微生物棉签擦拭取样方法验证记录1

清洁验证微生物检查记录

清洁验证微生物限度检查记录
编号：SMP-09-00702-g
清洁对象名称
供样单位
取样点
检验日期
年月日
编号
报告日期
年月日
温度
℃
相对湿度
％
检验依据
《中国药典》2015年版四部《非无菌产品微生物限度检查》
标准规定
需氧菌≤100cfu/100cm²；霉菌酵母菌≤100cfu/100cm²
供试液的制备：用棉签擦拭取样点100cm²，将棉签放入无菌具塞玻璃试管中，加入10ml生理盐水中，振摇混匀，作为1:10的供试液。按《非无菌产品微生物限度检查》进行检验。
检查结果
需氧菌
培养箱型号：
培养箱编号：RHBC-ZK-
设定温度：
霉菌、酵母菌
培养箱型号：
培养箱编号：RHBC-ZK-
设定温度：
1
2
阴性
对照
1
2
阴性
Hale Waihona Puke 对照1天1天2天
2天
3天
3天
4天
4天
5天
5天
6天
7天
平均
平均
结果
结果
结论
检验人
复核人

表面微生物检验记录车间)

取样时打开碟盖无菌培养基表面与取样面直接接触均匀按压接触碟底板确保全部琼脂表面与取样点表面均匀充分接触再盖上碟盖先于241培养3天再转至331培养2天
文件号：FQ-255
表面微生物检验记录
受检部门
受检人员
测试方法
接触平皿法
检验日期
年月日
完成日期
年月日
测试步骤：
取一次性无菌接触碟，碟子直径为50～55mm，取样面积一般为25cm2。取样时，打开
荡，再用薄膜过滤法计数，置33℃±1℃培养箱中培养。
菌落总数测定(30～35℃)：
菌落数
取样部位
培养时间
报告数
阴性对照
备注
1d
2d
3d
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
菌落数
取样部位
培养时间
（24℃±1）
培养时间
（33℃±1）
报告数
阴性
对照
备注
1d
2d
3d
1d
2d
额头
cfu/碟
口罩
cfu/碟
左肩
cfห้องสมุดไป่ตู้/碟
右肩
cfu/碟
左肘
cfu/碟
右肘
cfu/碟
左腕
cfu/碟
右腕
cfu/碟
左手指
cfu/碟
右手指
cfu/碟
左手掌
cfu/碟
右手掌
cfu/碟
左膝
cfu/碟

