干扰素α-2b 治疗 JAK2V617F 阳性的真性红细胞增多症和原发性血小板增多症的疗效分析

干扰素α-2b 治疗 JAK2V617F 阳性的真性红细胞增多症和
原发性血小板增多症的疗效分析
靳凯宇
【摘要】目的：观察干扰素（IFN）α-2b 治疗 JAK2V617F 阳性的真性红细胞增多症（PV）和原发性血小板增多症（eT）疗的疗效。

方法采用干扰素α-2b 治疗JAK2V617F 阳性的 PV 和 eT 患者47例，以同期羟基脲治疗组44例作为对照，比较两种治疗方法的血液学缓和分子学缓解率。

结果 PV 患者应用IFNα-2b 治疗组血液学总缓解率（CHR + PHR）85.2%，应用羟基脲治疗组血液学总缓解率56.0%，P <0.05。

eT 患者应用IFNα-2b 总血液学缓解率75.0%，羟基脲治疗组总血液学缓解率42.1%，P <0.05；PV 患者IFNα-2b 治疗组总分子学缓解率（CMR +PMR）77.7%，羟基脲治疗组4.0%，P <0.001。

eT 患者IFNα-2b 治疗组总分子学缓解率60.0%，羟基脲治疗组0%，P <0.001；PV 和 eT 患者采用IFNα-2b 治疗后血栓和出血发生率均低于羟基脲治疗组，但 P 均>0.05。

结论与羟基脲相比，干扰素α-2b 可以提高PV 和eT 患者血液学缓解率，并且降低患者JAK2V617F 负荷，使患者达到分子学缓解。

与羟基脲相比，α-2b 不能显著减少患者的血栓和出血发生率。

%Objective:To evaluate the efficacy and safety of interferon α - 2b(IFNα - 2b)on polycythemia vera(PV) and essential thrombocythemia( eT) patients with JAK2V617F mutation. Methods:47 patients of PV and eT with JAK2V617F mutation were treated with IFNα - 2b,and 44 patients were treated with hydroxyurea as a control . The hemato-logic remission rate and molecular remission rate were compared between two groups. Results:The overall hematologic remis-sion
rate(complete and partial remission )of PV patient with IFNα - 2b was 85.
2% ,and patients treated with hydroxyurea was 56. 0% ,P < 0. 05;The overall hematologic remission rate of eT patient with IFNα - 2b was 75. 0% ,and patients trea-ted with hydroxyurea was 42. 1% ,P < 0. 05. The overall molecular remission rate(complete and partial remission )of PV patient with IFNα - 2b was 77. 7% ,and patients treated with hydroxyurea was 4. 0% ,P < 0. 001;The overall molecular re-mission rate of eT patient with IFNα - 2b was 60. 0% ,and patients treated with hydroxyurea was
0% ,P < 0. 001;The oc-curance rate of thrombus and bleeding of both MPN patients treated with IFNα - 2b was lower than hydoxyurea treatment but with no statistical significance(P > 0. 05). Conclusion:Compared with hydroxyurea,PV and eT patients treated with IFNα- 2b have higher hematologic and molecular remisson rates but similar rates of . thrombus and bleeding.
【期刊名称】《泰山医学院学报》
【年(卷),期】2014(000)008
【总页数】4页(P726-729)
【关键词】真性红细胞增多症;原发性血小板增多症;JAK2V617F 突变;干扰素α - 2b
【作者】靳凯宇
【作者单位】菏泽医学专科学校，山东菏泽 274000
【正文语种】中文
【中图分类】R551
PV和ET属于常见的骨髓增生性肿瘤(MPN)，血象特点为不明原因的血细胞持续
升高，临床容易发生血栓栓塞和出血并发症，部分患者可转化为骨髓纤维化或白血病。

通过分子生物学研究发现约90%的PV和约50%的ET患者骨髓细胞存在激
酶JAK2V617F点突变，该突变的检测是诊断PV和ET的重要指标之一。

近年来
国外有学者将检测该突变的拷贝数用来评价疗效和微小残留病灶(MRD)[1-3]，国
内报道还很少[4]。

目前，IFN在MPN的治疗中处于重要地位[5]，近年来我科采
用IFNα作为一线治疗，并通过随访，发现IFNα不但具有较高的血液学缓解率，而且能使部分JAK2V617F阳性的患者达到分子学缓解，收到良好的治疗效果。

