猪圆环病毒抗体金标快速检测卡使用说明书概要
猪圆环病毒(PCV)试剂盒使用方法
猪圆环病毒（PCV）试剂盒使用方法检测范围：96T使用目的：本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中圆环病毒（PCV）表达。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪圆环病毒（PCV）表达。
用纯化的猪圆环病毒（PCV）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中圆环病毒（PCV）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的圆环病毒（PCV）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF 值相比较，从而判定标本中猪圆环病毒（PCV）的存在与否。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 阳性对照0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 阴性对照0.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。
然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
猪瘟抗体检测卡说明书(完整版)
猪瘟抗体快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书【名称】通用名称：猪瘟抗体快速检测试剂盒（胶体金法）英文名称：Rapid Anti-CSFV Test汉语拼音：Zhuwen Kangti Kuaisu Jiance ShijiHe(Jiaoti Jin Fa)【用途】用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪瘟(Classical Swine Fever, CSF)抗体。
【实验原理】猪瘟抗体快速检测试剂盒（胶体金法），系采用胶体金免疫层析技术，检测样品（血清、血浆或全血）中猪瘟抗体的方法。
在玻璃纤维纸上预包被金标记灭活猪瘟抗原（Au-Agl），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被猪瘟抗原(Ag2)和兔抗猪瘟抗体。
当检测样品为阳性时，样品中猪瘟抗体与胶体金标记猪瘟抗原（Au-Ag1）结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的猪瘟抗原(Ag2)形成“Au-Ag1-猪瘟抗体-Ag2-固相材料”免疫复合物而凝聚显色，游离金标记抗原则在对照线处与兔抗猪瘟抗体结合而富集显色。
阴性样品则仅在对照线处显色。
操作简便，快速，结果直观、准确，灵敏度高，容易判定。
【试剂盒组成】1.猪瘟抗体检测卡50头份2.说明书1份3.一次滴管50根【操作方法】1.用1.5ml样品管，采血0.5-1ml待检测血清自然析出或用离心机离心10分钟左右，使血清析出。
2.将检测卡平置于桌面上，用吸管吸取被检血清，在检测卡的椭圆形加样孔内加入2滴约80~100ul。
在室温下反应20分钟判定结果。
（检测卡如在4℃保存，必须恢复至室温后方可进行检测）【结果判定】阳性：对照线区（C）和检测线区(T)各出现一条紫红色线。
检测线(T)的颜色越深，表明猪瘟抗体的滴度越高。
阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线，对照线区(C)未出现紫红色线。
【诊断参考】被检样品加样后20分钟可与对照卡的色带滴度进行参考比较。
猪圆环病毒 PCR 检测试剂盒 说明书
猪圆环病毒PCR检测试剂盒用途猪圆环病毒（PCV）的聚合酶链反应（PCR）试验用于检测猪血清和组织中的PCV，适用于PCV 的检测、诊断和流行病学调查。
