生物学中常用的试剂
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3、生物学中常用的试剂:
⑴①斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混
合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。
②班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。
⑵双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇
匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。
⑶苏丹Ⅲ:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀配制而成。
用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。
⑷①二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。
②甲基绿:用于染色DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成绿色。
⑸①50%的酒精溶液:在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色。
②75%的酒精溶液:用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性。
③95%的酒精溶液:⑴冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝提纯DNA;⑵固定细胞形态,与卡诺氏试剂类同,
用于“观察根尖细胞有丝分裂”“低温又到染色体加倍”。
⑹15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。
⑺龙胆紫溶液、醋酸洋红染液、改良的苯酚品红溶液:用于染色体着色,通常染色3~5min。
⑻碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。不能用于“验证酶的专一性”。
⑼①丙酮、无水乙醇:用于提取叶绿体中的色素。
②层析液:利用不同色素在层析液中溶解度不同,用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。
③二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。
④碳酸钙:可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。
⑽0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,可用于质壁分离实验。
⑾0.1g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血。
⑿氯化钠溶液:①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、0.015mol/L时DNA的溶解度最高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最小。
②浓度为0.9%时可作为生理盐水。
⒀①胰蛋白酶:可用于动物细胞培养时使组织细胞分散。
②纤维素酶和果胶酶:可用于原生质体的获取,水解细胞壁。
③限制酶/DNA连接酶:用于基因工程中目的基因的获取、基因表达载体的构建。均作用于磷酸二酯键。
④解旋酶:水解氢键,用于DNA分子的复制和转录。
⑤DNA聚合酶、RNA聚合酶:分别用于DNA的复制和转录。
⑥Taq酶:热稳定性DNA聚合酶,用于PCR。
⒁秋水仙素:人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制正在分裂的细胞纺锤体的形成。低温也可以达到效果。
⒂氯化钙:增加细菌细胞壁的通透性(用于基因工程过程中的转化,使细胞处于感受态)。
⒃溴麝香草酚蓝溶液:根据溶液由蓝→绿→黄的时间检测CO2的多少。
⒄重铬酸钾溶液:鉴定酒精。溶液由橙色→灰绿色。
⒅健那绿:活性染色剂,专一的将线粒体染成蓝绿色。