草地早熟禾新格莱德胚性愈伤组织原生质体培养及植株再生的研究

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草地早熟禾愈伤组织诱导和分化中内源激素水平分析

（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＧａｎｓｕＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙ２０１ Nhomakorabea３年４月
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第２期７４￣７９
ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＧＡＮＳＵＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
第４８卷双月刊
草地早熟禾愈伤组织诱导和分化中内源
激素水平分析
ＴｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｈｏｒｍｏｎｅｓｃｈａｎｇｅｏｆＰｏａｐｒａｔｅｎｓｉｓ
ＺＨＡＮＧＹｕａｎ－ｙｕａｎ，ＭＡＨｕｉ — ｌｉｎｇ，ＹＵＬｉｎｇ，ＺＨＡＯＹｕａｎ
０．４９５ｇ／ｇ和０．６２９ｇ／ｇ，ＡＢＡ和ＺＴ含量在愈伤组织培养和分化过程中一直处于较低水平，ＡＢＡ分别为０．１２０ｇ／ｇ和０．１４１ｇ／ｇ，ＺＴ分别为０．１１１ｇ／ｇ和０．２０２ｇ／ｇ，二者在胚性愈伤组织形成期含量逐渐升高，在愈伤组织分化能力强的时期也有升高趋势，对胚性愈伤组织的形成和分化出芽有促进作用；高ＺＴ：ＩＡＡ和高

细胞工程名词解释

1.细胞工程学:细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学方法在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得新的应用性状的细胞系或生物体的有关理论和技术方法的科学.2.外植体:是指用于离体培养的活的植物组织,器官等材料.3.细胞同步化:是指同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期.4.生物反应器:是指由于高等生物细胞批量化培养的装置及其相应的控制系统.5.微繁:离体无性繁殖是在人工控制无菌条件下,使植物在人工培养基上繁殖的技术,是一种微型操作过程,有时称之为微繁.6.早熟萌发:幼胚接种后,离体胚不继续胚性生长,而是在培养基上萌发成幼苗,通常称之为早熟萌发.7.对称融合:两个完整的细胞质体融合.8.非对称融合:利用物理或法学方法使其亲本的核或细胞质失活后再进一步融合.9:体细胞杂交:指两个离体细胞通过一定的诱导技术使质膜接触而融合在一起随后导致两个细胞核融合在一起的技术,植物体细胞杂交是只除细胞壁后的原生质体融合.10.人工种子：具有良好发育的体细胞胚并能发育成正常完整植株；具有人工胚乳可提供种胚发育的营养；具有能起到保护作用的人工种皮。

类型：裸露的或休眠的繁殖体；人工种皮包被的繁殖体；水凝胶包被的繁殖体。

人工种皮的要求：具有一定的封闭性，保证人工胚乳的各种成分不易流失，同时又具有良好的透气性，保持繁殖体生理活性；具有一定的坚硬度，以加强人工种子的耐储运性和适于机械化操作；无毒无害，能保证繁殖体顺利穿透发芽；配制简单易行，成本低。

11.体细胞无性系:Larkin和Scoworoft(1989)提出把任何形式的细胞培养所形成的植株统称为细胞无性系.12.细胞全能性:一个细胞所具有的产生完整植株的能力,称之为植物细胞的全能性.13:脱分化:离体培养条件下,使一个已经分化的细胞恢复到原始无分化状态的过程就是细胞脱分化.14:器官发生:植物的离体器官发生是指在培养条件下的组织或细胞团(愈伤组织)分化形成不定根,不定芽的过程.15:细胞悬浮培养:是指将单个游离的细胞或细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术.16.原生质体:指除去细胞壁后的细胞,是一个被质膜包裹的裸露细胞.17.干细胞:细胞在分化过程中往往由于高度分化而完全失去了再分裂的能力,最终衰老死亡,机体在发展适应过程中为补充不足,保留了一部分未分化的原始细胞称之为干细胞.18.胚性细胞:分化程度不高,具备发育为胚胎或植株的全能性细胞.19.体细胞胚:离体条件下没有经过受精过程,但经过胚胎发育过程所形成的胚的类似物,统称为体细胞胚.,4-D:2,4-二氯苯氧乙酸,生长素的一种,启动愈伤组织形成. :玉米素,分裂素的一种,为天然物.:异戊烯腺嘌呤,诱导木本植物芽的萌动,诱导离体细胞增殖不定芽.:6-苄基氨基嘌呤:水解酪蛋白,成分:水解氨基酸,后期发生体胚诱导.:水解乳蛋白,(诱导愈伤):赤霉素,可促进细胞的伸展和茎叶的伸长,长日照植物提前开花,促进果实发育,诱导单性生殖,并且在禾谷类种子萌发中起作用.:烟酸或N ick酸,可促进新陈代谢和胚胎发育,高浓度具有抑制,常用量为L.:对根的生长具有促进作用.:聚乙二醇,用于诱导体细胞融合.:二甲基亚枫,冻剂.:荧光素双醋酸酯盐,活体染色,荧光素在原生质中呈G光.32非胚性细胞：高度分化或特化的细胞，已经失去分裂和再分化的能力，即使在培养的条件下也不能发育成植株。

