L-选择素及其配体足萼糖蛋白在结肠癌发生、发展中的 表达和意义

·短篇论著·
L⁃选择素及其配体足萼糖蛋白在结肠癌发生、发展中的表达和意义
刘　斌1　陈杏林1　王哲民1　陈柳勇1　蒋云飞1　李善高2*
杭州市临安区第一人民医院消化内科1（311300）　浙江中医药大学附属第一医院消化内科2
背景：结肠癌的早期诊治能有效改善患者的预后，简单有效且敏感的筛查指标对及早识别早期癌症及其癌前病变具有重要意义。

L⁃选择素是细胞黏附分子，足萼糖蛋白（PODXL）是其配体，两者在癌症的发生、发展中发挥关键作用。

目的：探讨L⁃选择素及其配体PODXL在结肠癌中的表达和意义。

方法：收集2020年11月—2022年11月杭州市临安区第一人民医院和浙江中医药大学附属第一医院的病理标本120例（增生性息肉、结肠腺瘤、结肠癌各
40例），另取正常肠黏膜组织20例作为对照。

采用qRT⁃PCR和免疫组化法分别检测L⁃选择素、PODXL mRNA和蛋白表达。

采用蛋白质印迹法测定L⁃选择素和PODXL蛋白表达，并分析其与结肠癌临床病理参数的关系。

此外，收集60例结肠癌患者血清标本。

以ELISA法检测血清L⁃选择素和PODXL浓度。

结果：结肠腺瘤组L⁃选择素和PODXL mRNA和蛋白表达明显高于正常对照组、增生性息肉组（P<0.05），而结肠癌组又显著高于正常对照组、增生性息肉组和结肠腺瘤组（P<0.05）。

不同病理类型、淋巴结转移、Dukes分期的结肠癌患者中L⁃选择素和PODXL 蛋白表达相比差异有统计学意义（P<0.05）。

结肠癌组织中L⁃选择素表达与PODXL表达具有显著正相关性（r=
0.855，P<0.001）。

初发组血清L⁃选择素和PODXL浓度显著低于复发组，未转移组亦显著低于转移组（P<0.05）。

术
后3个月血清L⁃选择素和PODXL浓度显著低于术后3 d和术前（P<0.05）。

结论：L⁃选择素和PODXL可能参与了结肠癌发生、发展的病理过程，属于致癌蛋白，可为结肠癌的预防和早期诊治提供参考价值，通过早期筛查病变可在一定程度上改善结肠癌患者的预后。

关键词　L⁃选择素；　足萼糖蛋白；　结肠肿瘤；　结肠腺瘤；　肿瘤转移；　复发
Expression and Significance of L⁃Selectin and its Ligand Podocalyxin in Development and Progression of Colon Cancer　LIU Bin1, CHEN Xinglin1, WANG Zhemin1, CHEN Liuyong1, JIANG Yunfei1, LI Shangao2. 1Department of Gastroenterology, the Frist People's Hospital of Hangzhou Lin'an District, Hangzhou (311300); 2Department of Gastroenterology, the First Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou
Correspondence to:LIShangao,Email:******************
Background: Early diagnosis and treatment can effectively improve the prognosis of colon cancer. Simple, effective and sensitive screening indicators are of great significance for identification of early cancer and precancerous lesions. L⁃selectin is a cell adhesion molecule, and podocalyxin (PODXL) is its ligand, both of them play key roles in the development of cancer. Aims:To investigate the expression and significance of L⁃selectin and its ligand PODXL in colon cancer.
Methods: A total of 120 cases of pathological specimens (40 hyperplastic polyp, 40 colon adenoma, and 40 colon cancer) from Nov. 2020 to Nov. 2022 at the Frist People's Hospital of Hangzhou Lin'an District and the First Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University were collected, and 20 cases of normal intestinal mucosal tissue were served as controls. qRT⁃PCR and immunohistochemistry were used to detect the mRNA and protein expressions of L⁃selectin and PODXL, respectively. Western blotting was used to determine the expressions of L⁃selectin and PODXL, and their relations with different clinicopathological parameters of colon cancer were analyzed. In addition, 60 serum specimens of colon cancer were collected. ELISA was used to detect serum concentrations of L⁃selectin and PODXL. Results: Expressions of L⁃selectin and PODXL mRNA and prote in in colon adenoma group were significantly higher than those in normal controls and hyperplastic polyp group (P<0.05), and mRNA and protein expressions of L⁃selectin and PODXL in colon cancer group were significantly higher than those in normal controls, hyperplastic polyp group and colon adenoma group (P<0.05).
Significant differences in protein expressions of L⁃selectin and PODXL were found in different pathological types, lymph node metastasis, Dukes staging in colon cancer (P<0.05). Expression of L⁃selectin was positive correlated with expression of PODXL in colon cancer (r=0.855, P<0.001). Serum concentrations of L⁃selectin and PODXL were significantly lower in the DOI： 10.3969/j.issn.1008⁃7125.2023.06.005
*本文通信作者，Email:******************
initial group than in the relapse group (P<0.05), and serum concentrations of L⁃selection and PODXL was significantly lower in the non⁃metastatic group than in the metastatic group (P<0.05). Serum concentrations of L⁃selectin and PODXL at 3 months after surgery was significantly lower than 3 days after surgery and before surgery (P<0.05). Conclusions:L⁃selectin and PODXL may be involved in the development and progression of colon cancer. They are carcinogenic proteins, and their detection could provide reference value for the prevention and early diagnosis of colon cancer, and through early screening of lesion could improve the prognosis of colon cancer to a certain extent.
Key words　L⁃Selectin;　Podocalyxin;　Colonic Neoplasms;　Colon Adenoma;　Neoplasm Metastasis;　
Recurrence
结肠癌（colon cancer）是一种消化道侵袭性恶性肿瘤，由于许多病例发现时已出现转移，导致致死率较高。