微生物表面取样方法

微生物表面取样方法引言：微生物是一类极其微小的生物体，存在于各种环境中，包括土壤、水体、空气中以及生物体的表面等。

研究微生物对于了解生物界的多样性、生态系统的功能以及人类健康等具有重要意义。

然而，微生物的研究面临着一个重要的问题，即如何有效地采集微生物样品。

本文将介绍几种常用的微生物表面取样方法。

一、刷拭法刷拭法是最常用的微生物表面取样方法之一。

该方法适用于采集微生物富集在固体表面的样品，如建筑物、设备表面等。

操作步骤如下：1. 选择一把消毒过的刷子，并将其浸入含有适当缓冲液的容器中。

缓冲液的选择应根据研究的目的而定，常见的有PBS缓冲液、生理盐水等。

2. 将刷子沿着被采样表面来回刷拭，以保证样品的均匀采集。

3. 将刷子放入含有缓冲液的试管中，并进行震荡或振荡，以使微生物从刷子上脱落到缓冲液中。

4. 取出试管，将液体倒入试管中，并进行后续分析。

二、擦拭法擦拭法是一种适用于平滑表面的微生物采样方法。

常见的应用场景包括医院、实验室等地的台面、玻璃器皿等。

操作步骤如下：1. 选择一块消毒过的无纺布或棉签，并将其浸入含有缓冲液的容器中。

2. 将布或棉签沿着被采样表面来回擦拭，以保证样品的均匀采集。

3. 将布或棉签放入含有缓冲液的试管中，并进行震荡或振荡，使微生物从布或棉签上脱落到缓冲液中。

4. 取出试管，将液体倒入试管中，并进行后续分析。

三、粘贴法粘贴法适用于采集微生物富集在不规则表面或微小孔隙中的样品，如土壤、植物叶片等。

操作步骤如下：1. 准备一块消毒过的胶片或胶带，并将其贴在采样区域上。

2. 将胶片或胶带撕下，并放入含有缓冲液的试管中。

3. 进行震荡或振荡，使微生物从胶片或胶带上脱落到缓冲液中。

4. 取出试管，将液体倒入试管中，并进行后续分析。

四、切割法切割法适用于采集微生物富集在固体样品表面的样品，如食品、植物组织等。

操作步骤如下：1. 准备一把消毒过的刀具，并将其切割在需要采样的区域。

2. 将切割下来的样品放入含有缓冲液的试管中。

清洁验证取样方法及检验方法验证方案

清洁验证取样方法及检验方法验证方案文件编码：EL-YZ54010-01文件审定部门签名日期起草人审核人审核人审核人审核人审核人批准人四川诺迪康威光制药有限公司目录1.概述 (3)2.目的 (3)3.适用范围 (3)4.职责 (4)5.验证条件 (4)6.验证时间计划 (4)7.验证要求及标准 (2)8.验证实施 (7)9. 验证结果评定与结论 (7)10. 拟定再验证周期 (7)11. 附件 (7)1.概述：生产过程中所用的生产设备均可能有残留物遗留，为了最大程度的避免由于上一批次生产产品的残留影响下一批次或其他品种，故必须对生产所用的设备进行清洁。

清洁后要对该清洗方法进行取样检测残留量。

一般通常的取样方法为棉签擦拭法和淋洗法。

由于我公司产品均为中成药，成分复杂，无法对每一成分进行测定，所以检测方2.目的：考察清洗验证涉及取样过程和所用检测方法的过程，是对人员取样操作、残留物转移、测试过程的考察，考察项目最低定量限、线性、综合回收率等。

3.适用范围：清洁验证取样方法及检验方法。

姓名部门小组职务职责方延刚质量管理部组长负责验证的组织协调工作，以保证本方案规定的验证项目顺利实施；负责验证数据及结果的审核；负责验证报告的起草；负责验证周期的确认乐元保工程部组员负责组织试验所需器具的校验。

张慧质量管理部组员负责验证现场监管并协调验证工作；负责偏差、变更的审核，杨燕质量管理部组员负责起草验证方案；负责验证方案的实施；负责协助调查和处理验证过程中的偏差；参与检验方法验证方案的实施；制备阴性样品。

李新质量管理部组员负责验证方案的实施。

负责协助调查和处理验证过程中的偏差。

陶瑶质量管理部组员负责验证方案的实施。

负责协助调查和处理验证过程中的偏差。

5.条件5.1.检验操作规程齐全（记录见附件1）5.2.设备相关标准操作规程齐全、用具齐全（记录见附件2）5.3.检验、检测仪器均已校验（记录见附件3）5.4.风险识别项目风险源风险发生的失败模式风险可能导致的后果1 文件与人员培训无操作指导文件，操作人员未经培训仪器操作失当，出现操作事故2 环境环境温湿度不符合要求影响仪器正常运行3 仪器状态仪器运行不正常；功能障碍、电源不符合要求损坏仪器4 试剂、试液、样品、工具不符合要求导致验证失败或结果不准确。

配液系统及灌装系统清洁验证1

配液系统及灌装系统清洁验证方案起草人/日期审核人/日期批准人/日期1.概述血液透析浓缩液是由多种化学原料药组成，在生产过程中用透析用水溶解这些化学原料药，灌装完毕后总会有一小部分药液残留于设备里。

按照工艺操作程序文件和作业指导书之规定，每一个批次产品生产完成后，要对现场进行清场。

清场的目的就是为了彻底清楚残留于设备中的残留物质，防止交叉污染，为下一个批次生产做好准备。

组成血液透析浓缩液的化学成分为：氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、冰醋酸。

这些成分和水的亲和力是不同的，其中氯化钠亲和力最弱。

在该项验证中，我们选择最后检测的物质就是氯化钠，亲和力最差（最难清洗掉）的物质被清洗掉了，亲和力强（容易清洗掉）的物质一定最早被清洗没有了。

2.目的通过验证证明清洁方法的有效性3.验证范围配液系统以及灌装系统4.验证实施时间本方案计划于年月日至年月日实施6.清洁剂的选择透析用水7.验证内容7.1 取样方法7.1.1化学成分残留取样（1）最终淋洗水取样用洁净500ml取样瓶收集灭菌结束后注入小于最小生产量的透析用水循环5分钟后的水样。