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究玉米是世界上最重要的粮食作物之一，其种植面积广泛且产量丰富。

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究是玉米生物技术领域的重要课题之一。

通过对玉米幼胚愈伤组织的诱导和继代研究，可以探索出更高效的育种方法和遗传改良技术，提高玉米的产量和品质，满足人们日益增长的粮食需求。

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导是指通过特定的生物技术手段，将玉米幼胚转变为可再生愈伤组织的过程。

幼胚是玉米胚芽在初期生长阶段的胚胎组织，其具有高度的再生和分化潜能，是进行愈伤组织培养的重要材料。

愈伤组织是由植物细胞再生和分化而成的一种特殊组织，具有再生植物的能力。

通过对玉米幼胚的愈伤组织诱导，可以获得大量的再生植株，为玉米的育种工作提供了丰富的遗传资源。

在玉米幼胚胚性愈伤组织诱导过程中，外源激素的添加是至关重要的。

生长素和细胞分裂素等植物激素可以促进幼胚的再生和愈伤组织的形成，而激素的种类和浓度则会对愈伤组织的形成和再生植株的数量产生重要影响。

外界环境条件如光照、温度和培养基的配方也对玉米幼胚的愈伤组织诱导起着重要作用。

通过优化外源激素的添加和培养条件的调节，可以提高玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导效率，为后续的遗传改良工作奠定良好的基础。

在玉米幼胚胚性愈伤组织诱导获得后，继代的研究也是十分重要的。

通过对愈伤组织的继代培养，可以获得更多的再生植株，并对其进行进一步的性状分析和遗传改良。

在愈伤组织的继代培养过程中，继代频率、植株再生率和遗传稳定性是评价指标的重要因素。

通过对这些指标的调查和分析，可以评估出最佳的继代培养条件，提高再生植株的质量和数量。

除了对玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代的研究，还可以开展对再生植株的性状和遗传改良的工作。

通过对再生植株的性状的观察和分析，可以筛选出具有优良表现型的植株，为玉米的选育工作提供可靠的遗传资源。

也可以利用基因工程技术对再生植株进行遗传改良，引入抗病虫害基因或提高产量和品质相关基因，从而提高玉米的抗逆性和经济效益。

草地早熟禾高频再生体系建立

好的组织培养条件和高效的植株再生体系仍具有重要
成愈伤组织，４周后挑取愈伤组织于继代培养基中，２每
周继代培养１。次
１２３愈伤组织分化愈伤组织继代培养６．．周后，挑取浅黄色、紧密、颗粒状胚性愈伤组织于分化培养基中。１２４再生植株的生根和移栽．．分化出ｌｍ的芽～２ｃ
维普资讯
・
生物技术・
北方园艺２８）９２０（：８００？１～０
草地早熟禾，频生体系建立高再
麻冬梅杨亚亚杨赛飞，，，许兴
（．１宁夏大学农学院，宁夏银川７０２；．夏大学生命科学学院，５０１２宁宁夏银川７０２）５０１
荫，耐寒能力强，有生长速度慢，需经常修剪、具不耐践踏、绿色期长、季保绿性和春季返青性能好、寒能力秋抗
子放人三角瓶中，加人５的浓硫酸，２０／ｎ摇床Ｏ在０ｍｉｒ
震荡２３ｍｎ后，７酒精中浸泡１ｎ然后用～ｉ在５，ｍｉ
０１／．氯化汞消毒８０ｍｉ，９５～１ｎ最后用无菌水冲洗５～７
强、用途广等优点，已是混播草坪的主栽品种，抗旱但
性、耐热性、耐盐能力差，易受病、虫危害￣］这些性状可１，２－３
次。消毒好的种子置于不同激素配比的诱导愈伤组织
草地早熟禾（ｏｒｔｓ＿为禾本科早熟禾属ＰａｐａｅｉＬ）ｎｓ多年生草本植物，世界广泛种植的重要草坪草种＿。是ｌＪ