但绝大多数结肠癌患者往往并非死于原发癌，而是由于肿瘤浸润，肿瘤的侵袭与转移是导致患者预后极差的关键所在，故早期诊治显得格外关键。

值得庆幸的是，结肠癌有比较明确的癌前病变，可在结肠黏膜恶性转化前或癌症早期阶段切除病灶，对于逆转结肠癌结局和改善预后尤为重要[1⁃2]。

有鉴于此，简单有效且敏感的筛查指标对及早识别早期癌症及其癌前病变具有重要意义。

L⁃选择素（L⁃selectin）作为淋巴细胞归巢受体，已有部分研究证实其表达与肿瘤细胞的淋巴结转移有关[3⁃5]。

足萼糖蛋白（podocalyxin, PODXL）是新近发现的一种L⁃选择素配体，属于CD43家族的一种抗黏附跨膜蛋白，因其能增强与L⁃选择素的黏附、迁移以及与细胞间的相互作用，进而可明显提高癌细胞的迁移率[6]。

本研究通过探讨L⁃选择素及其配体PODXL在结肠癌发生、发展中的表达及其临床意义，旨在评估其与结肠癌侵袭和转移的相关性，从而为判断肿瘤转移和复发提供参考价值，并对评估患者预后以及治疗方案的选择提供理论依据。

材料与方法
一、标本来源
收集2020年11月—2022年11月杭州市临安区第一人民医院和浙江中医药大学附属第一医院的病理标本（手术切除或活检钳取）120例，包括增生性息肉、结肠腺瘤、结肠癌标本各40例，另取同期健康体检者的正常肠黏膜组织20例作为对照，所有纳入病例均经病理活检证实。

此外，同时收集同期60例结肠癌患者的血清标本，其中40例接受手术治疗（均于术前采集血清，20例淋巴结未转移、16例淋巴结转移和4例远处转移）。

因手术患者均为初发，随机抽取20例纳入初发组，另收集同期肿瘤科门诊和病房随诊手术失败后病情进展转为保守治疗的复发患者。

二、纳入和排除标准
年龄>18岁，男女不限，无心肝肾等内科重大疾患，近1周内未服用过非甾体抗炎药、糖皮质激素、免疫抑制剂等药物，排除感染、结核、创伤等可能的干扰因素，未接受过放疗、化疗以及其他特殊治疗，未合并除结肠癌外其他系统的恶性肿瘤，并排除妊娠和精神异常者。