（2）棉签擦拭取样将洁净药签头按在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面。

在向前移动的同时将其从一边移到另一边。

擦拭过程应覆盖整个表面。

翻转药签，让药签的另一面也进行擦拭。

但与前次擦拭移动方向垂直，见下图：7.1.2 微生物污染取样（1）最终淋洗水取样用无菌500ml取样瓶收集注入小于最小生产量的透析用水循环5分钟后的水样。

（2）棉签擦拭取样将无菌棉签头按在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面。

在向前移动的同时将其从一边移到另一边。

擦拭过程应覆盖整个表面。

翻转棉签，让棉签的另一面也进行擦拭。

但与前次擦拭移动方向垂直，见下图：7.2 取样工具洁净取样瓶500ml、无菌取样瓶500ml、洁净棉签、无菌棉签、带螺旋盖洁净试管、带螺旋盖无菌试管7.3 取样溶剂透析用水7.4 取样位置7.4.1 最终淋洗水取样：过滤器末端、灌装机出液口最末端7.4.2 棉签擦拭取样：罐顶及罐内壁8.取样计划在生产透析A液一个批次后按清洁规程实施清洁。

微生物室清洁验证方案

微生物室清洁验证方案（TSD-YZ-20014-0）起草审核批准目录1、目的2、依据3、适用范围4、概述5、职责6、验证计划7、验证步骤8、可接受标准9、验证次数10、清洁验证检测记录11、结果分析及报告1、目的：对微生物室清洁进行验证，检查并确认清洁SOP规程的清洁效果的重现性。

2、依据：药品生产质量管理规范及设备说明书。

3、适用范围：本方案适用于质管部微生物室清洁验证。

4、概述微生物室是化验室进行微生物限度检查的场所，室内净化区设计为万级、局部百级。

微生物室净化空气经初、中效过滤后再经高效过滤后进入微生物限度检查室和生物检定室及其缓冲间、更衣室。

微生物限度检查室和生物检定室室内空气压差＞5Pa，洁净室与室外空气压差＞10Pa，洁净区与一般区之间装有传递窗，并装有紫外线灯进行消毒。

7、验证步聚7.1清洁方法：按照微生物室清洁规程进行操作。

7.2取样工具：普通药棉签、无菌药棉签、培养皿、7.3取样溶剂：0.9%无菌氯化钠溶液、纯化水7.4取样及检测方法7.4.1 取样部位、取样点数参见附表1、附表2规定。

7.4.2 取样点数为一个时,由取样人员选择最差状况点为取样点;取样点多个时其布局按要求确定取样点数。

7.4.3 每点用棉签擦拭方法手持棉签尾部,稍施压力使棉签略弯曲。

擦拭面积内不得漏擦，且使棉签不断翻转，以保证取样的代表性。

7.4.4 微生物检查取样检测:用浸有0.9%无菌氯化钠溶液的无菌棉签,擦拭所选点表面,每点25cm2,将棉签与手接触部分用无菌剪刀剪去,采样部分置于事先备妥的10ml0.9%的无菌氯化钠溶液试管中,密闭。

将采集到的样品试管在微生物实验室内，振摇1min，作为供试液。

取1ml供试液，点于Φ90mm培养皿中，随后倾注备妥的45℃左右的营养琼脂培养基约15ml，随即转动培养皿，待凝固后，移出实验室。

同时作阴性对照。

置30-35℃恒温培养箱中培养48小时，用肉眼观察点计菌落数。

7.4.5 普通棉签擦拭取样:取一干净的普通棉签,以纯化水湿润,按要求擦拭取样即可。

关于制药设备清洁验证中表面微生物擦拭取样方法和检验方法的验证实验

关于制药设备清洁验证中表面微生物擦拭取样方法和检验方法的验证实验发布时间：2021-12-30T08:36:42.297Z 来源：《中国科技人才》2021年第25期作者：董小燕[导读] 微生物在适当温湿度下以残留物中的有机物为营养可大量繁殖，产生各种代谢物，从而增加残留物复杂性和危害程度，进而对下批产品造成不良影响。

因此必须对药品生产设备的微生物进行严格控制。

此外，擦拭取样能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性最难清洁部位的残留物水平评价整套生产设备的清洁状况。

哈药集团三精制药有限公司黑龙江省哈尔滨市 150069摘要：为降低药物交叉污染及微生物污染风险，保证用药安全，延长系统或设备使用寿命，提高企业经济效益设备。

药品生产的每道工序完成后，需对药品生产设备进行清洁，并对清洁方法进行验证，在以前清洁验证中要求对化学残留取样方法进行验证，却未要求对微生物取样方法进行确认，而《药品生产质量管理规范》新增了对表面微生物取样和检验方法验证的要求。

关键词：制药设备；清洁验证；表面微生物微生物在适当温湿度下以残留物中的有机物为营养可大量繁殖，产生各种代谢物，从而增加残留物复杂性和危害程度，进而对下批产品造成不良影响。