禾本科牧草及草坪草原生质体培养与融合技术研究进展

是有性杂交的重要补隆目标基因控制的性状方面具有极大的潜力。本文综述了
禾本科牧草及草坪草的原生质体培养与融合技术，包括原生质体分离材料的选择、培养基成分、培养密度及培养方式、融合的方法与方式。同时，对禾本科牧草及草坪草体原生质体培养与融合技术的应用前景作出展望。
ｇｒｅａｔｐｏｔｅｎｔｉａｌｉｎｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇｔｈｅｔａｒｇｅｔｃｈａｒａｃｔｅｒｓｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｂｙｍｕｌｔｉｇｅｎｅｓｏｒｕｎｃｌｏｎｅｄｇｅｎｅｓ．ｉｓａｎｉｍ—
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｇｒａｍｉｎｅｏｕｓｆｏｒａｇｅａｎｄｔｕｒｆｇｒａｓｓｐｌａｎｔｓｐｌａｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｓｉｎｓｕｐｐｏｒｔｉｎｇｔｈｅｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅａｇｒｉ —
ｐｏｒｔａｎｔｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｔｏｔｈｅｓｅｘｕａｌｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ．Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ｔｈｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓｏｆｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｆｕｓｉｏｎｏｆｇｒａｍｉｎｅｏｕｓｆｏｒａｇｅａｎｄｔｕｒｆｇｒａｓｓｗｅｒｅｒｅｖｉｅｗｅｄ．Ｉｔｉｎｃｌｕｄｅｄｓｅｌｅｃｔｉｎｇｔｈｅｍａｔｅｒｉａｌｓｆｏｒｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉａ，ｃｕｌｔｕｒｅｄｅｎｓｉｔｙａｎｄｍｅｔｈｏｄｓ，ｆｕｓｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅｐｒｏｓｐｅｃｔｓｏｆｔｈｅｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｆｕｓｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓｏｆｇｒａｍｉｎｅｏｕｓｆｏｒａｇｅａｎｄｔｕｒｆｇｒａｓｓｐｌａｎｔｓｗｅｒｅｍａｄｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｇｒａｍｉｎｅｏｕｓｆｏｒａｇｅｐｌａｎｔｓ；Ｔｕｒｆｇｒａｓｓ；Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｃｕｌｔｕｒｅ；Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｆｕｓｉｏｎ

小麦成熟胚愈伤组织的诱导及植株再生体系的研究

ｅｅｔｖｙｔｍ＇ｆｐａｔｅｅｅａｏｆｅｔＳｅｔｂｉｈｄ．ｆｃｉｅｓｓｅｏｌｇｎｒｔｎｏｗｈａＷａｓａｌｓｅｎｒｉ
ＫｅｒｓＷｈａ；Ｍａｕｅｅｒｏ；ｕ；ａｔｇｎｒｔｏｙｗｏｄｅｔｔｒｍｙＣａｕＳＰｌｅｅｉｎｂｎｒｅａ
ｔｅｕｉｆｍｒｏｅｉｃｌｓａｉｐｏｅ．１ｍｉｏｄｅｅｔｔｎａＭ＋６Ｂ（．ｅＬ＋Ｋ（０ｓ）Ａ（．ｇ）ｈｑＭ￣ｏｅｙｇｎｌｗｓｍｒｖａｏｓＳ－Ａ１ｈｅ）Ｔ４ｍ／＋ＮＡ００．Ｌ３ｍＬ，
贺杰，常景玲（南技院河新５ｏ河科学，南乡４ｏ）３３
摘要以小麦的成熟胚为外植体，通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生。研究结果表明，ＭＳ２４Ｄ３ｍ／）Ｖ１ｍ／）培在＋，－（．ｇ＋Ｂ（．ｇ的０Ｌ０Ｌ养基中，成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织，导率为７．％，愈伤组织质量较差；低浓度２４Ｄ和添加了ＡＡ的继代培诱２３但在，－Ｂ养基中，伤组织质量明显改善，性愈伤组织增加。筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基Ｍ＋－Ａ１ｍ／）Ｋ（．ｍ／）愈胚Ｓ６Ｂ（．ｇ＋Ｔ４ｇ＋０Ｌ０ＬＮＡ０３ｄ）分化率达７．％。该研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体的小麦组织培养再生体系。Ａ（．ｍＬ中，３１８关键词小麦；成熟胚；伤组织；株再生愈植中图分类号Ｑ４．９３１文献标识码Ａ文章编号０１— ６１２０）５０２００５７６１（０７０ — １８－２

