江南大学发酵工程微生物遗传育种第四章基因重组育种
微生物 10-4、5、6第十章 微生物的遗传变异和育种
4. 冷冻干燥保藏法
用保护剂制备菌悬液，使其在冻结状态下升华
其中水分，最后获得干燥的菌体样品。
在真空状态密封瓶口隔绝空气，造成无氧的真
空环境，置低温下保存。
优点：保藏时间长，一般5-10年。大多数微生 物都可以采用。 我国大多数生物制品菌种都是采用冷冻干燥法 保藏。
④控制外源基因过量表达，外源基因表达水平越 高，重组质粒往往越不稳定； ⑤控制培养条件； ⑥在构建质粒时，插入能改良宿主细胞生长速率 的特殊DNA片断； ⑦避免使用带有可转移因子的质粒；
⑧将质粒上的不需要的DNA部分除去；
⑨在发酵过程中将工程菌固定化可以提高工程菌 的稳定性。
第六节
菌种的衰退、复壮和保藏
F因子的四种细胞形式
a）F-菌株(“雌性”菌株)，不含F 因子，没有性菌毛，但可以通过 接合作用接收F因子而变成F+菌株； b）F+菌株(“雄性”菌株)， F因 子独立存在，细胞表面有性菌毛。
c）Hfr菌株，F因子插入到染色体
DNA上，细胞表面有性菌毛。 d）F′菌株，Hfr菌株内的F因子 因不正常切割而脱离染色体时， 形成游离的但携带一小段染色体 基因的F因子，特称为F′因 子。 细胞表面同样有性菌毛。
大肠杆菌基因组很大（全部转移 需要100分钟），其遗传图谱须用 多株F因子整合在不同位置的Hfr 菌才能完成
3）F′×F-杂交 Hfr菌株内的F因子因不正常切割而 脱离染色体时，形成游离的但携带 一小段染色体基因的F因子，特称 为F′因子。 F′×F-与F+×F-的不同： 供体的部分染色体基因随F′一起转入受体 细胞 a）与染色体发生重组； b）继续存在于F′因子上，形成一种部分二 倍体；
江南大学食品科学与工程专业微生物学教学大纲.
食品科学与工程专业
微生物学课程教学大纲
课程名称:微生物学
英文名称:Microbiology
总学时:72理论学时:42实验学时:30总学分:3.5
一、课程的性质、目的及任务
微生物学是为食品科学与工程专业学生开设的一门专业基础课程,是一门主干课程和学位课程。掌握微生物学理论与技术对于在食品、粮油、饲料加工保藏及品质控制等方面起着十分重要的指导作用。
本课程要求学生通过学习能够掌握微生物学的基础理论、研究方法与实验技能,并与大食品(包括食品、粮油与饲料加工业密切联系,掌握微生物学在食品工业中的应用,微生物所引起的食品的腐败变质以及加以质量控制的基本原理和方法途径,同时对微生物学的最新发展动态有一定的了解,从而使学生为后继专业课程的学习打下扎实的基础。
二、课程教学基本要求
1、掌握与食品工业关系密切的各大类微生物的细胞形态结构、菌落特征与繁殖方式。
2、了解微生物营养需要以及配制培养基的原则。
3、掌握微生物的主要产能方式及典型的发酵途径。
4、掌握微生物的生长规律,以及影响微生物生长的主要理化因素。学会利用这些因素更好地促进有益微生物的生长,控制有害微生物的生长。
5、学习微生物遗传变异的基本理论,掌握几种新的育种方法---诱变育种、杂交育种、基因工程育种的原理与技术。
6、掌握微生物在自然界中的分布特性,了解不同食品及农副产品上微生物的类群,了解食品生产、贮存过程中变质的原因及其控制措施。
7、了解微生物之间的相互关系以及在污水处理中的作用。
8、了解抗原抗体反应的一般规律,掌握运用现代免疫学技术进行菌种鉴定的依据和方法。
江南大学微生物学综合(发酵工程专业) 考研 考试大纲
江南大学硕士研究生入学考试业务课
考试大纲
课程名称：微生物学综合（发酵工程专业）
一、考试的总体要求
《微生物学》是微生物专业最重要的专业基础课。微生物学综合重点检查考生对微生物学基本概念、基础理论、基本实验技能及其在发酵工程中的应用等知识的掌握情况，要求考生掌握发酵工业中常见及常用各类微生物的形态构造、营养与代谢、生长及控制、遗传变异与菌种选育、生态等微生物学基础知识，并能综合利用所学的知识合理设计工业微生物菌种的选育方案，并对发酵过程和工艺的微生物学原理进行合理解释。
二、试题类型及比例
1、选择/ 判断题：约20 %
2、名词解释：约20 %
3、问答题：约60 %
三、考试形式及时间
考试形式为笔试。考试时间为3小时。
四、考试主要内容
（一）绪论
1. 微生物学研究的对象和任务
2. 微生物学的发展简史及工业微生物学的发展概况
3. 微生物的分类和命名
4. 21世纪的工业微生物学
（二）微生物的形态与分类
重点掌握各类微生物（细菌、防线菌、酵母菌、霉菌、担子菌、噬菌体和藻类）的形态、细胞构造、繁殖方式、培养特征和分类，并对发酵工业中常见常用的各类微生物进行了解。
（三）微生物的营养与生长
1. 微生物的营养
2. 微生物的生长
3. 生长与发酵产物生成
（四）微生物的代谢调节
1. 微生物的代谢
2. 微生物代谢的自动调节