本实验方案已通过浙江中医药大学附属第一医院伦理委员会审核（伦理批件号：2020⁃KL⁃132⁃02），纳入研究的患者均对本实验表示知情且同意，并签署知情同意书。

三、方法
1. 第一部分实验：利用qRT⁃PCR和免疫组化法分别检测正常对照组、增生性息肉组、结肠腺瘤组和结肠癌组中L⁃选择素及其配体PODXL mRNA和蛋白表达。

①qRT⁃PCR法：取结肠组织，利用TRIzol® Reagent（购自Thermo Fisher Scientific Inc.）提取组织的总RNA，反转录为cDNA（反应条件：25 ℃ 10 min；50 ℃ 30 min；85 ℃ 5 min）。

PCR引物序列：内参GAPDH引物上游：5'⁃CCA TGA CAA CTT TGG TAT CGT GGA A⁃3'，下游：5'⁃GGC CAT CAC GCC ACA GTT TC⁃3'；L⁃选择素引物上游：5'⁃CTT CAG CTC ACA GTG TGC CTT CA⁃3'，下游：5'⁃GGT TGG TTC TGG AGA TGA CCA GTT⁃3'；PODXL引物上游：5'⁃CCC TGG CTA CAC CTT CAC AAG⁃3'，下游：5'⁃CAG CCT GGC TGA CAT GGT GAA⁃3'。

PCR反应条件：95 ℃ 1 min；95 ℃ 15 s，64 ℃ 25 s，40个循环，55~95 ℃熔点曲线。

采用2-∆∆Ct法计算目的基因mRNA 的相对表达。

②免疫组化法：常规进行石蜡切片，脱蜡至水，加热修复抗原，自然冷却、水洗；封闭后切片滴加L⁃选择素（购自Santa Cruz Biotechnology, Inc.，稀释浓度为1∶100）、PODXL一抗（购自Abcam公司，稀释浓度为1∶200）；切片滴加抗兔IgG抗体⁃HRP多聚体二抗稀释，室温下孵育，然后PBS漂洗3遍，每次约5 min；DAB显色，苏木素液复染细胞核1 min，脱水，透明，晾干，随后中性树胶封片，显微镜下观察结果并适时拍照。

由2名经验丰富的病理科医师双盲阅片，用半定量积分法进行显色强度判定。

2. 第二部分实验：采用蛋白质印迹法测定结肠癌组织中L⁃选择素及其配体PODXL蛋白表达，采用ELISA法检测结肠癌患者术前、术后3 d和术后3个月血清L⁃选择素及其配体PODXL浓度。

①蛋白质印迹法：采用总蛋白提取试剂盒（购自Thermo Fisher Scientific Inc.）进行蛋白提取，BCA定量试剂盒（购自碧云天生物技术股份有限公司）测定蛋白浓度。

取60 μg样品行SDS⁃PAGE电泳，转至PVDF膜上；浸泡于含5%脱脂奶粉的封闭液中，室温封闭过夜，漂洗3次；加入L⁃选择素（购
自Santa Cruz Biotechnology, Inc.，稀释浓度为1∶100）、PODXL （购自Abcam公司，稀释浓度为1∶2 000）、内参GAPDH（购自Abcam公司，稀释浓度为1∶10 000）一抗，洗涤5 min，4 ℃孵育过夜；加入山羊抗兔IgG二抗，室温孵育1 h，漂洗。

应用Image J软件按灰度值来定量分析蛋白表达，测量3次取
均值。

②ELISA法：样本冰上溶解、离心，取上清液100 μL，将所有试剂和样品置于室温（18~25 ℃）中。

然后按照试剂盒说明书完成实验步骤，上多功能酶标仪测定吸光度值（A 值），绘制标准曲线，计算各孔浓度。

四、统计学分析
应用SPSS 25.0统计学软件，所得数据以x±s表示，两组之间比较采用独立样本t检验，多组比较则采用方差分析。

两组数据相关性分析采用Spearman相关性分析。

P<0.05为差异有统计学意义。

结 果
一、一般资料
正常对照组、增生性息肉组、结肠腺瘤组和结肠癌组患者的性别、年龄、吸烟、饮酒、高脂血症、肿瘤家族史等临床资料相比无明显差异（P均>0.05；表1），具有可比性。