影响玉米幼胚愈伤组织诱导及植株再生因素的研究

养技术有了快速发展。现在几乎能从玉米各个部虽位诱导出愈伤组织，幼胚是最易诱导也是使用最但
１．供试材料．１１１．试剂与仪器．２１
供试材料为玉米自交系５５齐ｌ、抗生素、生长素、口膜等购封
３９鲁原３１５２海南种植。１、４、０，
ｌｃｌｐａｔｎｒｅｅｔｄｔｏｄｕｔｔｅｅｐｒｍｅｔｏａｌｎｕｃｍｅｆｅｐａｔｏａｌｎｉｇｗｅｅｓｌｃｅｏｃｎｃｈｘｅｉｎｆｃｌｉｄｅｎｔｏｘｌｎ．Ａｕｔｅｓｓｅｆｒｅｂｙｇｅｉｕｓｃｌｕｒｙｔｍｍｒｏｎｃｏｃｌｕｓｗａｓａｌｓｄｔｏｄｃｅｔｒｍａｅｉｌｏｍｉｅｇｎｅｉｒｎｓｏｍａｉｎ．ａｌｓｅｔｂｉｈｅｏｐｒｖｉｅａｅｐｏｔｒａｓｆｒｎｚｅｔｔａｆｒｔｏｃ
ｃｌｓｅｆｉｎｌ．ｎｔｉｓｕｙｔｅｉａｌｆｃｅｔＩｈｓｔｄ，ｈｍｍａｕｅｅｒｏｆｎｒｄｌｅｍａｚｈｔｈｖｏｄｒｓｓａｃｓａｄａｅｓｉｂｅｆｒｕｉｙｔｒｍｂｙｓｏｂｅｉｉｅｔａａｅｇｏｅｉｎｅｎｒｕｔｌｏｉｎｔａ
基因过程【外源摹困的直接受体．ｆｌ】利用米幼胚进行组织培养是高效获得胚性愈伤组织的主要途径选用抗性好、适宜本地种植
的玉米交系幼进行ｒ外植体的愈伤组织诱导研究，讧厂建具有胚性的愈伤组织培养体系，为玉米遗传转化提供了受体材

玉米成熟胚愈伤诱导及再生体系建立

玉米成熟胚愈伤诱导及再生体系建立玉米成熟胚愈伤诱导及再生体系建立玉米（Zea mays）是世界上最重要的粮食作物之一，对人类的食品安全和经济发展起着重要作用。

然而，玉米遗传改良的过程中，传统的育种方法已经无法满足需求，因此，基因工程和转基因技术被广泛应用于玉米品种的改良。

而要进行玉米的基因工程研究，需要建立有效的再生体系，以利于对基因的转移和编辑。

成熟胚愈伤诱导是建立玉米再生体系的关键步骤之一。

成熟胚愈伤诱导是将成熟胚通过外源性因子的刺激，使其发生异常的细胞分裂和分化过程，从而形成胚性愈伤组织。

这个过程需要精确控制生理条件和培养基组分，以确保胚性愈伤组织的产生率和质量。

首先，选择适当的玉米品种非常重要。

不同品种对愈伤诱导的敏感性有所不同，所以需要进行初步的筛选和鉴定。

一般来说，耐盐碱、抗病虫害和高产量的玉米品种更适合作为愈伤诱导试验的材料。

其次，确定合适的愈伤诱导方法。

目前常用的愈伤诱导方法包括激素处理、遗传转化等。

激素处理是指利用植物生长调节剂，如激素6-BA和生长抑制素NAA，来刺激胚部组织的分裂和分化。

遗传转化是指通过转基因技术，将外源基因导入玉米细胞内，使其发生遗传改变。

这些方法都需要经过多次试验和优化，以确定最适合玉米品种和实验条件的愈伤诱导方法。

此外，培养基的配方和条件也对愈伤诱导的效果有着重要影响。

培养基中需要加入适量的营养物质和激素，以满足组织生长的需求。

同时，温度、光照和湿度等环境因素也需要进行精确控制，以提供最适宜的生长环境。

当成功建立了玉米的胚愈伤诱导体系后，就可以进行进一步的再生研究。

再生过程中，胚性愈伤组织可以分化为植株组织，培养基中的激素浓度和类型需要进行适当调整，以促进侧芽的分化和根系的生长。

再生后的植株可以用于基因表达分析、遗传转化、基因编辑等研究。

综上所述，玉米成熟胚愈伤诱导是建立玉米再生体系的重要步骤之一。

通过合理选择品种、优化愈伤诱导方法和调整培养条件，可以建立高效的成熟胚愈伤诱导和再生体系，为玉米的基因工程和遗传改良提供了重要的技术支持综合考虑激素处理和遗传转化方法以及培养基配方和条件对玉米的成熟胚愈伤诱导的影响，可以得出结论：对于建立高效的玉米成熟胚愈伤诱导和再生体系，需要选择适合的愈伤诱导方法和优化培养条件。

结球甘蓝原生质体培养及植株再生

结球甘蓝原生质体培养及植株再生本试验以结球甘蓝不同熟性的6个品种为材料,对影响其原生质体培养的主要因素进行了探讨；初步建立了适合结球甘蓝原生质体游离、纯化、收集、培养以至再生出完整植株的实用技术体系；为其非对称细胞融合及品种改良与创新等研究奠定了基础。

