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亲子鉴定的六种方法

亲子鉴定的六种方法亲子鉴定是一种通过分析DNA信息来确定两个人是否具有亲属关系的方法。

它广泛应用于法律、医学、社会福利等领域，特别是在解决争议和确立父母子女关系方面。

下面将介绍六种常见的亲子鉴定方法。

1.核酸序列比对法：这是目前最常用的亲子鉴定方法。

其原理是通过提取参与鉴定的双方的DNA样本，并通过特定技术对其DNA进行核酸序列测定，然后将两个样本的核酸序列进行对比。

如果两个样本的核酸序列存在大量相同的碱基序列，则可以推断两个人之间存在亲属关系。

2. STR分型法：它是一种通过分析DNA中的短串联重复序列（short tandem repeats, STRs），来进行亲子鉴定的方法。

STR是一种特殊的DNA序列，由重复单元组成，每个人的STR序列都是独一无二的。

利用PCR技术扩增STR区域后，通过比对被测人物和参照样本的STR图谱，来判断两者之间是否存在亲属关系。

3. SNP分析法：SNP是指单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism），它是DNA序列上最常见的变异形式。

SNP分析法通过寻找被测人物和参照样本之间的SNP位点差异来判定亲子关系。

该方法的优点是需要较少的基因座，但SNP位点较多，数据处理较为复杂。

4.Y染色体鉴定法：Y染色体只有男性有，因此这种方法主要用于男性亲子鉴定。

通过对被测人物和参照样本的Y染色体进行分析，如果两者的Y染色体完全一致，那么可以确认两者之间存在亲属关系。

这是因为Y 染色体遗传基本不发生突变，所以父与子之间的Y染色体序列几乎完全一致。

5.X染色体鉴定法：X染色体鉴定法适用于女性或男性亲子鉴定。

女性有两条X染色体，而男性只有一条，因此通过对被测人物和参照样本的X染色体进行分析，可以确定是否存在亲属关系。

6.高级DNA测序技术：随着DNA测序技术的不断发展，高级DNA测序技术如全基因组测序、外显子测序等也逐渐应用于亲子鉴定领域。

这些技术能够对被测人物和参照样本的整个基因组进行测序，从而更全面、准确地判断两者之间的亲子关系。

dna琼脂糖凝胶电泳条件

dna琼脂糖凝胶电泳条件DNA琼脂糖凝胶电泳是一种常用的DNA分析技术，广泛应用于分子生物学和遗传学研究中。

凝胶电泳通过将DNA片段在电场作用下沿凝胶运动，根据片段大小的不同被分离出来，从而实现对DNA样品的检测和分析。

本文将详细介绍DNA琼脂糖凝胶电泳的条件和步骤，并解释其原理和应用。

DNA琼脂糖凝胶电泳条件的设定是成功进行分析的关键。

下面将一步一步回答关于电泳条件的问题。

1. 凝胶选择：DNA琼脂糖凝胶电泳通常使用琼脂糖（agarose）凝胶，因其透明度高、质地均匀且易于制备和使用。

琼脂糖的浓度通常在0.5%至2%之间，视待测DNA片段的大小而定。

较长的DNA片段，一般需要较低浓度的琼脂糖。

2. 缓冲液选择：DNA琼脂糖凝胶电泳常用的缓冲液是TAE（三乙酸铝溶液）或TBE（三硼酸盐溶液）。

这两种缓冲液都能提供适当的离子强度和pH值，维持DNA 片段的稳定移动。

常见的TAE缓冲液配方是：40 mM三乙酸（Tris-Acetate）、1 mM EDTA（乙二胺四乙酸）。

TBE缓冲液配方为：90 mM三硼酸（Tris-Borate）、1 mM EDTA。

在使用缓冲液前，必须经过滤以去除杂质。

3. 电场强度设定：电泳过程中的电场强度直接影响DNA片段的迁移速度，因此需要根据待测DNA片段的大小和琼脂糖浓度来设定适当的电压。

通常，电场强度设置在5至10 V/cm之间，以避免DNA的热失活和琼脂糖的熔化。

4. 标准品选择：为了对待测DNA片段的大小进行估测，我们需要在电泳实验中加入标准品。

标准品是一系列已知大小的DNA片段，通常以Kb（千碱基对）为单位。

标准品可以购买或通过PCR扩增获得。

根据标准品的迁移位置和待测样品的迁移位置，可以估测待测DNA片段的大小。

5. 采样和加载样品：将待测DNA样品与DNA标记染料混合（如溴化乙锭）后，小心加载到琼脂糖凝胶的预制孔中。

为了减少加载误差，可以在样品中加入DNA大小标记品和负载控制品（如碱基作为分子量标准品）。

6×DNA Loading Buffer说明书

北京索莱宝科技有限公司
6×DNA Loading Buffer说明书
货号：D1010
规格：5ml/100ml
保存：室温保存，有效期至少12个月。

产品简介：
本产品是6倍浓缩的DNA上样缓冲液，用于DNA凝胶电泳，能促使DNA样品沉入凝胶加样孔中。

其主要成份为甘油，EDTA，溴酚蓝和二甲苯青等。

溴酚蓝和二甲苯青用作电泳时的指示剂，可指示电泳进程。

使用说明：
1、请按每5微升DNA样品加入1微升6×DNA Loading Buffer上的比例(6倍稀释)来使用。