表1　各组受试者一般临床资料比较
临床资料
性别（n）
男
女
年龄（x±s, 岁）吸烟（n）
是
否
饮酒（n）
是
否
高脂血症（n）有
无
肿瘤家族史（n）有
无正常对照
组（n=20）
10
10
47.41±
15.24
8
12
6
14
2
18
20
增生性息肉
组（n=40）
20
20
56.64±8.65
8
32
4
36
14
26
1
39
结肠腺瘤
组（n=40）
21
19
55.38±
11.04
10
30
8
32
10
30
3
37
结肠癌组
（n=40）
23
17
59.82±
17.72
6
34
10
30
12
28
6
34
P值
0.909
0.206
0.170
0.224
0.214
0.087
40例结肠癌患者中，其中男性23例，女性17例，平均年龄为（59.82±17.72）岁，平均肿瘤直径（5.37±2.61） cm，病灶部位以乙状结肠为主，外观大致类型以混合型常见，主要是浸润溃疡型、隆起溃疡型等，淋巴结转移者多见，中⁃低分化腺癌比例明显高于高分化腺癌，Dukes分期中C+D分期患者的
比例亦明显高于A+B分期。

共收集结肠癌血清标本60例，其中男性36例，女性24
例，平均年龄为（56.36±10.21）岁，包括手术组40例，术后病
理和CT检查证实20例未转移、16例淋巴结转移以及4例远
处转移，初发患者初诊时即有转移的发生率为50.0%（20/ 40）；复发组20例，远处转移率为100%（20/20），最常见于肝脏，其次包括骨骼、腹腔、肺脏等。

二、结肠组织中L⁃选择素及其配体PODXL mRNA和蛋
白表达
L⁃选择素和PODXL在正常对照组、增生性息肉组、结肠腺瘤组和结肠癌组结肠组织中均可见mRNA表达（图1）。

与正常对照组相比，增生性息肉组L⁃选择素和PODXL mRNA表达略升高，但差异无统计学意义（P>0.05）。

结肠腺瘤组L⁃选择素和PODXL mRNA表达明显高于正常对照组、增生性息肉组，差异有统计学意义（P<0.05），而结肠癌组L⁃选择素和PODXL mRNA表达显著高于正常对照组、增生性息肉组和结肠腺瘤组，差异有统计学意义（P<0.05；图2）。

注：PODXL为足萼糖蛋白
图1　各组L⁃选择素和PODXL mRNA表达（qRT⁃PCR法）
L⁃选择素和PODXL蛋白阳性染色定位于细胞质，在正常对照组和增生性息肉组中均少量表达，组间相比差异无统计学意义（P>0.05）。

结肠腺瘤组L⁃选择素和PODXL蛋白表达明显高于正常对照组、增生性息肉组，差异有统计学意义（P<0.05）；结肠癌组L⁃选择素和PODXL蛋白表达明显高于正常对照组、增生性息肉组和结肠腺瘤组，差异有统计学意义（P<0.05；图3⁃5）。

三、结肠癌患者中L⁃选择素和PODXL蛋白表达与临床病理参数的相关性
不同性别、年龄、肿瘤部位、大致类型和肿瘤直径的结肠癌患者中L⁃选择素和PODXL蛋白表达相比差异无统计学意义（P>0.05）。

而不同病理类型、淋巴结转移、Dukes分期的结肠癌患者中L⁃选择素和PODXL蛋白表达相比差异均有统计学意义（P<0.05），其中低分化腺癌患者L⁃选择素和PODXL蛋白表达明显高于中、高分化腺癌（P<0.05），而中分化腺癌又明显高于高分化腺癌（P<0.05）；淋巴结转移患者表达明显高于无淋巴结转移者（P<0.05）；Dukes分期中C+D分期蛋白表达明显高于A+B分期患者（P<0.05；表2、图6）。