3. 微生物代谢的人工控制及其应用
（五）环境因子对微生物生长及代谢的影响
1. 环境因子对微生物生长和生存的影响
2. 污染微生物的控制
（六）微生物菌种的选育
1. 从自然界中分离筛选菌种
2. 基因突变及应用（含诱变育种、代谢调控育种等）
江南大学微生物习题
名词解释
1997
1原生质体2芽孢3菌落4诱导酶5生长因素6回复突变7诱导8拮抗9血清学反应10巴斯德效应
1998
1芽孢2菌落3质粒4回复突变5生长因子6诱导酶7拮抗8巴斯德效应9光复活作用10活性污泥
1999
1原生质体2菌落3质粒4芽孢5诱导酶6生长因子7巴斯德效应8营养缺陷型9 BOD 10血清学反应
2000
1温和性噬菌体2巴斯德效应3 艾姆斯试验（Ames test）4 ELISA 5 PCR 2001
1类毒素2暗修复作用3巴斯德效应4 诱导酶
2002
1转化2 半抗原3活性污泥4回复突变5 PCR
填空
1997
1微生物生长的特点是：_____
2微生物的学名是由_和_所组成
3细菌革兰氏染色的主要原理是_。
影响染色的主要因素是_和_，革兰氏染色后为红色的是_
4酵母菌是_，其无性繁殖方式是_和_，有性繁殖是_
5霉菌产生的无性孢子有___
6噬菌体的特点是___，其生长繁殖过程包括_____五个步骤。
7培养基按用途可分为_____
8根据生长和O2的关系，大多数酵母属于_，大多数霉菌属于_
9影响微生物生长的延滞期长短的因素有___等
10光复活作用是指____四种情况
11染色体畸变是指____四种情况
12大肠杆菌是指_食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是_
13影响微生物的抗热性的因素是_____
14 BOD是指_
15在空气中能较长时间的微生物类群是__特点是_
16培养时，培养皿倒置是为了_和_
17平板菌落计数法结果表达中常用的“clu”的意思是_
1998
1微生物的特点是_____
2微生物的学名有_和_所组成
发酵工程原理与技术_江南大学-陈坚
第四章培养基及其制备
第一节原料
一、原料的定义及选择
（一）原料的定义
从工艺角度来看，凡是能被生物细胞利用并转化成所需的代谢产物或菌体的物料，都可作为发酵工业生产的原料。（二）选择原料的依据
1，原料选择的原则
选择淀粉质原料生产酒精时，从工艺的角度着眼，凡任何含有可发酵性糖或可变为发酵糖的原料，都可作为酒精生产的原料。对于工业上大规模投入生产的原料，除了要提出工艺上的要求外，还要提出生产管理和经济上的要求，因此，在选择工业上大规模生产酒精的原料时，应考虑到下列诸条件：
（1）因地制宜，就地取材，原料产地离工厂要近，便于运输，节省费用。
（2）要求原料内碳水化合物含量较多，蛋白质含量要适当，适合与微生物的需要和吸收利用。
（3）原料资源要丰富，容易收集。由于酒精生产需要大量原料，要保证一定的库存量。（4）原料要容易贮藏。应考虑到新鲜原料内含水量多，不耐久藏，最好选择经，干燥后，含水极少的干原料，易与保藏，不宜霉烂。
（5）对人民的身体无寻损害，影响发酵过程的杂质含量因应当极少，或者几乎不含。（6）原料价格低廉，可降低产品成本。
此外，还应当考虑到大力节约粮食原料，尽量少用或不用粮食原料，充分利用当地的非粮食原料，广泛利用野生植物原料，同时利用农林副产物和植物纤维原料，以及亚硫酸盐纸浆废液等，对于节约粮食原料有着重要意义。另外，利用石油原料化学合成制造酒精，也是发展酒精的主要途径。
2，在确定原料选择原则时需注意的问题（1）所选用的培养基与所使用的发酵器的结构有关。例如ICI公司因指定用甲醇和氨生产单细胞蛋白质而另行设计新的发酵罐。同样的理由，在一个巳设定的发酵罐中，发酵必然会受到培养基组份改变的影响。
江南大学 发酵工程与设备
发酵工程与设备2
发酵工程是应用生物（主要是微生物）的生长繁殖和代谢活动来大量生产人们所需产品过程的理论和工程技术体系。也称作微生物工程
发酵工程组成从广义上讲，由三部分组成：上游工程、发酵工程、下游工程。
工业发酵的类型按微生物对氧的需求：厌氧发酵、好氧发酵、兼性厌氧发酵。
按发酵工艺流程：分批发酵、连续发酵、补料分批发酵
菌丝结团液体培养条件下，繁殖的菌丝不分散舒展，而是聚成团状。
菌丝粘壁：在种子培养过程中，菌丝正常发育生长，但再继续培养时菌丝逐步粘附在罐壁上。
反馈抑制：是生物化学途径的末端产物抑制反应途径中某个催化酶的活性，是由于末端产物连接到该酶的变构位点，从而影响酶与底物的接触。
反馈阻遏：是生物化学途径的末端产物阻止反应途径中某个催化酶的合成。阻遏发生在基因水平，通过末端产物和基因组连接阻止某因子的转录，从而导致酶合成的阻断。
抗体突变株：是诱变后能够在含有合适浓度的结构类似物的培养基中生长的菌落。
诱变育种：利用物理或化学诱导剂处理均匀分散的微生物细胞群。