因此必须对药品生产设备的微生物进行严格控制。

此外，擦拭取样能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性最难清洁部位的残留物水平评价整套生产设备的清洁状况。

一、清洁验证目的清洁验证是对清洁程序进行的验证方法，一般经过对数据的收集等工作，来证明清洁程度是否能达到清洁设备的标准要求。

此外，若在进行多种药品的生产时，使用同一种设备进行生产，这样会导致问题的出现，因一旦生产完一种产品未及时进行设备的清洗，会直接导致下一批药物生产受到污染，从而影响药品质量。

但在实际生产时，许多药品需一个设备进行生产，并且清洁设备的方法也都无太大差别，这时制药公司就可根据药品所需原料及其溶解性质、稳定因素、需要清洁的剂量等进行有效分析，之后将其安全指数根据数据统一计算。

表面微生物检验记录

左膝
cfu/碟
右膝
cfu/碟
标准规定
≤5cfu/碟
结论
□符合规定 □不符合规定
检验者：录
受检部门
测试方法
棉签擦拭法
检验日期
年月日
完成日期
年月日
测试步骤：
取样前，棉签头先湿润（无菌生理盐水）。取样时，握住棉签柄，以约300角与取样表
面接触，缓慢并充分擦拭，取样面积25cm2，然后将取样头折断放入上述溶液内，充分振
菌落总数测定(30～35℃)：
菌落数
取样部位
培养时间
（24℃±1）
培养时间
（33℃±1）
报告数
阴性
对照
备注
1d
2d
3d
1d
2d
额头
cfu/碟
口罩
cfu/碟
左肩
cfu/碟
右肩
cfu/碟
左肘
cfu/碟
右肘
cfu/碟
左腕
cfu/碟
右腕
cfu/碟
左手指
cfu/碟
右手指
cfu/碟
左手掌
cfu/碟
右手掌
cfu/碟
文件号：FQ-255
表面微生物检验记录
受检部门
受检人员
测试方法
接触平皿法
检验日期
年月日
完成日期
年月日
测试步骤：
取一次性无菌接触碟，碟子直径为50～55mm，取样面积一般为25cm2。取样时，打开
碟盖，无菌培养基表面与取样面直接接触，均匀按压接触碟底板，确保全部琼脂表面与取
样点表面均匀充分接触，再盖上碟盖，先于24℃±1培养3天，再转至33℃±1培养2天。（取样后，需要立即用75%酒精消毒剂擦拭被取样表面，以除去残留琼脂。）培养结束时，对每个平皿的菌落数进行计数并报告最终结果。

关于制药设备清洁验证中表面微生物擦拭取样方法和检验方法的验证实验

温度适宜等
汇报人：
实验设计：选择不同的取样和检验方法，进行对比实验
实验结果：分析实验数据，比较不同方法的优劣
结论：根据实验结果，确定最优的取样和检验方法
擦拭棒：用于擦拭设备表面，收集微生物样本培养皿：用于盛放微生物样本，进行培养和观察稀释液：用于稀释微生物样本，便于计数显微镜：用于观察微生物形态和数量培养基：用于培养微生物，观察其生长情况生物安全柜：用于保护证实验结果的可靠性和准确性
实验设计：描述实验的设计方案，包括取样方法、拭子类型、拭子数量、拭子擦拭次数等。
数据收集：列出实验中收集的数据，包括微生物数量、拭子擦拭次数、拭子类型等。
数据分析：对收集到的数据进行统计分析，包括平均值、标准差、置信区间等。
结果评价：根据数据分析结果，评价取样方法的可靠性和准确性，以及拭子类型、拭子数量、拭子擦拭次数等因素对实验结果的影响。
准备实验材料：擦拭取样器、培养基、无菌操作台等
擦拭取样：使用擦拭取样器对制药设备表面进行擦拭取样
培养基制备：将擦拭取样器上的微生物转移到培养基中
培养：将培养基放入培养箱中培养，观察微生物生长情况
结果分析：根据微生物生长情况，判断制药设备表面的微生物污染程度
,a click to unlimited possibilities
汇报人：
目的：验证表面微生物擦拭取样方法的可靠性和准确性实验设计：选择合适的拭子和培养基，确定取样面积和擦拭次数数据分析：比较不同拭子和培养基的检测结果，评估取样方法的可靠性和准确性结论：确定最佳的拭子和培养基组合，为制药设备清洁验证提供可靠的取样方法
通过实验比较不同取样方法的效果，如擦拭面积、

