤】1.离体蛙心制备（1）取蟾蜍1只，破坏脑和脊髓后，使其仰卧固定在蛙板上，从剑突下将胸部皮肤向上剪开，然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏。

（2）在主动脉干下方引2根线。

一条在左主动脉上端结扎作为插管时牵引使用，另一根则在动脉圆锥上方系一松结，用于结扎固定蛙心插管。

（3）左手持左主动脉上方的结扎线，用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小V字形切口（切口至心室距离应与蛙心插管头部的长度相似），右手将盛有少许任氏液的蛙心插管由此剪口处插入动脉圆锥。

当插管头到达动脉圆锥时，用镊子夹住少许动脉圆锥处组织，将插管稍稍后退，并插管头朝向心室中央方向，镊子向插管的平行方向提拉，心室收缩期时将插管插入心室（图5-11）。

离体蛙心灌流及某些离子、药物对离体蛙心活动的影响

离体蛙心灌流及某些离子、对离体蛙心活动的影响perfusion of frog’s heart 主要内容相关理论知识实验部分实验目的实验对象实验仪器与药品实验步骤结果分析与讨论相关理论知识正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。

蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。

由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。

相关理论知识心肌细胞的生理特性表现为：自动节律性、兴奋性、传导性和收缩性。

心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生物活性物质（如激素）引起的细胞膜离子通透性的改变，对心肌细胞的生物电活动和生理特性必然会产生明显的影响。

相关理论知识影响心肌细胞电生理特性的原因 1.心肌的自动节律性（1）最大复极电位与阈电位的差距（2）4期自动除极速度 2.心肌的兴奋性（1）静息电位水平：依赖于细胞外K浓度（2）Na通道的性状相关理论知识影响心肌细胞电生理特性的原因 3.心肌的传导性主要取决于动作电位0期除极速度和幅度 4.心肌的收缩性依赖于细胞外钙离子浓度相关理论知识离子对心脏活动的影响钾离子K参与心肌细胞的复极化和自律细胞的4期自动去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外K浓度梯度，还与细胞膜对K通透性有关，因此其影响是多方面的相关理论知识离子对心脏活动的影响钙离子 Ca2对Na内流存在竞争抑制作用，称膜屏障作用，对静息电位无影响。

Ca2o ↑，可使心肌细胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。

相关理论知识迷走神经和乙酰胆碱迷走神经兴奋时，节后纤维释放Ach激动心肌细胞膜上M型胆碱受体，产生负性变力、负性传导、负性变时等效应。

心交感神经与去甲肾上腺素心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上腺素，激动心肌细胞膜上的受体，产生正性变力、正性传导、正性变时等效应。

实验目的1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。

某些因素对离体蛙心心脏活动的影响ppt医学课件

（2）4期自动除极速度
2.心肌的兴奋性
（1）静息电位水平：依赖于细胞外K+浓度（2）Na+通道的性状
5
相关理论知识
影响心肌细胞电生理特性的原因
3.心肌的传导性
主要取决于动作电位0期除极速度和幅度
4.心肌的收缩性
依赖于细胞外钙离子浓度
6
相关理论知识
离子对心脏活动的影响
钾离子
K+参与心肌细胞的复极化和自律细胞的4期自动去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外K+浓度梯度，还与细胞膜对K+通透性有关，因此其影响是多方面的
收缩力↓
25
结果分析与讨论
6. 2.5％NaHCO3 灌流中和H+，Ca2+与肌钙蛋白结合，心肌收缩力恢复。
碳酸氢钠乳酸
7. 3%乳酸灌流 H+与Ca2+竞争肌钙蛋白， Ca2+不能与肌钙蛋白结合，心肌收缩力↓。
26
思考题
通过本次实验结果，分析离子、药物和递对心搏曲线有什么影响？为什么？
13
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.观察心脏的解剖结构
（腹面）
（背面）
14
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.蛙心插管 1.1 在主A干下穿一线打一松结；在左主A下再穿一线结扎。
15
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.蛙心插管
1.2 在主动脉根部剪一
斜口，将插管插入动脉
圆锥，在心室收缩时
将插管插入心室，结扎固定。
16
实验步骤
二、连接仪器和装置
1.用试管夹将蛙心管固定在铁支架上 2.把张力换能器固定铁支架支台上，在心室舒张期将与换能器相连的蛙心夹夹在心尖上。

离体蛙心灌流及药物对心脏的影响

离体蛙心灌流及药物对心脏的影响离体蛙心灌流及药物对心脏的影响一、实验目的：1、学习蛙心灌流方法。

2、了解离体心脏的自律性与环境中各因素变化的关系，观察理化因素对蛙心活动的影响。

二、实验对象：蟾蜍三、实验方法：1、标本制备：取蟾蜍→破坏CNS→固定→剪皮→打开胸腔（暴露胸骨柄，用镊子把胸骨柄捏起来，用粗剪刀剪断，沿胸骨将锁骨剪断，去除多余的骨头，注意勿将心脏剪破）→用眼科剪小心剪开心包膜→暴露心脏→在主动脉叉下方穿一根丝线备用→用蛙心夹在心舒张期夹住心尖部→在左侧主动脉分叉处2-3mm处剪一剪口→将盛有一定量任氏液的蛙心插管插入到主动脉球→将插入到主动脉球的套管稍向后退，再向左下逆时针旋转90°，插入心室→结扎固定→剪断血管和背面静脉窦以下组织，游离标本2、连接装置：蛙心管内保持2ml灌流液，用木夹夹住蛙心套管，蛙心夹的线与张力换能器相连，换能器与电脑的相应通道相连。