研究结果如下：1.原生质体的游离条件优化表明：以2% Cellulase R-10+0.5% Pectolase Y-23 +9CPW+5mmol/L MES酶液组合的酶解效果最佳。

其对4d苗龄的结球甘蓝下胚轴原生质体进行游离纯化,16h后以100rpm,4min的离心条件对游离的原生质体进行纯化,得到原生质体产量为16.85×105个/g,所获得原生质体活力为86.3%。

2.原生质体培养条件的优化表明：以YP+NAA 0.2mg/L+2,4-D 0.5mg/L+ 6-BA0.2mg/L的原生质体培养效果最佳,10d后细胞分裂频率与40d后植板率分别为20.8%和0.53%。

采用固液双层培养的方法,细胞分裂频率与液体浅层培养相差不大,但植板率明显大于液体浅层培养法获得的植板率。

由MS培养基添加NAA0.025mg/L+2,4-D0.025mg/L+6-BA0.1mg/L对结球甘蓝下胚轴原生质体微愈伤组织增殖效果好。

MS培养基附加6-BA 2g/L,ZT 0.5mg/L对结球甘蓝下胚轴原生质体再生愈伤组织芽分化效果较佳。

在结球甘蓝原生质体培养再生植株过程中,往芽分化培养基中添加AgNO37.5mg/L,能明显提高再生绿芽的分化,出芽率由51.3%提高至65.2%,褐化率下降约5个百分点。

取生长状态好的再生绿芽,以1/2MS附加IBA 0.2mg/L为生根培养基进行生根培养,能全部生根获得完整再生植株,植株再生率为100%。

3.再生植株差异性检测表明：所获得的QL再生植株,在外观形态上基本与母本植株相同,仅有数株表型略有不同。

流式细胞仪细胞倍性检测结果显示,所检测的原生质体再生植株,其中有79.6%为正常二倍体,9.1%为单倍体植株,6.8%为单/二倍体嵌合体植株,4.5%为四倍体植株。

原生质体培养方法和再生植株的遗传与变异

时添加新鲜培养基，同时降低渗透
压，否则细胞团不会继续生长。待小愈伤组织长至1 -2mm时，应及时
转移至固体培养基使其进一步生长
4.植株再生
原生质体培养再生的愈伤组织可直接转移到分化培养基，一步成苗（器官发生）。愈伤组织也可通过体细胞胚发生，先形成胚状体，再诱导生芽、生根。不同植物种属，其再生方式不同
供体细胞的分化程度：同一个基因型的植株生长在不同的环境条件下，其生理状态会有改变。供试植株最好生长在控制条件下，以提高原生质体的细胞分裂频率和再生能力，并且可提高实验重复性
柑橘：叶肉原生质体无论单独培养还是共培养均不能再生，只有胚性愈伤组织来源的原生质体才能再生
起始培养密度与培养基
–起始培养密度：适宜密度为1-5×105/ml –培养基激素水平：柑橘不添加外源激素，也可再生 –培养基营养成分完全性：越丰富越好
仙客来原生质体的再生
香蕉原生质体再生—Assani等2006 看护培养
Sugarbeet （糖甜菜）callus and protoplast regeneration
影响原生质体培养的主要因素
基因型
– 番茄与秘鲁番茄有性杂交后性状分离的遗传分析表明，其愈伤组织再生能力受2个显性基因决定(Koornneef等1987)。Cheng和 Veilleux(1991)对芙薯(S. phureja)原生质体培养能力进行遗传分析，证明从原生质体培养到形成愈伤组织受2个独立位点的显性基因控制(Cheng等1991)
• 变异程度的大小与起始材料及培养过程中产生的变异有关
• 原生质体再生植株变异可为体细胞遗传学研究和品种改良提供有益的材料
• 从原生质体培养再生植株已选育一些新品种（体细
胞突变育种）

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究玉米是一种重要的粮食作物，其幼胚是植物再生研究中常用的实验材料之一。

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究是植物学和生物技术领域的热门课题，对于深入了解植物细胞再生机制以及植物遗传转化具有重要意义。

本文将就玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究进行综述。

一、玉米幼胚胚性愈伤组织的特点玉米幼胚是种子在发育早期的胚胎期的植物胚胎，其细胞分裂活跃、生长迅速，具有较高的再生能力。

在玉米幼胚中，随着细胞分裂和分化的进行，愈伤组织逐渐形成。

愈伤组织是一种具有再生潜能的组织，其细胞具有较强的分裂和分化能力，在适当的条件下能够通过植物再生组织培养技术进行诱导和培养，形成成熟的植物器官。

玉米幼胚胚性愈伤组织的形成和培养为玉米的遗传改良、育种和种质资源保存提供了重要的工具和途径。

二、玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导方法1. 外源激素诱导法外源激素诱导是一种常用的玉米幼胚胚性愈伤组织诱导方法。