清洁验证取样方法和检验方法验证方案及报告

清洁验证取样方法和检验方法验证方案一、目的：通过对清洁验证取样方法（棉签取样法）的回收率试验，来验证该取样方法的回收率和重现性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。

二、范围：适用于本公司设备清洁验证的取样和检验方法。

三、责任人：验证小组取样人员、检验人员。

四、内容:1.概述制药企业生产设备、生产场所、用具等需清洁，清洁后残留物限度经检验应符合要求，检验残留物的限度有两种方法：一是最终淋洗水取样；二是棉签擦拭取样，本公司目前所有设备均采用的是棉签擦拭取样方法。

棉签擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性的最难清洁部位的残留物限度评价生产设备的清洁状况。

但取样方法需验证其可行性（回收率和重现性），因此须通过取样方法验证确定清洁验证取样方法的有效性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。

2.验证目的本验证是通过对清洗消毒后，棉签擦拭取样方法的回收率试验，来验证、评价取样方法的可行性（回收率和重现性）、代表性和科学性，及检验方法的线性、精密度（RSD），为证明清洗方法有效性提供基本的取样和检验依据。

3.范围本次验证适合清洁验证取样方法（棉签擦拭法）和检验方法（高效液相色谱法）。

4.验证选取的参照物本次验证选用黄芩苷（C21H18O11）来做取样方法回收率试验和检验方法的线性、精密度（RSD）。

5.验证周期及验证进度安排验证由起草人和审核人提出完整的验证计划，经批准后实施，整个验证活动分两个阶段完成。

验证小组成员的培训：试验时间：6.验证小组成员及职责验证小组成员所在部门验证小组职务质量部QA负责本次验证的取样人员，监督本次验证过程的实施，异常情况汇报和处理。

质量部QA主管验证小组组长，验证方案及报告的起草，提供取样方法验证方案；负责本次验证方案的培训与指导。

质量部QC负责进行本次验证过程中的检验、数据记录、分析和报告。

质量部QC主管验证方案及报告的审核，提供检验方法验证方案；负责本次验证实施规程中的指导。

(仅供参考)清洁验证取样方法和检验方法验证方案及报告

清洁验证取样方法和检验方法验证方案一、目的：通过对清洁验证取样方法（棉签取样法）的回收率试验，来验证该取样方法的回收率和重现性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。

二、范围：适用于本公司设备清洁验证的取样和检验方法。

三、责任人：验证小组取样人员、检验人员。

四、内容:1.概述制药企业生产设备、生产场所、用具等需清洁，清洁后残留物限度经检验应符合要求，检验残留物的限度有两种方法：一是最终淋洗水取样；二是棉签擦拭取样，本公司目前所有设备均采用的是棉签擦拭取样方法。

棉签擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性的最难清洁部位的残留物限度评价生产设备的清洁状况。

但取样方法需验证其可行性（回收率和重现性），因此须通过取样方法验证确定清洁验证取样方法的有效性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。

2.验证目的本验证是通过对清洗消毒后，棉签擦拭取样方法的回收率试验，来验证、评价取样方法的可行性（回收率和重现性）、代表性和科学性，及检验方法的线性、精密度（RSD），为证明清洗方法有效性提供基本的取样和检验依据。

3.范围本次验证适合清洁验证取样方法（棉签擦拭法）和检验方法（高效液相色谱法）。

4.验证选取的参照物本次验证选用黄芩苷（C21H18O11）来做取样方法回收率试验和检验方法的线性、精密度（RSD）。

5.验证周期及验证进度安排验证由起草人和审核人提出完整的验证计划，经批准后实施，整个验证活动分两个阶段完成。

验证小组成员的培训：试验时间：6.验证小组成员及职责验证小组成员所在部门验证小组职务质量部QA负责本次验证的取样人员，监督本次验证过程的实施，异常情况汇报和处理。

质量部QA主管验证小组组长，验证方案及报告的起草，提供取样方法验证方案；负责本次验证方案的培训与指导。

质量部QC负责进行本次验证过程中的检验、数据记录、分析和报告。

质量部QC主管验证方案及报告的审核，提供检验方法验证方案；负责本次验证实施规程中的指导。

药品生产设备表面微生物取样方法确认

药品生产设备表面微生物取样方法确认颜若曦北京紫竹药业有限公司，北京（100024）E-mail: s ssyrx@摘要：目前国内外法规在药品生产设备的清洁验证中仅仅要求对化学残留的取样方法进行验证。