育种方法具有：方法简单、快速、收效显著等特点。
杂交育种：指两个基因型不同的菌株通过接合使遗传物质重新组合，从中分离和筛选具有新性状的菌株。
细胞的杂交可以通过：细菌结合、F因子转移、转化和转导等方法促使基因重组。
代谢控制发酵：用人工诱变的方法，有意识地改变微生物的代谢途径，最大限度地积累产物，这种发酵形象地称为代谢控制发酵，最早在氨基酸发酵中得到成功应用
回复突变：高产菌株在传代的过程中，由于自然突变导致高产性状的丢失，生产性能下降，这种情况我们称为回复突变
江南大学发酵工程微生物名词解释
局限性转导：指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因（供体细菌染色体上原噬菌体整合位点附近少数基因）携带到受体菌中，并与后者的基因组整合、重组形成转导子的现象。P227B
移码突变：当基因突变时，在DNA序列中由于一对或少数几对核苷酸的插入或缺失（不是三的倍数）而使其后的全部遗传密码的阅读框架发挥僧移动，进而引起转录或翻译错误的突变，它一般只引起一个基因的表达出现错误。P313P208B
准性生殖：（霉菌的基因重组）是一种类似于有性生殖，但比它更为原始的一种两性生殖方式，这是一种在同种而不同君主的体细胞见发生的融合，他可不借减数分裂而导致低频率的基因重组并产生重组子。因此，可以认为准性生殖是在自然条件下，真核微生物体细胞见的一种自发性的原生质体融合现象，它是某些真菌尤其在还未发现有性生殖的半知菌类中常见。P234B
巴斯德灭菌法(Pasteurization)：在一控制温度给液体食物或饮料加热以提高保藏质量，同时也消毀有害的微生物。一种用于对牛奶啤酒等不宜进行高温灭菌的也太风味食品和调料的低温消毒方法，他得名于首次用该法控制葡萄酒变质的巴斯德。一般将待消毒的液体食品在63-65°保持30分钟，后迅速冷却，以杀死其中可能存在的病原菌，保持食品的营养和风味，延长食品的保持时间。P289
连续灭菌：是指让培养基连续通过高温蒸汽灭菌塔，维持和冷却，然后流进发酵罐，培养基一般加热至135-340°下维持5-15S，连续灭菌采用高温瞬时灭菌，既彻底地灭了菌，有有效地减少营养成分的破坏，从而提高了原料的利用率。P291
江南大学发酵工程复试里的 发酵工程综合知识 怎么考
江南大学发酵工程复试里的发酵工程综合知识怎么考？
悬赏分：20 - 解决时间：2009-5-26 22:06
是不是他们所提供参考书：什么微生物学，生物化学，化工原理的书都要看啊？很多哦
最好是找下以前的复试题目，题目重复很多，要求的数目最好有一本配套的习题集，把里面的大题看看……发酵综合主要是几门课的综合，你把之前初试的知识抓住的同时，把妹看的书稍微看看，但是，最主要的是看历年复试真题，尤其是06到08的，重点看06、07年的，05年的最好也看看，搞清楚以后基本上就差不多了
082203 发酵工程01发酵工学
02酶工程与技术
03微生物代谢工程
04酿酒科学与工程
05工业微生物45 ①101政治
②201英语
③302数学二
④424微生物学（发酵）或425生物化学（含实验）或418化工原理（含实验）623发酵工程综合知识 1.化工原理
2.有机化学
3.生化工程微生物学：《微生物学》诸葛健李华钟编，科学出版社2005
《微生物学教程》（第二版）周德庆，高等教育出版社
生物化学：《生物化学》魏述众主编，中国轻工出版社
《生物化学》第三版沈同主编，高等教育出版社
化工原理：《化工原理》第二或第三版天津大学编
生化工程：《生化工程》伦世仪主编，轻工业出版社
有机化学：《有机化学》第二版徐寿昌编，高等教育出版社
细胞生物学:《细胞生物学》翟中和编，高等教育出版社
发酵工程综合知识：《微生物工程与工艺原理》姚汝华编，华南理工大学出版社
《发酵工艺原理》熊宗贵主编，中国医药科技出版社
江南大学发酵工程专业参考书目
江南大学发酵工程专业参考书目
第一篇：江南大学发酵工程专业参考书目
重庆大学发酵工程专业
参考书目：《生物化学（第三版上下册）》王镜岩等主编高等教育出版社
《化工原理（上、下册）》夏清陈常贵等天津大学出版社
《微生物学教程（第二版）》周德庆高等教育出版社
微生物参考书：1.诸葛健，李华钟主编，微生物学（第二版），科学出版社，2009 2.诸葛健，李华钟，王正祥主编，微生物遗传育种学，化学工业出版社，2008 3.周德庆，微生物学教程（第二版），高等教育出版社，2002
第二篇：江南大学发酵工程综合考试大纲
课程名称：发酵工程综合
一、考试的总体要求
发酵工程原理与技术是生物工程专业一门最重要的专业核心课程。作为江南大学发酵工程、轻工技术与工程和生物工程专业硕士研究生入学考试的复试科目，考生应掌握发酵工程所涉及的生物化学和微生物学的基础理论知识和生物技术产业化过程涉及的工程知识，具备发酵工程相关的研究方法与技能，并要求对发酵工程研究领域的发展和前沿有一定的了解。要求考生掌握发酵工程的基本原理，具备一定的融汇贯通、独立思考的综合分析能力能力，主要考察学生分析和解决生物技术产业化中关键问题的能力。