原理提取病料DNA作为模板，高温使模板的一条双链DNA变性后形成两条单链，低温使引物与互补的模板形成双链，中温时，在TaqDNA聚合酶作用下，以dNTP为原料，以引物为复制的起点，沿模板合成一条新链。
每个循环包括：高温变性、低温退火、适温延伸三个过程。
每一次循环使扩增的DNA 片段拷贝数放大一倍。
经过35次循环，使扩增的DNA片段放大了数百万倍。
将扩增产物进行电泳，经染色后，在紫外灯照射下，肉眼可见到DNA片段的扩增带。
试剂1. 试剂盒组成名称10头份50头份0.2 mL薄壁PCR管 15个 60个PCV-1阳性对照350 µL 1 mLPCV-2阳性对照350 µL 1 mLA液：消化液 6 mL 30 mLB液：蛋白酶K 110 µL 600 µLC液：酚/氯仿/异戊醇混合液7 mL 34 mLD液：异丙醇 6 mL 30 mLE液：70％乙醇12 mL 60 mLF液：灭菌去离子水650 µL 2 mLJ液：PCR反应液200 µL 1 mLK液：Taq DNA聚合酶25 µL 120 µLL液：矿物油300 µL 1.2 mLM液：50倍TAE电泳缓冲液（50倍稀释后使用）20 mL 100 mLO液：上样缓冲液50 µL 250 µL染色液20 µL 50 µL2. 贮藏条件：塑料袋内红盖试剂（阳性对照、B、E、J、K液）-20 ℃冻存。
其他室温保存。
3. 试剂盒保存期：6个月需要自备的器材1．仪器：分析天平、水浴锅、台式高速离心机、真空干燥器、PCR扩增仪、电泳仪、电泳槽、紫外凝胶成像仪（或紫外分析仪）、液氮或-70 ℃冰箱、微波炉、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
猪圆环病毒型检测技术课件
02
检测方法主要包括PCR（聚合酶
链式反应）、RT-PCR（反转录
聚合酶链式反应）、基因芯片等。
03
PCR技术是利用DNA聚合酶对病
毒基因进行扩增，通过检测扩增
产物来判断病毒类型。
04
RT-PCR技术是先将病毒RNA反
转录为cDNA，再进行PCR扩增，
05
基因芯片技术是利用芯片上的探
提高了检测灵敏度。
疫苗效果：疫苗可以有效预防猪圆环病毒型感染， 提高猪的健康水平
疫苗推广：疫苗研发成功后，需要推广到养殖场， 提高疫苗的覆盖率，降低猪圆环病毒型的危害
养殖场管理
检测技术在养殖场的 应用：提高养殖效率， 降低疾病风险
检测结果的分析：根 据检测结果，调整养 殖场管理策略
检测技术的实施：制 定检测计划，定期进 行检测
法规政策：国家对猪圆环病毒型检 02 测技术的法规政策变化
法规政策：国家对猪圆环病毒型检 03 测技术的法规政策实施情况
法规政策：国家对猪圆环病毒型检 04 测技术的法规政策未来发展趋势
谢谢
猪圆环病毒型检测技术课件
演讲人
目录
01. 猪圆环病毒型检测技术概述 02. 猪圆环病毒型检测技术的原
理和方法
03. 猪圆环病毒型检测技术的应 用
04. 猪圆环病毒型检测技术的发 展趋势
猪圆环病毒型检测技 术概述
病毒类型及危害
01 猪圆环病毒型：一种猪病
毒性疾病，主要感染猪的 免疫系统，导致猪的免疫 功能下降，容易感染其他 疾病。
检测技术可以区分猪圆环病毒病 的不同类型和亚型
检测技术可以帮助兽医和养殖户 及时发现和治疗猪圆环病毒病
检测技术可以提高猪圆环病毒病 的防控效果，降低经济损失
猪轮状病毒检测卡说明书(完整版)
猪轮状病毒金标检测卡使用说明书【简介】猪轮状病毒病是由猪轮状病毒(Porcine Rotavirus Infection ,RV)所致的一种幼龄猪急性消化道传染病。
仔猪感染后引起厌食、下痢、呕吐，中猪和大猪为亚临床症状或隐性感染。
轮状病毒主要存在于病猪及带毒猪的消化道，随粪便排到外界环境。
有些临床健康猪粪便也可检出病毒。
【检测原理】采用渗滤式免疫胶体金技术，利用金颗粒作为示踪剂，选择性捕捉标本中轮状病毒抗原。
斑点反应板上的固相单克隆抗体特异地与标本中的轮状病毒抗原结合形成复合物，胶体金标记的抗体再与复合物结合，形成肉眼可见的红色斑点。