本文提出在药品生产设备清洁验证中对微生物取样方法进行评估、确认的必要性，建立了一种评价药品生产设备表面微生物取样回收率和重复性的方法：采用304 不锈钢板作载体，以大肠埃希菌作为细菌的代表，白色念珠珠作为真菌的代表，同步制备菌种载体，同时检测菌种载体活菌数计算回收率，方法消除了载体制备过程中微生物死亡对回收率计算的影响。

同时对目前国内药品生产企业常用的表面微生物取样方法（玻璃棉签擦拭、一次性医用棉签擦拭和淋洗水取样）进行评价，建立检测药品生产设备表面真实活菌数的方法。

关键词：表面微生物；回收率；清洁验证中图分类号：TQ0 引言国内外法规均规定：“药品生产的每道工序完成后，需对药品生产设备进行清洁，并对清洁的方法进行验证，在清洁验证中要求对化学残留的取样方法进行验证”，却未要求对微生物的取样方法进行确认。

[2-5，10]目前为此，尚未发现关于表面微生物采样方法确认的文献与报道。

微生物在适当的温湿度下以残留物中的有机物为营养可大量繁殖，产生各种代谢物，从而大大增加残留物的复杂性和危害程度。

进而对下批产品造成不良影响。

[5]因此必须药品生产设备的微生物进行严格控制。

不进行微生物取样方法的确认，检测结果将是不可信的。

不准确的检测结果将对药品的生产造成不良的影响。

为解决这一问题，本文建立了一种评价药品生产设备表面微生物取样回收率的方法，并对目前国内药品生产企业常用的表面微生物取样方法进行简单分析。

1 实验试剂、原料及菌种1.1 实验试剂及原料1.1.1 培养基实验用营养琼脂培养基干粉试剂、玫瑰红钠琼脂培养基干粉试剂、pH7.0 氯化钠—蛋白胨缓冲液干粉试剂、营养肉汤培养基干粉试剂、改良马丁培养基干粉试剂均为北京三药科技开发公司生产。

棉签擦拭取样标准操作规程

范围：作微生物限度检查的擦拭取样法
职责：质量部对本规程的实施负责
正文：
1.取样前的准备
1.1准备取样的器具和相关的试剂
——普通取样瓶500ml
——无菌取样瓶500ml
——无菌药签（15cm）
——带螺旋盖无菌试管（15cm）
——无菌平皿5个
——灭菌生理盐水
1.2计算所要擦试表面的面积，通常可取100cm2。

2.取样
2.1用灭菌生理盐水润湿药签，并将其靠在溶剂瓶内壁上挤压以除去多余灭菌生理盐水。

2.2用药签头按在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时将其从一边移到另一边，擦拭过程应覆盖整个表面,翻转药签，让药签的另一面也进行擦拭，但与前次擦拭移动方向垂直。

2.3擦拭完毕，将药签放入无菌试管中，加入4ml无菌生理盐水，用螺旋盖旋紧，轻摇后放置于10分钟，使物质溶出。

2.4对照样品按步骤2.2湿润签后，直接放入试管并旋紧密封。

2.5将浸润擦拭后药签的无菌生理盐水分别注入四个平皿中，混匀，待凝后，置30～35℃生化培养箱中培养48小时，观察结果并记录。

第1 页共1 页。

棉签擦拭法取样操作规程

棉签擦拭法取样操作规程公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]4 内容取样准备工作：取样员依据请验单做好取样准备工作。

取样工具：笔、剪刀、医用棉签（用具塞三角瓶盛装）、验证方案中规定的溶剂（用具塞三角瓶盛装），样品接收具塞试管（加适量溶剂）、取样标签。

用于取样的工具和盛装容器均需灭菌。

.取样方法残留量检查取样：用溶剂润湿棉签，并将其靠在溶剂瓶上挤压以除去多余的溶剂。

每个擦拭部位擦拭的面积以获取的残留物的量在检测方法的线性范围内为原则，一般取25cm2或100cm2，具体参照验证方案。

擦拭时，将棉签头按在取样表面上，用力使其弯曲与擦拭表面成45 o，平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时，将其从一边移到另一边，擦拭过程应覆盖整个表面。