二、考试的内容及比例
本课程考试内容涉及面较广，突出有关发酵过程的化学、生物学、生物化学和微生物学等基本原理，并结合工程学知识，内容包括发酵过程的微生物学和生物化学基本原理、发酵原辅料处理、培养基及其水的处理和无菌空气的制备，工业微生物菌种的扩大培养、各种发酵操作方式的工艺规律、下游工程的分离方法等发酵工程基础，发酵工业的主要设备的操作原理、性能及构造和设计方法以及固态发酵、基
江南大学发酵工程讲义
发酵工程（发酵工程第一章）
发酵工程：主要指在最适发酵条件下，发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的工艺技术。
(1) 有严格的无菌生长环境：
包括发酵开始前采用高温高压对发酵原料和发酵罐以及各种连接管道进行灭菌的技术；
在发酵过程中不断向发酵罐中通入干燥无菌空气的空气过滤技术；
(2)在发酵过程中根据细胞生长要求控制加料速度的计算机控制技术；
(3)种子培养和生产培养的不同的工艺技术。
(4)在进行任何大规模工业发酵前，必须在实验室规模的小发酵罐进行大量的实验，得到产物形成的动力学模型，并根据这个模型设计中试的发酵要求，最后从中试数据再设计更大规模生产的动力学模型。
(5)由于生物反应的复杂性，在从实验室到中试，从中试到大规模生产过程中会出现许多问题，这就是发酵工程工艺放大问题。
微生物发酵技术
1857年法国化学家、微生物家巴斯德提出了著名的发酵理论：“一切发酵过程都是微生物作用的结果。”
巴斯德认为，酿酒是发酵，是微生物在起作用；酒变质也是发酵，是另一类微生物在作祟；随着科学技术的发展，可以用加热处理等方法来杀死有害的微生物，防止酒发生质变。同时，也可以把发酵的微生物分离出来，通过人工培养，根据不同的要求去诱发各种类型的发酵，获得所需的发酵产品。
利用微生物的特点
Use of Microorganisms
Positive（益处）
Biomass
Production
Conversion
Negative（危害）
Pathogens
Spoilage
一、发酵的定义
1、传统发酵
2、生化和生理学意义的发酵
3、工业上的发酵
发酵工程试题及答案
、名词解释
1、分批发酵：在发酵中，营养物和菌种一次加入进行培养，直到结束放出，中间除了空气进入和
尾气排出外，与外部没有物料交换。
2、补料分批发酵：又称半连续发酵，是指在微生物分批发酵中，以某种方式向培养系统不加一定物料的培
养技术。
3、絮凝：在某些高分子絮凝剂的作用下，溶液中的较小胶粒聚合形成较大絮凝团的过程。
二、填空
1、生物发酵工艺多种多样，但基本上包括菌种制备、种子培养、发酵和提取精制等下游处理几
个过程。
2、根据过滤介质截留的物质颗粒大小的不同，过滤可分为粗滤、微滤、超滤和反渗透四大类。
3、微生物的育种方法主要有三类：诱变法，细胞融合法，基因工程法。
4、发酵培养基主要由碳源，氮源，无机盐，生长因子组成。
5、青霉素发酵生产中，发酵后的处理包括：过滤、提炼，脱色，结晶。
6、利用专门的灭菌设备进行连续灭菌称为连消，用高压蒸汽进行空罐灭菌称为空消。
7、可用于生产酶的微生物有细菌、真菌、酵母菌。
常用的发酵液的预处理方法有酸化、加热、加絮凝剂。
8、根据搅拌方式的不同，好氧发酵设备可分为机械搅拌式发酵罐和通风搅拌式发酵罐两种。
9、依据培养基在生产中的用途，可将其分成孢子培养基、种子培养基、发酵培养基三种。
10、现代发酵工程不仅包括菌体生产和代谢产物的发酵生产，还包括微生物机能的利用。
11、发酵工程的主要内容包括生产菌种的选育、发酵条件的优化与控制、反应器的设计及产物的分离、提取与精制。
12、发酵类型有微生物菌体的发酵、微生物酶的发酵、微生物代谢产物的发酵、微生物转化发
酵、生物工程细胞的发酵。
13、发酵工业生产上常用的微生物主要有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌。
江南大学微生物考研题库
名词解释
1、半知菌
2、中质体（间体）
3、鉴别培养基
4、防腐
5、致死温度
6、异宗配合
7、子囊孢子
8、甲基红反应：