2、混匀后，直接加到DNA凝胶加样孔中，电泳。

注意事项：
1、如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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DNA分子量标准

DNA分子量标准DNA marker简介DNA Marker 是分子量大小不同的DNA片段。

主要用途就是DNA 分子凝胶电泳时，通过其大小可以粗略估算样品DNA分子量的大小。

现在常用的DNA Marker 有两种，一种是质粒、病毒等DNA经过酶切获得的，分子量大小有零有整；另外一种是固定数值的，比如100 bp，200 bp等，它是通过PCR获得的片段混合物。

本公司生产的DNA Marker是由单一条带混合而成的，带型均匀清晰，克服了传统的酶切分子量DNA Marker的缺点，如小片段和大片段摩尔数相同，但在紫外光照射下亮度极其不均匀的现象。

本公司严格按照每条带的DNA含量（一次一条带约为50 ng）来配置DNA Marker，因而亮度均匀，带型清晰，而且可用于DNA定量的参照物，每种DNA Marker中都有一条带更亮（含量约为100 ng），便于电泳后观察。

DNA凝胶电泳的原理琼脂糖凝胶电泳是以琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。

其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。

琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大大提高了分辨能力。

蛋白质和核酸会根据pH不同带有不同电荷，在电场中受力大小不同，因此移动的速度不同，根据这个原理可将其分开。

电泳缓冲液的pH在6 ~ 9之间，离子强度0.02 ~ 0.05最为合适。

常用1%的琼脂糖作为电泳支持物。

琼脂糖凝胶约可区分相差100 bp 的DNA片段，其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低，但它制备容易，分离范围广，普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2 ~ 20 kb。

DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。

DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。

由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速率向正极方向移动。

中国白兔IL-6基因的克隆与序列分析

３．ＣｈｏｎｇＱｉｎｇＢａｎａｎＡｉｍａｌＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌＣｅｎｔｅｒ，ｂａｎａｎ，４０１３２０，Ｃｈｉｎａ；４．ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＡｎｉｍａｌＨｅａｌｔｈＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎ，ｂａｎａｎ４０１１４７，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＲａｂｂｉｔＩｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６ｇｅｎｅｃＤＮＡｗａｓａｃｑｕｉｒｅｄｆｒｏｍｔｈｅｔｏｔａｌＲＮＡｏｆｒａｍ— ｐｈｏｃｙｔｅｓｗｈｉｃｈｈａｄｂｅｅｎｓｔｉｍｕｌａｔｅｄａｎｄｉｎｄｕｃｅｄｂｙＣｏｎＡ，ａｎｄｉｔｗａｓｃｌｏｎｅｄｉｎｔｏｐＭＤ１８一Ｔｖｅｃｔｏｒｔｏｓｅ — ｑｕｅｎｃｅ．ＴｈｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｒｅｓｕｌｔｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｏｍｐｌｅｔｅＩＬ一６ｇｅｎｅｏｆＣｈｉｎａＷｈｉｔｅｒａｂｂｉｔｗａｓ７２６ｂｐ．Ａ—
（１．ＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＬａｂｏｒａｒｙｏｆＡｎｉｍａｌＰｒｅｖｅｒｔｉｖｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａａｎ６２５０１４，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＡｎｉｍａｌＤｉｓｅａｓｅＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ

