实验九蔗糖的转化

实验九蔗糖的转化
一、实验目的
1. 掌握蔗糖的转化反应原理及方法。

2. 了解酵母细胞的发酵过程。

二、实验原理
蔗糖是一种二糖，在发酵过程中可以被酵母菌分解为两个单糖——葡萄糖和果糖。

这
个过程是通过酵母细胞内的酶途径进行的。

首先，酵母细胞外部的酶——蔗糖酶，将蔗糖
水解为葡萄糖和果糖。

然后，葡萄糖和果糖进入酵母细胞，接受不同途径的代谢，进而通
过乳酸酸精、酒精发酵等途径转化为乳酸、酒精等产物。

本实验是通过蔗糖的转化反应，
观察其转化过程。

三、实验步骤
1. 将6个干净无菌培养瓶（50ml）放入常压蒸馏水锅中加热10min，取出并晾干。

2. 用大约1ml的无菌蔗糖水解液均匀涂抹在培养瓶内的玻璃明片上，倾斜瓶子30度，约10min后透镜检查观察玻璃明片表面上是否有球形菌落，如果有殖物不均匀，再涂抹无
菌的蔗糖水解液，待殖物浓度足够，用无菌棉签在液面涂心形，并使之在玻璃明片上连成
一线。

3. 取出蔗糖酵母菌液（5ml），用透过菌膜纸过滤的方法在培养瓶中注入5ml。

其余瓶中加入蔗糖酵母菌液或蔗糖水解液，用无菌棉签在液面涂成心形，使得殖物在玻璃明片上
连成一线。

4. 把培养瓶标上标签，分别记录添加菌量、添加液量和发酵温度（24℃、28℃和32℃）。

5. 将培养瓶放置到发酵箱中温度为24℃、28℃和32℃的三个恒温培养箱中，关闭箱门。

6. 观察转化反应产物的变化情况，在适当时间取出发酵液，用无菌的玻璃纤维滴头
过滤，观察滤液是否浑浊。

如果产物表现完全转化，则停止发酵反应。

7. 根据实验数据计算计算变化情况，消耗蔗糖转化产生的CO2数量可以用气相色谱法进行分析，用光谱分析、色谱分析、红外光谱分析等方法可以分析转化产物的组成，从而
得出蔗糖的转化过程。

四、实验注意事项
1. 实验前应将所有玻璃器皿用去离子水和2%双氧水混合溶液清洗3-4次，并用水洗涤干净，晾干或烘干。

2. 操作时必须戴口罩、手套、实验服等。

3. 严格按照实验步骤进行，不要随意更改。

4. 酵母培养液应使用新鲜培养的酵母液。

5. 培养液液体的体积应当保持相同，且要保持无菌状态。

6. 发酵过程中，应注意酵母的生长情况和液体的温度。

7. 实验后，将器皿严格加热消毒，丢弃实验废液和废棉签。

五、实验结果及分析
1. 观察发酵液的颜色是否变化，产生气泡的数量和形状是否一致。

3. 记录实验数据，通过对数据的分析，获得结果，总结实验结果，合理解释结果的产生原因。

六、实验结果解释及意义
蔗糖是一种重要的食品添加剂，在发酵过程中可以被酵母菌转化为二糖，进而通过不同途径的代谢产生不同的产物。

本实验通过酵母菌转化过程，观察其产生的反应产物的变化，从而通过对产物的分析，得到蔗糖的转化过程，有助于理解生物大分子分解的过程和分析方法，拓展有机化学和生物化学的研究范围。