【试剂及用品】●猪轮状病毒金法检测卡（50份）●一次性塑料滴管（50支）●塑料一次性手套（5只）●使用说明书（1份）【样品收集及准备】1、用生理盐水沾湿的棉签从直肠取样，或从新鲜粪便中直接取样；2、采集样品时注意多部位同时收集新鲜及有效样品，充分在试管中搅拌稀释；静置10分钟（建议离心3分钟）后，用一次性滴管取上清液；3、样品一般须当即进行检测，否则应冷藏保存，超过24小时的，应该冷冻保存。
【检测步骤】1、试纸条恢复室温；2、取出试纸，开封后平放在桌面，从滴管中缓慢而准确地逐滴加入2-3滴混合液。
3、加样品液后，红色的液体从靠样品孔的观察窗边缘涌出，朝另一方向流动。
4、5-10分钟后判断结果，半小时后结果判读无效。
【结果判定】阳性（+）：当位置C显示出红色线条，而位置T同时显示出红色线条时，判为阳性。
阴性（-）：当位置C显示出红色线条，而位置T不显色时，判为阴性。
无效：当位置C不显示出红色线条，则无论位置T显示出红色线条与否，均判为无效。
【注意事项】1．仅用作体外诊断。
2．注意样品具有潜在传染性，注意防止交叉感染。
3．该试纸及配套试管、棉签均为一次性产品，不可交叉及重复使用。
4．包装袋破损或产品过期请勿使用。
5．试纸2-8℃冷藏保存，勿要冷冻。
猪瘟抗原检测卡说明书(完整版)
猪瘟抗原快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书【名称】通用名称：猪瘟抗原快速检测试剂盒（胶体金法）英文名称：Rapid CSFV Test汉语拼音：Zhuwen Kangyuan Kuaisu Jiance Shiji He(Jiaoti Jin Fa)【用途】用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪瘟病毒(Classical Swine fever virus, CSFV)抗原，用于猪瘟的辅助诊断。
【实验原理】猪瘟病毒抗原快速检测试剂盒（胶体金法）采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维纸上预包被金标记鼠抗猪瘟病毒单克隆抗体（Au-Ab1），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被鼠抗猪瘟病毒单克隆抗体（Ab2）和羊抗鼠IgG，检测样品为阳性时，样品中的猪瘟病毒抗原（Ag）可与包被在试纸条前端的胶体金标记的鼠抗猪瘟病毒单克隆抗体（Au-Ab1）结合，形成免疫复合物，由于层析作用，复合物沿膜带向前移动，经过检测线时与预包被的鼠抗猪瘟病毒单克隆抗体（Ab2）形成“Au-Ab1-Ag-Ag2-固相材料”免疫复合物而凝聚显色，游离金标记抗体在对照线处与羊抗鼠IgG体结合而富集显色。
阴性样品则仅在对照线处显色。
检测时只需将血清/血浆/全血加在检测卡的加样孔内，操作简便、快速，结果直观、准确，灵敏度高，容易判定。
【试剂盒组成】1.猪瘟抗原检测卡50头份2.说明书1份3.一次滴管50根【试验方法】1、将检测卡从铝箔袋中取出，水平放置并做好标记。
2、在检测卡的加样孔内加入2滴（70-100ul）待检血清/血浆/全血标本。
3、20分钟内观察并记录实验结果。
【结果判定】阳性：对照线区（C）和检测线区（T）各出现一条紫红色线。
阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线，对照线区(C)未出现紫红色线。
【注意事项】1. 操作前请仔细阅读说明书；2. 检测样品可以是血清/血浆/全血；3. 检测卡从铝箔袋中取出后，应尽快进行试验，避免放置于空气中过长时间，试剂吸潮后将失效；4. 实验环境应保持一定湿度，避风，避免在过高温度下进行试验；5. 试剂盒在室温下保存，如在2-8℃冷藏，使用前应平衡至室温后方可打开铝箔袋进行检测操作。
猪流感病毒检测卡说明书(完整版)