宁乡猪肉质相关Myo6基因多态性研究

宁乡猪肉质相关Myo6基因多态性研究1. 引言1.1 背景介绍近年来，越来越多的研究表明Myo6基因与猪肉质之间存在一定的关系。

通过研究Myo6基因的多态性，可以更好地理解宁乡猪肉质特性的形成机制，为优质肉类的生产提供科学依据。

对宁乡猪Myo6基因的多态性进行研究具有重要意义。

本研究旨在探究宁乡猪Myo6基因的多态性，并结合实验数据对其与肉质特性之间的关系进行分析，为进一步挖掘优质猪肉的育种提供理论支持。

通过这一研究，希望能够为肉类生产提供新的思路和方法，促进猪肉质的改良和提高，满足消费者对优质肉制品的需求。

1.2 研究目的研究目的：本研究旨在探讨Myo6基因与宁乡猪肉质的关系，并通过对Myo6基因多态性的研究，进一步揭示宁乡猪肉质形成的分子机制。

通过对样本的采集和实验方法的应用，我们希望能够获得可靠的实验结果，并对其进行深入的分析和讨论。

研究的目的不仅在于理论层面上的探索，更重要的是为肉类生产提供科学依据，为提升宁乡猪肉质和肉类品质提供参考和启示。

通过本研究，我们希望能够为肉类生产提供新的思路和方法，为提高宁乡猪的肉质水平和市场竞争力做出贡献。

1.3 研究意义猪肉是人们生活中常见的肉类食品，对于研究猪肉质的相关基因具有重要意义。

而Myo6基因作为影响猪肉质的关键基因之一，其多态性可能对猪肉质造成显著影响。

对宁乡猪Myo6基因多态性进行研究具有重要意义。

通过深入探究Myo6基因与宁乡猪肉质之间的关系，可以进一步揭示不同基因型对猪肉质的影响程度，为猪肉质的改良和优化提供理论依据。

该研究还有助于深入了解猪肉质形成的分子机制，为提高猪肉品质和增加经济效益提供科学依据。

对宁乡猪Myo6基因多态性的研究具有重要意义，可以为优化猪肉生产提供科学指导，促进我国肉类产业的健康发展。

2. 正文2.1 Myo6基因与猪肉质的关系Myo6基因是编码肌球蛋白家族的一员，它在猪肉质中起着重要作用。

研究表明，Myo6基因在肌肉细胞中的表达水平与肌肉的质地、口感以及遗传肉质性状密切相关。

细胞因子药物分析

电荷等
分子大小、离子交换
分析所需时间 10～120min
分辨力
好
几小时好
10～30min 好
样品体积灵敏度范围定量准确性
10～50ul ng ～ug
+
1～50ul ng～ug
±
1～50nl pg +
分析方式
紫外、荧光、折射紫外（可见、荧光）同HPLC
仪器价格
电化学、放射性中～高
银染、放射自显影
分子排阻HPLC
分子大小
质谱测量法
分子大小
四、蛋白质含量测定
一般采用蛋白质的含量测定。在产品以效价表示时，不必另测含量。
有时还要证明所得量值直接与生物测定值相关。如已证实相关性，在生产过程中可测定含量而不测定生
物活性。
可根据物理化学性质采用Folin-酚试剂法（Lowry法）、染色法（Bradford法）、双缩脲法、紫外吸收法、HPLC法和凯氏定氮等方法。
1、概念：采用DNA重组技术或其他新生物技术生产的治疗和预防药物。
2、分类｛重组DNA药物重组蛋白质药物
1、重组蛋白质或重组多肽药物包括：细胞因子类：rIFN、IL-2、EPO等；
抗细胞素治疗：CD4可溶性受体等；重组溶血栓类：rSK、rSAK等；人源化单克隆抗体制剂；重组疫苗和菌苗制剂。
（2）HPLC法：分子筛、反相层析，离子交换层析，尽量采用与SDS-PAGE原理不同的反相或离子交换层析，不主张用分子筛分析。（3）毛细管电泳：简便、快速、灵敏度和分辨率高；价格高、重现性差。
几种检定重组蛋白纯度方法的比较
特性分离机制
HPLC
SDS-PAGE、IEF CE