四、L⁃选择素与PODXL蛋白表达的相关性分析
结肠癌患者组织中L⁃选择素和PODXL蛋白表达分别为
注：PODXL为足萼糖蛋白；*与正常对照组比较，P<0.05；#与增生性息肉组比较，P<0.05；▲与结肠腺瘤组比较，P<0.05 图2　各组L⁃选择素和PODXL mRNA表达比较（qRT⁃PCR法）
A：正常对照组；B：增生性息肉组；C：结肠腺瘤组；D：结肠癌组
图3　各组L⁃选择素免疫组化染色结果（×100）
注：PODXL为足萼糖蛋白
A：正常对照组；B：增生性息肉组；C：结肠腺瘤组；D：结肠癌组
图4　各组PODXL免疫组化染色结果（×100）
注：PODXL为足萼糖蛋白；*与正常对照组比较，P<0.05；#与增生性息肉组比较，P<0.05；▲与结肠腺瘤组比较，P<0.05 图5　各组L⁃选择素和PODXL蛋白表达比较（免疫组化染色）
9.63±6.94、2.67±8.16，Spearman相关性分析结果显示两者表达具有显著的正相关性（r=0.855，P<0.001；图7），表明两者有可能协同促进结肠癌的侵袭与转移。

表2　结肠癌患者中L⁃选择素和PODXL蛋白表达与不同临床病理参数的相关性（x±s）
临床病理参数性别
男
女
年龄
>65岁≤65岁肿瘤部位
左半结肠右半结肠大致类型
隆起型
溃疡型
混合型
肿瘤直径>5 cm ≤5 cm
病理类型
高分化腺癌中分化腺癌低分化腺癌淋巴结转移有
无Dukes分期A+B
C+D 例数
23
17
16
24
30
10
14
6
20
18
22
6
14
20
30
10
10
30
L⁃选择素
9.01±1.31
8.65±0.29
11.65±2.21
10.28±1.45
10.32±2.48
9.47±1.61
10.32±1.19
8.27±0.71
9.72±1.32
10.77±1.61
9.85±0.30
2.86±0.18
7.78±1.48
19.27±2.93
22.34±2.11
7.25±0.21
5.28±1.51
20.78±3.34
P值
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
<0.05
<0.05
<0.05
PODXL
10.45±1.54
11.43±2.31
11.48±1.27
10.89±0.65
10.01±0.17
10.92±1.28
12.76±2.16
10.47±1.76
11.48±2.26
12.45±2.45
11.26±1.21
2.46±0.07
10.53±1.59
20.90±1.00
24.40±3.02
5.02±1.34
3.34±1.28
21.01±3.18
P值
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
<0.05
<0.05
<0.05
注：PODXL
为足萼糖蛋白
注：PODXL为足萼糖蛋白；1 Da=0.992 1 u
1~3：低分化腺癌；4~6：中分化腺癌；7~9：高分化腺癌
图6　不同病理类型结肠癌中L⁃选择素和PODXL
蛋白表达（蛋白质印迹法
）
注：PODXL为足萼糖蛋白
图7　结肠癌患者中L⁃选择素与PODXL蛋白表达的
相关性分析（Spearman相关性分析）
五、结肠癌患者中血清L⁃选择素和PODXL浓度
初发组血清L⁃选择素和PODXL浓度明显低于复发组，
未转移组明显低于转移组，差异均有统计学意义（P<0.05）。

术后3个月血清L⁃选择素和PODXL浓度最低，明显低于术
后3 d和术前，差异均有统计学意义（P<0.05），而术后3 d与
术前相比差异无统计学意义（P>0.05；图8）。

注：PODXL为足萼糖蛋白；*与初发组比较，P<0.05；#与未转移组比较，P<0.05；▲与术后3个月比较，P<0.05
图8　不同结肠癌组中血清L⁃选择素和PODXL浓度（ELISA法）
讨 论
目前结肠癌是全球第三大常见的恶性肿瘤，由于治疗效果差而呈现高死亡率，是与癌症相关死亡的第五大主要原因[7⁃8]。