通过外源生长调节物质的添加，可诱导玉米幼胚中的细胞分裂和再生过程。

常用的外源激素包括激素类（如激动素、生长素、赤霉素等）和抗生素类（如半胱氨酸、链霉素等）。

外源激素的种类和浓度对于玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导效果具有重要影响，需要经过一定的试验和优化。

2. 生物诱导法生物诱导法是利用微生物的代谢产物或菌株对玉米幼胚进行诱导，促进愈伤组织的形成。

常用的生物诱导剂包括农杆菌、枯草芽孢杆菌等。

这些微生物通过其代谢产物或共培养，可以有效地刺激玉米幼胚中愈伤组织的形成和生长，提高愈伤组织的再生效率和质量。

三、玉米幼胚胚性愈伤组织的继代研究玉米幼胚胚性愈伤组织的继代研究是对愈伤组织再生能力和稳定性的研究。

通过对愈伤组织的连续培养和传代，可以评估其在不同发育阶段的再生能力和质量变化，为愈伤组织培养条件和再生机制的深入了解提供重要数据支持。

1. 继代培养条件的优化继代培养条件的优化是保证愈伤组织再生能力和稳定性的关键。

培养基成分、激素浓度、光照条件等因素对愈伤组织的继代效果有重要影响，需要通过实验设计和数据分析，进行优化和调整。

实验二植物胚性愈伤组织诱导、胚状体的分化与高再生能力基因型的筛选教学提纲

在离体培养下，植物的体细胞或性细胞被诱导产生器官分化和再生，成为具有与母体植株相同遗传信息的植株的能力。
离体条件下植物细胞的脱分化和再分化
细胞脱分化（dedifferentiation) 是指失去已分化细胞的典型特征，或消除了
细胞分工，使之回复到分生组织状态，或胚性细胞状态。
愈伤组织(callus)：脱分化后的细胞，往往
胚状体一开始就是一个完整植物的雏形，可通过根端或类似胚柄结构从外植体或愈伤组织中取得营养。
很容易从愈伤组织的表面脱离下来，在适宜条件下长成一株植物。
类似于动物胚胎早期的发育
发育早期2次均等分裂胚胎细胞发生
胚结构形成
体细胞胚胎发生途径
➢ 胚状体可从离体培养的各种外植体上直接或间接地发生，大致分为五种：
实验二植物胚性愈伤组织诱导、胚状体的分化与高再生能力基因型的筛选
实验目的
理解植物细胞全能性的概念及应用。了解并掌握植物体细胞胚胎发生的过程和途径。了解植物体细胞胚胎发生的影响因素。了解紫花苜蓿高胚状体发生基因型筛选的原理
与方法。
实验原理
植物细胞全能性(totipotent) ：
实验步骤：
胚状体分化与高胚状体发生基因型的筛选将不同植株上形成的胚状体转移到新鲜的 21-28d后观察胚状体分化状况挑选高胚状体发生基因型，取分化成苗的基因型
的叶柄转入新鲜的愈伤组织分化培养基中进行新一轮的选择。未生根的植株转入生根培养基中生根。
实验结果与分析
一些重要实验现象可用数码相机照相，存入电脑，保存电子照片。
器官发生
➢ 植物的离体器官发生是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根
（adventitious roots）、不定芽（adventitious shoots）等器官的过程。

植物多倍体诱导方法研究进展

Botanical Research 植物学研究, 2021, 10(3), 313-318Published Online May 2021 in Hans. /journal/brhttps:///10.12677/br.2021.103042植物多倍体诱导方法研究进展汤迪霏1,2*，袁晓伟1,2#，郭仰东2#，李兴盛11山东省华盛农业股份有限公司，山东青州2中国农业大学园艺学院，北京收稿日期：2021年3月15日；录用日期：2021年5月13日；发布日期：2021年5月24日摘要植物染色体多倍化在育种、生产中有非常重要的意义。

本文综述了诱导植物多倍体的主要方法，有物理诱导法、化学诱导法以及其他方法。

有望为今后多倍体技术的研究及应用提供理论依据。

关键词植物多倍体，诱导，研究进展Advances in Plant Polyploid InductionDifei Tang1,2*, Xiaowei Yuan1,2#, Yangdong Guo2#, Xingsheng Li11Shandong Huasheng Agriculture Co., Ltd., Qingzhou Shandong2College of Horticulture, China Agricultural University, BeijingReceived: Mar. 15th, 2021; accepted: May 13th, 2021; published: May 24th, 2021AbstractPlant polyploidy is of great significance in breeding and production. In this paper, the main me-thods of inducing plant polyploids are reviewed, including physical induction, chemical induction and other methods. It is expected to provide theoretical basis for the research and application of polyploid technology in the future.KeywordsPlant Polyploidy, Induction, Research Progress*第一作者。