用DNA条形码鉴定常见鱼翅的种类与真伪

Vol.33,No.6Dec. 2020第33卷第6期2020年12月水产学杂志CHINESE JOURNAL OF FISHERIES文章编号:1005-3832( 2020 )06-0028-06用DNA 条形码鉴定常见鱼翅的种类与真伪熊娟，黄启红，陈敏儿，方军(广东省科学院，广东省测试分析研究所(中国广州分析测试中心)，广东省化学危害应急检测技术重点实验室，广东省保健食品功效成分检测与风险物质快速筛查工程技术研究中心，广东广州510070)摘要:用形态鉴定了物种的市面上常见的6种正品鱼翅作标准样品，以明胶为主要原料制作的2种假鱼翅作阴性对照，用DNA 条形码技术研究了广东省市场流通的35种鱼翅的遗传多样性，探讨从基因水平鉴别鱼翅制品真伪的方法，提高鱼翅产品标识准确性。

采用不同基因组DNA 提取方法比对，选择适合鱼翅DNA 的提取旗筛选出C01序列DNA 条形码通用引物,对鱼翅DNA 进行PCR 扩增并测序,应用MEGA 6.0软件对64条鱼翅COZ 序列进行多序列比对，基于邻接法(N-J )构建进化树，分析遗传距离。

同时应用DNAman 构建相应COZ 序列的聚类同源树。

结果表明,本研究所建立的条形码技术能鉴别13种鱼翅物种。

分子系统发育树显示侗_个物种的不同个体基本都能形成单系，节点支持率大都为99% ~ 100%。

聚类分析显示侗一物种都位于同一个分支，不同个体的鱼类的CO/序列相似度均大于95%。

该方法可为广东省流通的鱼翅制品的鉴定提供分子生物学基础。

关键词:鱼翅;DNA 条形码技术;鉴定中图分类号:S917文献标识码:AIdentification of Species and Authenticity of Shark Fins by DNA Barcoding TechnologyXIONG Juan, HUANG Qihong, CHEN Miner, FANG Jun(Guangdong Provincial Engineering Research Center for Efficacy Component Testing and Risk Substance Rapid Screening of H ealthFood, Guangdong Provincial Key Laboratory of E mergency Test for Dangerous Chemicals, Guangdong Institute of A nalysis ( ChinaNational Analytical Center Guangzhou), Guangdong Academy of Sciences, Guangzhou 510070, China)Abstract: Six species of authentic shark fins in the market were identified by morphology as standard samples, and two kinds of fake shark fins made with gelatin as the main raw material were used as negative controls. The genetic diversity of 35 types of shark fins in the market in Guangdong Province was investigated using DNA barcode technology to probe for a method of identifying the authentic ity of shark fin products from the genetic level with higher accuracy of identification of shark fins products in Guangdong Province. Different genomic DNA extraction methods were compared and the most suitable DNA extraction methods for shark fins were chosen.The universal primers of DNA barcode of COI sequence were screened out, and the DNA of shark fins was amplified and sequenced by PCR. The multiple sequence alignment of 64 shark fin COI sequences was carried out by MEGA 6.0 software. The phylogenetictree was constructed based on the Neighbor-Joining method (N-J ), and the genetic distance was analyzed, and DNAman was used to construct cluster homology tree of COI sequences, with 13 species of shark fin being identified by the DNA barcode technology.Molecular phylogenetic tree showed that diSerent individuals of the same species had basically monophy form, with support rate of 99%〜100% for most of the nodes. Cluster analysis revealed that the same species was located in the same branch, and that the COI se quence similarity of fishes with different individuals was all greater than 95%. In conclusion, this method provides molecular biological basis for identification of shark fins products in Guangdong Province.Key words: shark fin; DNA barcode technology; identification广东省素被誉为养生大省，而鱼翅作为广东著度水涨船高。