9、超净工作台10、经典分类法11、化能异养微生物12、基本培养基（MM）13、间歇灭菌法14、湿热灭菌15、灭菌和消毒16、化能无机营养型（化能自养型）17、分生孢子18、细菌的生长曲线19、营养缺陷型20、光复活作用21、化能自养型22、共生关系(symbiotic system) 23、局限性转导24、原噬菌体（prophage）25、选择培养基：26、基因重组（Gene recombination）27、溶源性细菌28、孢囊孢子29、厚垣孢子（chlamydospore）30、微生物的自发突变31、平板菌落计数32、质粒（plasmid）33、分批培养（batch culture）34、接合孢子35、孢子囊孢子（sporangium spore / sporangiospore）36、细胞器（cell organelle37、芽裂38、杀伤因子（killer）39、微生物营养物质40、基团转位（Group translocation）41、恒化连续培养42、能荷43、嗜冷微生物44、兼性厌氧菌45、生物膜（biofilm）46、连续灭菌47、累积反馈抑制（cumulative feedback inhibition）48、大肠杆菌49、原核生物（prokaryote）50、世代时间（generation time）52、原生质体融合（protoplast fusion）53、诱导物（inducer）54、富集培养55、拟核（nucleoid）56、单双倍体生活史型酵母57、恒化器连续培养58、微生物分离时的增殖培养59、碱基结构类似物60、载体61、生物转盘法62、接种63、pH 值和酸度64、水活度和浓度65、碳源物质66、周质空间（periplasmic space，periplasm）67、stationary phase （稳定期）68、选择性培养基（selective medium）69、大肠菌群70、半保留复制（semiconservative replication）模型71、血球计数板72、巴斯德灭菌73、HFR菌株74、对数生长期75、细菌的芽孢76、倒位77、多克隆位点：载体DNA分子中，具有的多种限制性内切核酸酶的单一切点的部位。78、EcoR I79、结构类似物80、结构类似物抗性突变株81、细菌的异常形态82、诱导抑制剂法83、寄生（parasitism）关系84、调节突变株85、插入钝化和插入失活86、MPN（发酵法most probable number）87、双核菌丝88、诞生痕（Birth scar）/出芽痕（bud scar）89、二倍体原生质体融合育种90、E.coli k12（λ）91、深层培养92、增殖培养基93、琼脂块法94、厌氧呼吸（无氧呼吸）95、反馈抑制96、助变剂（comutagen）97、体外重组98、DNA重组技术99、稀释平板计数法100、移码突变101、准性生殖102、表型延迟103、生长因子104、假菌丝105、内质网106、菌落107108、天然培养基109、肽聚糖110、硝酸盐呼吸111、温度敏感突变株112、科赫原则113、双命名法114、孢子丝115、高压蒸汽灭菌法116、类囊体117、定位诱变118、菌种退化119、恒化器120、革兰氏染色121、暗修复122、影印培养法123、DNA(G+C)mol%124、BOD5 125、基因工程126、渗漏缺陷型127、冷冻干燥保藏法128、二倍体129、菌种复壮130、组成型突变株131、极端微生物132、PCR133、转导噬菌体134、消毒剂135、转化136、拮抗137、活性污泥138、活性污泥法139、锁状联合140、CFU 141、碱基置换142、子囊孢子143、主动运输144、初级代谢产物145、感受态146、感受态细胞147、葡萄糖效应148、生长谱法149、真空冷冻干燥法151、prototroph152、结构类似物抗性153、巴斯德效应
2009年江南大学微生物学考研试题1
2009年江南大学微生物学考研试题
江南大学微生物学
生化问答
1.天冬氨酸转变成葡萄糖所需的A TP数
2.乳糖操纵子是谁提出的,年份是多少,用操纵子机制解释基因对如何对酶作用的
3.考了个凝胶层析方面的问题
4.RNA聚合酶和DNA聚合酶相比为什么不需要SSB,和另一种东西,记不清了
5考了个氨基酸对蛋白质活性的影响,题目给出的具体的氨基酸
微生物问答
1实验室内五种常用的消毒,灭菌,除菌方法
2.紫外线对氨基酸缺陷型的诱变过程,氨基酸缺陷型的定义及在工业微生物上的应用
3.霉菌,细菌,病毒,酵母菌的繁殖方式
4微生物相互之间的作用类型,并举例说明
江南大学微生物(发酵)
第一题是判断,记不清了,说第2题
二.名词解释(10个一个三分)
1.转道噬菌体
2.巴斯德效应
3.移码突变
4.生物膜(英文的)
5.生长因子
6.
记不清了,想想我再来补充
三.问答题(90分)
1.简述大肠杆菌,酿酒酵母,红曲霉,噬菌体的繁殖过程,并丛微生物的繁殖方式角度阐述你对微生物多样性的了解(20分)
2.简述营养物质进出细胞的方式,并丛运输方向,运输动力,载体,是否耗能,有无竞争性,运输前后是否变化,输送物质类别(举例)等方面比较各种运输方式(20分)
3.什么叫基因工程?为什么说基因工程的操作离不开微生物(15分)
4.简述斜面培养基的配制步骤?并说明每步的注意事项(15分)