1 材料与方法
1.1 患者资料
所有患者均为我院自2009年6月至2013年6月在我院门诊就诊及住院的患者，PV和ET诊断符合WHO2001标准。

JAK2V617F阳性患者接受IFNα治疗6月
以上的47例(男26例，女21例)，就诊中位年龄55岁(41～78岁)，其中PV27例， ET20例。

拒绝使用干扰素者采用羟基脲治疗共44例，其中PV25例(男11例，女14例，中位年龄53岁)，ET19例(男10例，女19例，中位年龄51岁)。

1.2 治疗方案及疗效评价
1.2.1 预治疗:白细胞>50×109/L或血小板>1000×109/L的患者给予小剂量羟基
脲0.5～1 g/d，并给予阿司匹林100 mg/d口服治疗,血小板>1500×109/L的ET 患者则禁止应用阿司匹林；血红蛋白>200 g/L的PV患者给予放血疗法，每次200～400 ml，每周2次。

当患者外周血白细胞<50×109/L、血红蛋白<180 g/L、血小板<800×109/L以下时，再进行IFNα或羟基脲治疗。

1.2.2 治疗方案干扰素组：IFNα-2b(哈药集团生物工程有限公司) 300万IU，皮
下注射，每周3次，当达到完全血液学缓解后可减量至每周1～2次维持。

羟基脲组：给予羟基脲0.5～1.5g/d，当血细胞接近正常时减量至0.25～0.5/d维持治疗。

1.2.3 疗效评价疗效评价参考WHO2001年标准。

完全血液学缓解(CHR) 定义为: 脾大消失; 血细胞计数正常，白细胞<10.0×109 /L，及血小板<400×109 /L，红细胞压积小于45%( 男),42%(女) (持续3 个月以上)。

部分血液学缓解(PHR) 定义为: 血细胞计数下降较初诊时下降50%，可伴有脾大。

治疗无效判断标准：达不到部分缓解者。

完全分子学缓解(CMR)定义为JAK2V617F 基因突变转为阴性。

部分分子学缓解(PMR) 定义为JAK2V617F 突变负荷较前减少50%。

微小分子学反应(MMR) 定义为JAK2V617F 突变负荷减少20%～49%。

1.3 JAK2V617F基因突变检测
治疗前和开始治疗后每6月无菌抽取患者骨髓5 ml，提取基因组DNA,参考文献[4]方法，采用巢式基因突变定量PCR检测患者JAK2V617F基因突变。

按下列公
式检测其Ct值。

JAK2V617F 负荷( %V617F) = DNA(JAK2V617F) /DNA( JAK2WT +
JAK2V617F)
△ Ct = CtJAK2V617F-CtJAK2WT
应用JAK2V617F 负荷( % V617F) 做横坐标，△Ct值做纵坐标，做出标准曲线。

所有样本重复检测3 遍，根据不同样本3 次△Ct 的平均值，在标准曲线上计算出
其相对应的JAK2V617F 负荷。

1.4 统计学处理
计量数据用均数±标准差表示，两样本率的比较采用卡方检验，两样本均数的比较采用t检验，采用SPSS 17.0 软件进行数据分析。

P<0.05为有统计学意义。

2 结果
2.1 两组MPN患者血液学缓解率的比较
如表1，PV患者应用IFNα-2b治疗组血液学总缓解率(CHR+PHR)85.19%，达CHR时间3.5±1.2月，应用羟基脲治疗组血液学总缓解率56.0%，达CHR时间6.0±1.5月。

IFNα-2b总缓解率高于羟基脲治疗组(P=0.02<0.05)，达缓解时间短于羟基脲组(P<0.001)。

ET患者应用IFNα-2b总血液学缓解率75.0%，达CHR 时间3.6±1.6月，应用羟基脲治疗组总血液学缓解率42.1%，达CHR时间
6.4±2.3月。

IFNα-2b总缓解率高于羟基脲治疗组(P=0.037<0.05)，达缓解时间短于羟基脲组(P<0.001)。

表1 两组MPN患者血液学缓解率的比较PVCHR%PHR%ETCHR%PHR%IFNα-2b59.2(16/27)25.9(7/27)40.0(8/20)35.0(7/20)HU
24.0(6/25)32.0(8/25)26.3(5/19)15.8(3/19)
2.2 两组MPN患者分子学缓解率的比较
如表2，PV患者IFNα-2b治疗组总分子学缓解率(CMR+PMR)77.7%，羟基脲治疗组4.0%,P<0.001。

ET患者IFNα-2b治疗组总分子学缓解率60%，羟基脲治疗组0%,P<0.001。

PV和ET患者IFNα-2b治疗后达CMR时间分别为20±6月和18±4.9月。

2例PV患者达到CMR停用IFNα-2b，分别在6月和12月后出现分子学复发，继续应用6月后又达到CMR。

表2 两组MPN患者分子学缓解率的比较
PVCMR%PMR%MMR%ETCMR%PMR%MMR%IFNα-
2b33.3(9/27)44.4(12/27)22.2(6/27)20.0(4/20)20.0(5/20)24(6/20)HU0(0/25)4( 1/25)4(1/25)0(0/19)0(0/19)5.2(1/19)
2.3 两组MPN患者并发症的比较
如表3，两组MPN患者IFNα-2b治疗血栓和出血发生率均低于羟基脲治疗组，但P均>0.05。