实验六-植物组织基因组DNA的提取与分析(CTAB法)

异丙醇、70%乙醇、TE缓冲液、上样缓冲液（0.5%溴酚蓝+40%蔗糖）、1×TAE电泳缓冲液。
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四、实验步骤
1、DNA的提取
称取0.1g植物幼苗加入适量液氮充分研磨，全
部转入1.5ml离心管中
加入0.5ml CTAB提取缓冲液，充分混合均匀
65℃水浴10min，其间缓慢颠倒3次
加入0.5ml氯仿:异戊醇，上下颠倒充分混匀
（1）1%琼脂糖凝胶：称取0.3g琼脂糖，加入30mL 1×TAE 缓冲液，在微波炉中加热，反复加热、振荡2-3次，使琼脂糖充分融化。待凝胶冷却至60℃左右，倒入插入梳子的凝胶板中（避免产生气泡），让凝胶自然凝固。
（2）待凝胶凝固后，小心拔出梳子，避免前后左右摇晃，以免破坏胶面及加样孔，小心将凝胶和胶床放入电泳槽中，加样孔靠近阴极的一端。
七、思考题
1、在DNA抽提过程中造成DNA分子断裂的主要因素有哪些？ 2、本实验中所用到下列试剂（CTAB、氯仿、异丙醇、75%乙醇）的作用各是什么?
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知识回顾 Knowledge Review
祝您成功
2掌握dna的琼脂糖凝胶电泳检测方法一实验目的22掌握dna的琼脂糖凝胶电泳检测方法二实验原理通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞由于植物细胞匀浆含有多种酶类尤其是氧化酶类对dna的抽提产生不利的影响在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂如巯基乙醇以降低这些酶类的活性
实验六植物组织中DNA的提取与分析
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四、实验步骤
2、DNA电泳检测
（3）上样电泳：将20μLDNA样品溶液和5μL上样缓冲液混匀后，上样，100V稳压电泳检查，根据指示剂迁移的位置，判断是否中止电泳。切断电源后，再取出凝胶。（4）照胶、拍照：将凝胶泡在EB溶液（注意：EB溶液为剧毒物，需带上一次性手套拿取凝胶）中10min左右，进入暗室，使用凝胶成像系统照胶并拍照。

Takara说明书

Code No. RR047A 研究用PrimeScript TM RT reagent Kitwith gDNA Eraser(Perfect Real Time)说明书目录内容页码●制品说明1●制品内容 1 ●试剂盒外必备材料 1 ●保存 1 ●特长 2 ●使用注意 2 ●操作方法 2 ●Real Time PCR 4 ●实验例 6 ●附录7 ●关联产品8●制品说明为了准确地进行基因表达量分析，必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件，但Total RNA中常常混有基因组DNA，并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增，因此会造成解析结果不准确。

为了避免这种情况发生，通常将检测用引物设计在内含子前后的外显子上，使基因组DNA得不到扩增。

但是，此方法不适合具有单个外显子的基因或两个外显子之间所跨的内含子过小的基因，同时当基因组上有伪基因存在时、或设计引物对基因组有非特异性扩增时、以及基因信息没被完全解析的生物种等也同样不适合于本方法。

在这种情况下，我们常常需要对Total RNA样品进行DNase I处理，以除去残存的基因组DNA。

而DNase I处理通常要进行复杂的纯化操作，同时会造成RNA的降解和损失。

PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。

Kit中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser，通过42℃，2 min即可除去基因组DNA。

同时由于反转录试剂中含有抑制DNA分解酶活性的组分，经过gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行15 min的反转录反应合成cDNA，因此，20 min内即可迅速完成从基因组DNA去除到cDNA 合成的全过程。

使用本制品合成的cDNA适用于SYBR® Green分析法和TaqMan®探针分析法，可以根据实验目的，选择与SYBR®Premix Ex Taq II（Tli RNaseH Plus）、Premix Ex Taq（Probe qPCR）等定量试剂组合使用。

