生物分离与纯化技术模拟试卷十一答案

生物分离与纯化技术模拟试卷十一答案
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1．盐析：23．451A0.02～10μ2A B C D 3A ．羟型阴B 4A1％～10％5A 、阴性洗脱B 6A 、水B 、甲醇C 7．在一定的pH 和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作(A) A 、KS 盐析法B 、β盐析法C 、重复盐析法D 、分部盐析法 8．在超滤过程中，主要的推动力是（C ） A 、浓度差B 、电势差C 、压力D 、重力
9．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（A ） A 、粗且长的B 、粗且短的C 、细且长的D 、细且短的
10．如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方法最佳？（C ） A.匀浆法B.超声波法C.渗透压休克法D.冻融法 11．盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（B ） A ．分辨率高B ．变性作用小C ．杂质易除D ．沉淀易分离 12．磺酸型阳离子交换树脂可用于分离（E ） A 、强心苷B 、有机酸C 、醌类D 、苯丙素E 、生物碱
13．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（C ） A ．离子交换色谱B ．亲和色谱C ．凝胶过滤色谱D ．反相色谱
14．洗脱体积是（C）。

A、凝胶颗粒之间空隙的总体积
B、溶质进入凝胶内部的体积
C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积
D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积
15．下列细胞破碎的方法中，哪个方法属于非机械破碎法(A)
A.化学法
B.高压匀浆
C.超声波破碎
D.高速珠磨
三、判断题（每小题1分，共10分）
2．阴树脂易受有机物污染，可用有机溶剂浸泡或淋洗。

（×）
3．吸附力较弱的组分，有较低的Rf值。

（×）
4．凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。

（√）
5．等密度梯度离心中，梯度液的密度要包含所有被分离物质的密度。

（√）
6．疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液（√）
7．采用溶剂提取法提取中草药有效成分时，选择溶剂的原则是“相似相溶原则”。

（√）
（2）对极性基团（-COOH、-NH2、-OH等）多的化合物的吸附力大于极性基团少的化合物，。

（3）对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物。

（4）对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。

（5）发酵液的pH与活性炭的吸附效率有关，一般碱性物质在中性下吸附，酸性下解吸；酸性物质在中性下吸附，碱性解吸。

（6）活性炭吸附溶质的量在未达到平衡前一般随温度升高而增加；但在升高温度时应考虑到溶质对热的稳定性。

4．简述凝胶层析有哪些用途？
①作为分析工具；作为脱盐工具②生物大分子的浓缩
③除热原物质④生物大分子的分离纯化；分子量的测定
5．蛋白质的纯度鉴定的方法有哪些。

(1)色谱法用分子筛或离子交换色谱检查样品时，如果样品是纯的，应显不单一的洗脱峰。

该样品在色谱性质上是均一的，称为“色谱纯”。

(2)电泳法用PAGE检查样品呈现单一区带，也是纯度的一个指标，这表明样品在电荷和质量方面的均一性。

可以说纯的蛋白质电泳仅有一条区带，但仅有一条区带却不一定是纯的，仅能表明它在电泳上的均一性，称为“电泳纯”。

(3)免疫化学法免疫学技术是鉴定蛋白质纯度的有效方法，它根据抗原与抗体反应的特异性，可用已知抗体检查抗原或已知抗原检
查抗体。

用此法检测的纯度称为“免疫纯”。

六、案例分析题（共10分）
①树脂颗粒的大小：树脂颗粒大小要适中。

②搅拌和流速。

③离子浓度：过稀、过浓都对交换速度不利。

④离子的水化半径：离子在水溶液中要发生水化，水化离子在水溶液中的大小以水化半径来表示。

水化半径小的离子，较易吸附。

一价阳离子；Li+<Na+<k+≈NH+<Rb+<Cs+<Ag+<Ti+
二价阳离子：Mg2+<Cu2+≈Ni2+<Co2+<Ca2+<Sr2+<pb2+<Ba2+
阴离子：F—<HCO3—<C-<HSO3—<Br—<NO3—<I—<Cl3—
⑤树脂酸碱性的强弱和溶液的pH值。

⑥交联度愈低，树脂愈易膨胀，交换速度也就愈快。

⑦有机溶剂的影响：当有机溶剂存在时，会降低树脂对有机离子的选择性，而容易吸附无机离子。