由于发病的隐匿性和症状的不典型性，多数患者确诊时已出现转移，初诊时即有25%的患者发现转移[9]。

本研究中，初诊患者转移率高达50%，这往往是结肠癌患者预后差的原因所在。

此外，因结肠腺瘤占结肠癌癌前疾病的
85%~90%，甚至更高[10]，故对结肠癌的早期预防主要是落实到对结肠腺瘤的诊治。

然而，如何有效地发现早期癌症及其癌前病变，不但需要结肠镜的普及和影像学的发展，一个敏感的筛查指标进行辅助判别同样具有重要意义。

尽管目前已存在癌胚抗原（CEA）等相对成熟的结肠癌筛查指标，但有研究表明其假阳性率为7%~16%，假阴性率则高达40%[11]。

有研究表明选择素的阳性率更高，敏感性更佳[12]。

因此尝试探讨选择素及其配体作为结肠癌早期筛查指标仍有一定的临床应用潜力。

已知L⁃选择素是选择素家族的重要成员之一，其配体PODXL是维持肾脏足细胞功能的抗黏附分子，选择素主要通过其与配体的结合发挥生物学作用。

研究证实L⁃选择素表达上调与肿瘤细胞的发生、发展有关，可通过介导表达选择素的宿主细胞与肿瘤细胞上配体的结合，促进微血管转移和肿瘤细胞的阻滞[6]。

当缺乏L⁃选择素时，血栓和癌症转移的数量明显减少[13]。

同时有动物实验表明，当小鼠注射结肠癌疫苗（DCNLGPCEA）后，L⁃选择素表达明显下降[14]。

而PODXL在促进上皮⁃间质转化、肿瘤迁移和侵袭中同样发挥重要作用[15]，与多种恶性肿瘤的发生、发展紧密联系[16⁃18]。

PODXL高表达被证实与癌症患者的不良生存率相关[19]。

由于PODXL具有L⁃选择素亲和力，可作为其配体共同促进肿瘤的发生、发展。

本研究中，L⁃选择素和PODXL在结肠癌中的mRNA和蛋白表达明显升高，其具体机制目前有待进一步明确。

L⁃选择素可促进髓系细胞募集，诱导白细胞活化，与E⁃选择素共同促进肿瘤细胞高效外渗，发挥着肿瘤细胞黏附和渗出介质的作用，并激活了调节肿瘤微环境中免疫反应的信号级联反应[20]。

Xu等[21]发现PODXL过表达消除了miR⁃138模拟物引起的抑制作用，PODXL可能是miR⁃138的直接靶标，miRNA 早已被证实与肿瘤的发生、发展和转移有关，认为以miR⁃138为靶标的PODXL促进了结肠癌的发生和发展。

另一种设想是，Hippo传感器作为PDZ结合基序（TAZ）的转录辅激活子，在结肠癌中可作为PODXL的下游介质。

PODXL的抑制导致TAZ信号的抑制和Hippo下游基因的下调[22]。

本研究还发现，结肠腺瘤患者中L⁃选择素和PODXL表达明显低于结肠癌组，但明显高于正常对照组和增生性息肉组，提示L⁃选择素和PODXL在具有恶化倾向的组织中存在敏感表达。

故未来可尝试利用其表达水平作为筛选高危患者的依据，从而发现并早期切除腺瘤。

此外，当L⁃选择素和PODXL达到平均水平而结肠镜结果阴性时需警惕遗漏隐匿性病灶的可能，必要时缩短复查周期，为临床评估病情提供参考价值。

增生性息肉组中L⁃选择素和PODXL mRNA和蛋白表达与正常对照组无明显差异，但显著低于结肠癌组和结肠腺瘤组。

这与其各自黏膜恶化风险程度基本相对应，上述实验结果提示两者可能参与了结肠癌的发生，具有促癌作用，可尝试作为鉴别结肠良恶性疾病的理论依据和结肠癌早期诊断的生物学标志物。

本研究发现低分化腺癌L⁃选择素和PODXL蛋白表达明显高于中、高分化腺癌，而Dukes分期A+B期L⁃选择素和PODXL蛋白表达明显低于C+D期，提示L⁃选择素和PODXL 的高表达与肿瘤分化程度呈负相关，且结肠癌的浸润和转移往往能进一步刺激L⁃选择素和PODXL表达。

同时，两者在结肠癌中的表达具有显著正相关关系，佐证了L⁃选择素与PODXL协同促进结肠癌的侵袭和转移。

复发组、转移组血清L⁃选择素和PODXL浓度明显高于初发组和未转移组，证实L⁃选择素和PODXL可能参与了结肠癌的侵袭和转移。

其机制可能是选择素通过募集髓样细胞，介导肿瘤细胞与宿主细胞的连接，肿瘤细胞可与血小板和白细胞形成多细胞复合物，然后这些复合物可滞留在远处器官的微血管中，最终渗出并建立转移集落，这往往是癌症转移过程中的关键步骤[6]。