3、运行电脑：打开电脑→Medlab→实验/常用生理实验→离体蛙心灌流四、实验结果：分别观察正常心脏活动曲线及加入不同溶液后的心脏活动曲线的变化。

曲线规律：心脏节律；曲线疏密：心率曲线幅度：心室收缩强度；曲线顶点：心室收缩最大强度；曲线基线：心室舒张最大程度顺序观察项目药量心肌(率、力)变化正常任氏液灌流正常1 0.65%NaCl 灌流1~2d2 2% CaCl23 1%KCl 1~2d4 1:10000 NA 1~2d5 1:100000 ACh 1~2d6 3% LH 1~2d2.5% NaHCO3 2~4d7 1:100000 Isop 1ml +任氏液1ml8 1:1000 prop 0.2ml+任氏液1.8ml出现效应后，抽出一半液体后立即加入Isop1ml五、实验讨论：心肌细胞兴奋时，通过兴奋-收缩耦联机制，触发心肌细胞收缩。

心肌收缩的特点是：1.对细胞外Ca2+浓度的依赖性高；2.“全或无”式收缩1、 0.65%NaCl灌流与正常任氏液相比[Ca2+]↓→ Ca2+内流↓→兴奋-收缩耦联↓→收缩力↓（1～2滴）→[Ca2+]↑→Ca2+内流↑→兴奋-收缩耦联↑→收缩力↑2、2%CaCl2舒张期Ca2+与肌钙蛋白不完全解离，产生Ca2+强直，基线上移。

某些因素对离体蛙心心脏活动的影响-实验报告

某些因素对离体蛙心心脏活动的影响-实验报告实验方法：
材料：离体蛙心、生理盐水、药品（肾上腺素、乙酰胆碱）、高钾低钙溶液、常规薄片切割工具。

实验过程：
1. 将离体蛙心放入生理盐水中，去除外部组织和器官。

2. 将心脏放入离体心脏温度下的高钾低钙溶液中，用药铺盖胶布进行刺激，记录心跳率变化。

3. 将心脏放入生理盐水中，用肾上腺素注射片或吸管将其注入心室内，记录心跳率和心跳强度。

实验结果：
1. 高钾低钙溶液刺激后，离体蛙心心跳率明显下降。

2. 肾上腺素注入心室后，离体蛙心心跳率和心跳强度明显增加。

实验分析：
1. 高钾低钙溶液可以使离体蛙心细胞内钙离子浓度降低，引起心肌收缩力下降，心跳率变缓。

2. 肾上腺素可以作用于β1受体，使心肌细胞的cAMP水平升高，增强钙离子释放，心肌收缩力增强，心跳率加快。

高钾低钙溶液可以使离体蛙心跳率下降，肾上腺素可以使其心跳率和心跳强度增加，乙酰胆碱可以使其心跳率和心跳强度降低。

实验意义：
通过本次实验，可以更好地理解离体蛙心脏的生理活动，并且了解某些因素对其心跳率和心跳强度的影响，为相关疾病的发病机制研究和临床治疗提供参考。

蛙心离体灌流活动的影响因素分析

蛙心离体灌流活动的影响因素分析蛙心离体灌流活动的影响因素分析摘要：通过对蛙类离体心脏进行人工灌流实验，学习蛙类心脏暴露与离体的方法、斯氏蛙心插管法与灌流法以及计算机采集系统和张力传感器的使用方法，熟悉心脏的结构，研究心脏活动的规律及特点，并通过记录与观察心搏曲线的变化来了解灌流液成分的改变（即Na+、Ca2+、K+、肾上腺素、乙酰胆碱）对蛙类离体心脏活动的影响。

结果表明：心脏具有自动节律性和收缩性。

当任氏液中加入Ca2+或肾上腺素（Adr）后，心搏曲线的基线上移，即对蛙类离体心脏的收缩机起到了促进作用；而当任氏液中加入Na+、K+或乙酰胆碱（ACh）后，心搏曲线的基线下移，即对蛙类离体心脏的收缩机起到了抑制作用。

关键词：Na+；Ca2+；K+；肾上腺素；乙酰胆碱；心搏节律蛙类，属于两栖纲，无尾目，品种甚多，是脊椎动物由水生向陆生过渡的中间类型。

蛙类虽然较为低等，但在生理学实验中应用非常广泛，其循环系统、神经系统以及肌肉均为生理学常用的实验材料。

诸如离体心脏灌流、下肢血管灌流、微循环的观察、心电图；脊髓休克、脊髓反射、谢切诺夫抑制、反射弧的分析实验以及坐骨神经-缝匠肌、腹直肌等均为生理学的重要实验的标本。

心脏具有自动产生节律性收缩的特性，即自动节律性。

因此，在心脏离体后，，如用人工灌流方法，可保证其新陈代谢的顺利进行，但心脏仍能有节律地自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。

离体心脏活动所需的条件应与动物内环境的理化性质保持基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心脏活动的变化。

故可以采用离体心脏灌流的方法来研究心脏活动的规律、特点及影响因素。

1 材料和方法1.1 材料实验材料：活体蛙或蟾蜍（取自水产品市场）。

实验用具：蛙心套管（斯氏套管或八木氏套管）、套管夹、支架、双凹夹、滑轮、烧杯、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、滴管、培养皿（或小烧杯）、污物缸、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液、、1% KCl、1：5000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、300U/ml 0.65%NaCl、2% CaCl2肝素。