猪流感病毒检测试纸条使用说明书【原理】猪流感是由正粘病毒科A型流感病毒属的特定病毒引起的。
A型猪流感病毒可根据其血凝素和神经氨酸酶蛋白再进一步细分为H1N1,H1N2和H3N2等。
猪流感病毒（SIV）抗原快速检测卡采用了快速免疫层析检测技术，用于检测猪鼻腔拭子中的猪流感病毒抗原。
本检测卡对A型猪流感病毒的所有亚型都有极高的敏感性。
把待检样本加入到加样孔后，与胶体金标记的抗SIV单克隆抗体一起沿层析膜移动。
若样品中存在SIV抗原时，与检测线上的抗体结合而显示酒红色。
如果样品中不存在SIV抗原时，则不产生颜色反应。
【试剂组成】1. 猪流感病毒快速检测卡50片/盒2. 样本稀释液50管/盒3．棉签50支/盒4．一次性手套5支【操作方法】操作流程1）应采集急性、体温高的及未经处理的病猪鼻拭子。
棉签应插入鼻腔，并在内壁上反复旋转擦拭。
2）立即将棉签插入装有样品缓冲液的试管，将棉签在试管壁上反复用力旋转至少10次，并混匀溶液，使标本尽可能溶解在溶液中。
在液面上方的试管壁上挤压棉签，使液体尽可能被挤出，丢弃棉签。
3）从密封袋中取出检测卡。
将检测卡放置在平整表面，用吸管从试管内吸取上层清亮液体，缓慢、逐滴的准确滴加4滴到有“S”标记的加样孔内。
4）在室温下放置10-15分钟判断结果，超过15分钟结果无效。
【结果判定】1. 阳性：在观察孔内，若对照线C显色，检测线T同时显色，判为阳性。
2. 阴性：在观察孔内，若对照线C显色，而检测线T不显色，判为阴性。
3. 无效：在观察孔内，若对照线不显色，则结果无效，建议重新测试。
【检测方法的局限性】1. 检测线红色线条的颜色深浅直接与检测病毒多少相关。
当检测病毒含量很高时，检测线可能在出现后，红色又慢慢变淡，此时建议将样品数倍稀释后再进行检测，红色线条就可以稳定了。
2. 当检测线出现模糊的色迹，但不显示为清楚的线形时，判为阴性。
3. 本试剂是定性筛选试剂，一个明确的临床诊断结果应该由医生在考虑到所有的临床和实验室的现象后作出。
猪圆环病毒检测卡说明书(完整版)
猪圆环病毒抗体快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书【产品名称】通用名称：猪圆环病毒抗体快速检测试剂盒（胶体金法）汉语拼音：Zhu Y uanhuan Bingdu Kangti Kuaisu Jiance Shiji He(Jiaoti Jin Fa)【用途】用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪圆环病毒(Pseudorabies,PR)抗体。
【原理】猪圆环病毒抗体检测试剂盒（胶体金法），系采用国际最先进的胶体金免疫层析技术检测样本（全血、血清、血浆）中抗猪圆环病毒抗体的方法。
整个试验只需20分钟，操作简便、快速、准确，灵敏度高、结果直观、容易判定。
本试剂盒内还设计一张“金标试纸与ELISA试验实物参照图”，用试纸检测线的颜色与实物参照图对照，便可粗略估计样品中的抗体滴度。
【试剂盒组成】1.猪圆环病毒抗体检测卡50头份2.说明书1份3.一次滴管50根【试验方法】1.在检测卡的加样孔内加入2滴（100ul）待检血清或血液样品。
2.将检测卡平放于桌面上，在室温下静置20分钟内判定结果。
超过20分钟的结果只能作为参考。
【产品特点】1.敏感：阳性检出率达到98%；2.特异：不与其它常见猪病如猪瘟、伪狂犬、细小病毒发生交叉反应，特异性97%；3.方便：肉眼判断、无需仪器、操作简单；4.快速：20分钟即可以出结果，有利于疫情的快速鉴别和免疫水平监测；5.用途：适合于各级防检部门、猪场、兽医站广泛使用。
【结果判定】阳性：对照线区（C）和检测线区(T)各出现一条紫红色线。
检测线(T)的颜色越深，表明猪圆环抗体的滴度越高。
阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线，对照线区(C)未出现紫红色线。
【诊断参考】1.如果该猪未接种过猪圆环病毒疫苗:a)当被检样品检测线（T）处无明显色带出现，说明被检测样品中没有猪圆环病毒抗体。