表3 两组MPN患者并发症的比较PV血栓%出血%ET血栓%出血%IFNα-
2b7.4(2/27)7.4(2/27)5.0(1/20)10(2/20)HU16.0(4/25)8.0(2/25)15.8(3/19)10.5( 2/19)
2.4 干扰素的不良反应
患者在首次应用IFNα-2b后，均出现发热、头痛、肌肉关节酸痛等类流感样症状，体温在37．8℃～39．9℃，给予非甾体类抗炎药后大部分患者好转。

应用3～6
次后，发热症状消失。

3例患者出现纳差，腹胀，2例患者出现嗜睡，抑郁，1例
患者出现脱发。

3 讨论
在2008年世界卫生组织(WHO)造血和淋巴组织肿瘤分类中，PV和ET均归为造
血干细胞恶性克隆性疾病，病理学特点是骨髓增生异常活跃，外周血细胞持续升高并伴有不成熟性，因此抑制骨髓细胞恶性增生是治疗的重点。

JAK2V617F基因突变的发现使得该类疾病的靶向治疗成为可能，目前国外JAK激酶抑制剂正在进行
临床实验，但进入临床应用还需要时间，且疗效和副作用还需要观察，目前IFNs
的应用仍处于一线地位。

IFNs具有以下生物学作用：1抑制骨髓细胞增殖。

IFN-α能下调cyclin E, cyclin A, cdc25A, cyclin D-cdk4, 和 cyclin-cdk6的表达及活化，并抑制Rb蛋白的磷酸化，从而抑制细胞由G1期进入S期，延缓细胞的增生和分裂[6]。

IFN-α能抑制造血生长因子如粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨核细胞集落刺激因子(Mk-CSF)、促血小板生成素(TPO)的合成和分泌，并且能促进抑制造血
的细胞因子如转化生长因子(TGF)、肿瘤坏死因子(TNF)的分泌，从而起到抑制巨
核细胞、红细胞以及粒细胞的增生和分化[7，8]。

2促进细胞凋亡。

IFNs能引起
细胞膜和细胞浆的结构改变，DNA片段化和凋亡小体的形成；IFNs能上调TRAIL、FasL，与相应受体结合后活化Fas相关的死亡结构域，并活化下游的蛋白酶如Caspase-4，Caspase-8等诱发凋亡[9]。

3免疫调节作用。

IFNs能促进宿主体内不成熟细胞如T淋巴细胞、NK细胞和单核细胞的分化。

单核细胞分化为抗原呈递
细胞活化T和B细胞，而T细胞和NK细胞可起到杀伤肿瘤细胞的用[10]。

4抑制骨髓纤维化。

虽然存在争议，但有研究证明， TGF-β能够刺激多种器官和组织中
成纤维细胞增生，调节血小板源性生长因子(PDGF)的分泌，是促进胶原纤维的合
成和沉积的重要调节因子。

IFN-γ能通过STAT途径调节TGF-β的分泌，抑制胶
原在骨髓中的沉积[11]。

5诱导细胞遗传学缓解。

在MPN患者中，往往存在克隆性的染色体异常，IFNs作为一种非致白血病的生物治疗方式，可以诱导患者达到
细胞遗传学缓解[12]。

我们研究数据发现，与传统的药物羟基脲相比，IFN-α治疗具有血液学缓解率高，血栓发生率低的特点，并且能诱导患者达到分子学缓解，并且不具有致白血病作用。

IFN-α的这些特性使得它成为治疗MPN的一种适宜的生物制剂。

但IFN-α具有
发热、寒颤、肌肉酸痛、乏力、食欲减退等副作用，并且会对神经系统、内分泌、生殖系统有不良影响。

另外IFN-α需要长期注射使得部分患者不能坚持。

从我们
研究看出，中断IFN-α治疗可以使JAK2V617F拷贝数升高，继续应用拷贝数可
再下降。

因此，IFN-α治疗需要长期维持，具体维持时间和剂量尚无统一标准。

聚乙二醇干扰素(peg-IFN)最初用来治疗乙型肝炎，与传统IFN相比，具有半衰期长和副作用低的特点，每周只需注射1次，耐受性好。

近来有报道peg-IFN治疗MPN亦取得了不错的疗效[13]。

目前peg-IFN和羟基脲治疗PV和ET的随机对
照试验正在进行中，有望成为治疗Ph染色体阴性的MPN的更好选择。

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