而PODXL作为L⁃选择素配体增强了其黏附、迁移和细胞间的相互作用，协同促进结肠癌的侵袭和转移。

结肠癌患者术后3 d血清L⁃选择素和PODXL浓度与术前无明显差异，术后3个月明显低于术后3 d和术前，提示结肠癌的实体瘤是影响L⁃选择素和PODXL水平的关键所在。

至于术后3 d 的浓度未明显低于术前，可能原因在于患者仍处于手术应激期，炎症反应未完全消退，而手术创伤刺激大量炎性因子分泌，诱发炎症反应。

很多学者已证实选择素及其配体主要通过炎症途径的共同作用来支持肿瘤的进展，这可能是导致机体血清L⁃选择素和PODXL浓度短期内仍维持在较高水平的原因所在，这一观点与张梁等[23]一致。

故未来可利用血清L⁃选择素和PODXL浓度在健康筛查中发现早期癌症，及早采取干预措施，逆转病情进展，改善预后。

当然，对于初发未转移患者，后期随访中可根据血清浓度大致判断是否复发与转移，从而评估病情进展并指导治疗方案。

总之，L⁃选择素和PODXL可能参与了结肠癌的生成、浸润、转移等过程，属于促癌蛋白，两者表达具有相关性，协同促进肿瘤的发生、发展，临床上可利用黏膜表达水平推测肠道可能存在的癌前病变和早期癌状态，从而早期发现病灶并切除，且可一定程度上减少漏诊。

此外，对于初发和未转移患者，利用血清浓度可动态监测病情变化，若浓度接近复发和转移水平，可给予早期干预，调整治疗方案。

当然，本研究同样有其局限性。

首先本研究为单中心研究，随访时间短且病例数少。

其次，影响L⁃选择素和PODXL 表达的因素较多，尽管对纳入研究的病例进行了筛选，但不可避免存在一些隐匿的影响因素，可能对研究结果存在干扰。

未来将增加研究例数，对纳入病例的筛选更严谨和精细
化，尽可能减少结果误差，并尝试加入CEA等成熟常用的筛查指标进行比较，进一步研究L⁃选择素和PODXL的敏感性、特异性，探讨应用于临床的可行性。