如果猪群健康，应当及时进行猪圆环病毒疫苗接种。
猪瘟病毒抗体检测卡
猪瘟病毒抗体快速检测卡说明书1.阳性：检测（T）线区及对照（C）线区同时出现红色线。
2.阴性：只有对照（C）线区出现一条红色线。
3.无效：对照（C）线区不出现红色线。
通用名称：猪瘟病毒抗体快速检测卡英文名称：ClassicalSwineFeverVirus（CSFV）AntibodyRapid Test Card【包装规格】1份/袋，40袋/盒【预期用途】本检测卡采用胶体金免疫层析技术检测样品中猪瘟病毒抗体，可作为猪瘟病毒疫苗的免疫监测及该病辅助检测。
【检测原理】如果待检样品中含有猪瘟病毒抗体，就会与胶体金标记的猪瘟病毒重组抗原结合并一起沿层析膜移动。
胶体金-抗原-抗体结合物在检测（T）线区与检测线上的猪瘟病毒抗原结合而显示红色。
如果样品中不存在猪瘟病毒抗体，则不产生显色反应。
【储存条件及有效期】2~30℃保存，有效期18个月。
【样品要求】1.本检测卡仅适用于检测猪血清/血浆/全血样品。
2.为保证检测效果，尽量采用新鲜、无污染的样品。
若样品有大量血脂，应处理后，取上清部分检测。
3.血清样品：短期（3天内）存放须置于4℃，长期保存请置于-20℃。
4.血浆样品：如果采用含有抗凝剂EDTA的容器，就可能干扰检测结果。
EDTA在低浓度下也能起到干扰作用，所以避免使用EDTA。
5.全血样品：未加抗凝剂的全血样品应立即检测。
加抗凝剂的全血样品请于24小时内检测，且勿冷冻，冻融会使红细胞破裂导致溶血，严重影响检测效果。
【检验方法】1.将检测卡平衡至室温后从铝箔袋中取出，水平放置并做好标记。
2.在检测卡的加样孔内加入2滴（100ul）待检样品。
3.室温下静置，20分钟内判定结果，超过20分钟的结果仅作为参考。
【检验结果的解释】【诊断参考】1.如果该动物未接种过猪瘟病毒疫苗：a）当被检样品检测（T）线处无明显色带出现，说明被检样品中没有猪瘟病毒抗体。
如果群体健康，应当及时进行猪瘟病毒疫苗接种。
b）当被检样品检测（T）线处有明显色带出现，则该动物有可能为野毒感染，应进一步观察验证。
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猪圆环病毒抗体金标快速检测卡使用说明书
【产品用途】
本检测卡采用免疫原理和胶体金免疫层析技术制成快速检测猪血液或血清中的圆环病毒抗体。
检测时间仅需3-15分钟，操作简便、快速、结果准确、直观、灵敏度高、容易判定。
当猪圆环病毒抗体滴度达到能抵御圆环病毒强毒攻击时，在检测区和对照区各形成一条色线，则视为阳性，抗体滴度越高，检测线颜色越深；当猪圆环病毒抗体滴度达不到抵御圆环病毒强毒攻击的抗体滴度时，只在对照区形成一条色线，则视为阴性。
【操作步骤】
1．打开包装袋，取出检测卡平放在桌面上，并做好标记；
2．在检测卡的加样孔内加入2-3滴待检血液或血清样品；
3．在3-15分钟内观察和记录结果，超过15分钟的结果只能作为参考。
【结果判定】见右图
阳性：在检测区（T）和对照区（C）各出现一条紫红色线。
检测线颜
色越深，表明圆环病毒抗体滴度越高。
弱阳性：在检测区（T）和对照区（C）各出现一条紫红色线，但检测
线颜色很浅。
阴性：只在对照区（C）出现一条紫红色线。
无效：都不出现紫红色线或只在检测区（T）出现紫红色线，对照区
（C）不出现紫红色线。
【注意事项】
1．请严格按照说明书要求进行操作和结果判定。
2．检测样品可以是猪血液或血清。
3．检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用，尽量避免长时间放置在空气中，否则吸潮后将失效。
4．检测环境应保持一定的湿度，避风和避免在过高温度下进行操作。
5．检测卡在室温下保存，如在2-8℃冷藏，使用时需平衡至室温后方可打开包装进行检测操作。
【包装规格】单头份铝箔袋包装（内含检测卡、吸管和干燥剂）；20头份/盒。
【贮藏和有效期】3-30℃，避光干燥处贮存，有效期12-18个月。