5.以赖氨酸高产菌株为出发菌株,筛选菌种的题,记不清了(20分)
2009生物化学试题
名词解释
1. molecular chaperones
2. domain
3. hyper chromic effct
江南大学发酵工程微生物名词解释
局限性转导：指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因（供体细菌染色体上原噬菌体整合位点附近少数基因）携带到受体菌中，并与后者的基因组整合、重组形成转导子的现象。P227B
移码突变：当基因突变时，在DNA序列中由于一对或少数几对核苷酸的插入或缺失（不是三的倍数）而使其后的全部遗传密码的阅读框架发挥僧移动，进而引起转录或翻译错误的突变，它一般只引起一个基因的表达出现错误。P313 P208B
准性生殖：（霉菌的基因重组）是一种类似于有性生殖，但比它更为原始的一种两性生殖方式，这是一种在同种而不同君主的体细胞见发生的融合，他可不借减数分裂而导致低频率的基因重组并产生重组子。因此，可以认为准性生殖是在自然条件下，真核微生物体细胞见的一种自发性的原生质体融合现象，它是某些真菌尤其在还未发现有性生殖的半知菌类中常见。P234B
巴斯德灭菌法(Pasteurization)：在一控制温度给液体食物或饮料加热以提高保藏质量，同时也消毀有害的微生物。一种用于对牛奶啤酒等不宜进行高温灭菌的也太风味食品和调料的低温消毒方法，他得名于首次用该法控制葡萄酒变质的巴斯德。一般将待消毒的液体食品在63-65°保持30分钟，后迅速冷却，以杀死其中可能存在的病原菌，保持食品的营养和风味，延长食品的保持时间。P289
连续灭菌：是指让培养基连续通过高温蒸汽灭菌塔，维持和冷却，然后流进发酵罐，培养基一般加热至135-340°下维持5-15S，连续灭菌采用高温瞬时灭菌，既彻底地灭了菌，有有效地减少营养成分的破坏，从而提高了原料的利用率。P291
江南大学微生物思考题
第一章的复习思考题
1，发酵及发酵工程的定义
狭义“发酵”的定义在生物化学或生理学上发酵是指微生物在无氧条件下，分解各种有机物质产生能量的一种方式，或者更严格地说，发酵是以有机物作为电子受体的氧化还原产能反应。如葡萄糖在无氧条件下被微生物利用产生酒精并放出二氧化碳。同时获得能量，丙酮酸被还原为乳酸而获得能量等等。
广义“发酵”的定义工业上所称的发酵是泛指利用生物细胞制造某些产品或净化环境的过程。它包括厌氧培养的生产过程，如酒精、丙酮丁醇、乳酸等，以及通气（有氧）培养的生产过程，如抗生素、氨基酸、酶制剂等的生产。产品有菌体细胞、酶，细胞代谢产物，生物转化产品等。
Fermentation Engineering应用微生物学等相关的自然科学以及工程学原理，利用微生物等生物细胞进行酶促转化，将原料转化成产品或提供社会性服务的一门科学。
2，发酵工程的特点
发酵和其他化学工业的最大区别在于它是生物体所进行的化学反应。
1，发酵过程一般来说都是在常温常压下进行的生物化学反应，反应安全，要求条件也比较简单。
2，发酵所用的原料简单粗放。通常以淀粉、糖蜜或其他农副产品为主，只要加入少量的有机和无机氮源就可进行反应。微生物因不同的类别可以有选择地去利用它所需要的营养。基于这一特性，可以利用废水和废物等作为发酵的原料进行生物资源的改造和更新。
3，发酵过程是通过生物体的自动调节方式来完成的，反应的专一性强，因而可以得到较为单一的代谢产物。
4，发酵过程中对杂菌污染的防治至关重要。除了必须对设备进行严格消毒处理和空气过滤外，反应必须在无菌条件下进行。
江南大学1992-2008年硕士生招生微生物学与发酵工程真题
化能自养
化能异养
4.产生单个碱基变化的突变叫突变，如果碱基的改变产生一个并不改变氨基酸残基编码的，并且不会造成什么影响，这就是突变。如果改变了氨基酸残基的密码，这就是突变。这种突变对蛋白质功能影响程度要根据被改变的氨基酸残基在蛋白质或结构中的重要程度，或是与酶的的密切性来决定，活性变化范围可从到接近正常。
5、用简单的方法快速将细菌、酵母、霉菌和放线菌区别开来。。
6、从微生物的细胞组成简述微生物的营养要求。
七、实验设计（10分）
要从自然界筛选一株直接利用淀粉原料产酒精的菌种，其最佳筛选方案如何为好？
5.DNA修复包括3个步骤：酶对DNA链上不正常碱基的识别与切除，
酶对已切除区域的重新合成，酶对剩下切口的修补。
二、配对（2.5分）
藻类（a）无细胞构造
细菌（b）细胞壁由几丁质组成
真菌（c）细胞壁由肽葡聚糖组成
原生动物（d）细胞壁由纤维素组成，具有光合作用
病毒（e）无细胞壁，细胞结构复杂
三、常见菌名翻译并说明分解其细胞壁可采用的酶（每题2分，计10分）
考试科目：微生物学
请将题号和答案写在答题纸上，直接写在试卷上无效
一、填空题（每格0.5分，计23.5分）
1.