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究

玉米幼胚胚性愈伤组织诱导和继代研究引言玉米是世界上最重要的粮食作物之一，也是全球最主要的农业经济作物之一。

玉米的种质资源非常丰富，但是其遗传改良和育种工作一直面临着诸多挑战。

细胞培养技术是现代生物技术研究中的关键技术之一，通过组织培养技术，可以实现玉米杂种优势的利用、快速育种和遗传改良等目标。

对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导和继代研究，具有非常重要的理论和应用价值。

1. 选择适宜的供体材料玉米幼胚是玉米胚胎发育的过程中，从受精卵形成到种子成熟前期的一个重要的阶段。

为了获得良好的愈伤组织诱导效果，选择适宜的供体材料是非常关键的。

一般来说，玉米幼胚在发育初期，生长速度快，细胞活力强，是胚性愈伤组织诱导的优质材料。

2. 优化培养基配方玉米幼胚愈伤组织的诱导受到培养基配方的影响很大，不同的培养基配方会对愈伤组织的形成和继代产生重要影响。

研究表明，含有不同植物激素浓度的培养基对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导效果有显著影响，在实验中需要对培养基的配方进行优化，以获得更好的诱导效果。

3. 适宜的诱导条件除了供体材料和培养基配方外，适宜的诱导条件也是影响玉米幼胚胚性愈伤组织诱导效果的重要因素。

如培养温度、光照条件、气体环境等都会对诱导效果产生重要影响。

通过调控这些诱导条件，可以更好地促进玉米幼胚胚性愈伤组织的形成。

1. 愈伤组织的快速增殖玉米幼胚胚性愈伤组织的继代研究是指在得到初代愈伤组织后，通过培养和传代，使其不断增殖和繁衍的过程。

为了实现愈伤组织的快速增殖，需要优化培养基中的植物激素浓度和种类，以及培养环境中的温度、光照和气体环境等条件，从而促进愈伤组织的增殖和繁衍。

2. 愈伤组织的遗传稳定性研究在愈伤组织的继代过程中，其遗传稳定性是一个非常重要的问题。

通过继代研究，可以对愈伤组织的遗传稳定性进行评估和分析，从而为玉米杂交、育种和遗传改良等工作提供重要的理论依据。

3. 愈伤组织的分化调控研究在愈伤组织的继代研究中，也可以对其分化调控进行研究，例如通过培养基中不同植物激素的配比和浓度进行调控，从而可以实现愈伤组织向不定芽、花芽和根系等不同类型组织的分化方向调控，为后续的组织工程和遗传改良工作奠定重要的基础。

影响草地早熟禾原生质体生长和分裂的生理生化因素分析

培养１，５ｄ后原生质体分裂率分别为‘ 新格莱德 ’Ｏ１、午夜Ⅱ ’２８、橄榄球Ⅱ ’９４前２个品种原生质５． ‘ 号４． ‘ 号２．％．
体在培养过程中生长状态良好，持续分裂分化， ‘ 而橄榄球Ⅱ ’ 生质体在分裂数次后死亡．号原在愈伤组织更换新鲜培
（甘肃农业大学草业学院，草业生态系统教育部重点实验室，美草地畜牧业可持续研究中心，中一甘肃兰州７０７）３００
摘要：以草地早熟禾 ‘ 午夜Ⅱ 、新格莱德 ’ ‘ 号’ ‘ 和橄榄球Ⅱ ３号’ 个品种继代２次的愈伤组织为材料，行原生质体Ｏ进培养，测定愈伤组织可溶性蛋白质含量、氨基酸含量、ＯＳＤ和ＰＸ酶活性．Ｏ结果表明：个草地早熟禾品种原生质体经３
ＡｂｔａｔＴｈａｌｓｓｂｕｔｒｄｆｒ２ｉｓｆｍｈＭｉｎｇｔ ’ ‘ ｇａｅｎＲｕｂ［’ ｉｈｗｅｅｖ — ｓｒｃ：ｅｃｌｕｃｌｅｏ０ｔｕｕｍｅｒｔｅ‘ ｄｉｈ１，Ｎｕｌｄ ’ａｄ‘ ｇｙ［ｗｈｃｒａｏ
ｒｅｉｓｏａｐａｅｓｒｓｄａｔｒａｒｐｏｏｌｓｓｃｌｒｎｓｒｗｔｔｔｓｗｅｅｏｓｒｅｉｐ — ｉｔｆＰｏｒｔｎｉｗｅｅｕｅｓｍａｅｉ１ｏｒｔｐａｔｕｔｅａｄｉｏｈｓａｕｒｂｅｖｄｉｔｓａｅｓｆｕｔｇｎｈｐｒＭｅｎｉ，ｈｏｕｌｐｏｅｎｃｎｅｔａｄｉｏｔｎｈｎｅｗｉｈｃｌｓｇｏｈａｎｃｄｃｎｅｔＳｅ．ａｗｈｌｔｅｓｌｂｅｒｔｉｏｔｎｎｓｃｎｅｔａｇｔａｌｒｗｔ，ｍｉｏａｉｏｔｎ，０ＤｎｅｔｃｕａｄＰＯＸｃｉｉｅｒｅｅｍｉｅｈａｉｔｓＴｈｅｕｔｎｉａｅｈｔｆｅ５ｄｏｒｔｐａｔｕｔｒ，ｈｒ — ａｔｔｓｗｅｅｄｔｒｎｄｉｔｅ３ｖｒｅｉ．ｅｒｓｌｉｄｃｔｄｔａｔｒ１ｆｏｏｌｓｓｃｌｅｔｅｐｏｖｉｎｅａｐｕ