常用化妆品检测方法

常用化妆品检测方法化妆品检测方法可分为物理性能检测、化学成分分析、生物学评价和安全性评估等几个方面。

下面将对常用的化妆品检测方法进行详细介绍。

一、物理性能检测：1.外观检测：通过目测和显微镜观察化妆品的形状、颜色和纯度等外观特征。

2.包装检测：检测包装结构的耐摔、耐压、耐磨等性能，以确保产品在运输过程中不会受损。

3.气味检测：通过嗅觉感知化妆品的气味，检测气味是否正常或有异常臭味。

4.重量检测：使用天平检测化妆品的质量，确保产品规格和称重准确。

5.测试pH值：使用酸碱指示剂或pH计检测化妆品的酸碱性，以确定其pH值是否在正常范围内。

6.粘度测试：使用粘度计测定化妆品的粘度，以判断其流动性和适应性。

二、化学成分分析：1.紫外-可见光谱检测：通过测量化妆品在紫外-可见光范围内的吸收或反射光谱，来分析其中的化学成分。

2.红外光谱检测：利用红外光谱仪分析化妆品中的各种有机化合物和无机物质，确定其分子结构和组成。

3.超高效液相色谱检测：利用色谱柱和特定的流动相，在高压力下将化妆品中的各种化学成分进行分离和定量分析。

4.气相色谱-质谱联用检测：结合气相色谱和质谱的技术，可以对化妆品中的有机化合物进行高效、快速、准确的检测和鉴定。

5.原子吸收光谱检测：通过测量化妆品中金属元素的吸收光谱，来分析其中的金属离子浓度。

6.核磁共振谱分析：利用核磁共振技术对化妆品中的化学成分进行结构分析和组成确定。

三、生物学评价：1.细菌检测：采用平皿菌落计数法和膜过滤法，检测化妆品中的菌落总数、霉菌和酵母菌等微生物的数量。

2.皮肤刺激性测试：通过在动物或人体上施加或涂抹化妆品，观察皮肤的变化和刺激反应，判断其皮肤刺激性。

3.眼刺激性测试：利用鸡胚或家兔等动物的眼睛，判断化妆品对眼睛的刺激性和损伤情况。

4.皮肤渗透性测试：使用离体皮肤、动物模型或人体志愿者，评估化妆品对皮肤的渗透性和吸收性。

5.致致敏性测试：通过敏感人群或动物皮肤的接触测试，判断化妆品是否有过敏反应，如红肿、瘙痒等。

第六章 DNA序列分析

第六章ＤＮＡ序列分析［本章摘要］DNA 的序列分析有两种基本方法， Maxam-Gilbert 化学降解法和 Sanger 氏酶学法。

因为测序每个反应读取的序列是有限的，做长片段 DNA 或基因组测序时，需要选用一定的策略。

测序的策略有 primer walking ，随机测序，定向测序等。

现在全自动测序仍然沿用 Sanger 氏酶学法，但是在标记上作了改进。

DNA 测序结果通过生物信息学分析，获取需要的信息。

第一节Maxam-Gilbert 化学降解法1977年， A.M. Maxam 和 W. Gilbert 首先建立了 DNA 片段序列的测定方法，其原理为：将一个 DNA 片段的 5' 端磷酸基作放射性标记，再分别采用不同的化学方法修饰和裂解特定碱基（表 6-1），从而产生一系列长度不一而 5' 端被标记的 DNA 片段，这些以特定碱基结尾的片段群通过凝胶电泳分离，再经放射线自显影，确定各片段末端碱基，从而得出目的 DNA 的碱基序列。

Maxam-Gilbert 化学降解法测序原理如图 6-1 ：表6-1：Maxam-Gilbert化学降解法测序的常用化学试剂：碱基体系化学修饰试剂化学反应断裂部位GA + G C + T CA > C dimethyl sulphate（硫酸二甲酯）Piperidine formate（哌啶甲酸）, pH2.0hydrazine（肼，联氨NH2.NH2）hydrazine + NaCl（1.5M）90 C, NaOH（1.2M）甲基化脱嘌呤打开嘧啶环打开胞嘧啶环断裂反应GG和AC和TCA和C硫酸二甲酯[dimethyl sulphate ，DMS ，（CH3O）2SO2]是一种碱性化学试剂，可以使 DNA 链上的腺嘌呤 A 的 N2和鸟嘌呤 G 的 N７甲基化，但是鸟嘌呤 G 的 N７甲基化速度比腺嘌呤 A 的 N2甲基化速度要快 4-10 倍，并且在中性 pH 环境中， DMS 主要作用于鸟嘌呤 G ，使之甲基化，导致糖苷键断裂。