翻转棉签，让棉签的另一面也进行擦拭，但与前次擦拭移动方向垂直，每支棉签分别擦拭取样25cm2，取样位置应避免与微生物取样点重复）。

擦拭完成后，将每个取样点的棉签头剪下集中放入同一支样品接收试管中，并塞子塞紧密封。

按的步骤，用溶剂药签，将与取样使用同等数量的棉签头直接放入样品接收试管，并用塞子塞紧密封，作为对照样品。

取样完成后，在所取样品试管上应贴上标签，内容包括：取样地点、取样用途、取样编号、取样人及取样日期。

表面微生物检查取样：将无菌棉签分别放入盛有无菌生理盐水溶液的瓶中湿润，并将其靠在管口上挤压以挤去多余的溶剂。

每个擦拭部位擦拭的面积按验证方案的规定，一般为100cm2。

擦拭时，将棉签头按在取样表面上，用力使其弯曲与擦拭表面成45 o，平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时，将其从一边移到另一边，擦拭过程应覆盖整个表面。

翻转棉签，让棉签的另一面也进行擦拭，但与前次擦拭移动方向垂直，每支棉签分别擦拭取样25cm2。

擦拭完成后，将每个取样点的棉签头剪下集中放入同一支样品接收试管中，立即塞子塞紧密封。

在所取样品瓶上应贴上标签，内容包括：样品名称、批号、样品编号、取样人及取样日期。

37微生物表面擦拭方法验证方案

微生物棉签擦拭取样方法及检验方法验证方案文件编号：VP-01-06-00-037起草人_____________ 日期___________审核人_____________ 日期___________批准人_____________ 日期__________1、概述微生物在适当的温湿度下以残留物中的有机物为营养可大量繁殖，产生各种代谢物，从而大大增加残留物的复杂性和危害程度，对下批产品造成污染。

因此必须对药品生产设备的微生物进行严格控制。

制药企业的生产场所、设备、用具等在生产结束后需清洁，根据GMP的要求，清洁后应对清洁效果进行评价，设备表面微生物限度检查应符合要求，擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性的最难清洁部位的表面微生物限度评价设备的清洁状况。

对棉签擦拭取样方法和检验方法的可行性进行验证，确保清洁方法的有效性，降低药品交叉污染和微生物污染的风险。

2、验证依据：《中华人民共和国药典》2015版四部3、验证目的通过对清洗消毒后微生物取样方法的回收率试验，评价取样方法的有效性、代表性和科学性，并为证明清洗方法有效性提供基本依据。

4 、范围本次验证适合微生物棉签擦拭法取样。

5、验证小组成员及职责表1 验证小组成员及职责6、验证风险评估及范围6.1根据《验证管理规程》对验证的相关要求，对检测过程中可能影响检测结果的因素进行风险分析。

风险定性标准如下：6.1.1严重性（S）：危害可能产生后果的程度。

严重程度分为十个等级，如下：6.1.2可能性（P）：影响检测结果的事件发生的可能性频率或概率，建立以下等级：6.1.3.可检测性（D）：检测到异常情况存在的能力的程度，定义如下：6.2风险优先数量等级判定（RPN）6.2.2风险等级判定标准注：当1≤RPN＜27，但严重性S×发生可能性P为10×2或9×2时，仍需按中等以上风险进行后续控制。

重庆麦克福新制药VP-01-06-00-0336.3.风险评估过程6.3.1风险识别采用5M1E分析法从人、机、料、法、环等方面进行分析：6.3.2 阿莫西林胶囊微生物限度检查方法验证风险分析：6.4表面微生物擦拭取样限度检查方法验证的不可接受风险汇总：注：当1≤RPN＜27，但严重性S×发生可能性P为10×2或9×2时，仍需按中等以上风险进行后续控制。

37微生物表面擦拭方法验证方案

微生物棉签擦拭取样方法及检验方法验证方案文件编号：VP-0}起草人_____________ 日期___________审核人_____________ 日期___________批准人_____________ 日期__________：…1、概述微生物在适当的温湿度下以残留物中的有机物为营养可大量繁殖，产生各种代谢物，从而大大增加残留物的复杂性和危害程度，对下批产品造成污染。

因此必须对药品生产设备的微生物进行严格控制。

制药企业的生产场所、设备、用具等在生产结束后需清洁，根据GMP的要求，清洁后应对清洁效果进行评价，设备表面微生物限度检查应符合要求，擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性的最难清洁部位的表面微生物限度评价设备的清洁状况。

对棉签擦拭取样方法和检验方法的可行性进行验证，确保清洁方法的有效性，降低药品交叉污染和微生物污染的风险。

2、验证依据：《中华人民共和国药典》2015版四部3、验证目的通过对清洗消毒后微生物取样方法的回收率试验，评价取样方法的有效性、代表性和科学性，并为证明清洗方法有效性提供基本依据。