孢子名称
染色体倍数
内生或外生
有性或无性
举例何种菌具有该种孢子
厚垣孢子
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3、感受态可诱导产生 从营养丰富的培养液中转移到营养贫乏的
培养液中 抑制核酸合成但不抑制蛋白质合成的处理 CaCl2处理
8
加入感受态因子 感受态因子：伴随感受态而出现的位于 细胞表面的蛋白质分子
4、感受态细胞的特点 细胞表面的正电荷增加 细胞壁的通透性增加 细胞表面的DNA分解能力增加
可滤因子
50
LT22
LT2
51
可滤因子的特点
对DNA酶不敏感 它与从溶源性的LT22菌株分离的P22具有相
同的质量和大小 加热后失活 用抗P22的LT2菌株和LT22菌株混合培养，
在MM上不长。
52
一、局限性转导specialized transduction
只能传递供体染色体上原噬菌体整合位 点附近的少数固定基因的转导。 1、噬菌体：温和性噬菌体，如l等 2、转导噬菌体的形成 Campbell模型（不正确切离） 形成频率：10-6 转导噬菌体：缺陷噬菌体ldgal或ldbio
色体DNA整合，保持游离状态
15
五、转化育种
例：B. subtilis 供体：SB19(trp+) 受体：168(trp-)
1、供体菌DNA的制备 2、感受态受体菌的培养 3、转化
16
管号 1 2 3
名称 培养基 转化168×DNA 1.7ml
受体对照 1.8ml 核酸对照 1.9ml
DNA液 0.1ml
AAaaaaAA
Ⅱwk.baidu.com
10
aaAAAAaa
Ⅱ
16
A基因的着丝粒距离
=［(9+5+10+16)/(40+234)×2］×100
=7.3图距单位
75
6、着丝粒距离与重组频率 研究对象：两对基因Aa和Bb 若A~B基因连锁：dA~B=dA~O+dB~O
9
三、转化的过程
1、转化因子的吸附 吸附位点 吸附的专一性 只有分子量较大（>3×105d）的双链
DNA才能被吸附 吸附不受感受态的限制
10
2、转化因子的吸收 核酸内切酶将吸附的DNA切成约107d的
片段 核酸酶切除一个单链 剩余的一个单链进入细胞
11
3、整合 转化因子的单链DNA 和受体染色体的某
遗传性状的现象 转导子为部分二倍体，如lac-/F-lac+
48
第三节 转导
Transduction
通过噬菌体作为媒介，而把一个细菌的 基因导入另一个细菌的过程叫转导。 转导的组分： 供体细菌，受体细菌，转导噬菌体
49
转导现象的发现
1952年，鼠伤寒沙门氏菌 LT22（trp-)，LT2（his-)，MM上混合培养 ，结果在107细胞中得到大约100个原养型 细胞。
有特定的位置 gall-bio
转导噬菌体的获得 自发裂解或诱导裂解 诱导裂解
转导子
非溶源性
1/10稳定的完全转导 子
9/10不稳定流产转导 子
缺陷溶源性 1/3稳定转导子 2/3不稳定转导子
65
第四节 真菌的有性生殖
Sexual reproduction 一、顺序排列的四分体的遗传学分析 1、粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)的生活史 ①菌丝体 ②无性繁殖 ③有性繁殖
1、中断杂交实验 1956， Wollman 和Jacob
Hfr: thr+leu+azisTonslac+gal+strs F-: thr-leu-azirTonrlac-gal-strr 选择标记：thr+leu+ 反选择标记：strr 非选择标记：azis Tons lac+gal+ ①选择培养基：MM+str，选择thr+leu+strr 重组
胞接触而获得； ⑤F因子可自体复制 4、 F因子的存在状态 自主态：含有自主态F因子的细胞叫F+细胞 整合态：含有整合态F因子的细胞叫Hfr细胞
30
三、 F- 、F+、 Hfr 菌株 1、 F+菌株：细胞表面具有性纤毛（F-pilus
） 2、Hfr菌株 3、 F-菌株
F+ Hfr
31
32
33
四、细菌接合作用 1、F+×F结果：F-转变为F+
0 0.1ml
受体菌液 0.2ml 0.2ml 0
于37℃振荡培养90min 4、转化子分离
涂布 MM培养基平板，37 ℃培养48h
17
六、转化的特殊类型 1、真核微生物的转化 原生质体转化 酿酒酵母可通过Li+处理，人工诱发感受态 2、RNA转化 3、转染 Transfection
用除去蛋白质外壳的病毒DNA或RNA通过 转化过程进入受体细胞或原生质体，使后 者得以感染
34
2、Hfr×F（1）Hfr DNA的转移
35
36
（2）形成部分杂合子
37
（3）通过双交换形成重组体
形成lac+ade+重组体
形成lac-ade+重组体
38
39
3、F+×F+，Hfr×Hfr 由于存在于细胞表面的由tra基因编码的 蛋白质赋予细胞的表面排异(surface exclusion)作用，使F+×F+、Hfr×Ffr不 能杂交
71
例：N. crassa 6种子囊中子囊孢子的排列 (1)AAAAaaaa (2)aaaaAAAA (3)AAaaAAaa (4)aaAAaaAA (5)AAaaaaAA (6)aaAAAAaa
72
第一次分裂分离
第二次分裂分离
73
5、着丝粒距离： 某一基因与着丝粒之间的距离
着丝粒距离=
重组染色单体数 染色单体总数
43
44
2、连锁分析
45
六、F因子转导 1、F’因子：带有细菌基因的F因子。 例 F-lac，F-gal，F-pro… 2、F’因子的形成：Hfr菌株中F因子的异常 切除（aberrant excision)
46
47
3、F’菌株：含有F’因子的菌株。有初生F’ 菌株与次生F’菌株之分。
4、F因子转导（性因子转导、性导） 通过F’因子的转移而使受体细菌改变其
第四章 微生物的遗传重组
第一节 转化 第二节 细菌的接合 第三节 转导 第四节 真菌的有性生殖 第五节 真菌的准性生殖
1
第一节 转化 Transformation
转化：受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而 获得后者部分遗传性状的现象。由转化方式 形成的杂种后代称为转化子。 能进行自然转化的微生物：Bacillus, Streptococcus, Neisseria, Haemophilus 一、转化因子 1、转化因子的化学本质