6西格玛合格率标准

6西格玛合格率标准六西格玛（Six Sigma）是一种管理方法和质量管理体系，旨在通过减少缺陷和提高过程稳定性来提高产品和服务的质量。

在六西格玛中，合格率是一个关键的质量指标，它表示在生产或服务过程中，产品或服务符合规格要求的比例。

六西格玛追求的是极高的合格率，通常将目标设定在99.99966%的合格率，即每百万个机会只有不到3.4个缺陷。

以下是关于六西格玛合格率标准的一些关键概念：1. 六西格玛体系的核心理念六西格玛体系主张通过测量、分析、改进和控制（DMAIC）的循环过程，不断优化组织的业务过程，以达到几乎零缺陷的水平。

核心思想是通过消除变异性，提高产品或服务的一致性，从而提高合格率。

2. 合格率与DPMO（每百万机会的缺陷数）的关系DPMO是六西格玛体系中常用的度量，表示每百万个机会中有多少个缺陷。

合格率与DPMO 之间的关系可以通过以下公式表示：六西格玛目标的合格率为99.99966%，相应的DPMO为3.4。

3. 不同六西格玛级别的合格率目标在六西格玛体系中，通常将不同的六西格玛级别与合格率目标相对应。

以下是一些常见的级别及其合格率目标：3六西格玛（3 Sigma）：99.73%的合格率，对应DPMO约为66,807。

4六西格玛（4 Sigma）：99.38%的合格率，对应DPMO约为6,210。

5六西格玛（5 Sigma）：99.977%的合格率，对应DPMO约为233。

6六西格玛（6 Sigma）：99.99966%的合格率，对应DPMO为3.4。

4. 实现高合格率的关键要素数据驱动决策：六西格玛强调基于数据和事实进行决策，而不是依靠猜测或主观判断。

流程优化：通过对业务流程的深入了解和优化，减少变异性，提高合格率。

员工培训：六西格玛体系要求对员工进行培训，使其能够有效地使用六西格玛工具和方法，参与问题解决和持续改进。

管理支持：高层管理对六西格玛项目的支持至关重要，他们需要理解六西格玛的价值，推动其在整个组织中的应用。

cisco 思科 Catalyst 9130 系列无线接入点产品手册

思科 Catalyst 9130 系列无线接入点产品手册思科公开信息目录恢复能力 - 在严苛环境中提供稳定的性能5安全基础设施5焕新打造下一代企业级设备6支持思科 DNA 6产品规格7软件包42保修信息43思科环境可持续性43思科服务43 Cisco Capital 44思科® Catalyst® 9130 系列无线接入点是下一代企业级无线接入点。

其特点是恢复能力强，可提供安全保护和智能功能。

随着高密度网络和物联网的出现，我们比以往任何时候都更依赖于无线网络。

每年都有越来越多的设备连接到网络，从高性能客户端设备到低带宽物联网设备，举不胜举。

思科 Catalyst 9130 系列无线接入点可以随时随地为任何人提供无缝体验，在各种网络部署中实现卓越的可扩展性和出色的性能。

9130 系列在支持 Wi-Fi 6 (802.11 ax)标准的基础上更进一步，能够实现安全性、恢复能力和运营灵活性的绝佳融合，并可提供更加强大的网络智能功能。

思科 Catalyst 9130 系列不仅可拓展思科基于意图的网络，而且可进行扩展以满足不断增长的物联网需求，同时完全支持最新的创新成果和最新技术，因此是各种规模网络的理想选择。

9130 系列在性能、安全性和分析方面也处于领先地位。

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选用该系列无线接入点是实现网络更新换代的第一步，唯有如此，才能更充分地发挥 Wi-Fi 6提供的所有功能和优势。