参考文献
[ 1 ]KOLLIGS F T. Diagnostics and epidemiology of colorectal cancer[J]. Visc Med, 2016, 32 (3): 158⁃164.
[ 2 ]ACETO G M, CATALANO T, CURIA M C. Molecular aspects of colorectal adenomas: the interplay among
microenvironment, oxidative stress, and predisposition[J].
Biomed Res Int, 2020, 2020: 1726309.
[ 3 ]KUMARI S, ARORA M, SINGH J, et al. L⁃Selectin expression is associated with inflammatory microenvironment
and favourable prognosis in breast cancer[J]. 3 Biotech,
2021, 11 (2): 38.
[ 4 ]GOLDSON T M, TURNER K L, HUANG Y, et al.
Nucleolin mediates the binding of cancer cells to L⁃
selectin under conditions of lymphodynamic shear stress
[J]. Am J Physiol Cell Physiol, 2020, 318 (1): C83⁃C93. [ 5 ]赵焕芬, 何春年, 李萍, 等. 肺腺癌组织CC趋化因子受体7和L⁃选择素表达及其临床意义的探讨[J]. 中华肿
瘤防治杂志, 2009, 16 (5): 351⁃354.
[ 6 ]THOMAS S N, SCHNAAR R L, KONSTANTOPOULOS K. Podocalyxin⁃like protein is an E⁃/L⁃selectin ligand on
colon carcinoma cells: comparative biochemical properties of
selectin ligands in host and tumor cells[J]. Am J Physiol
Cell Physiol, 2009, 296 (3): C505⁃C513.
[ 7 ]SANTIAGO L, CASTRO M, PARDO J, et al. Mouse model of colitis⁃associated colorectal cancer (CAC): isolation and
characterization of mucosal⁃associated lymphoid cells[J].
Methods Mol Biol, 2019, 1884: 189⁃202.
[ 8 ]FARINHA P, PINHO J O, MATIAS M, et al. Nanomedi⁃cines in the treatment of colon cancer: a focus on metal⁃
lodrugs[J]. Drug Deliv Transl Res, 2022, 12 (1): 49⁃66. [ 9 ]KIRSTEIN M M, LANGE A, PRENZLER A, et al.
Targeted therapies in metastatic colorectal cancer: a
systematic review and assessment of currently available
data[J]. Oncologist, 2014, 19 (11): 1156⁃1168. [10]中华医学会消化病学分会, 中华医学会消化病学分会
肿瘤协作组. 中国结直肠癌预防共识意见(2016年, 上
海)[J]. 胃肠病学, 2016, 21 (11): 668⁃686. [11]BJÖRKMAN K, JALKANEN S, SALMI M, et al. A
prognostic model for colorectal cancer based on CEA and
a 48⁃multiplex serum biomarker panel[J]. Sci Rep, 2021,
11 (1): 4287.
[12]齐洪峰, 李世拥, 安萍, 等. 结直肠癌患者血清可溶性E
选择素的检测及其临床意义[J].解放军医学杂志,
2006, 31 (9): 858⁃859.[13]KÖHLER S, ULLRICH S, RICHTER U, et al. E⁃/P⁃
selectins and colon carcinoma metastasis: first in vivo evidence for their crucial role in a clinically relevant model of spontaneous metastasis formation in the lung[J].
Br J Cancer, 2010, 102 (3): 602⁃609.
[14]SARKAR K, GOSWAMI S, ROY S, et al. Neem leaf
glycoprotein enhances carcinoembryonic antigen presen⁃
tation of dendritic cells to T and B cells for induction of anti⁃tumor immunity by allowing generation of immune effector/memory response[J]. Int Immunopharmacol, 2010,
10 (8): 865⁃874.
[15]LIN Y Y, WANG C Y, PHAN N N, et al. PODXL2
maintains cellular stemness and promotes breast cancer development through the Rac1/Akt pathway[J]. Int J Med Sci, 2020, 17 (11): 1639⁃1651.
[16]CIPOLLONE J A, GRAVES M L, KÖBEL M, et al. The
anti⁃adhesive mucin podocalyxin may help initiate the transperitoneal metastasis of high grade serous ovarian carcinoma[J]. Clin Exp Metastasis, 2012, 29 (3): 239⁃252.
[17]TANIUCHI K, FURIHATA M, NAGANUMA S, et al.
Podocalyxin⁃like protein, linked to poor prognosis of pancreatic cancers, promotes cell invasion by binding to gelsolin[J]. Cancer Sci, 2016, 107 (10): 1430⁃1442. [18]LIN C W, SUN M S, WU H C. Podocalyxin⁃like 1 is
associated with tumor aggressiveness and metastatic gene expression in human oral squamous cell carcinoma[J]. Int J Oncol, 2014, 45 (2): 710⁃718.
[19]KANEKO M K, OHISHI T, KAWADA M, et al. A cancer⁃
specific anti⁃podocalyxin monoclonal antibody (60⁃mG2a⁃
f) exerts antitumor effects in mouse xenograft models of
pancreatic carcinoma[J]. Biochem Biophys Rep, 2020, 24: 100826.
[20]HÄUSELMANN I, ROBLEK M, PROTSYUK D, et al.
Monocyte induction of E⁃selectin⁃mediated endothelial activation releases VE⁃cadherin junctions to promote tumor cell extravasation in the metastasis cascade[J].
Cancer Res, 2016, 76 (18): 5302⁃5312.
[21]XU Y, PAN Z G, SHU L, et al. Podocalyxin⁃like, targeted
by miR⁃138, promotes colorectal cancer cell proliferation, migration, invasion and EMT[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci, 2018, 22 (24): 8664⁃8674.
[22]LEE W Y, KUO C C, LIN B X, et al. Podocalyxin⁃like
protein 1 regulates TAZ signaling and stemness properties in colon cancer[J]. Int J Mol Sci, 2017, 18 (10): 2047. [23]张梁, 罗桂飞, 元辉雄, 等. 结直肠癌患者血清中可溶性
P⁃选择素和L⁃选择素水平及临床意义[J]. 中国癌症杂
志, 2014, 24 (8): 599⁃603.
（2023⁃05⁃12收稿；2023⁃06⁃20修回）
（本文编辑：袁春英）。