草地早熟禾再生体系建立的研究进展

Ｃａｅｇｒｈｌｎｅ的幼穗为外植体，进行了组织培养再生体ｌ系的研究，发现幼穗的愈伤组织分化率高达７．２７％，从而进一步证实了ＶａｄｒａｎｅＶｌｋ等人的结论。１９９３年，Ｋｒｅｉｔｓｎ等以成熟种子为外植体获得愈伤组织且建立了胚性细胞悬浮系再生体系，获得了再
１８９４年，Ｍｃｏｎｌ和Ｃｎｅ１ｎｅｌＤｏｇｒ｝研究草地早２开始
熟禾再生体系的建立，他们用成熟种子诱导出了胚性愈伤组织，试验发现其愈伤组织的植株再生率很低，最高仅有６％，且从组织解剖学研究上发现草地早熟禾不是呈体胚发生途径而是呈器官发生途径。１８９６年，Ｂｙｏｄ和Ｄｌ成熟种子作外植体，ａ［ｅｑ用得到了愈伤组织和再生苗，但分化率很低。１８年，Ｐｅｅ和Ｓｉ０３８９ｉｒｍｔ￣个草地早熟禾成熟ｐｈ以
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业ｊｋ２年５第ｏ与－ｏ第Ｊ０期总１８５期
ＣＹＵＵＵＡＥＭＯＸＹ
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赵小强，马晖玲，周万海
（甘肃农业大学草业学院。甘肃兰州７０７）３００
株的节尖部分为外植体，在对整个植株快速再生繁殖体系进行研究时，发现前两者的再生频率不如后者高。１８年，ＶｎｅＶｋ９９ａｄｒａ等嘣曼了草地早熟禾成熟ｌ道种子及幼穗的组织培养结果，试验发现在相同条件下，采用幼穗作为外植体其再生率高达７％，而成熟９种子只有３％，证明幼穗是草地早熟禾诱导胚性愈伤组织的最好外植体，并且利用幼穗愈伤组织建立了悬

玉米幼胚愈伤组织诱导及植株再生研究

（辽宁省农业科学院创新中心，辽宁沈阳１０６）１１１
摘要：以玉米幼胚为外植体，研究了２４一，Ｄ不同浓度对愈伤组织诱导以及６一ＢＡ不同浓度对愈伤组织分化的
影响。结果表明，，Ｄ浓度显著影响愈伤组织的诱导，２４一愈伤组织诱导培养基中２４，一Ｄ适宜的浓度范围是２～
组织培养及分子育种等研究工作。Ｅ—ｍｉｄ１２３＠１３ｔｍ。ａｌｏ５１３６．ｏ：１通信作者：杨涛，究员，研主要从事植物转基因抗病育种和微生物
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试验于２００９年在辽宁省农业科学院创新中心实验室进行，供试材料辽单５５和自交系７２由辽宁省农业科学院玉６４米研究所提供。
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１２试验方Biblioteka 法．２７月选取生长整齐一致的植株进行套袋，粉０９年０授９～４ｄ１后取玉米果穗，剥去外层苞叶，在超净台上用７％酒精５浸泡５ｍｎ用无菌水冲洗３～ｉ， ‘ ５遍，然后用手术刀削去籽粒上端，使幼胚露出，子取出幼胚，用镊将幼胚的盾片朝上，接种于Ｎ添加脯氨酸６０ｍＬ基本培养基上，，６（９ｒ）／２４一Ｄ添加浓度分别为Ｏ１２３４ｍ／。１、、、、ｇＬ周后去胚芽，观察并记录愈伤组织的诱导情况，计算愈伤组织诱导率（愈伤组织诱导率＝产生愈
２－，４Ｄ浓度（／）ｍｇＬ图ｌ２４Ｄ。－浓度对辽单５５６愈伤组织诱导率的影响