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DNA的定量分析方法进展

化学与生物工程2009,Vol.26No.7　Chemistry &Bioengineering11　基金项目:山西农业大学科技创新基金资助项目(2008021)收稿日期:2009-03-15作者简介:武鑫(1977-),女,山西文水人,硕士,讲师,主要从事分析化学教学与研究;通讯联系人:李生泉,教授。

E 2mail :sq_li126@ ,wuxin4668@ 。

D NA 的定量分析方法进展武　鑫,李生泉,刘金龙(山西农业大学,山西太谷030801) 摘　要:对近年来脱氧核糖核酸(DNA )的定量分析方法的进展进行了评述,列出了重要的反应体系及分析特征。

关键词:定量分析;脱氧核糖核酸;评述中图分类号:O 657 文献标识码:A 文章编号:1672-5425(2009)07-0011-05 脱氧核糖核酸(DNA )存在于一切生物体中,是重要的生命基础物质,是生物体内一类含有磷酸基团的生物大分子,是遗传信息的携带者和传递者。

DNA 不但对生物的生长、发育和繁殖等正常的生命活动具有十分重要的作用,而且与生命的异常情况,如肿瘤发生、放射损伤、遗传疾病等也有密切关系。

DNA 定量测定是诠释其结构和功能的基础,检测低含量DNA 在生物工程、药理学、临床诊断中具有重要的作用,因此,研究DNA 定量分析方法意义重大。

DNA 的定量测定方法有很多,早期有紫外吸收法、定磷法、定糖法,目前应用较广泛的有探针技术法、分光光度法、荧光光度法,新兴的有电化学发光法、毛细管电泳法、高效液相色谱法和共振光散射法等。

作者就近年来DNA 定量测定方法的进展进行综述。

1　紫外吸收法由于组成DNA 的嘌呤碱和嘧啶碱都具有共轭双键,碱基、核苷、核苷酸、核酸在240～290nm 范围内有特征吸收。

由于结构上的差异,各组分紫外吸收也有区别,其中DNA 在260nm 附近有最大吸收,据此可用紫外吸收法对DNA 进行定量、定性测定[1]。

dna相对分子质量标准品

dna相对分子质量标准品DNA相对分子质量标准品被广泛用于DNA分析实验中，如凝胶电泳、光谱分析、质量控制和定量实验等。

以下是一些常见的DNA 相对分子质量标准品及其主要特性：1. 长度标准品：这些标准品用于估计DNA片段的长度。

它们通常由一系列已知长度的DNA片段组成，如质粒或基因组DNA片段。

这些片段通常在几百到几千个碱基对之间，可以根据其长度进行分离和识别。

2. 纯度标准品：这些标准品用于评估DNA样品的纯度。

它们通常由高纯度的DNA 组成，不含其他杂质，如蛋白质或脂质。

通过比较样品与标准品的吸光度、紫外光谱等参数，可以评估样品的纯度。

3. 完整性标准品：这些标准品用于评估DNA样品的完整性。

它们通常由已知长度的完整基因组DNA片段组成，可以用来检测样品中是否存在完整的DNA片段以及这些片段的长度分布。

4. 构象标准品：这些标准品用于研究DNA的构象变化。

它们通常由具有不同构象状态的DNA片段组成，如双链、单链或超螺旋结构。

通过分析样品与标准品的构象变化，可以了解DNA在特定条件下的构象稳定性。

5. 定量标准品：这些标准品用于定量分析DNA样品中的特定基因或序列。

它们通常由已知拷贝数的基因或序列组成，可以作为内标用于定量PCR、基因表达分析等实验。

6. 序列标准品：这些标准品用于验证DNA序列的准确性。

它们通常由已知序列的DNA片段组成，可以用于序列分析、测序反应等实验中的内部对照。

7. 修饰标准品：这些标准品用于研究DNA中的化学修饰，如甲基化、磷酸化等。

它们通常由经过修饰的DNA片段组成，可以用于检测和分析样品中的修饰类型和程度。

8. 突变标准品：这些标准品用于研究DNA中的突变和变异。

它们通常由已知突变类型的DNA片段组成，如点突变、插入或缺失等。

通过将样品与标准品进行比较，可以检测样品中是否存在相同的突变类型。

9. 结构标准品：这些标准品用于研究DNA的高级结构，如染色体结构、三维构象等。