-4 、范围本次验证适合微生物棉签擦拭法取样。

5、验证小组成员及职责表1 验证小组成员及职责6、验证风险评估及范围根据《验证管理规程》对验证的相关要求，对检测过程中可能影响检测结果的因素进行风险分析。

风险定性标准如下：严重性（S）：危害可能产生后果的程度。

严重程度分为十个等级，如下：】可能性（P）：影响检测结果的事件发生的可能性频率或概率，建立以下等级：可检测性（D）：检测到异常情况存在的能力的程度，定义如下：风险优先数量等级判定（RPN）)风险等级判定标准的确定风险等级判定标准注：当1≤RPN＜27，但严重性S×发生可能性P为10×2或9×2时，仍需按中等以上风险进行后续控制。

.风险评估过程风险识别采用5M1E分析法从人、机、料、法、环等方面进行分析：培养环境及观察环境洁净区环境（供试品溶液检查环境）测环法阿莫西林胶囊微生物限度检查方法验证风险分析：表面微生物擦拭取样限度检查方法验证的不可接受风险汇总：注：当1≤RPN＜27，但严重性S×发生可能性P为10×2或9×2时，仍需按中等以上风险进行后续控制。

38微生物表面擦拭方法验证报告

微生物棉签擦拭取样方法及检验方法验证报告文件编号：VP-01-06-00-038起草人_____________ 日期___________审核人_____________ 日期___________批准人_____________ 日期__________1、概述微生物在适当的温湿度下以残留物中的有机物为营养可大量繁殖，产生各种代谢物，从而大大增加残留物的复杂性和危害程度，对下批产品造成污染。

因此必须对药品生产设备的微生物进行严格控制。

制药企业的生产场所、设备、用具等在生产结束后需清洁，根据GMP的要求，清洁后应对清洁效果进行评价，设备表面微生物限度检查应符合要求，擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性的最难清洁部位的表面微生物限度评价设备的清洁状况。

对棉签擦拭取样方法和检验方法的可行性进行验证，确保清洁方法的有效性，降低药品交叉污染和微生物污染的风险。

2018年08月19日至8月31日，根据经批准的微生物棉签擦拭取样方法及检验方法验证方案（编号：VP-01-06-00-037），验证小组对微生物棉签擦拭取样方法及检验方法进行了验证，验证过程包括擦拭取样、菌悬液制备、回收率试验。

在验证过程中严格按照验证方案及验证计划进行了验证，其验证方案在验证过程中没有修改，验证结果完整、真实，验证达到预期的效果。

2、验证依据：《中华人民共和国药典》2015版四部3、验证目的通过对清洗消毒后微生物取样方法的回收率试验，评价取样方法的有效性、代表性和科学性，并为证明清洗方法有效性提供基本依据。

4 、范围本次验证适合微生物棉签擦拭法取样。

5、验证小组成员及职责表1 验证小组成员及职责6、验证方案的实施情况6.1证前的准备6.1.1主要验证用仪器仪表的确认6.1.1.1确认方法：查看手提式压力蒸汽灭菌锅、生化培养箱、霉菌培养箱、电热恒温干燥箱、生物安全柜校验日期，确定是否在有效期内；6.1.1.2可接受标准：确认提式压力蒸汽灭菌锅、生化培养箱、霉菌培养箱、电热恒温干燥箱、生物安全柜已经过校验，校验合格。

棉签擦拭取样方法验证方案

棉签擦拭取样方法验证方案1方案批准目录1 概述 ............................................ 错误!未定义书签。

2 验证目的......................................... 错误!未定义书签。

3 验证范围......................................... 错误!未定义书签。

4 职责 ............................................ 错误!未定义书签。

4.1 验证小组成员及其职责分工 ................... 错误!未定义书签。

4.2 本次验证小组人员及相应职责 ................. 错误!未定义书签。

5 验证方案制定依据................................. 错误!未定义书签。

6 验证步骤......................................... 错误!未定义书签。

6.1 人员培训的确认 ............................. 错误!未定义书签。

6.2 相关文件的确认 ............................. 错误!未定义书签。

6.3 验证方法 ................................... 错误!未定义书签。

7 再验证 .......................................... 错误!未定义书签。

8 异常情况......................................... 错误!未定义书签。

9 偏差处理情况..................................... 错误!未定义书签。

1 概述在药品生产的每道工序完成后，为了降低残留物料污染风险，保证用药安全，延长系统或设备的使用寿命，需对药品生产设备进行清洁，并进行清洁验证，这是防止药品污染和交叉污染的必要手段。