60
61
3、完全转导与完全转导子 Complete transduction 通过双交换而实现 约占1/10
62
4、流产转导与流产转导 子Abortive transduction
进入受体的供体DNA 片段既不复制，也不 整合，但能正常表达 。
约占9/10
63
5、共转导 cotransduction
由一个转导噬菌体同时传递两个供体基因 的转导。
P1同时传递thr+leu+基因至受体thr-leu-，产 生原养型转导子的频率占转导子数的1%
共转导的频率
F
(1
d L
)3
64
三、普遍性转导与局限性转导的区别
普遍性转导
局限性转导
能转导的基因
供体的任何基因
特定基因, l:gal,bio
噬菌体在供体菌中 无特定的位置 的位置
53
54
55
3、稳定转导子的获得 ldgal DNA gal基因与受体gal-基因之间
双交换，得到稳定的gal+转导子。 稳定转导子约占转导子的1/3
56
4、不稳定转导子的获得 ldgal DNA通过BP’与受体BB’位点之间的
单交换，形成一个带缺陷l原噬菌体的 gal+/gal 部分合子（不稳定转导子）。 整合的ldgal DNA偶然会从受体染色体上 逸出，从而产生gal-分离子 不稳定转导子约占转导子的2/3
说明：遗传物质A→B F+(fertility):雄性, 供体(donor), 提供DNA F-：雌性，受体(recipient)，接受DNA 2、F因子（致育因子） cccDNA，95kb，1~2个/cell
27
28
29
3、F因子的特性 ①F因子可以转移； ②F因子可自发失去； ③F因子可经吖啶橙等处理而失去； ④F因子一旦消失不能再现，除非与另外的F+细
2、证实 (1) 转化作用的排除：
1950，Davis的U型管试验
21
22
(2) 互养的排除：A+B-T1r× A-B+T1s (3) 回复突变的排除幻灯片 23 (4) 异核体和杂合二倍体的排除
(5) 基因重组的证实 23
24
25
二、F因子 1、性因子的发现1952，W. Hayes
E.coli k12 诱变
1、发现：1946，J. Lederberg 和E. T. Tatum 实验：E. coli K12
19
A: Thr Leu B1 B: Bio Phe Cys幻灯片 28
20
可能：①细菌接合以后发生基因重组；
②发生了转化； ③通过交换了养料而互养； ④回复突变； ⑤接合后形成异核体或杂合二倍体
18
第二节 接合
供体细胞和受体细胞直接接触后，质粒从供 体细胞向受体细胞转移的过程。 Conjugation is the mechanism by which genetic material is transferred between two cells by plasmids. 一、细菌接合作用的发现和证实
57
58
二、普遍性转导 generalized transduction
能传递供体的任何基因的转导。 1、噬菌体：烈性噬菌体或经过改造的温和
性噬菌体 如 Salmonella typhimurium P22, E. coli P1 2、转导噬菌体的形成 选择性包裹模型 形成频率：10-6
59
体 ②单独分析：azis Tons lac+ gal+性状
42
方法：Hfr×F- CM 杂交，定时取样，通过 剧烈搅拌而中断杂交，洗涤后涂布 MM+str选择性培养基上，将长出的 thr+leu+strr重组体再用不同的选择性培养 基分析azis Tons lac+gal+等基因的重组情 况。
结果：
A(met-bio-) B(thr-leu- thi-)
诱变
诱变
Astrs
Astrr Bstrs Bstrr
26
在MM上： Astrs×Bstrr , 获重组菌落 Astrr×Bstrs , 获重组菌落
在MM+str上： Astrs×Bstrr , 获重组菌落 Astrr×Bstrs , 无重组菌落
离体的DNA片段
2
转化过程
3
2、转化因子的变性和失活
肺炎链球菌 单、双链DNA与 转化活性的关系
4
二、感受态
1、感受态 Competence： 能接受转化作用的细菌的生理状态叫感受态 2、感受态通常取决于生长条件 生长阶段：肺炎链球菌 枯草杆菌：对数后期
5
6
7
出现频率：枯草杆菌：10~20% 肺炎链球菌：几乎100%
66
67
2、有性繁殖过程中着丝粒的分离情况
68
3、还原分裂和均等分裂
还原分裂：
来自同一亲本的两 上基因趋向同一极 的分裂。
均等分裂：
来自同一亲本的两个 基因分别趋向两极的 分裂。
69
70
4、基因的第一次分裂分离和第二次分裂分离 (1)第一次分裂分离：还原分裂，均等分裂 原因：基因与着丝粒之间未发生交换 (2)第二次分裂分离：均等分裂，还原分裂 原因：基因与着丝粒之间发生了交换
4、 F+与Hfr菌株的异同点
40
相同点 不同点
含有F因子，都具有性纤毛，都 具有接合作用
Hfr细菌
F+
对于吖啶橙处理
稳定
F因子易失去
传递供体染色体 基因
F因子本身转移
高频(10-3 ~ 10-4) 基本不能
低频(10-6 ~ 107)
频率70%以上
F因子复制
随细菌染色体复制 独立复制
41
五、中断杂交实验和连锁分析
×100
2 ×第二次分裂分离子囊数
=
4 ×子囊总数
100
第二次分裂分离子囊数
1
=
子囊总数
× ×100 2
74
例：N. crassa接合型基因子囊类型（ Lindegren， 1932）
子囊类型 分离类型 子囊数
AAAAaaaa
Ⅰ
105
aaaaAAAA
Ⅰ
129
AAaaAAaa
Ⅱ
9
aaAAaaAA
Ⅱ
5
一部分形成供体-受体复合物 供体DNA和受体DNA形成共价键，同时
被替代的一小段DNA为酶所分解 作用酶：
核酸酶、DNA多聚酶、DNA连接酶
12
13
供体-受体复合物
瞬变异质双链 重组DNA分子 14
4、影响转化效率的因素 受体细胞的感受态 受体细胞的限制酶系统和其它核酸酶 受体和供体染色体的同源性 四、大肠杆菌的转化 CaCl2处理可人工诱发感受态的产生 质粒DNA可直接进入细胞，并且不与染